The spoilage flora of vacuum-packaged, sodium nitrite or potassium nitrate treated, cold-smoked rainbow trout stored at 4°C or 8°C

http://www.elsevier.nl/locate/01681605The spoilage flora of vacuum-packaged, salted, cold-smoked rainbow trout fillets, with or without the addition of nitrate or nitrite, stored at 4°C and 8°C, was studied. Of 620 isolates, lactic acid bacteria were the major fraction (76%), predominating in all samples of spoiled product. However, the phenotypical tests used were insufficient to identify the lactic acid bacteria to the species level. Gram-positive, catalase-positive cocci, Gram-negative, oxidase-negative rods and Gram-negative, oxidase-positive rods were found in 6%, 16% and 2% of the samples, respectively. Of 39 Gram-positive, catalase-positive cocci, 29 were identified as staphylococci and 10 as micrococci. Eighty-five isolates were found to belong to the family Enterobacteriaceae, with 45 of those being Serratia plymuthica. Eleven isolates from the nitrate treated samples stored at 8°C were identified as Pseudomonas aeruginosa. The occurrence of P. aeruginosa and staphylococci in the nitrate-containing samples, stored at 8°C, may cause problems with respect to the safety of the product. The types of lactic acid and other bacteria in the spoilage flora were generally reduced by the addition of nitrate or nitrite to fillets

Defensive behavior in principal-agent relationships

In this doctoral thesis, I explore how vague behavioural or legal standards affect agents decision-making. In particular, I test the extent to which agents engage in defensive behaviour in order to signal a professional qualification or in the face of vague legal standards. I measure defensive behaviour as the extent to which agents make less than efficient decisions for their principals in order to increase the probability of complying with the vague standard. This behaviour is of great interest as it is associated with vast costs to principals and to society as a whole.I find that defensive behaviour is not easily eroded and very sensitive to legal standard vagueness. Policy makers seeking to minimize defensive behaviour face a complex task in which the reduction of legal uncertainty or financial liability is not always an effective strategy. All three papers are based on economic experiments

Synthese und Charakterisierung von binären Polyaziden der p-Blockelemente

Gegenstand der vorliegenden Arbeit war die Untersuchung der binären Polyazide der p-Blockelemente. Hierbei standen vor allem die Etablierung neue Synthesewege und die vollständige Charakterisierung der Verbindungen im Vordergrund. Insbesondere die Charakterisierung durch Einkristall-Röntgenbeugung und damit die Betrachtung der intermolekularen Wechselwirkung gestützt durch quantenchemische Berechnungen waren von besonderem Interesse. Amidinatoantimon- und -bismut-Komplexe: Die Komplexe [tBuC(NiPr)2SbF2] 5 und [tBuC(NDipp)2SbF2] 6 konnten in nahezu quantitativer Ausbeute durch die Salzmetathese-Reaktionen der korrespondierenden Lithiumamidinat-Komplexe mit Antimontrifluorid bei tiefer Temperatur synthetisiert werden. Die vorteilhafte Reaktionsroute zwischen den Difluoridostiban-Komplexen 5 und 6 mit TmsN3 zu den analogen LSb(N3)2-Komplexen lieferte 9 und 10 in hohen Ausbeuten. Die Bildung von TmsF ist thermodynamisch durch die starke Silizium-Fluor-Bindung bevorzugt und TmsF kann wie überschüssiges TmsN3 verhältnismäßig einfach unter vermindertem Druck entfernt werden. Die analogen Diazidobismutan-Komplexe konnten nicht durch diese Reaktionsführung erhalten werden. Deshalb wurde der Halogenid-Azid-Austausch zwischen LBiCl2 bzw. LBiI2 und AgN3 durchgeführt. Hierdurch konnten die Verbindungen 11 und 12 in nahezu quantitativer Ausbeute synthetisiert werden. Die Difluoridostiban- sowie Diazidostiban und Diazidobismutan-Komplexe wurden vollständig charakterisiert inklusive Einkristall-Röntgenstrukturanalyse und repräsentieren einige der wenigen Beispiele für Difluorid- bzw. Diazid-Verbindungen der Metalle Antimon und Bismut. Zusätzlich wurde die Bindungssituation von den Azid-Gruppen im multinuklearen {[tBuC(NiPr)2]Bi(N3)2}4-Komplex 11 durch DFT-D-Berechnungen untersucht. Die strukturellen Parameter der Azid-Einheiten in 11 unterscheiden sich im Festkörper. Dies deutet auf eine unterschiedliche Bindungssituation hin, jedoch gibt es in der berechneten DFT-D Gas-phasenstruktur 11' keine signifikanten Unterschiede zwischen den verschiedenen Azid-Gruppen. Obwohl sich die absoluten Ladungen innerhalb der experimentellen und der optimierten Strukturen erheblich unterscheiden, ist die elektronische Natur der verschiedenen Azid-Gruppen innerhalb jeder Struktur vergleichbar. Binäre Polyazid-Verbindungen der Gruppe 15: Die neutralen Tri- und Pentaazid-Verbindungen der Elemente As, Sb und Bi konnten aus den entsprechenden Fluorid-Spezies und Trimethylsilylazid synthetisiert werden. Bei den Reaktionen wurden alle Fluorid-Ionen vollständig gegen Azid-Einheiten ausgetauscht. Aufgrund der explosiven Eigenschaften und der über alternative Reaktionswege schwierigen Aufreinigung der Polyazid-Verbindungen besitzen TmsF und TmsN3, letzteres diente zudem als Lösungsmittel, durch ihren hohen Dampfdruck einen weiteren Vorteil, dieser ermöglicht den präparativen Zugang der reinen Polyazid-Verbindungen. Für die Synthese der Triazide Sb(N3)3 15 und Bi(N3)3 16 bei Raumtemperatur war ein Ultraschallbad förderlich, dagegen wurden die Pentaazide bei tiefer Temperatur hergestellt (–78 °C). Die temperaturempfindlichen Pentaazide wurden in situ durch eine zusätzliche Azid-Gruppe oder Lewis-Base in die bei Raumtemperatur stabileren Verbindungen PNP[Sb(N3)6] 19, As(N3)5(dmap) 20 und Sb(N3)5(dmap) 21 überführt. Zudem wurden noch das basenstabilisierte Bi(N3)3(py)2 17 und das dianionische Pentaazidoantimonat-Ion [Sb(N3)5]2– in der Verbindung (PNP)2[Sb(N3)5] 18 synthetisiert. Alle mittels spektroskopischer Methoden (multinukleare NMR-, IR- und Raman-Spektroskopie) sowie Einkristall-Röntgenstrukturanalyse untersuchte Verbindungen wurden in nahezu quantitativer Ausbeute erhalten und belegen damit das hohe Potential dieser Syntheseroute. 15 ist das zweite Polymorph von Sb(N3)3 und stellt hiermit eine der sehr wenigen neutralen binären Polyazid-Verbindungen der p-Blockelemente dar, die im Festkörper strukturell charakterisiert worden sind. Bi(N3)3(py)2 17 ist das erste neutrale Bismuttriazid, sowie As(N3)5(dmap) 20 und Sb(N3)5(dmap) 21 sind die ersten neutralen Pentaazide der Gruppe 15, deren Festkör-perstrukturen bestimmt werden konnten. Die Koordination von starken Lewis-Basen wie DMAP erweist sich als sehr effektiv für die kinetische Stabilisierung von höchst explosiven Pentaaziden der Gruppe 15. Zusätzlich wurden die Komplexe (PNP)2[Sb(N3)5] 18 und PNP[Sb(N3)6] 19 vollständig inklusive der Einkristall-Röntgenstrukturanalyse charakterisiert. Dabei stellt das Pentaazidoantimonat-Dianion [Sb(N3)5]2– ein in der 15. Gruppe unerwartetes und erstmalig beobachtetes binäres Polyazid-Ion dar. Dessen Bildung ergibt sich in theoretischen Berechnungen zufolge aus der Tatsache, dass das Hexaazidoantimonat-Trianion [Sb(N3)6]3– energetisch viel höher liegt. Azide der 17. Gruppe: Das gelbe, unter Standardbedingungen gasförmige ClN3 (22), die orange Flüssigkeit BrN3 (23) sowie der leuchtend gelbe Feststoff IN3 (24) wurden nach teilweise über 100 Jahre alten Synthesevorschriften, die leicht verändert wurden, hergestellt. Chlor- und Bromazid sowie ein zweites Polymorph von Iodazid wurden erstmalig vollständig strukturell charakterisiert, wobei die Kristallzucht bei den Halogenaziden durch deren ausgeprägte Empfindlichkeit gegenüber kleinsten Druck- oder Temperaturschwankungen erschwert war. Unter Einsatz eines IR-Lasers mit einem Miniaturzonenschmelzverfahren konnten Einkristalle von 22 und 23 bei 150 K direkt auf dem Röntgendiffraktometer gezüchtet werden, dies belegt die Leistungsfähigkeit der in-situ-Kristallisationstechnik. Die Einkristalle der beiden Polymorphe des Iod-azids 24a und 24b wurden durch langsame Sublimation des gekühlten amorphen IN3 erhalten. Die Halogenazide ClN3, BrN3 und IN3, deren Strukturen hier zum ersten Mal verglichen wurden, zeigen jeweils verschiedenartige intermolekulare Wechselwirkungen, die zu einem unterschiedlichen strukturellen Aufbau im Kristall dieser Verbindungen führen. ClN3 weist inter-molekulare Cl•••Cl-Kontakte zwischen den ClN3-Molekülen auf, die zu einem Kettenpolymer führen, wie sie ebenfalls in der Festköperstruktur von elementarem Chlor beobachtet wurden, während beide Polymorphe des IN3 eindimensionale Polymere bilden, die durch nahezu symmetrische Verbrückungen der Iodatome über die Nα-Atome der Azid-Einheiten entstehen. BrN3 nimmt eine helikale Struktur über intermolekulare Br•••Nα-Kontakte vom Bromatom zum Nα-Atom des Nachmoleküls im Festkörper ein, die von zusätzlichen intermolekularen Nβ•••Nγ-Kontakten begleitet sind. Ein derartiges Strukturmotiv wurde in der Chemie kovalenter Azide bislang noch nicht beobachtet. Um experimentell ermittelte Bindungslängen und -winkel von 22 und 23 mit theoretischen Werten vergleichen zu können und die Gründe für die Stärke der intermolekularen Wechselwirkungen zu beleuchten, wurden Berechnungen auf allerhöchstem Niveau mittels Coupled-Cluster-Theorie (CCSD(T)) und zudem DFT-SAPT-Berechnungen durchgeführt. Bei den Wechselwirkungen des ClN3-Moleküls mit seinen nächsten Nachbarn sind unerwarteterweise die berechneten, intermolekularen Wechselwirkungen zwischen den Molekülen der benachbarten Ebenen (CCSD(T): –12.2, DFT-SAPT: –12.1 kJ mol–1) sogar stärker als die innerhalb einer Ebene. Unter Vernachlässigung relativistischer Effekte liefert die Wechselwirkungsenergie mittels DFT-SAPT der Dimerstruktur in BrN3 mit Br•••Nα-Kontakt einen Wert von –12.6 kJ mol–1 und ist in sehr guter Übereinstim-mung mit dem nichtrelativistischen CCSD(T)-Wert von –12.3 kJ mol–1. Für die Dimerstruktur mit Nβ•••Nγ-Kontakt in 23 beträgt die DFT-SAPT-Gesamtwechselwirkungsenergie –6.0 kJ mol–1, während das CCSD(T)-Resultat von –6.1 kJ mol–1 nahezu identisch ist. Beachtet werden sollte, dass jeweils die stärkste intermolekulare Wechselwirkung in ClN3 sowie in BrN3 ca. 60 % der für die Wasserstoffbrückenbindung im dimeren Wassermolekül beobachteten 21 kJ mol–1 beträgt. Niedervalente Azide der 14. Gruppe: Die Verbindung Ge(N3)2(IPr) 25 wurde in guter Ausbeute durch die Reaktion von NaN3 mit GeCl2(IPr) synthetisiert und vollständig charakterisiert. Ge(N3)2(IPr) ist das erste niedervalente kovalente Hauptgruppenelementazid, dessen Struktur im Festkörper mittels Einkristall-Röntgenstrukturanalyse bestimmt werden konnte. Die Ausnahme hiervon sind die basenfreie und die basenstabilisierten Pb(N3)2-Verbindungen, in den jedoch das Bleiatom in seiner stabileren Oxidationsstufe vorliegt, im Gegensatz zum Germaniumatom in Ge(N3)2(IPr). Die Bindungssituation in 25 als auch in diversen anderen binären Germaniumpolyazid-Verbindungen mit dem Germaniumatom in der formalen Oxidationsstufe +II sowie +IV wurde mit Hilfe der Dichtefunktionaltheorie unter Einbeziehung einer empirischen Dispersionskorrektur (BP86 D3) auf hohem theoretischen Niveau untersucht. Das Prinzip der Basenstabilisierung erscheint generell zur Stabilisierung niedervalenter Azid-Verbindungen geeignet. Es verspricht für die Zukunft ein großes Potenzial für die hier erstmalig belegte strukturelle Charakterisierung thermo- und stoßsensitiver sowie redoxlabiler niedervalenter kovalenter Hauptgruppenelementazide

Antibacterial activity of different organic honeys against food pathogenic bacterium Clostridium perfringens

Clostridium perfringens is one of the most common causes of food poisonings and is known to cause human and animal diseases. It has been reported that C. perfringens has developed resistance to antibiotics. Antimicrobial properties of honey have been studied in order to confirm its action as a potential antimicrobial agent and also as a potential food preservative through inactivation, growth delay or growth prevention of food pathogenic microorganisms. This study had two different parts related on virulence of C. perfringens. In the first part of the study antimicrobial activity of five multifloral organic honeys from different parts of Finland and one multifloral honey originated from Argentina and Hungary were investigated against C. perfringens. Honeys were tested at the concentrations of 50% (w/v), 25% (w/v), 20% (w/v), 15% (w/v) and 10% (w/v). For the antimicrobial assessment a disc diffusion method was used and zone of inhibition was expressed as diameter. The minimum concentrations (minimum inhibitory concentration, MIC) needed for inhibition of bacterial growth were determined for honeys showing activity in dilutions of 50%. Four of the studied honeys showed good inhibitory activity (diameter >8 mm) compared to control sugar solution (diameter of 6.1 ± 1.5) against C. perfringens at the concentration of 50 % (w/v). All the active honeys were of Finnish origin. The broadest zone of inhibition was induced by North Carelien multifloral organic honey with willow herb as the main floral source (referred here as F) (diameter of 14,3 mm ± 0.6), followed by other North Carelien multifloral organic honey (diameter of 11 mm ± 2) with clover as the main floral source (referred here as E). In terms of MIC values North Carelien organic honey F was also the most efficient honey against C. perfringens and showed moderate antibacterial activity (diameter of 7-8 mm) even at 10% (w/v). The other active honeys showed moderate inhibitory activity in the dilution of 15%. To our knowledge this is the first report on the antimicrobial activity of organic honeys and antimicrobial activity of honey against C. perfringens. (Oinaala et al 2015) In the second part of the work C. perfringens isolates from healthy broilers and from broilers suffering from necrotic enteritis (NE) were analyzed by polymerase chain reaction (PCR) method in order to determine the presence of gene coding the NE toxin B (NetB), a novel toxin that has been strongly associated with the pathogenesis of NE. The netB toxin gene was detected in 30% isolates from broilers with necrotic enteritis and in 32.5% isolates from healthy broilers. In this study the presence of netB gene gives not enough information for predicting the virulence of C. perfringens isolates, thus, further investigations are needed

A longitudinal study of Campylobacter distribution in a turkey

Background: Campylobacter is the most common cause of bacterial enteritis worldwide. Handling and eating of contaminated poultry meat has considered as one of the risk factors for human campylobacteriosis.Campylobacter contamination can occur at all stages of a poultry production cycle. The objective of this study was to determine the occurrence of Campylobacter during a complete turkey production cycle which lasts for 1,5 years of time. For detection of Campylobacter, a conventional culture method was compared with a PCR method. Campylobacter isolates from different types of samples have been identified to the species level by a multiplex PCR assay. Methods: Samples (N = 456) were regularly collected from one turkey parent flock, the hatchery, six different commercial turkey farms and from 11 different stages at the slaughterhouse. For the detection of Campylobacter, a conventional culture and a PCR method were used. Campylobacter isolates (n = 143) were identified to species level by a multiplex PCR assay. Results: No Campylobacter were detected in either the samples from the turkey parent flock or from hatchery samples using the culture method. PCR detected Campylobacter DNA in five faecal samples and one fluff and eggshell sample. Six flocks out of 12 commercial turkey flocks where found negative at the farm level but only two were negative at the slaughterhouse. Conclusion: During the brooding period Campylobacter might have contact with the birds without spreading of the contamination within the flock. Contamination of working surfaces and equipment during slaughter of a Campylobacter positive turkey flock can persist and lead to possible contamination of negative flocks even after the end of the day's cleaning and desinfection. Reduction of contamination at farm by a high level of biosecurity control and hygiene may be one of the most efficient ways to reduce the amount of contaminated poultry meat in Finland. Due to the low numbers of Campylobacter in the Finnish turkey production chain, enrichment PCR seems to be the optimal detection method here

Characterisation of lactic acid bacteria from spoiled, vacuum-packaged, cold-smoked rainbow trout using ribotyping

http://www.elsevier.nl/locate/01681605A total of 405 lactic acid bacteria (LAB) isolated from spoiled, vacuum-packaged, salted, sodium nitrite- or potassium nitrate-treated, cold-smoked rainbow trout stored at 48C or 88C were characterised and identified using a molecular method. The isolates were initially classified according to their restriction endonuclease profiles using HindIII and EcoRI restriction endonucleases and further characterised by rRNA gene restriction patterns (ribotypes). Numerical analysis of these ribopatterns was performed together with 19 reference LAB strain patterns in order to identify the isolates to species level. The strains were divided with HindIII and EcoRI ribopatterns into ten and nine clusters at the similarity level of 65% and 50%, respectively. The Leuconostoc-clusters and the Lb. sakei /Lb. curvatus-clusters formed the two main groups. Only one isolate was identified as Lactobacillus plantarum and no Carnobacterium strains were discovered. For both enzymes, the 35 isolates possessing six individual ribotypes and forming five clusters could not be identified further with the reference strains used. The relative proportion of Leuconostoc mesenteroides subsp. mesenteroides was higher in all samples stored at 48C. Most of the Leuconostoc citreum were found in the samples stored at 88C, and particularly in the nitrite-treated samples

A longitudinal study of Campylobacter distribution in a turkey production chain

Background: Campylobacter is the most common cause of bacterial enteritis worldwide. Handling and eating of contaminated poultry meat has considered as one of the risk factors for human campylobacteriosis.Campylobacter contamination can occur at all stages of a poultry production cycle. The objective of this study was to determine the occurrence of Campylobacter during a complete turkey production cycle which lasts for 1,5 years of time. For detection of Campylobacter, a conventional culture method was compared with a PCR method. Campylobacter isolates from different types of samples have been identified to the species level by a multiplex PCR assay. Methods: Samples (N = 456) were regularly collected from one turkey parent flock, the hatchery, six different commercial turkey farms and from 11 different stages at the slaughterhouse. For the detection of Campylobacter, a conventional culture and a PCR method were used. Campylobacter isolates (n = 143) were identified to species level by a multiplex PCR assay. Results: No Campylobacter were detected in either the samples from the turkey parent flock or from hatchery samples using the culture method. PCR detected Campylobacter DNA in five faecal samples and one fluff and eggshell sample. Six flocks out of 12 commercial turkey flocks where found negative at the farm level but only two were negative at the slaughterhouse. Conclusion: During the brooding period Campylobacter might have contact with the birds without spreading of the contamination within the flock. Contamination of working surfaces and equipment during slaughter of a Campylobacter positive turkey flock can persist and lead to possible contamination of negative flocks even after the end of the day's cleaning and desinfection. Reduction of contamination at farm by a high level of biosecurity control and hygiene may be one of the most efficient ways to reduce the amount of contaminated poultry meat in Finland. Due to the low numbers of Campylobacter in the Finnish turkey production chain, enrichment PCR seems to be the optimal detection method here