Embriogênese somática e regeneração in vitro de clones elite de Theobroma cacao

The objective of this work was to evaluated a procedure for somatic embryogenesis and regeneration of cacao (Theobroma cacao L.) elite clones. Petal explants from cacao clones TSH 565 and TSH 1188 were cultured on PCG and SCG-2 media, for calli growth. Somatic embryos were formed on the surface of embryogenic calli after transfer to embryo development (ED) medium. Clone TSH 565 showed a higher embryogenic potential than TSH 1188. The best combination of carbon source for embryo induction in ED medium was genotype-specifi c. Embryogenic callus formations increased in micropore tape-sealed Petri dishes, irrespective of cacao genotype. Mature somatic embryos were successfully converted into plantlets.O objetivo deste trabalho foi avaliar um procedimento para embriogênese somática e regeneração de clones elite de cacau. Pétalas dos clones de cacau TSH 565 e TSH 1188 foram cultivadas em meios PCG e SCG-2para o crescimento de calos. Embriões somáticos desenvolveram-se na superfície dos calos embriogênicos, após a transferência para o meio ED. O clone TSH 565 apresentou maior potencial embriogênico do que oTSH 1188. A melhor combinação de fonte de carbono quanto à indução de embriões em meio ED foi específi ca do genótipo. A formação de calos embriogênicos foi superior em placas de Petri seladas com fi ta hipoalergênica,independentemente do genótipo. Embriões maduros de ambos os genótipos foram convertidos em plântulas

Growth regulators, culture media and antibiotics in the in vitro shoot regeneration from mature tissue of citrus cultivars

O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito de combinações de 6-benzilaminopurina (BAP) e ácido α-naftalenoacÚtico (NAA), meios de cultura e antibióticos beta-lactâmicos sobre a regeneração in vitro de segmentos internodais de laranja doce ('Pêra', 'Valência' e 'Bahia') e limão 'Cravo'. Para a indução de brotações, os explantes internodais foram cultivados em meio Murashige e Skoog (MS) contendo as seguintes combinações de BAP/ANA: 0,0/0,0; 0,25/0,0; 0,25/0,25; 0,5/0,0; 0,5/0,5; 1,0/0,0; 2,0/0,0; 2,0/0,25; 2,0/0,5; e 1,0/2,0 mg L-1. A fim de testar a influência dos meios de cultura na organogênese, as formulações (MS), Murashige e Tucker (MT) e "woody plant medium" (WPM) foram avaliadas, associadas à melhor combinação de reguladores de crescimento obtida no experimento anterior. Foram utilizados quatro antibióticos beta-lactâmicos (timentin, cefotaxima, trihidrato de meropenem e augmentin), em diferentes concentrações, para avaliar sua influência na regeneração in vitro. As melhores respostas foram obtidas quando os explantes foram cultivados em meio MS com 500 mg L-1 de cefotaxima com as seguintes combinações BAP/ANA: 0,5 + 0,25 mg L-1, para 'Cravo'; 1,0 + 0,25 mg L-1, para 'Valência' e 'Bahia'; e 1,0 + 0,5 mg L-1, para 'Pêra'. Genótipos, meios de cultura e antibióticos beta-lactâmicos afetam a resposta morfogenética de tecidos maduros de citros.The objective of this study was to evaluate the effects of 6-benzylaminopurine (BAP) and α-naphthaleneacetic acid (NAA) combinations, basal media and beta-lactam antibiotics on in vitro organogenesis from mature stem segments of 'Pêra', 'Valência' and 'Bahia' sweet oranges and 'Cravo' rangpur lime. For induction of shoot regeneration, the segments of the four cultivars were placed on Murashige and Skoog (MS) medium containing the following BAP/NAA concentrations: 0.0/0.0; 0.25/0.0; 0.25/0.25; 0.5/0.0; 0.5/0.5; 1.0/0.0; 2.0/0.0; 2.0/0.25; 2.0/0.5; and 2.0/1.0 mg L-1. In order to test the influence of the culture media on shoot-bud induction, (MS), Murashige and Tucker (MT), and woody plant medium (WPM) formulations were evaluated, associated with the best combination of plant growth regulators obtained in the previous experiment. The influence of four beta-lactam antibiotics (timentin, cefotaxime sodium salt, meropenem trihydrate and augmentin) on shoot regeneration was determined. Better regeneration responses were achieved when internodal segments were cultured onto MS-based medium with 500 mg L-1 cefotaxime with the following BAP/NAA concentrations: 0.5 + 0.25 mg L-1 for 'Cravo', 1.0 + 0.25 mg L-1 for 'Valência' and 'Bahia', and 1.0 + 0.5 mg L-1 for 'Pêra'. Genotype, growth regulators, basal media and beta-lactam antibiotics affect the morphogenetic response in mature tissues of citrus

Parâmetros de cultura de tecidos em cultivares de laranjeira‑doce

The objective of this work was to establish tissue culture parameters for gene transfer in sweet orange cultivars. Epicotyl explants with different ages were cultured with 6-benzylaminopurine (BAP), kanamycinand hygromycin. Shoots were cultured with alpha-naphthaleneacetic acid (NAA) alone or in combination with indole-3-butyric acid (IBA). The requirement of BAP for shoot development was genotype-specifi c. Epicotylexplants from 35-day-old seedlings produced signifi cantly more shoots per explant in 'Pêra'. Kanamycin inhibited shoot regeneration for the most cultivars. The percentage of shoots that produced roots in 'Pêra' wassignifi cantly higher in medium with NAA and IBA than with NAA alone.O objetivo deste trabalho foi estabelecer parâmetros de cultura de tecidos para transferência gênica em cultivares de laranjeira-doce. Explantes de epicótilo com idades diferentes foram cultivadascom 6-benzilaminopurina (BAP), canamicina e higromicina. Os brotos foram cultivados só com ácido alfa-naftalenoacético (ANA), ou ANA em combinação com ácido indolbutírico (IBA). O requerimento de BAPpara o desenvolvimento de broto foi genótipo-específi co. Explantes de epicótilo de plântulas com 35 dias de idade produziram mais brotos por explante em 'Pêra'. A canamicina inibiu a regeneração de broto, na maioriadas cultivares. A percentagem de brotos que produziram raízes em 'Pêra' foi signifi cativamente maior em meio com ANA e IBA do que só com ANA

Recurrent water deficit causes epigenetic and hormonal changes in citrus plants

The present study evaluated the physiological, molecular and hormonal parameters from scion/rootstock interaction of citrus plants during recurrent water deficit. Responses of the Valencia (VO) scion variety grafted on two rootstocks with different soil water extraction capacities, Rangpur Lime (RL) and Sunki Maravilha (SM), during three successive periods of water deficit: plants exposed to a single episode of water deficit (WD1) and plants exposed to two (WD2) and three (WD3) recurrent periods of WD were compared. The combinations VO/RL and VO/SM presented polymorphic alterations of epigenetic marks and hormonal (i.e. abscisic acid, auxins and salicylicacid) profiles, which were particularly prominent when VO/SM plantswere exposed toWD3 treatment. Upon successive drought events, the VO/SM combination presented acclimatization characteristics that enable higher tolerance to water deficit by increasing transpiration (E), stomatal conductance (g s ) and photosynthetic rate (A), which in turn may have facilitated the whole plant survival. Besides providing comprehensive data on the scion/rootstock interactions upon successive stress events, this study brings the first dataset suggesting that epigenetic alterations in citrus plants triggered by recurrent water deficit lead to improved drought tolerance in this crop species. (Résumé d'auteur