Lipofection improves gene targeting efficiency in E14 TG2a mouse embryonic stem cells

Electroporation has been the method of election for transfection of murine embryonic stem cells for over 15 years; however, it is a time consuming protocol because it requires large amounts of DNA and cells, as well as expensive and delicate equipment. Lipofection is a transfection method that requires lower amounts of cells and DNA than electroporation, and has proven to be effi cient in a large number of cell lines. It has been shown that after lipofection, mouse embryonic stem cells remain pluripotent, capable of forming germ line chimeras and can be transfected with greater effi ciency than with electroporation; however, gene targeting of mouse embryonic stem cells by lipofection has not been reported. The objective of this work was to fi nd out if lipofection can be used as effi ciently as electroporation for regular gene targeting protocols. This context compares gene targeting effi ciency between these techniques in mouse embryonic stem cells E14TG2a, using a gene replacement type vector. No differences were found in gene targeting effi ciency between groups; however, lipofection was three times more effi cient than electroporation in transfection effi ciency, which makes lipofection a less expensive alternative method to produce gene targeting in mouse embryonic stem cells

Bacteriophage Therapy: An Alternative for the Treatment of Staphylococcus aureus Infections in Animals and Animal Models

Staphylococcus aureus causes hospital-acquired (HA), community-acquired (CA) and companion animal and livestock-associated (LA) infections. Molecular epidemiology studies suggest that although host specificity may be associated with specific genetic lineages, recent human-to-animal and animal-to-human transmissions related to mobile genetic elements have been described. Gene transfers include virulence and antibiotic resistance genes, thus making it difficult to control multidrug resistance S. aureus infections. Bacteriophages (phages) and endolysins, the enzymes responsible for bacterial lysis by phages, are alternatives to the use of antibiotics for the control of S. aureus infections. In this work, we review current advances in the development of phage therapy and the study and design of recombinant endolysins to treat S. aureus infections. Preliminary results of bacteriophage isolation based on molecular epidemiology knowledge show that bacteriophages are specific of genetic lineages and that this strategy may be used as an approach to isolate and evaluate new bacteriophages for therapy

Nanopigmented Acrylic Resin Cured Indistinctively by Water Bath or Microwave Energy for Dentures

The highlight of this study was the synthesis of nanopigmented poly(methyl methacrylate) nanoparticles that were further processed using a water bath and/or microwave energy for dentures. The experimental acrylic resins were physicochemically characterized, and the adherence of Candida albicans and biocompatibility were assessed. A nanopigmented acrylic resin cured by a water bath or by microwave energy was obtained. The acrylic specimens possess similar properties to commercial acrylic resins, but the transverse strength and porosity were slightly improved. The acrylic resins cured with microwave energy exhibited reduced C. albicans adherence. These results demonstrate an improved noncytotoxic material for the manufacturing of denture bases in dentistry

Regulación de la expresión del gen miostatina en epitelio mamario por glucocorticoides

La proteína miostatina es el regulador negativo del crecimiento del músculo esquelético; miostatina se expresa además en la glándula mamaria, sin embargo, se conoce poco su papel en este órgano. Los glucocorticoides (GCs) son fármacos utilizados ampliamente en la medicina humana y veterinaria por su capacidad antiinflamatoria e inmunosupresora. Se conoce además que el gen mstn posee elementos "cis"de respuesta funcionales para los GCs. En este trabajo analizamos la participación de los GCs en la regulación la expresión del gen mstn, en cultivo primario de células de epitelio mamario de bovino (EMB). Los resultados de PCR cuantitativa mostraron un comportamiento bimsico de la expresión del gen mstn. Además, la potencia de la expresión del gen mstn fue como sigue: a la concentración de 1 nM, Corticosterona > Prednisolona > Hidrocortisona > Dexametasona > Fludrocortisona; a 1O nM, Prednisolona > Hidrocortizona > Corticosterona > Dexametasona; a 100 nM, Hidrocortizona > Corticosterona > Dexametasona. Por el contrario, Betametasona favoreció la disminución de la expresión del gen mstn en todas las dosis empleadas. Este trabajo muestra que los GCs modulan la expresión en células EMB del gen mstn de forma diferencial

Células madre y células troncoembrionarias: diferencias biológicas

Las células madre o progenitoras se han clasifi cado según su lecho natural de derivación, su aptitud y su función diferencial, en tres tipos: totipotenciales, pluripotenciales y multipotenciales; las primeras, llamadas células madre embrionarias, derivadas del cigoto en estadio de mórula; las segundas, provenientes de la masa celular interna (MCI) del blastocisto; las terceras, denominadas células madre somáticas, se encuentran en algunos tejidos adultos. La diferencia biológica radica en su capacidad para producir diversos linajes celulares; las totipotentes están biológicamente aptas para dar origen a un organismo completo; las pluripotentes pueden generar todos los tipos celulares, incluida la línea germinal; y las multipotentes pueden derivar en linajes específi cos. Las células troncales tienen la capacidad de autorrenovación y de originar células hijas comprometidas con determinadas rutas del desarrollo; se caracterizan porque se dividen indefi nidamente y además se diferencian de manera morfológica y funcional. Cuando las células troncoembrionarias y algunos tipos de células progenitoras se extraen de su entorno natural y se cultivan in vitro, en medios adecuados, pueden ser transfectadas y se mantienen indiferenciadas, sin perder su potencial; así, al reintroducirse a blastocistos receptores continúan su desarrollo. El estudio y la compilación de información acerca de estas cualidades biológicas de función diferencial, así como su utilidad para aprovechar la recombinación homóloga y para producir modelos animales que generen proteínas recombinantes, aplicables en medicina preventiva-regenerativa y tratamiento de enfermedades, constituyen el objetivo de este trabajo

Opciones vacunales contra los virus patógenos de porcinos PRRS y PCV2, un binomio frecuente

En la última década, el síndrome reproductivo y respiratorio porcino (PRRS, por sus siglas en inglés) y las enfermedades asociadas al circovirus porcino tipo 2 (PCV2, por sus siglas en inglés), representan una gran preocupación para la industria porcícola, debido a la afectación de los índices productivos. En consecuencia, su presencia va acompañada de cuantiosas pérdidas económicas. Actualmente, en la mayoría de los centros de producción, se utilizan vacunas clásicas, es decir, elaboradas a partir del virus completo viable ó atenuado. En relación al PCV2, se dispone de pocas vacunas de nueva generación, referidas como aquellas obtenidas a través de la tecnología del ADN recombinante, mientras que, únicamente vacunas clásicas están disponibles contra el virus PRRSV. En este manuscrito, revisamos la naturaleza de los virus PRRSV y PCV2, así también, resaltamos la importancia económica, de acuerdo a los datos de prevalencia nacional e internacional. Además, se incluyen datos de nuevas opciones vacunales, en relación con las vacunas comerciales que, en algunos casos, se ha documentado una baja protección contra cepas heterólogas y cepas de reciente aparición. Por un lado, la investigación en vacunas de nueva generación, ha tenido buena aceptación, debido a la posibilidad de seleccionar la información genética del virus para estimular la respuesta inmune protectora del hospedero y, por otro, porque se acelera el desarrollo de vacunas, e incluso, es posible evitar las infecciones de las cuales es responsable el virus vacunal

Lipofection improves gene targeting efficiency in E14 TG2a mouse embryonic stem cells

Electroporation has been the method of election for transfection of murine embryonic stem cells for over 15 years; however, it is a time consuming protocol because it requires large amounts of DNA and cells, as well as expensive and delicate equipment. Lipofection is a transfection method that requires lower amounts of cells and DNA than electroporation, and has proven to be effi cient in a large number of cell lines. It has been shown that after lipofection, mouse embryonic stem cells remain pluripotent, capable of forming germ line chimeras and can be transfected with greater effi ciency than with electroporation; however, gene targeting of mouse embryonic stem cells by lipofection has not been reported. The objective of this work was to fi nd out if lipofection can be used as effi ciently as electroporation for regular gene targeting protocols. This context compares gene targeting effi ciency between these techniques in mouse embryonic stem cells E14TG2a, using a gene replacement type vector. No differences were found in gene targeting effi ciency between groups; however, lipofection was three times more effi cient than electroporation in transfection effi ciency, which makes lipofection a less expensive alternative method to produce gene targeting in mouse embryonic stem cells