Serological Survey of Antibodies to Mannheimia haemolytica and Pasteurella multocida in Camelids from Argentina

South American camelids are a source of livestock wealth in Andean countries. In Argentina,there is little information about camelid pathogens, and most of the literature data available areseroprevalence works against virus. Besides, little is known about the immunological status againstbacterial agents affecting these animals. In an effort to explore the serological status of Argentineancamelids, we evaluated the presence of serum antibodies against bacterial pathogens involved inpneumonic diseases (Pasteurella multocida and Mannheimia haemolytica) in llamas from differentregions of the country. By ELISA, a high seroprevalence for both pathogens was found in the serumsamples; higher optical density (OD) values were obtained when the sera were incubated with heatkilledP. multocida as coating antigen compared to M. haemolytica. In addition, a large number ofsera analyzed presented high OD values for both microorganisms independently of their originregion. Serum avidity was also evaluated, by means of an assay based on antibody desorption byurea. No correlation was found between the high ODs obtained for P. multocida and the serumavidity. On the other hand, samples reacting with M. haemolytica had lower OD values but higheravidity index. The antigenic recognition pattern for both microorganisms was determined bywestern blot. Unlike P. multocida, the antigenic recognition pattern of M. haemolytica did not differamong serum samples obtained from animals living in different areas. In summary, we found thatcamelids can synthetize antibodies that recognize M. haemolytica with high avidity for differentantigens of the bacterium, suggesting that Argentinean camelids are in contact with M. haemolyticawhich is probably a causative agent of subclinical infections. Conversely, specific antibodies forP. multocida were also found, but these sera presented low avidity that is probably the result of acolonization process by this bacterium, or else, to be a consequence of cross-reactivity phenomenaFil: Díaz, Ailén Magalí. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral Prof. Ricardo A. Margni. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral Prof. Ricardo A. Margni; ArgentinaFil: Ledesma, Martin Manuel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral Prof. Ricardo A. Margni. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral Prof. Ricardo A. Margni; ArgentinaFil: Calcagno, M. L.. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Departamento de Físico Matemática. Cátedra de Matemáticas; ArgentinaFil: Leoni, Juliana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral Prof. Ricardo A. Margni. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral Prof. Ricardo A. Margni; ArgentinaFil: Manghi, Marcela Alejandra. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral Prof. Ricardo A. Margni. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral Prof. Ricardo A. Margni; ArgentinaFil: Canellada, Andrea Mercedes. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral Prof. Ricardo A. Margni. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral Prof. Ricardo A. Margni; ArgentinaFil: Castro, Marisa Silvia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral Prof. Ricardo A. Margni. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral Prof. Ricardo A. Margni; Argentin

A possible explanation for the discrepancy between ELISA and neutralising antibodies to tetanus toxin

The structure and protective activity of tetanus antibodies elicited in rabbits after whole-cell pertussis diphtheria-tetanus vaccine (DTPw) vaccination was studied. ELISA antibody levels and toxin neutralisation activity (TNT) were measured in individual serum samples. The ratio of symmetric and asymmetric (functionally monovalent) IgG molecules was determined by concanavalin A (Con A) chromatography. This test is based on the fact that the carbohydrate group responsible for the molecular asymmetry has high affinity for the lectin Con A. Asymmetric molecule ratio was observed to increase with immunisation time, as well as differences between TNT and ELISA levels. All serum samples were overestimated by ELISA as compared to TNT assay, in line with the markedly higher proportion of asymmetric molecules which have lower toxin neutralising activity. Protective levels could not be predicted reasonably from ELISA results below 0.222 IU/ml, because this methodology fails to discriminate between both types of antibodies and only an in vivo serum neutralisation procedure (TNT) reflects the true neutralising serum activity. Copyright (C) 2000 Elsevier Science Ltd.Fil: Dokmetjian, Jose Christian. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral Prof. Ricardo A. Margni. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral Prof. Ricardo A. Margni; ArgentinaFil: Della Valle, C.. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral Prof. Ricardo A. Margni. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral Prof. Ricardo A. Margni; ArgentinaFil: Lavigne, V.. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral Prof. Ricardo A. Margni. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral Prof. Ricardo A. Margni; ArgentinaFil: De Luján, Calcagno M.. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Departamento de Físico Matemática; ArgentinaFil: Manghi, Marcela Alejandra. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral Prof. Ricardo A. Margni. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral Prof. Ricardo A. Margni; Argentin

Treatment with Enterococcus faecalis CECT7121 Is Not Effective as Therapy in Mice with an Established Allergy Status

In allergies, an unbalanced immune response towards a T helper (Th) 2 profile with high levels of Immunoglobulin (Ig) E is produced. We have demonstrated that the pre-administration of Enterococcus faecalis CECT7121 prevents the development of allergy in ovalbumin-immunized mice. In this work, we evaluated whether this bacterium can also revert an established allergic status. Mice were immunized with ovalbumin (OVA) and after that, were inoculated with an E. faecalis CECT7121 suspension. In immunized animals, serum specific immune response, proliferative activity of memory splenocytes, and levels of Th2 cytokines were assessed. The in vivo active cutaneous anaphylaxis test was also performed. The treatment with E. faecalis CECT7121 only increased anti-OVA IgG2a levels. No differences were observed in other specific immunological parameters. Probiotic-treatment did not prove to have any desensitizing effect on mice. These results, together with those recently published, can be concluded that this bacterium would not be appropriate for the treatment of allergic symptoms.Fil: Díaz, Ailén Magalí. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral Prof. Ricardo A. Margni. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral Prof. Ricardo A. Margni; ArgentinaFil: Molina, Matías Alejandro. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral Prof. Ricardo A. Margni. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral Prof. Ricardo A. Margni; ArgentinaFil: Nuñez, Guillermo G.. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral Prof. Ricardo A. Margni. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral Prof. Ricardo A. Margni; ArgentinaFil: Mourelle, Ana Carolina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral Prof. Ricardo A. Margni. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral Prof. Ricardo A. Margni; ArgentinaFil: Sparo, Mónica Delfina. Universidad Nacional de la Plata. Facultad de Ciencias Médicas; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Manghi, Marcela Alejandra. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral Prof. Ricardo A. Margni. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral Prof. Ricardo A. Margni; ArgentinaFil: Castro, Marisa Silvia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral Prof. Ricardo A. Margni. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral Prof. Ricardo A. Margni; Argentin

Probiotic activity of <i>Enterococcus faecalis</i> CECT7121: effects on mucosal immunity and intestinal epithelial cells

Aims: To analyse the effect of Enterococcus faecalis CECT7121 on intestinalepithelial cells (IECs) and its effects on the mucosal immune response. Methods and Results: Enterococcus faecalis CECT7121 showed a high adhesioncapacity to completely and heterogeneously differentiated human intestinalepithelial cell line (Caco-2 cells). In addition, the contact of this bacteriumwith Caco-2 cells did not induce inflammatory chemokines (IL-8 and CCL-20). The presence of IgA⁺ and IL-6⁺ cells in the small intestine, as well as theproduction of inflammatory cytokines (TNFa, IL-6 and IL-12) in the gut, wasdetermined after intragastric inoculation of Ent. faecalis CECT7121 in BALB/cmice. The administration of Ent. faecalis CECT7121 increased the number ofIgA⁺ cells in the intestinal lamina propria without modifying the percentage ofIL-6⁺ cells. No differences were observed in the cytokines measured in theintestinal extracts between probiotic-treated and control mice. Conclusions: Enterococcus faecalis CECT7121 stimulates local mucosalimmunity and adheres to IECs without inducing inflammatory signals. Significance and Impact of the Study: Our results indicate that, apart from itsalready reported systemic immune activity, Ent. faecalis CECT7121 has amodulatory effect at a local level.Centro Universitario de Estudios Microbiológicos y Parasitológico

Potentiation of the humoral immune response elicited by a commercial vaccine against bovine respiratory disease by Enterococcus faecalis CECT7121

Vaccination against pathogens involved in bovine respiratory disease (BRD) is a useful tool to reduce the risk of this disease however, it has been observed that the commercially available vaccines only partially prevent the infections caused by Pasteurella multocida and Mannheimia haemolytica. Therefore, it is recommended to search for new adjuvant strategies to minimise the economic impact of this respiratory syndrome. A possibility to improve the conventional vaccine response is to modulate the immune system with probiotics, since there is accumulating evidence that certain immunomodulatory strains administered around the time of vaccination can potentiate the immune response. Considering veterinary vaccines are frequently tested in murine models, we have developed an immunisation schedule in BALB/c mice that allows us to study the immune response elicited by BRD vaccine. In order to evaluate a potential strategy to enhance vaccine efficacy, the adjuvant effect of Enterococcus faecalis CECT7121 on the murine specific humoral immune response elicited by a commercial vaccine against BRD was studied. Results indicate that the intragastric administration of E. faecalis CECT7121 was able to induce an increase in the specific antibody titres against the bacterial components of the BRD vaccines (P. multocida and M. haemolytica). The quality of the humoral immune response, in terms of antibody avidity, was also improved. Regarding the cellular immune response, although the BRD vaccination induced a low specific secretion of cytokines in the spleen cell culture supernatants, E. faecalis CECT7121-treated mice showed higher interferon-γ production than immunised control mice. Our results allowed us to conclude that the administration of E. faecalis CECT7121 could be employed as an adjuvant strategy to potentiate humoral immune responses.Fil: Díaz, Ailén Magalí. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Departamento de Microbiología, Inmunología y Biotecnología. Cátedra de Inmunología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral Prof. Ricardo A. Margni. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral Prof. Ricardo A. Margni; ArgentinaFil: Almozni, Brenda. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Departamento de Microbiología, Inmunología y Biotecnología. Cátedra de Inmunología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral Prof. Ricardo A. Margni. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral Prof. Ricardo A. Margni; ArgentinaFil: Molina, Matías Alejandro. ABM Laboratorios Tandil; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral Prof. Ricardo A. Margni. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral Prof. Ricardo A. Margni; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Departamento de Microbiología, Inmunología y Biotecnología. Cátedra de Inmunología; ArgentinaFil: Sparo, Mónica Delfina. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Médicas. Departamento de Articulación de Ciencias Básicas y Clínicas. Cátedra de Microbiología y Parasitología; ArgentinaFil: Manghi, Marcela Alejandra. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral Prof. Ricardo A. Margni. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral Prof. Ricardo A. Margni; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Departamento de Microbiología, Inmunología y Biotecnología. Cátedra de Inmunología; ArgentinaFil: Canellada, Andrea Mercedes. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Departamento de Microbiología, Inmunología y Biotecnología. Cátedra de Inmunología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral Prof. Ricardo A. Margni. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral Prof. Ricardo A. Margni; ArgentinaFil: Castro, Marisa Silvia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral Prof. Ricardo A. Margni. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral Prof. Ricardo A. Margni; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Departamento de Microbiología, Inmunología y Biotecnología. Cátedra de Inmunología; Argentin

Probiotic activity of Enterococcus faecalis CECT7121: effects on mucosal immunity and intestinal epithelial cells

Aims: To analyse the effect of Enterococcus faecalis CECT7121 on intestinalepithelial cells (IECs) and its effects on the mucosal immune response.Methods and Results: Enterococcus faecalis CECT7121 showed a high adhesioncapacity to completely and heterogeneously differentiated human intestinalepithelial cell line (Caco-2 cells). In addition, the contact of this bacteriumwith Caco-2 cells did not induce inflammatory chemokines (IL-8 and CCL-20).The presence of IgA+ and IL-6+ cells in the small intestine, as well as theproduction of inflammatory cytokines (TNFa, IL-6 and IL-12) in the gut, wasdetermined after intragastric inoculation of Ent. faecalis CECT7121 in BALB/cmice. The administration of Ent. faecalis CECT7121 increased the number ofIgA+ cells in the intestinal lamina propria without modifying the percentage ofIL-6+ cells. No differences were observed in the cytokines measured in theintestinal extracts between probiotic-treated and control mice.Conclusions: Enterococcus faecalis CECT7121 stimulates local mucosalimmunity and adheres to IECs without inducing inflammatory signals.Significance and Impact of the Study: Our results indicate that, apart from itsalready reported systemic immune activity, Ent. faecalis CECT7121 has amodulatory effect at a local level.Fil: Castro, Marisa Silvia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral Prof. Ricardo A. Margni. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral Prof. Ricardo A. Margni; ArgentinaFil: Molina, Matías Alejandro. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral Prof. Ricardo A. Margni. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral Prof. Ricardo A. Margni; ArgentinaFil: Azpiroz, María Belén. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral Prof. Ricardo A. Margni. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral Prof. Ricardo A. Margni; ArgentinaFil: Díaz, Ailén Magalí. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral Prof. Ricardo A. Margni. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral Prof. Ricardo A. Margni; ArgentinaFil: Ponzio, R.. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina; ArgentinaFil: Sparo, Mónica Delfina. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Médicas. Departamento de Articulación de Ciencias Básicas y Clínicas. Cátedra de Microbiología y Parasitología; ArgentinaFil: Manghi, Marcela Alejandra. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral Prof. Ricardo A. Margni. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral Prof. Ricardo A. Margni; ArgentinaFil: Canellada, Andrea Mercedes. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral Prof. Ricardo A. Margni. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral Prof. Ricardo A. Margni; Argentin

BM-DCs stimulation with <i>E</i>. <i>faecalis</i> CECT7121 cell walls and soluble lysate.

<p>BM-DCs were <i>in vitro</i> stimulated with <i>E</i>. <i>faecalis</i> CECT7121 cell walls (μg) and soluble lysate (μg of total protein), and IL-6, TNFα, IL-12, and IL-10 were measured in culture supernatants after 24 h (A, B, C, and D, respectively). Heat-killed <i>E</i>. <i>faecalis</i> CECT7121 (MOIs 1:1 and 100:1) was employed as a positive control. Cytokine levels were expressed as mean pg/mL ± SEM. ns: non-significant, *<i>p</i><0.05, **<i>p</i><0.01, ***<i>p</i><0.001 (One-way ANOVA and Dunnett’s Multiple Comparison tests after ‘sqrt(IL-12)’ or ‘Log(TNFα)’ transformations). <i>E</i>. <i>faecalis</i> CECT7121 cell walls and soluble lysate show different behavior. Both stimuli are able to induce IL-12 and IL-6, but the soluble lysates induce low TNFα and fail to induce IL-10 production.</p

Evaluation of regulatory cells in the spleen of probiotic-immunized animals.

<p>Spleen and MLNs cells were stained employing specific antibodies to determine CD4⁺FoxP3⁺ Tregs by flow cytometry (A). CD11b⁺Ly6C^intGr-1^high gMDSCs and CD11b⁺Ly6C^highGr-1^int mMDSCs were also determined by flow cytometry in the spleen of PBS and immunized mice (B). Results were expressed as mean cpm ± SEM from 2 independent experiments, and comparisons were performed between PBS and probiotic-treated mice. ns: non-significant (One-way ANOVA and Dunnett’s Multiple Comparison tests). The inoculation of <i>E</i>. <i>faecalis</i> CECT7121 does not induce Tregs accumulation neither in spleens nor in MLNs, but causes a non-significant accumulation of gMDSCs in the spleen of immunized mice.</p

<i>In vivo</i> influence of <i>E</i>. <i>faecalis</i> CECT7121-pulsed DCs, and IFNγ production by spleen cells.

<p>C57BL/6 BM-DCs were pulsed with heat-killed <i>E</i>. <i>faecalis</i> CECT7121 (Ef∅) for 18 h, and then adoptively transferred to naïve C57BL/6 mice. After 7 days, spleen cells were <i>ex vivo</i> stimulated with Ef∅ (72 h) and cytokines were analyzed in culture supernatants by ELISA (A, IFNγ; B, IL-13; <b>C</b>, IL-10). Cytokine levels are expressed as mean pg/mL ± SEM. Comparisons were performed between DC and Ef-DC groups. ns: non-significant, * <i>p</i><0.05 (Unpaired Student’s <i>t</i> test). <i>E</i>. <i>faecalis</i> CECT7121-primed BM-DCs adoptively transferred to naïve mice induce the specific-secretion of IFNγ by spleen cells without production of IL-13 or IL-10.</p

IFNγ production after <i>in vivo</i> immunization with <i>E</i>. <i>faecalis</i> CECT7121.

<p>Supernatants from spleen (A and B) and MLNs (C and D) cell cultures were analyzed by direct ELISA to determine the levels of IFNγ. Results were expressed as mean pg/mL ± SEM from 2 independent experiments, and comparisons were performed between PBS and EF groups. ns: non-significant, *<i>p</i><0.05, **<i>p</i><0.01 (Mann-Whitney U-test). The inoculation of <i>E</i>. <i>faecalis</i> CECT7121 induces a rapid IFNγ production at local (MLNs) and systemic (spleen) levels.</p