Triterpene Saponins from the Aerial Parts of Trifolium medium L. var. sarosiense

Seven previously unreported triterpene glycosides (1−7) were isolated from methanol extract of the aerial parts of Trifolium medium var. sarosiense (zigzag clover). Their structures were established by the extensive use of 1D and 2D NMR experiments along with ESI-MS and HRMS analyses. Compounds 1−7 are oleanane derivatives characterized by the presence of a keto group at C-22 of an aglycone and a primary alcoholic function at C-24 and differing functions at C-30. Among these, compounds 1−3 and 6 showed a secondary alcoholic function at C-11, which is methoxylated in compounds 4 and 7. Compound 5 was shown to possess a known aglycone, wistariasapogenol A; however, it is described here for the first time as a saponin constituent of the Trifolium genus. Some aspects of taxonomic classification of zigzag clover are also discussed

Antifungal [Gaeumannomyces graminis var. tritici] activity of various glycosides of medicagenic acid

Different concentrations of medicagenic acid and five glycosides of this acid isolated from alfalfa (Medicago sativa) were added to agar medium (com meal agar, CMA) inoculated with cultures of Gaeumannomyces graminis var. tritici (Ggt). After 7 days of incubation at 25°C colony radius was measured and % of inhibition calculated in relation to the control medium (CMA enriched with the solvent of the tested compounds). Within the tested concentrations, only 3-O-β -D -glucopiranoside medicagenate (monoglucoside) significantly reduced the growth of Ggt on CMA medium. This compound at 0.05 mM concentration completely inhibited the development of the fungus and the effect was shown to be fungi-toxic.Różne koncentracje kwasu medikagenowego (KM) oraz pięciu glikozydów tego kwasu wyodrębnionych z lucerny siewnej (Medicago sativa) dodawano do pożywki agarowej (corn meal agar, CMA) zaszczepionej kulturą Gaeumannomyces graminis var. tritici (Ggt). Po różnych okresach inkubacji mierzono promień kolonii badanego grzyba i wyliczano % zahamowania jego wzrostu w stosunku do kontroli (CMA z dodatkiem rozpuszczalnika testowanych związków). Spośród analizowanych związków tylko monoglukozyd KM (3-O-β -D -glukopiranozyd KM) istotnie hamował wzrost Ggt w zakresie użytych koncentracji. Związek ten w stężeniu 50 µM spowodował zupełne zahamowanie rozwoju badanego grzyba, a po przełożeniu inokulum na pożywkę czystą, grzyb ten nie był zdolny do ponownego wzrostu. Wskazuje to, że w powyższej koncentracji monoglukozyd KM wykazuje efekt grzybobójczy w stosunku do Ggt

Calcium-Magnesium salt of saponins from bird's foot trefoil seeds (Lotus corniculatus L.)

A calcium-magnesium salt of saponins was isolated from bird's foot trefoil seeds with a yield of 0.04%. The salt contained: 1.37% - Ca and 0.04% - Mg. The saponin salts were deionized on IR-120 Amberlite and free crystalline saponin was obtained. In both cases the presence of one major component and of three trace ones was found, using TLC. In acid hydrolysates of the saponin salts and of the free saponin the following sugars were identified: rhamaose, xylose, glucose, galactose, glucuronic acid. From among aglycones soyasapogenols B, C, traces of E, and of one unidentified in both cases were found. The Ca-Mg salt obtained seems to be a natural form of saponins in bird's foot trefoil seeds

Oddziaływanie saponin z Medicago arabica, M. hybrida i M. sativa na wzrost i rozwój Fusarium oxysporum f. sp. tulipae

In the present work it was shown that total saponins originated from M. hybrida and M. sativa substantially limited mycelium growth of F. oxysporum f. sp. tulipae and symptoms of fusariosis on tulip bulbs. Out of 15 individual tested saponins originated from M. arabica, M. hybrida and M. sativa, four compounds: 3-O-[β-D-glucopyranosyl (1→2)α-L-arabinopyranosyl] hederagenin, hederagenin 3-O-β-D-glucopyranoside, medicagenic acid, medicagenic acid 3-O-β-D-glucopyranoside had the strongest inhibitory effect on mycelium growth of Fusarium oxysporum f. sp. tulipae on PDA medium. The total saponins from M. arabica, M. hybrida and M. sativa inhibited the number of colony forming units of Fusarium oxysporum f. sp. tulipae in artifi cially infested substrate. The use of saponins originated from Medicago as a fungicide is suggested.Wykazano, że suma saponin pozyskana z korzeni Medicago hybrida i M. sativa w stężeniach 0,01%, 0,05% i 0,1% oddziaływała fungitoksycznie na wzrost grzybni 4 izolatów Fusarium oxysporum f. sp. tulipae (F.ox.t.) w warunkach in vitro na pożywce PDA. Najwyższe stężenie saponin (0,1%) najsilniej ograniczało wzrost grzybni badanych izolatów F.ox.t.; inhibicja wynosiła w granicach 73-80% dla saponin izolowanych z M. hybrida i 46–65% dla saponin z M. sativa. Spośród badanych 15 poszczególnych pojedyńczych saponin otrzymanych z M. arabica, M. hybrida i M. sativa 4 następujące saponiny wykazały silne haO-[β-D-glukopiranozylo(1→2)α-L-arabinopiranozyd] hederageniny (M. arabica) – w stężeniu 140 μgxcm־³ 70% hamowanie, 3-O-β-D-glukopiranozyd hederageniny ( M. hybrida) – w stężeniu 100 μgxcm־³ 80% hamowanie, kwas medikagenowy (M. sativa) – w stężeniu 60 μgxcm־³ 85% hamowanie, 3-O-β-D-glukopiranozyd kwasu medikagenowego (M. hybrida, M. sativa) – w stężeniu 115 μgxcm־³ 65% hamowanie. Suma saponin pozyskana z M. hybrida i M. sativa zastosowana profi laktycznie do zaprawiania cebul tulipana silnie ograniczała rozwój fuzariozy. W stężeniu 0,1% suma saponin z każdego badanego gatunku lucerny ograniczała rozwój choroby w około 80%, oceniany długością i głębokością plam infekcyjnych i hamowała tworzenie się gum. Zastosowane sumy saponin w wyższym stężeniu 0,5% silniej ograniczały rozwój patogena. Badane sumy saponin, zastosowane w stężeniu 5%, do podlewania zakażonego przez F.ox.t. 218 podłoża, wykazały inhibicyjny, jednakże zróżnicowany wpływ na rozwój patogena w podłożu. Najsilniej ograniczała liczbę jednostek tworzących kolonie F.ox. t 218, suma saponin z M. sativa (około 92%), słabsze wyniszczające oddziaływanie na patogena wykazała M. hybrida (około 60%) a najsłabiej ograniczała rozwój patogena suma saponin z M. arabica (około 40%) – w porównaniu do liczebności jednostek tworzących kolonie F.ox.t. 218 w podłożu kontrolnym nie traktowanym

Flavonoids from the bird's foot trefoil seeds (Lotus corniculatus L.)

In the seeds of bird's foot trefoil (Lotus corniculatus L.) the presence of quercetin- and kaempferol heterosides was found. Eight crystalline compounds and one chromatographically homogeneous fraction were obtained from the flavonoid mixture using column chromatography on polyamide and cellulose. By means of TL-chromatography, elemental analysis and UV-spectrometry seven of the isolated compounds were identified to be quercetin, quercetin 3-arabopyranoside (guajaverin), quercetin 3-galactoside, quercetin 3-rhamnoside, kaempferol 3,7-diglucoside, kaempferol 3,7-dirhamnoside kaempferol 3-glucosyl-7-rhamnoside and two remaining ones were only partly characterized a snearer indefinite kaempferol heterosides

Aktywnosc antygrzybowa saponin korzeni Medicago hybrida w stosunku do kilku patogenow roslin ozdobnych

Antifungal activity of total saponins originated from roots of Medicago hybrida (Pourret) Trautv. were evaluated in vitro against six pathogenic fungi and eight individual major saponin glycosides were tested against one of the most susceptible fungi. The total saponins showed fungitoxic effect at all investigated concentrations (0.01%, 0.05% and 0.1%) but their potency was different for individual fungi. The highest saponin concentration (0.1%) was the most effective and the inhibition of Fusarium oxysporum f. sp. callistephi, Botrytis cinerea, Botrytis tulipae, Phoma narcissi, Fusarium oxysporum f. sp. narcissi was 84.4%, 69.9%, 68.6%, 57.2%, 55.0%, respectively. While Fusarium oxysporum Schlecht., a pathogen of Muscari armeniacum, was inhibited by 9.5% only. Eight major saponin glycosides isolated from the total saponins of M. hybrida roots were tested against the mycelium growth of Botrytis tulipae. The mycelium growth of the pathogen was greatly inhibited by hederagenin 3-O-β -D-glucopyranoside and medicagenic acid 3-O-β -D-glucopyranoside. Medicagenic acid 3-O-β -D-glucuronopyranosyl-28-O-β -D-glucopyranoside and oleanolic acid 3-O-[β -D-glucuronopyranosyl(1→2)-α -L-galactopyranosyl]-28-O-β -D-glucopyranoside showed low fungitoxic activity. Medicagenic acid 3-O-β-D-glucopyranosyl- 28-O-β -D-glucopyranoside, hederagenin 3-O-[α -L-rhamnopyranosyl(1→-2)-D-glucopyranosyl( 1→2)-D-glucopyranosyl]- 28-O-β -D-glucopyranoside and hederagenin 3-O-α -D-glucuronopyranosyl-28-O-β -D-glucopyranoside did not limit or only slightly inhibited growth of the tested pathogen. While 2β, 3β-dihydroxyolean-12 ene-23-al-28-oic acid 3-O-β -D-glucuronopyranosyl-28-O-β -D-glucopyranoside slightly stimulated mycelium growth of B. tulipae.Oszacowano in vitro aktywnooeć sumy saponin pozyskanych z korzeni Medicago hybrida na wzrost grzybni szeoeciu patogenów i przetestowano osiem dominują- cych glikozydów saponinowych względem Botrytis cinerea. Suma saponin wykazała fungistatyczny wpływ przy wszystkich badanych stężeniach (0,01%, 0,05% i 0,1%) ale ich aktywnooeć była różna dla poszczególnych grzybów. Najwyższe stężenie (0.1%) saponin było najbardziej efektywne i wyrażało się silnym hamowaniem Fusarium oxysporum f. sp. callistephi (84,4%), Botrytis cinerea (69,9%), Botrytis tulipae (68,6%), Phoma narcissi (57,2%), Fusarium oxysporum f. sp. narcissi (55,0%). Podczas, gdy Fusarium oxysporum Schlecht, patogen pochodzący z Muscari armeniacum był zahamowany zaledwie w 9,5%. Osiem dominujących glikozydów saponinowych wyodrębnionych z sumy saponin testowano w stosunku do Botrytis tulipae. Wzrost liniowy grzybni tego patogena był silnie zahamowany przez dwa glikozydy: 3-O-β-Dglukopyranozyd hederageniny i 3-O-β -D-glukopyranozyd kwasu medikagenowego. 3-O-β-D-glukuronopyranozylo-28-O-β-D-glukopyranozyd kwasu medikagenowego i 3-O-[-D-glukuronopyranozylo(1→2)- α -L-galaktopyranozylo]-28-O-β -D-glukopyranozyd kwasu oleanolowego wykazywały niską fungitoksycznooeć. 3-O-β -D-glukopyranozylo- 28-O-β -D-glukopyranozyd kwasu medikagenowego, 3-O-[α-L-rhamnopyranozylo( 1→2)-β -D-glukopyranozylo(1→2)-D-glukopyranozylo]-28-O-β-Dglukopyranozyd hederageniny i 3-O-β -D-glukuronopyranozylo- 28-O-β -D-glukopyranozyd hederageniny nie wpływają lub tylko oeladowo wpływają na wzrost badanego patogena. Podczas, gdy 2β,3β-dihydroxyolean-12ene-23-al-28-karboksy 3-O-β -D-glukuronopyranozylo-28-O-β-D-glukopyranozyd lekko stymuluje wzrost B. tulipae

Evaluation of nematicidal properties of saponins from Medicago spp

The nematicidal activity of saponins from Medicago arborea (tops), M. arabica (tops and roots) and M. sativa (tops and roots) against the plant-parasitic nematode Xiphinema index was investigated. Nematicidal activity of related prosapogenins and sapogenins on X. index is also described. Saponins from Medicago spp. at different concentrations were all nematicidal, those from M. arborea tops being the less effective. In general, saponins induced 100% mortality at 500 mu g ml(-1) between 8 and 48 h, while prosapogenins resulted in toxicity starting at 125 mu g ml(-1). Differences in the effects on X. index induced by prosapogenins and sapogenins were less pronounced, although prosapogenins displayed a larger range of activity. Assays with purified sapogenins demonstrated the relationship of the observed nematicidal activity of M. sativa and M. arborea to the content of the main aglycones (medicagenic acid and hederagenin, respectively) in the saponin extracts. Hederagenin displayed the highest bioactivity, giving 38% mortality after 1 h at 125 mu g ml(-1)