PROPORÇÃO DO SEXO NA PRODUÇÃO IN VITRO DE EMBRIÕES BOVINOS

Objetivou-se avaliar a proporção do sexo utilizando espermatozoides provenientes de sêmen convencional ou sexado para fêmea em um programa de produção in vitro de embriões (PIVE) bovinos. Foram utilizados oócitos de 87 doadoras Bos taurus indicus da raça Nelore, obtidos por sistema de aspiração folicular transvaginal guiado por ultrassonografia. Os oócitos selecionados foram maturados in vitro, fertilizados com espermatozoides oriundos de sêmen convencional (grupo 1 – CONV) ou sêmen sexado para fêmea (grupo 2 – SEX) e os embriões produzidos foram então cultivados in vitro por sete dias. Após o cultivo, os mesmos foram envasados e inovulados em receptoras mestiças Bos taurus taurus x Bos taurus indicus. Foram transferidos 1.319 embriões, sendo 1.081 produzidos com sêmen convencional (CONV) e 238 com sêmen sexado de fêmea (SEX). O diagnóstico precoce de gestação e a sexagem fetal foram realizados por ultrassonografia transretal. A taxa de gestação total foi 37,38% (493/1.319), sendo 37,74% (408/1.081) no grupo CONV e 35,71% (85/238) no grupo SEX. A proporção do sexo no grupo CONV foi desviada (P=0,002) a favor dos machos (57,84% de machos e 42,16% de fêmeas) e no grupo SEX ocorreu um desvio na proporção (P=0,001) a favor das fêmeas (68,24% de fêmeas e 31,76% de machos). Concluiu-se que a utilização do sêmen convencional em PIVE bovinos elevou a proporção de produtos machos e apesar da utilização de sêmen sexado de fêmea ser uma alternativa para pré-selecionar o sexo dos produtos, ainda houve uma considerável taxa de machos quando se utilizou este tipo de sêmen

DIÂMETRO FOLICULAR E FERTILIDADE DE VACAS MESTIÇAS LEITEIRAS SUBMETIDAS A PROTOCOLO DE IATF COM AJUSTES NO PROESTRO

Objetivou-se comparar protocolos de sincronização com uma e duas aplicações de um luteolítico simultâneas ou não a gonadotrofina coriônica equina (eCG) sobre o diâmetro do folículo ovulatório (DFOL) e a taxa de concepção de fêmeas mestiças leiteiras cíclicas. Para tanto, no D0 foi iniciado o protocolo por meio da inserção de dispositivo de progesterona (P4) e aplicação de 2,0mg de benzoato de estradiol. No D7 receberam 12,5mg de dinoprost trometamina. No D9 executou-se remoção dos P4 e aplicou-se 0,6mg de cipionato de estradiol. Nesse momento, as fêmeas foram subdivididas nos seguintes tratamentos: Grupo Controle - 2,5mL de solução fisiológica, Grupo 2PGF - 12,5mg de dinoprost trometamina, Grupo eCG - 300UI de eCG, Grupo 2PGF+eCG - 300UI de eCG e 12,5mg de dinoprost trometamina. No D11 foi realizada ultrassonografia transretal (US) para determinar o DFOL e os animais foram inseminados. O diagnóstico de gestação foi realizado por US 55 dias após. Os dados obtidos foram avaliados pelo SPSS considerando P≤0,05. O DFOL e as taxas de concepção foram semelhantes entre os protocolos de sincronização. Conclui-se que em animais cíclicos a utilização de protocolos com uma única dose PGF2α e sem suporte gonadotrófico do eCG parece proporcionar adequada resposta folicular e índices de fertilidade satisfatórios

EFICIÊNCIA DO CIPIONATO DE ESTRADIOL E DO BENZOATO DE ESTRADIOL EM PROTOCOLOS DE INDUÇÃO DA OVULAÇÃO SOBRE A DINÂMICA OVARIANA E TAXA DE CONCEPÇÃO DE FÊMEAS NELORE INSEMINADAS EM DIFERENTES MOMENTOS

Objetivou-se avaliar a dinâmica ovariana e a taxa de concepção de fêmeas Nelore submetidas à IATF utilizando o benzoato ou o cipionato de estradiol como indutores da ovulação e inseminadas nos turnos da manhã ou da tarde. Para tanto, 296 animais receberam um dispositivo de progesterona e a aplicação de 2,0 mg benzoato de estradiol em um dia aleatório, denominado D0. No D8 houve a remoção dos implantes, a administração de 500 µg de Cloprostenol e 300 UI de gonodotrofina coriônica equina. Neste momento, metade dos animais recebeu 1,0 mg de cipionato de estradiol, e à outra metade 1,0 mg de benzoato de estradiol no dia posterior (D9), constituindo os tratamentos CE e BE, respectivamente. No experimento 1, 38 animais (19 de cada tratamento) tiveram a dinâmica ovariana acompanhada por ultrassonografia. No experimento 2, 258 animais distribuídos nos tratamentos (CE e BE) foram estratificados para que as inseminações ocorressem pelo turno da manhã (M) ou da tarde (T) do D10, constituindo os grupos CE-M (n = 65), BE-M (n = 65), CE-T (n = 63) e BE-T (n = 65). Não foi encontrada diferença entre os tratamentos para as variáveis: diâmetro do folículo ovulatório, momento das ovulações, taxa de ovulação e diâmetro do corpo lúteo, entretanto, os animais do grupo CE apresentaram maior taxa de crescimento folicular (CE: 0,48 mm/dia; BE: 0,29 mm/dia). Não houve diferença na taxa de concepção entre os grupos CE-M (52,3%), BE-M (41,5%), CE-T (41,3%) e BE-T (49,2%). O emprego do cipionato em substituição ao benzoato proporciona uma redução no número de manejos sem comprometer a dinâmica ovariana e os índices de concepção. Adicionalmente, a extensão no intervalo para realização das inseminações revela-se como uma alternativa aos modelos de gestão no uso desta biotecnologia

DIÂMETRO DO FOLÍCULO NO MOMENTO DA INSEMINAÇÃO ARTIFICIAL EM TEMPO FIXO E TAXA DE CONCEPÇÃO EM VACAS NELORE

The objective of this study was to evaluate the influence of the diameter of the largest follicle at the time of TAI (DFOL) on conception rate of Nellore cows submitted to TAI protocol. Therefore, 348 females were synchronized on day 0 (D0) with an intravaginal progesterone device (P4) associated with 2.0 mg of estradiol benzoate intramuscularly (im). On day 8 (D8), after P4 removal, 500 μg Sodium cloprostenol (im), 0.6mg of estradiol cypionate (im) and 300 UI equine chorionic gonadotropin (eCG) (im) were administered. On day 10 (D10), immediately before each TAI, DFOL was measured in all animals by transrectal ultrasonography. Pregnancy diagnosis was performed 30 days after TAI by transrectal ultrasonography. Data were analyzed by SPSS (version 19) and DFOL means were compared by Student's t-test. The overall conception rate was 57.47% and DFOL overall average was 12.43±2.84mm. There were differences (P=0.0001) in the comparison of DFOL of pregnant (13.33±2.40mm) and nonpregnant (11.27±2.75mm) cows. The results showed a positive effect of DFOL on fertility of cows submitted to synchronization protocol

Suplementação com progesterona oral para gado de corte após a inseminação em programas de IATF

The objective of this work was to evaluate the effects of supplementation with melengestrol acetate (MGA), after timed artificial insemination (TAI), on the conception rate of Nellore cows, according to cyclicity during the protocol, estrus expression between intravaginal device withdrawal and insemination, and diameter of the largest follicle at the time of insemination, in order to identify predictors of the use of MGA. Multiparous lactating cows (577) were subjected to a hormonal protocol for ovulation synchronization. On day -2 of the protocol, the animals were painted with a marker on the base of their tail. On day 0, they were evaluated for estrus expression; the preovulatory follicle diameter (POFD) was measured by ultrasonography, and the artificial insemination was performed. The animals were assigned to two experimental groups according to the supplementation or not with 0.50 mg MGA, between 13 and 18 days after TAI. Pregnancy diagnosis was performed using an ultrasound examination 35 days after TAI. A positive effect of the treatment with MGA on the conception rate occurred generally in animals in anestrus, irrespective of the estrus expression. For animals treated with MGA, only those with POFD greater than 14 mm showed better conception rates that the control group.O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito da suplementação com acetato de melengestrol (MGA), após a inseminação artificial em tempo fixo (IATF), sobre a taxa de concepção de fêmeas bovinas da raça Nelore, de acordo com a ciclicidade durante o protocolo, a expressão do estro entre a retirada do dispositivo intravaginal e a inseminação, e o diâmetro do maior folículo no momento da inseminação, para determinar preditores da utilização do MGA. Fêmeas multíparas lactantes (577) foram submetidas a um protocolo hormonal de sincronização da ovulação. No dia -2 do protocolo, foram pintadas com bastão marcador na base da cauda. No dia 0, foram avaliadas em relação à expressão do estro; a mensuração do diâmetro do folículo pré-ovulatório (DFOL) foi feita por ultrassonografia, e a inseminação artificial foi realizada. Os animais foram distribuídos em dois grupos experimentais de acordo com a suplementação ou não com 0,50 mg de MGA entre 13 e 18 dias após IATF. O diagnóstico de gestação foi realizado por exame ultrassonográfico 35 dias após IATF. Um efeito positivo do tratamento com MGA sobre a taxa de concepção ocorreu, em geral, nos animais em anestro, independentemente da expressão do estro. Nos animais tratados com MGA, apenas os com DFOL acima de 14 mm apresentaram melhores taxas de concepção que o grupo-controle

DINÂMICA FOLICULAR E TAXA DE CONCEPÇÃO DE VACAS NELORE SINCRONIZADAS COM DIFERENTES PROTOCOLOS DE INDUÇÃO DA OVULAÇÃO

 Objetivou-se avaliar a dinâmica ovariana e a taxa de concepção em vacas Nelore sincronizadas com diferentes indutores da ovulação. Em um dia aleatório do ciclo estral (D0), 196 fêmeas receberam um dispositivo intravaginal de progesterona (P4) e uma injeção de 2 mg de Benzoato de estradiol (BE) im No D8 retirou-se o dispositivo de P4 e foram administrados 150 µg de d-Cloprostenol e 10 mg de FSHp im. Neste momento, os animais foram distribuídos em três grupos de acordo com o indutor da ovulação: Grupo BE (n=62) – os animais foram tratados com 1 mg de BE im no D8; Grupo GnRH (n=62) – os animais receberam 25 µg de Acetato de Gonadorelina (GnRH) im no D10 e o Grupo BE+GnRH (n=72) – os animais foram tratados com 1 mg de BE no D8 e 25 µg de GnRH no D10. Os animais foram inseminados 48h após a retirada do dispositivo de P4 (D10) e o diagnóstico de gestação foi realizado 30 dias após a IATF. Para avaliação da dinâmica folicular foram utilizadas 10 fêmeas de cada grupo e as ultrassonografias foram realizadas a cada 8h a partir do D8 até o momento da ovulação (MOV). A análise estatística foi realizada pelo SPSS, versão 19. A média do DFOL para grupo GnRH (13,19±1,43 mm) foi significativamente superior aos dos grupos BE e BE+GnRH (11,73±1,46 e 11,23±2,13 mm). Entretanto, não foi verificada diferença significativa para a taxa de concepção, que foi de 59,71; 61,32; 54,23%, respectivamente, para os grupos BE, GnRH e BE+GnRH. Os fármacos utilizados, assim como, sua associação resultaram em uma eficiente resposta ovariana e satisfatória taxa de concepção, entretanto, a associação entre o BE e o GnRH não promoveu uma melhora desses índices. 

Efeito de um quelante de cálcio, um detergente e da lecitina de soja sobre a qualidade do sêmen caprino congelado-descongelado

The aim of this paper was verifying the effect of the Equex STM Paste and EDTA addition to a Tris-egg yolk extender, on the post-thaw goat sperm viability. Nine semen samples of two adult goats were collected by artificial vagina and cryopreserved. It was also objective of this study, to evaluate the utilization of a soybean lecithin based commercial extender (Bioexcell® - IMV, L'Aigle, French) for the goat semen freezing. They were formed five experimental groups: TRIS; TRIS+EDTA; TRIS+EQUEX; TRIS+EDTA+EQUEX e Bioexcell. After evaluation, the semen was diluted in the five extenders and packed in 0.25mL straws with 100 million of motile spermatozoa. The samples were cooled at 0,46°C/min to 5°C, submitted at 75min of equilibration time and frozen in liquid nitrogen vapour. The thawing was accomplished in 37ºC water bath for 50s. There were no differences (P>;0,05) on the means of post-thaw total and progressive sperm motility among the groups TRIS, TRIS+EQUEX and TRIS+EQUEX+EDTA. The Bioexcell group obtained the least (P<0,05) percentage of post-thawing total and progressive sperm motility. After the thermotolerance test, it was observed the greatest (P<0,05) rates of total and progressive sperm motility in the Equex STM groups (TRIS+EQUEX and TRIS+EQUEX+EDTA). Thus, it can be affirmed that the Equex addition promotes better maintenance rates in the pos-thaw sperm viability, when compared with the extenders that did not contain it.Nove amostras de sêmen de dois caprinos adultos, colhidas com a utilização de vagina artificial, foram submetidas a criopreservação, com o objetivo de verificar o efeito do Equex STM Paste e do EDTA, adicionados a um diluidor a base de Tris-gema de ovo, sobre a viabilidade espermática pós-descongelação. Também foi objetivo desse trabalho, avaliar a utilização de um diluidor comercial, a base de lecitina de soja (Bioexcell® - IMV, L'Aigle, França), para a congelação do sêmen caprino. Assim, foram formados cinco grupos experimentais: TRIS; TRIS+EDTA; TRIS+EQUEX; TRIS+EQUEX+EDTA e Bioexcell. Logo depois da avaliação, o sêmen foi diluído nos diferentes meios e envasado em palhetas de 0,25 mL, com dose inseminante de 100 x 10(6) espermatozóides. As amostras foram submetidas ao resfriamento, com uma curva média de 0,46°C/min, até atingirem a temperatura de 5°C, mantidas por mais 75min em tempo de equilíbrio e, posteriormente, congeladas em nitrogênio líquido. A descongelação foi realizada em banho-maria a 37ºC por 50s. Não houve diferença (P>;0,05) entre as médias de motilidade total e progressiva, em relação aos grupos TRIS, TRIS+EQUEX e TRIS+EQUEX+EDTA. O grupo Bioexcell obteve o menor (P<0,05) percentual de espermatozóides com motilidade total e progressiva após a descongelação. Após o teste de termoresistência, as melhores (P<0,05) taxas de motilidade total e progressiva foram observadas para os grupos com Equex STM (TRIS+EQUEX e TRIS+EQUEX+EDTA). Assim, pode-se afirmar que a adição do Equex promove uma maior manutenção das taxas de viabilidade espermática após a descongelação, quando comparado com os diluidores que não o continham

EFEITO DA eCG SOBRE AS CARACTERÍSTICAS MORFOFUNCIONAIS DO CORPO LÚTEO DE VACAS MESTIÇAS DURANTE A SINCRONIZAÇÃO DA OVULAÇÃO

Objetivou-se neste estudo avaliar o efeito do tratamento com gonadotrofina coriônica equina (eCG) sobre as características morfofuncionais do corpo lúteo (CL) em vacas mestiças com diferentes concentrações circulantes de progesterona (P4) durante a sincronização da ovulação. Foram utilizadas 30 fêmeas mestiças submetidas a um protocolo de sincronização para IATF e divididas para receberem ou não de PGF2α no D0 no início do protocolo e no momento da retirada do dispositivo intravaginal de P4 foram subdivididas aleatoriamente em quatro grupos para receberem a aplicação ou não de eCG. Uma alta concentração de P4 no momento da sincronização da ovulação influenciou negativamente (P=0,03) o diâmetro, volume e a vascularização do CL subsequente ao protocolo. Vacas tratadas com eCG e com alta concentração circulante de P4 no momento da sincronização da ovulação apresentaram diâmetro do CL (P>0,05), semelhante às vacas com baixa concentração de P4. Conclui-se que elevadas concentrações circulantes de P4 impactaram negativamente nas características morfofuncionais do CL e a administração de eCG pode ser utilizada como uma estratégia para favorecer uma melhor resposta luteal em fêmeas mestiças bovinas com alta concentração de P4 no momento da sincronização da ovulação

UTILIZAÇÃO DO TESTE HIPOSMÓTICO PARA AVALIAR A EFICÁCIA DE DIFERENTES PROTOCOLOS DE CRIOPRESERVAÇÃO DO SÊMEN CAPRINO

Este estudo teve por objetivo comparar a eficácia de quatro protocolos de congelação do sêmen caprino (glicerol, glicerol+EDTA; etilenoglicol; etilenoglicol+EDTA), através da utilização do teste hiposmótico (HOST). O sêmen foi colhido de dois machos da raça Alpina, sexualmente maduros, diluído nos diferentes meios, congelado e armazenado em nitrogênio líquido. Após a colheita, 20ìL do sêmen fresco foram incubados com 01mL de solução hiposmótica (combinação de citrato de sódio e frutose em água destilada com osmolaridade de 125mOsmol), em banho-maria a 370C por 30 minutos. Este procedimento foi repetido após a descongelação e, em seguida, uma amostra foi colocada sobre lâmina/lamínula e avaliada em contraste de fase com mil vezes de aumento. Um total de 100 células foi contado, e as médias percentuais de espermatozóides com edema ou dobramento de cauda, após o HOST, foram – para o sêmen fresco, glicerol, glicerol+EDTA; etilenoglicol; etilenoglicol+EDTA –, respectivamente, 53,89; 16,90; 10,25; 52,64 e 57,54. PALAVRAS-CHAVE: Caprinos, criopreservação, sêmen, teste hiposmótic