Produção de inoculante de fungo ectomicorrízico utilizando fermentação no estado líquido em biorreator tipo airlift

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro Tecnológico.Este estudo inicia uma nova geração de bioprocessos para a produção de inoculantes de fungos ectomicorrízicos (fECM). Foi estudada a produção de inoculante do fECM Pisolithus microcarpus (isolado UFSC-Pt 116), em biorreator tipo airlift com circulação externa. Inicialmente, estudou-se o efeito da composição do meio de cultura sobre a produção de biomassa fúngica, utilizando-se como base os meios Melin-Norkrans Modificado (MNM) e meio Litchfield e Arthur (L&A). Uma das variações do meio L&A, que promoveu maior produtividade, foi estudada por meio de planejamento fatorial, tendo-se como variáveis os componentes: peptona, extrato de levedura e glicose (g.L-1). A concentração de glicose pôde ser aumentada em até 40%, permitindo um melhor rendimento do biorreator. A peptona (de carne ou soja) apresentou fatores de crescimento importantes, enquanto que o extrato de levedura apresentou fatores deletérios. Em biorreator airlift o fungo cresceu principalmente na forma de pellets densos e esféricos, havendo grande produção de pigmentos. Os valores de velocidade específica máxima de crescimento foram 0,391 dia-1, para o cultivo em frascos, e 0,576 dia-1, para o cultivo no airlift. Os valores de conversão foram 0,42 g.g-1, e de produtividade de 0,49 g.L-1.dia-1, para os dois processos. O biorreator airlift forneceu velocidade específica de formação de biomassa superior a outros processos citados na literatura, com relação ao gênero Pisolithus, mostrando-se promissor para produção de biomassa de fECM. São necessários, no entanto, estudos visando controlar a fisiologia de crescimento do fungo e a adequação do processo ao cultivo de outros isolados/espécies de fECM

Tecnologia para produção de inoculantes de fungos ectomicorrízicos utilizando cultivo submerso em biorreator Airlift

Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro Tecnológico. Programa de Pós-Graduação em Engenharia Química.A necessidade crescente de produtos de base florestal criou um déficit mundial, que precisa ser compensado pela utilização de novas estratégias para promover o aumento da produtividade no setor. Em adição, os programas brasileiros de reflorestamento têm que lidar com baixos níveis de fertilidade do solo que determinam o uso de quantidades muito elevadas de fertilizantes para manter a produtividade nos níveis atuais. Esta prática contribui para os altos custos de produção e para impactos ambientais. Estratégias biotecnológicas que tratam da inoculação das plantas com microrganismos promotores do crescimento, tais como os fungos ectomicorrízicos (fECM), são alternativas ao uso de fertilizantes químicos para o aumento da produtividade dessas áreas. A introdução dessa prática nos viveiros florestais depende da seleção de isolados fúngicos eficientes e do desenvolvimento de métodos de produção de inoculantes. No Brasil, um dos principais produtores de madeira no mundo, não há tentativas de introduzir a inoculação micorrízica como uma prática rotineira dos viveiros. Neste contexto, este estudo objetiva estabelecer uma tecnologia para produção de inoculantes de fECM através do cultivo submerso. A cinética de crescimento e de transferência do oxigênio durante o cultivo do fECM Rhizopogon nigrescens (isolado UFSC-Rh90) foi estudada em um biorreator airlift com circulação externa. Biorreatores airlifts são reconhecidos como eficientes para cultivo de microrganismos filamentosos que exigem elevada transferência de massa e baixas tensões de cisalhamento. Para este estudo, foi concebido um biorreator airlift de aço inoxidável com 5 L de capacidade. Esse biorreator era equipado com sensor de oxigênio dissolvido esterilizável e o separador de gás foi projetado para melhorar os parâmetros hidrodinâmicos, tais como a velocidade de circulação de líquido (ULr), o gás holdup (e) e, por conseqüência, o coeficiente volumétrico de transferência de oxigênio (kLa). A velocidade específica de consumo de oxigênio (QO2) e o kLa foram determinados através do método dinâmico, onde a velocidade de sedimentação e o tempo de mistura foram considerados. Os resultados mostraram que o kLa, a velocidade específica de crescimento (µX) e de respiração (QO2) são afetadas pelo aumento da concentração da biomassa (X), o que ocorre principalmente devido ao aumento no tamanho dos pellets de micélio. Isso revela a importância da quantidade e do nível de fragmentação do inóculo na cinética de crescimento. Não foi possível determinar a concentração de oxigênio crítica (Ccrít) nesta situação porque a morfologia do crescimento promoveu uma deterioração contínua das condições de transferência durante o cultivo. Isso indica que níveis elevados de oxigênio dissolvido têm que ser mantidos durante a operação do biorreator. O maior valor de consumo global de oxigênio foi de 28 mgO2.L-1.h-1, para uma concentração celular de 6 g.L-1, durante um ciclo de cultivo com uma vazão específica de ar de 0,52 vvm. A quantidade de oxigênio necessária para a manutenção celular foi 2,36 mgO2.gcel.h-1, que correspondeu a 30% da QO2 média. A cinética de crescimento para outros cinco isolados - Scleroderma sp. (UFSC- Sc42), Rhizopogon vulgaris (UFSC-Rh106), Pisolithus microcarpus (UFSC-Pt116 e UFSC-Pt188) e Chondrogaster angustisporus (UFSC-Ch163) - foi estudada em frascos estáticos. Foram produzidos inoculantes de todos os seis isolados utilizando-se a técnica de imobilização em gel de alginato de cálcio, avaliando-se a viabilidade desses em relação ao tempo de armazenamento. A infectividade e eficiência do inoculante para plântulas de Eucalyptus e Pinus foram estudadas sob condições de estufa e viveiros. A adição de carvão ativado nas cápsulas de alginato favoreceu a viabilidade do micélio, mantendo-se em 100% após 6 meses de armazenamento sob refrigeração. Enquanto que no tratamento sem carvão, com exceção para os isolados do gênero Rhizopogon, a viabilidade era perdida logo após o encapsulamento. Isto indica a necessidade de realização de estudos fisiológicos e bioquímicos, a fim identificar os compostos tóxicos produzidos pelos fungos durante seu crescimento. Nos estudos de inoculação das plantas, verificou-se que todos os isolados foram capazes de colonizar as raízes, apresentando resultados positivos no seu crescimento. Os resultados mostram que a tecnologia de produção de biomassa de fECM em biorreator airlift apresenta alta eficiência. A veiculação em gel de alginato de cálcio pode manter a infectividade do inoculante durante longos períodos de armazenamento, sobretudo com a adição de carvão ao inoculante. The increasing need of forest products has created a worldwide deficit that has to be met by the utilization of new strategies to promote a higher productivity in the sector. In addition, Brazilian reforestation programmes have to deal with low levels of soil fertility which determine that very high amounts of fertilizers are necessary to maintain the productivity at the present threshold. This practice contributes to high production costs and to environmental impact. Biotechnological strategies dealing with plant inoculation with growth promoting microorganisms, such as ectomycorrhizal fungi (ECMf), is one alternative to the use of chemical fertilizers for increasing forest productivity. The introduction of this practice in forest nurseries depends on the selection of efficient fungal isolates and the development of inoculum production methods. In Brazil, one of the main timber producers in the world, there is no attempt to introduce controlled mycorrhization as one of the nursery practices. In this context, this study aims to establish a technology of ectomycorrhizal inoculum production through submerged cultivation. In one assay the kinetic of growth and oxygen transfer of an ECMf, Rhizopogon nigrescens (isolate UFSC-Rh90), was studied in an airlift bioreactor with external circulation. Airlift bioreactors are well known for their high efficiency in the cultivation of filamentous microorganisms whose growth demands high mass transfer rates and low shear rates. For this study a stainless steel 5-litter airlift bioreactor was conceived. This bioreactor was equipped with a sterilizable dissolved oxygen probe and the gas separator was designed in order to improve hydrodynamic parameters such as liquid circulation rate (ULr), gas holdup (e) and, by consequence, volumetric oxygen mass transfer coefficient (kLa). The specific oxygen uptake rate (QO2) and the kLa were determined through the dynamic method, taking into account the sedimentation rate and mixing time. Results show that kLa, as well as the specific growth (µX) and respiration rates, are affected by the increase in biomass concentration, which happens mainly through the increase of the size on the mycelium pellets. This indicates the importance of the concentration and the level of inoculum fragmentation on the kinetics of growth. It was impossible to determine the critical oxygen concentration (Ccrít) in this situation because growth morphology promoted a continuous deterioration of the transfer conditions during the course of cultivation. This indicates that high levels of dissolved oxygen have to be maintained during the operation of the bioreactor. The highest value of global oxygen uptake observed was 28 mgO2.L-1.h-1, for a cell concentration of 6 g.L-1, during a cultivation cycle with a specific air flow rate of 0.52 vvm. The amount of oxygen necessary for cell maintenance was 2.36 mgO2.gcell.h-1, which corresponded to 30% of the average QO2. Growth kinetics of five other isolates - Scleroderma sp. (UFSC-Sc42), Rhizopogon vulgaris (UFSC-Rh106), Pisolithus microcarpus (UFSC-Pt116 and UFSC-Pt188) and Chondrogaster angustisporus (UFSC-Ch163) was also studied in static flasks. Inocula of all the six isolates were produced using the calcium alginate immobilization technique and their viability in relation to storage time was evaluated. Their infectivity and efficiency towards Eucalyptus and Pinus seedlings was studied under greenhouse and nursery conditions. The addition of activated charcoal to the alginate beads improved mycelium viability up to 100% even after 6 months of storage under refrigeration. This indicates that physiological and biochemical studies have to be carried out in order to identify toxic compounds produced by the fungi during their growth. In the inoculation studies, all isolates were able to colonize roots and had a positive effect in the plant growth. Results show that the technology of ECMf biomass production in airlift bioreactors presents high efficiency. The immobilization of the inoculum in calcium alginate contributes to maintain fungal infectivity during a long period of storage, mainly with the addition of activated charcoal

Desenvolvimento e nutrição de mudas de acácia-negra (Acacia mearnsii de Wild. De Wild.) em substratos a base de cama de aviário

We evaluated the development and the nutritional status of Acacia mearnsii De Wild. seedlings produced in four organic substrates with poultry litter base, distributed in percentage terms: T1: 25CA:50S:25A; T2: 50CA25S25A; T3: 25CA75S and T4: 100SC (CA: poultry litter; S: soil; A: sand; SC: commercial substrate), in tubes of 125 cm3 conducted in greenhouse / shade area. The best results, to the morphological variables height, stem diameter, number of leaves, dry mass of roots and total, were obtained in commercial substrate and in between 25 to 50% of poultry litter with clay soil and sand. The N and Mg contents (shoot and roots) and P and K (shoot) were not influenced by substrates. In the roots, the P content was greater on treatment with biggest proportion of clay soil. The K, in the roots, had the highest levels in substrates composed of 25 to 50% of poultry litter and commercial substrate. For Ca, the contents in shoots were higher than roots, mainly in the substrates with up to 50% of poultry litter. In the roots, the proportion of poultry litter did not influence Ca. The tested substrates, generally, did not influence the nutritional status of the seedlings.Avaliou-se o desenvolvimento e o estado nutricional de mudas de Acacia mearnsii De Wild., produzidas em quatro diferentes substratos a base de cama de aviário, percentualmente distribuídos em: T1: 25CA:50S:25A; T2: 50CA25S25A; T3: 25CA75S e T4: 100SC (CA: cama de aviário; S: solo; A: areia; SC: substrato comercial), em tubetes de 125 cm3 e conduzidos em casa de vegetação / casa de sombra. Os melhores resultados, para as variáveis morfológicas altura da parte aérea, diâmetro do colo, número de folhas, massa seca de raízes e total, foram obtidos em substrato comercial e em misturas de 25% até 50% de cama de aviário com solo argiloso e areia. Os teores de N e Mg (parte aérea e raízes) e de P e K (parte aérea) não foram influenciados pelos substratos. Nas raízes, o P teve maior teor no tratamento com solo argiloso. O K, nas raízes, teve os maiores teores nos substratos com 25% a 50% de cama de aviário e no comercial. Para Ca, os teores na parte aérea foram superiores ao das raízes, principalmente nos substratos com até 50% de cama de aviário. As raízes, para Ca, não se apresentaram influenciadas pelos tratamentos. Os substratos testados, em termos gerais, não influenciaram o status nutricional das mudas

A low-cost HPV immunochromatographic assay to detect high-grade cervical intraepithelial neoplasia

Objective To evaluate the reproducibility and accuracy of the HPV16/18-E6 test. Methods The study population was comprised of 448 women with a previously abnormal Pap who were referred to the Barretos Cancer Hospital (Brazil) for diagnosis and treatment. Two cervical samples were collected immediately before colposcopy, one for the hr-HPV-DNA test and cytology and the other for the HPV16/18-E6 test using high-affinity monoclonal antibodies (mAb). Women with a histologic diagnosis of cervical intraepithelial neoplasia grade 2 or 3 were considered to be positive cases. Different strategies using a combination of screening methods (HPV-DNA) and triage tests (cytology and HPV16/18-E6) were also examined and compared. Results The HPV16/18-E6 test exhibited a lower positivity rate compared with the HPV-DNA test (19.0% vs. 29.3%, p<0.001) and a moderate/high agreement (kappa = 0.68, 95% CI: 0.60-0.75). It also exhibited a significantly lower sensitivity for CIN2+ and CIN3+ detection compared to the HPV-DNA test and a significantly higher specificity. The HPV16/18-E6 test was no different from cytology in terms of sensitivity, but it exhibited a significantly higher specificity in comparison to ASCH+. A triage test after HPV-DNA detection using the HPV16/18-E6 test exhibited a significantly higher specificity compared with a triage test of ASCH+ to CIN2+ (91.8% vs. 87.4%, p = 0.04) and CIN3+ (88.6% vs. 84.0%, p = 0.05). Conclusion The HPV16/18-E6 test exhibited moderate/high agreement with the HPV-DNA test but lower sensitivity and higher specificity for the detection of CIN2+ and CIN3+. In addition, its performance was quite similar to cytology, but because of the structural design addressed for the detection of HPV16/18-E6 protein, the test can miss some CIN2/3+ lesions caused by other high-risk HPV types.Cancer Prevention Department, Center for the Researcher Support and Pathology Department of the Barretos Cancer Hospital. This study was supported by CNPq 573799/2008-3 and FAPESP 2008/57889-1info:eu-repo/semantics/publishedVersio

Grafic Humor in the classroom and the Teaching of History

A pesquisa é sobre o humor gráfico e a sua utilização em sala de aula, principalmente as charges no processo de ensino-aprendizagem em História, focando as suas dificuldades e as potencialidades. As principais fontes são oriundas dos arquivos do Centro Nacional de Documentação, Pesquisa e Divulgação do Humor em Piracicaba (CEDHU), das Secretarias Municipais de Ação Cultural e da Educação, e, também o material Currículo em Ação, distribuído à rede estadual paulista pela Secretaria da Educação do Estado de São Paulo (SEDUC-SP) nos anos de 2021 e 2022. Discutimos a hipótese sobre as dificuldades crescentes dos alunos em analisarem a linguagem gráfica tradicional das charges, mesmo inseridos atualmente no universo tecnológico onde predominam tantos recursos visuais.The research is about graphic humor and its use in the classroom, mainly as charges in the teaching-learning process in history, focusing on its difficulties and potentials. The main sources will come from the archives of the National Center for Documentation, Research and Dissemination of Humor in Piracicaba (CEDHU), from the Municipal Departments of Cultural Action and Education, as well as the material Curriculum in Action, distributed to the São Paulo state network by the Department of Education of the State of São Paulo (SEDUC-SP) in the year 2021 and 2022. We intend to discuss the hypothesis about the growing difficulties of students in analyzing the traditional graphic language of cartoons, even though they are currently inserted in the technological universe where so many visual resources predominate.Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES