Study about fusion using ceramic with platelet-rich plasma in the spine of rats

OBJECTIVE: To assess the osteoinductive action of platelet-rich plasma when associated to ceramics in the spine of rats. MATERIAL AND METHOD: Laminectomy was performed in 16 isogenic Lewis rats for posterior ceramic grafting. PRP was prepared intraoperatively using blood collected from two other rats. Study and control groups were set by randomization, with the study group receiving ceramics associated to PRP, and the control group receiving only ceramics. The animals were sacrificed for histopathological analysis after 10 weeks. RESULTS: Strong osteoblastic and osteoclastic activity and full re-absorption of ceramics were found on study group. In control group, small bone islands across fibrous tissue and non-reabsorbed were seen. Discussion: growth factors released by platelets bind to osteoblasts and fibroblasts surfaces, stimulating collagen synthesis to form bone matrix. Activated macrophages keep releasing growth factors and stimulating osteogenesis. CONCLUSION: The use of PRP associated to ceramics showed stronger osteoblastic and osteoclastic activity and full ceramics re-absorption compared to standalone grafting on the spine of rats.OBJETIVO: Analisar o efeito osteoindutor dos fatores de crescimento contidos no plasma rico em plaquetas (PRP) quando associados a cerâmicas no processo de fusão na coluna vertebral de ratos. MATERIAL E MÉTODO: Laminectomia lombar foi realizada em 16 ratos Lewis isogênicos para implantar cerâmica. O PRP foi preparado no ato operatório a partir do sangue de outras duas cobaias.os grupos estudo e controle foram estabelecidos por randomização, recebendo o grupo estudo cerâmica associada a PRP e o controle apenas cerâmica. Os animais foram sacrificados após 10 semanas e as colunas enviadas para análise histopatológica. RESULTADOS: Intensa atividade osteoblástica e osteoclástica e completa reabsorção da cerâmica foram achados no grupo estudo. No grupo controle havia ilhotas de osso em meio a tecido fibroso e cerâmica não reabsorvida. Discussão: Os fatores de crescimento liberados pelas plaquetas agem ligando-se à superfície de osteoblastos e fibroblastos, estimulando a síntese de colágeno para formação de matriz óssea. macrófagos ativados continuam secretando os fatores de crescimento e estimulando a osteogênese. CONCLUSÃO: O uso de PRP associado a cerâmica mostrou maior atividade osteoblástica e osteoclástica e completa reabsorção da cerâmica em relação à enxertia da mesma isoladamente na coluna vertebral de ratos.Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)UNIFESPSciEL

Nuclear morphometric analysis: description of the methodology and the role of image-editing softwares

The morphometric analysis of images, which comprises measuring and counting, is used in pathology to obtain accurate data of cellular and tissue components that are important for diagnosis and prognosis of several tumors. Although it is a useful and low-cost tool, it is restricted to a few diagnosis and research centers. The objective of this study is to present and describe the method of nuclear morphometry with supplementary use of image-editing softwares, making detailed analysis of the critical stages of the process. The correction of problems found during the capture of the image, such as erroneously adjusted color temperature and color shade and unevenly illuminated images from an improperly adjusted microscope, is fundamental for the accurate analysis. Through the color mask resource present in countless image-editing softwares, it is possible to select and to separate objects of similar colors, resulting in a final image that shows only the objects of interest for analysis. Morphometry is accomplished through a specific software, such as ImageTool (version 3.00), that permits the accurate automatic measuring of one or more parameters in a short interval of time. The interface of ImageTool allows one to work simultaneously with the original and the processed images, in which the similar colors were selected. Therefore, it is possible to confront the selected object with the same object in its original image, what ensures its exact selection. This system allows interobserver comparison of 100% of the objects, enabling the rejection of those that should not have been selected and measured.A análise morfométrica de imagens é utilizada em patologia para se obter dados precisos de componentes celulares e teciduais, por meio da mensuração e contagem, que são importantes para o diagnóstico e prognóstico de vários tumores. Essa técnica, mesmo sendo ferramenta útil e de baixo custo, mantém-se restrita a poucos centros de diagnóstico ou pesquisa. O objetivo deste trabalho é apresentar e descrever o método de morfometria nuclear com a utilização complementar de softwares de edição de imagens, fazendo a análise detalhada das etapas críticas do processo. A correção de problemas encontrados durante a captura das imagens, como temperatura e matiz da cor erroneamente ajustados, e de imagens com iluminação desigual provenientes de microscópio mal regulado, é fundamental para a correta análise. Assim, utilizando o recurso máscara de cor disponível em vários softwares de editoração de imagens, é possível selecionar e separar objetos de cores semelhantes, resultando numa imagem final que apresenta somente os objetos de interesse para análise. A morfometria é realizada por meio de softwares específicos como o ImageTool (versão 3.0), que possibilitam a mensuração automática de um ou mais parâmetros, com precisão e em curto intervalo de tempo. A interface do ImageTool permite ainda trabalhar simultaneamente com a imagem original e a imagem processada em que se fez a seleção das cores semelhantes. Dessa forma, pode-se confrontar o objeto que está sendo selecionado com o mesmo objeto na sua imagem original, garantindo assim correta seleção. Esse sistema possibilita conferência interobservador de 100% dos objetos, o que permite desprezar aqueles que posteriormente constatou-se que não deveriam ter sido selecionados e mensurados.Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP) Escola Paulista de Medicina Departamento de PatologiaUniversidade Federal do ParanáUNIFESP, EPM, Depto. de PatologiaSciEL

The role of bone morphogenetic protein on bone tissue repair

This literature review study addresses the progresses of the use of the bone morphogenetic protein (BMP) for repairing the bone tissue and its mechanisms of action in the injured tissue. The BMPs are pleiotropic molecules that are involved in the chemotaxis, mitosis and differentiation of mesenchymal cells in the bone tissue.Este estudo de revisão da literatura aborda os avanços do uso da proteína morfogenética óssea (BMP) na reparação do tecido ósseo e seus mecanismos de ação no tecido lesionado. As BMPs são moléculas pleiotrópicas que são envolvidas na quimiotaxia, mitose e diferenciação de células mesenquimais no tecido ósseo.Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP) Departamento de PatologiaUniversidade Federal de São Paulo (UNIFESP) Departamento de Ortopedia e TraumatologiaUNIFESP, Depto. de PatologiaUNIFESP, Depto. de Ortopedia e TraumatologiaSciEL

Effect of shock waves upon the growth plate in rabbits

OBJECTIVE: To evaluate the effects of shock waves upon the growth plate in rabbits by varying the energy and number of applied waves. MATERIAL AND METHODS: Six groups of five rabbits aged 5 weeks (Total: 30) were studied. OSSATRON (HMT) was used to generate shock waves. Animals were submitted to applications upon the proximal growth plate of the left tibia; the intensity (14, 21,28kV) and number of waves varied (1,000 and 4,000). The right tibia was used as control. Animals were sacrificed after six weeks when measurements of tibia length were taken and the growth plate was microscopically studied. Statistical tests were used to compare measurements of the growth plate area and tibia length with those obtained in the control group, as well as between study groups. RESULTS: In the present study, no statistically significant change was found in the measurements of the growth plate area and tibia length following application of shock waves in either group. A difference in the tibia growth tended to occur between the groups submitted to 1,000 impulses and the groups submitted to 4,000 impulses. However, this difference was not statistically significant. Hematomas were seen in the local of application in groups submitted to higher-energy waves and spontaneously subsided, special care being not required. CONCLUSIONS: The application of shock waves upon the proximal tibia in immature rabbits as described did not have any effect upon the growth plate, as shown by the evaluation methods used in the present study.OBJETIVO: Avaliar os efeitos da aplicação de ondas de choque na placa de crescimento de coelhos, variando a energia e o número de ondas aplicadas. MATERIAL E MÉTODOS: Foram estudados 30 coelhos com idade de cinco semanas divididos em seis grupos. O aparelho gerador de ondas de choque foi o OSSATRON (HMT). Os animais foram submetidos a aplicações na placa de crescimento proximal da tíbia esquerda, variando a intensidade (14, 21,28kV) e o número de ondas (1000 e 4000). A tíbia direita foi usada como controle. Os animais foram sacrificados após seis semanas e sua avaliação foi feita por meio da mensuração do comprimento das tíbias e pela análise microscópica da placa de crescimento. Os resultados de mensuração da área da placa e do comprimento das tíbias foram comparados com o grupo controle e entre os grupos, utilizando-se estudos estatísticos. RESULTADOS: Neste estudo não ocorreram alterações estatisticamente significantes nas medidas da área da placa ou do comprimento da tíbia após a aplicação de ondas de choque em nenhum dos grupos. Foi observada tendência de ocorrer uma diferença de crescimento das tíbias entre os grupos submetidos a 1.000 impulsos e os grupos submetidos a 4.000 impulsos, mas esta diferença não foi considerada significante. Foi observada também a formação de hematoma no local da aplicação nos grupos que receberam ondas com maior energia, evoluindo com regressão espontânea sem necessidade de cuidados especiais. CONCLUSÕES: A aplicação de ondas de choque na região proximal da tíbia de coelhos imaturos, nas formas descritas, não teve nenhum efeito na placa de crescimento, de acordo com os métodos de avaliação usados neste estudo.Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP) Escola Paulista de Medicina Departamento de Ortopedia e TraumatologiaUniversidade Federal de São Paulo (UNIFESP) Escola Paulista de Medicina Departamento de PatologiaUNIFESP, EPM, Depto. de Ortopedia e TraumatologiaUNIFESP, EPM, Depto. de PatologiaSciEL

Assessment of proliferating cells of nuclear antigen and estrogen and progesterone receptor expression changes determined by primary chemotherapy in breast cancer

ABSTRACT PURPOSE: to evaluate the changes in the cell phenotype determined by primary chemotherapy. METHODS: we evaluated the expression of proliferating cells of nuclear antigen (PCNA) and the estrogen (RE) and progesterone (RP) receptors in 17 stage II breast cancer patients before and after chemotherapy by immunohistochemistry. The values were compared with menopausal status, tumoral clinical response and with axillary lymph node status. RESULTS: there was a significant decrease in the average index of anti-PCNA-stained cells before (time A) and after (time B) chemotherapy (p=0.041). Responder patients displayed a significant decrease in PCNA levels [time A=53.1 and time B= 30.7 (p=0.011)]. A similar trend was observed in patients with histologic grade GII/GIII [time A=63.1 and time B=38.7 (p=0.049)]. There was no significant difference in PCNA expression regarding menopause status and axillary lymph node involvement. There was a significant decrease in RE after chemotherapy in the premenopausal patients [time A=60.3 and time B=24.1 (p=0.027)] and in those who showed a therapeutic response [time A=59.1 and time B=37.9 (p=0.030)]. We observed a significant increase in RP after chemotherapy in the postmenopausal patients [time A=35.3 and time B=58.3 (p=0.023)]. There was no relationship between hormone receptors and axillary lymph nodes. CONCLUSIONS: the decrease in PCNA levels in patients with high histologic grade, in RE in premenopausal patients, and both, PCNA and RE, in the tumors with clinical response after chemotherapy shows that the drugs acted on proliferating cells, and therefore PCNA can be used as a parameter of treatment response.OBJETIVO: averiguar as alterações induzidas pela quimioterapia primária no fenótipo celular. MÉTODOS: avaliamos a expressão do antígeno nuclear de proliferação celular (PCNA) e dos receptores de estrogênio (RE) e de progesterona (RP) em 17 tumores de mama no estádio clínico II, obtidos antes e após a terapia antiblástica, por método imuno-histoquímico. Os valores foram relacionados com o estado menstrual, com a resposta clínica tumoral e com o comprometimento axilar. RESULTADOS: houve redução significante na porcentagem de células coradas pelo anti-PCNA antes (tempo A) e após (tempo B) a quimioterapia (p=0,041). Observamos também resultados significantes ao compararmos os índices médios de PCNA com o grau histológico GII/GIII [tempo A=63,1 e tempo B=38,7 (p=0,049)] e nos casos em que houve resposta clínica [tempo A=53,1 e tempo B=34,4 (p=0,011)]. Não observamos relação significante entre os índices de PCNA com o estado menstrual e o axilar. Houve redução significante do RE após a quimioterapia nas pacientes pré-menopausadas [tempo A=60,3 e tempo B=24,1 (p=0,027)] e naquelas que apresentaram resposta clínica ao tratamento [tempo A=59,1 e tempo B=37,9 (p=0,030)]. Observamos aumento significante do RP após a quimioterapia nas pacientes pós-menopausadas [tempo A=35,3 e tempo B=58,3 (p=0,023)]. Não encontramos relação entre os receptores hormonais e o comprometimento axilar. CONCLUSÕES: a diminuição dos índices de PCNA nos tumores de alto grau histológico, do RE nas pacientes pré-menopausadas e de ambos, PCNA e RE, nos tumores com redução clínica após a quimioterapia nos mostra que ela atuou sobre as células em proliferação e que o PCNA pode ser utilizado como parâmetro de resposta a este tratamento.Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP) Escola Paulista de Medicina Departamento de GinecologiaUNIFESP, EPM, Depto. de GinecologiaSciEL

Extranasopharyngeal angiofibroma of the nasal septum -uncommon presentation of a rare disease

UNIFESP-EPMUNIFESP-EPM Setor de RinologiaUNIFESP-EPM Departamento de PatologiaUNIFESP-EPM Departamento de Otorrinolaringologia e Cirurgia de Cabeca e PescocoUNIFESP, EPM, Setor de RinologiaUNIFESP, EPM Depto. de PatologiaUNIFESP, EPM Depto. de Otorrinolaringologia e Cirurgia de Cabeca e PescocoSciEL

Tissue Microarray Analysis Applied to Bone Diagenesis

Taphonomic processes affecting bone post mortem are important in forensic, archaeological and palaeontological investigations. In this study, the application of tissue microarray (TMA) analysis to a sample of femoral bone specimens from 20 exhumed individuals of known period of burial and age at death is described. TMA allows multiplexing of subsamples, permitting standardized comparative analysis of adjacent sections in 3-D and of representative cross-sections of a large number of specimens. Standard hematoxylin and eosin, periodic acid-Schiff and silver methenamine, and picrosirius red staining, and CD31 and CD34 immunohistochemistry were applied to TMA sections. Osteocyte and osteocyte lacuna counts, percent bone matrix loss, and fungal spheroid element counts could be measured and collagen fibre bundles observed in all specimens. Decalcification with 7 % nitric acid proceeded more rapidly than with 0.5 M EDTA and may offer better preservation of histological and cellular structure. No endothelial cells could be detected using CD31 and CD34 immunohistochemistry. Correlation between osteocytes per lacuna and age at death may reflect reported age-related responses to microdamage. Methodological limitations and caveats, and results of the TMA analysis of post mortem diagenesis in bone are discussed, and implications for DNA survival and recovery considered

Description of a rare case of nodular fasciitis of the apical aspect of the upper buccal sulcus

This report describes a rare case of nodular fasciitis (NF) of the oral cavity, discussing the clinical, histological, and immunohistochemical characteristics. Histopathologic diagnosis of this type of lesion can be challenging due to its differential diagnosis, which principally includes sarcoma. The patient presented with a painless, well-defined nodule, reported as increasing in size, located at the apical aspect of the upper left buccal sulcus. Histologically, the lesion revealed spindle cell proliferation arranged in fascicles, while immunohistochemistry demonstrated positivity for smooth muscle actin. Eight months after complete surgical excision, no signs of local recurrence have been observed.Department of Oral Pathology, Sao Leopoldo Mandic Institute and Research Center, Rua José Rocha Junqueira13, Ponte Preta, 13045-755 Campinas, SP, BrazilDepartment of Pathology, Escola Paulista de Medicina, Rua Botucatu 740, Vila Clementino, 04023-900 Sao Paulo, SP, BrazilDepartment of Pathology, Escola Paulista de Medicina, Rua Botucatu 740, Vila Clementino, 04023-900 Sao Paulo, SP, BrazilWeb of Scienc

Influência do ultra-som terapêutico na epífise de crescimento ósseo de coelhos

A aplicação de ultra-som terapêutico na área da cartilagem de crescimento epifisário de crianças ainda gera dúvidas quanto a seus efeitos lesivos, o que faz com que muitas crianças deixem de ser tratadas por esse recurso. Este estudo avaliou a influência da aplicação de ultrasom, em suas formas contínua e pulsada, sobre as epífises de tíbias de coelhos em crescimento, visando identificar doses que provocassem alterações macro e/ou microscópicas, prejudicando o crescimento ósseo normal. Foram utilizados 32 coelhos com oito semanas de idade, divididos em três grupos, nos quais se aplicou, na face mediai da extremidade superior da tíbia direita, ultra-som pulsado e contínuo em diferentes áreas e intensidades de radiação; as tíbias esquerdas nos três grupos foram utilizadas como controle. Fêmures e tíbias de todos os animais foram radiografados dois dias antes da primeira aplicação e ao completarem 16 semanas, realizando-se análise histomorfométrica da placa de crescimento epifisário para avaliação dos campos microscópicos consecutivos nas regiões lateral e medial. No grupo I, que recebeu ultrasom pulsado, não houve diferenças estatisticamente significantes no lado direito em relação ao esquerdo, em todas as análises feitas. O mesmo não ocorreu com os grupos II e III (tratados com ultra-som contínuo), onde houve alterações, inclusive radiográficas. Conclui-se que, em coelhos, o tratamento no modo pulsado em 20% a 2w/cm2 (ISATP) não tem efeito lesivo na epífise de crescimento ósseo.Therapeutic use of ultrasound on children's bones growth plates is still little studied as to its harmful effects, hence many children fail to be treated with it. This study evaluated the influence of applying ultrasonic energy, in its continuous and pulsed forms, onto the growth plate of growing rabbits' tibias, to identify doses that might produce macro and/or microscopic changes, thus harming the normal bone growth. Thirty-two 8-week old rabbits were used, divided into three groups, which received each different radiation areas and intensities of continuous and pulsed ultrasound on the medial face of the right tibia upper end. The three groups' left tibias were used as control. X-rays of right and left tibias and femurs of all animals were taken two days previous to the first ultrasound application and at the age of 16 weeks; growth plates histomorphometric analysis was made in order to assess lateral and medial areas microscopic fields. In the first group, which received pulsed ultrasound, no statistically significant differences were found between values obtained from the right and left sides, in all analyses made. The same did not happen to the other groups (treated with continuous ultrasound), in which changes were found, including X-ray alterations. In rabbits, thus, treatment with pulsed ultrasound in 20% with 2w/cm2 (ISATP) does not have harmful effects onto bones growth plate