Pesquisa sorológica de anticorpos anti-Toxoplasma gondii em animais de produção do Estado de São Paulo, Brasil

Toxoplasmosis is one of the most prevalent parasitic infections of man and livestock, and its transmission has usually been attributed to ingestion of undercooked or raw meat from infected livestock, with the infection rate in those animals being an important risk predictor of human disease, high in Brazil and São Paulo State. Looking for this public health problem, we tested serum samples from cattle, goat, sheep and chicken from the State of São Paulo, Brazil, for IgG antibodies to Toxoplasma gondii by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). Antibodies to Toxoplasma gondii were found in 31.00% (62/200) of sheep, 17.00% (34/200) of goat and 11.00% (22/200) of cattle, without positive sample in chicken. Despite differences in feeding habits of each species, the rate of infection of tested animals could be better attributed to livestock management methods, which improvement could reduce infection.A toxoplasmose é uma das infecções parasitárias mais prevalentes no homem e no rebanho, e a sua transmissão tem sido usualmente atribuída à ingestão de carnes cruas ou mal cozidas, de animais de produção infectados, sendo que a taxa de infecção destes animais pode ser um importante índice preditivo da doença humana, de alta prevalência no Brasil e no estado de São Paulo. Estudando este aspecto de Saúde Pública, nós testamos amostras séricas de bovinos, caprinos, ovinos e frangos de corte de matadouros do Estado de São Paulo, para a presença de anticorpos IgG anti-Toxoplasma gondii por um ensaio imunoenzimático de fase sólida (ELISA). Nós encontramos anticorpos específicos em 31,00% (62/200) dos ovinos, 17,00% (34/200) dos caprinos e 11,00% (22/200) dos bovinos testados, sem positividade em 185 amostras de frangos de corte. Apesar de diferenças em hábitos alimentares de cada espécie, estas taxas de infecção foram menores em criações intensivas, relacionadas ao tipo de manejo da criação, o que pode reduzir a taxa de infecção por este parasita no rebanho

Cultura e Extensão em um Instituto de Pesquisa: as Experiências e Propostas do Instituto de Medicina Tropical de São Paulo

Institutos de pesquisa em geral têm um contato distante com a sociedade e relegam a um plano secundário as atividades de extensão. No Instituto de Medicina Tropical de São Paulo, desde a sua fundação, houve inúmeras tentativas de atividades de extensão pelo tipo de pesquisa desenvolvido. Mas, num instituto de pesquisa, a manutenção destas atividades é um desafio e ocorrem frequentes interrupções. Neste artigo, procuramos mostrar as novas iniciativas para aumentar a interface do IMTSP com a sociedade “laica” e detectamos que a conscientização do corpo próprio e o “aggiornamento” dos conceitos de extensão são muito benéficos para os institutos de pesquisa. Contradizendo a suposição inicial limitada de uma transmissão unidirecional de conhecimento à sociedade e um plano secundário para as ações de extensão, propõe- -se aqui que estas são mais valiosas para mostrar o reconhecimento da sociedade e ratificar o valor da pesquisa desenvolvida nos institutos de pesquisa, como o IMTSPUsually, research institutes presented a distant relationship with the laic Society. This fact results in an undervaluation of activities of social promotion or communication. In the Instituto de Medicina Tropical de São Paulo, since our foundation there were several actions for social promotion and communication, due to our research type or open field projects, but with challenging and difficult maintenance with frequent interruptions, as a research institute. Here, we present the new initiatives to enhance the interface between Society and IMTSP and we detect that the awareness of scientific staff and the “aggiornamento” of concepts and interactions were extremely beneficial to research institutes. Contradicting the initial thinking of a limited unidirectional knowledge transmission of those contacts and a “downstairs” social promotion or communication, those initiatives were more important to the scientific staff by showing the Society commitments with the support of the research, ratifying the value of the evolving research in those institutes

Leishmaniose visceral canina e doença de Chagas em cães de Araguaína, Tocantins

The present study analyzed serum samples from 111 male and female dogs of various ages from the municipality\ud of Araguaína in the State of Tocantins, Brazil. Serological diagnosis of canine visceral leishmaniasis (CVL) was initially\ud performed at the Central Laboratory (Laboratório Central – LACEN) of Araguaína, resulting in 61 positive samples\ud by an indirect immunofluorescence assay (IIFA) (≥1:40) and 50 non-reactive samples. The same samples were analyzed\ud at the São Paulo Institute of Tropical Medicine (Instituto de Medicina Tropical de São Paulo – IMTSP) by an enzyme-\ud linked-immunosorbent assay (ELISA), resulting in 57 positive samples (51.35%) and 54 negative samples (48.64%).\ud The Kappa coefficient of agreement between the tests was 0.74. The serum samples were also subjected to a diagnostic\ud assay for\ud Trypanosoma cruzi (Trypomastigote Excreted/Secreted Antigens\ud -TESA-blot) that detected five suspect animals;\ud three of those animals were positive for leishmaniasis by ELISA but negative by IIFA. These findings suggest that the\ud canine population of Araguaína may be simultaneously infected with\ud Leishmania chagasi\ud and\ud T. cruzi.\ud The results\ud obtained demonstrate the difficulty of using serology to detect CVL, thus emphasizing the necessity for a reference test\ud to diagnose CVL, particularly in regions where the infection is endemic.Neste estudo foram analisadas amostras de soros de 111 cães machos e fêmeas, de idades variadas, provenientes\ud do município de Araguaína, estado do Tocantins, Brasil. O diagnóstico sorológico para leishmaniose visceral canina\ud foi realizado, inicialmente, no Laboratório Central (LACEN) de Araguaína, resultando em 61 amostras positivas\ud na Reação de Imunofluorescência Indireta - RIFI (≥1:40) e 50 amostras não reativas. As mesmas amostras foram\ud analisadas no Instituto de Medicina Tropical de São Paulo (IMTSP) pelo\ud Enzyme-Linked-Immunosorbent Assay\ud (ELISA), sendo 57 amostras positivas (51,35%) e 54 amostras negativas (48,64%), com coeficiente de concordância\ud entre os testes (Kappa = 0,74). Os soros foram submetidos também a um teste de diagnóstico para\ud Trypanosoma cruzi\ud (Trypomastigote Excreted/Secreted Antigens\ud -TESA-\ud blot\ud ), o qual detectou cinco animais suspeitos, dos quais três foram\ud positivos para leishmaniose no ELISA, mas negativos na RIFI. Estas observações mostram que a população canina de\ud Araguaína pode também estar infectada simultaneamente com\ud Leishmania chagasi\ud e\ud T. cruzi.\ud Estes resultados mostram\ud a dificuldade da sorologia na detecção da Leishmaniose Visceral Canina (LVC), reforçando a necessidade de um teste de\ud referência para o diagnóstico da leishmaniose visceral canina, principalmente em regiões endêmicas para tais infecções

Descrição preliminar da ocorrência de infecção pelo HIV e toxoplasmose em mulheres grávidas em Moçambique

Toxoplasmosis, a protozoan disease, causes severe disease in fetuses during pregnancy and deadly encephalitis in HIV patients. There are several studies on its seroprevalence around the world, but studies focusing on African countries are limited in number and mostly anecdotal. We studied two groups of samples from Mozambique by ELISA, using serum samples from 150 pregnant women and six Cerebrospinal fluid (CSF) samples from AIDS patients with encephalitis. HIV status was confirmed, and CD4 blood counts were obtained from HIV-positive pregnant women. IgG seroprevalence of the group as a whole was 18.7% (28/150), with a higher prevalence in HIV-positive individuals compared to those who were HIV-negative (31.3%, [18/58] vs. 10.9%, [10/92]) patients. These data may be biased due to cumulative effects of exposition affecting disease prevalence. If corrected, this data may indicate an interaction of HIV and T. gondii. Prevalence of both diseases increases with age, but this is more clearly seen for toxoplasmosis (p < 0.005) than HIV infection, possibly explained by higher transmission of HIV after childhood. In HIV patients suffering from encephalitis, CSF serology showed that 33% of specific IgG CSF had a high avidity, which was in accordance with the data from the group of pregnant women. Lower prevalence rates of both infections in older groups could be explained by more deaths in the infected groups, resulting in an artificially lower prevalence. Using CD4 counts as a marker of time of HIV infection, and correcting for age, patients with contact with T. gondii had fewer CD4 cells, suggesting prolonged HIV disease or other causes. Toxoplasma IgG prevalence is higher in HIV+ groups, which could be ascribed to HIV- and T. gondii-associated risk factors, such as exposure to higher and more diverse social contacts. The low incidence of Toxoplasma IgG in younger age groups shows that transmission could be related to better access to cyst-containing meat in adulthood, as environmental transmission due to oocysts is usually blamed for higher incidence in children. Taken together, these data support the urgent need of research in toxoplasmosis in Africa, especially in the presence of HIV epidemics.Toxoplasmose, uma protozoonose, causa doença grave em fetos de mulheres grávidas com infecção aguda e encefalite letal em portadores de HIV. Apesar de muitos estudos sobre sua prevalência no Mundo, existem apenas alguns relatos da toxoplasmose na África Austral, geralmente anedóticos. Estudamos por ELISA dois grupos de amostras de Moçambique, usando 150 amostras de soros de mulheres grávidas e seis amostras de Liquido Cefalorraquidiano (LCR) de pacientes com AIDS e encefalite. O estado da infecção pelo HIV foi confirmado e a contagem de células CD4+ no sangue foi obtida das pacientes grávidas infectadas pelo HIV. No grupo das gestantes, IgG anti T.gondii foi encontrada em 18.7% (28/150), mais freqüente em pacientes HIV positivas (31.3%, 18/58) do que em HIV negativas (10.9%, 10/92). A ocorrência de ambas as doenças aumenta com a idade, mais claramente vista na toxoplasmose (p < 0.005) do que na infecção pelo HIV, devido maior transmissão do HIV após a infância. Na encefalite em pacientes HIV+, a sorologia do LCR mostrou uma ocorrência de 33% de IgG especifica de alta avidez, que está de acordo com a ocorrência neste grupo etário, baseado nos dados de nossas gestantes. A menor ocorrência de ambas as infecções em grupos etários mais idosos pode ser explicada pela mortalidade cumulativa por qualquer causa nos grupos mais idosos, resultando em menor ocorrência relativa. Usando as contagens de células CD4+ como marcadores da progressão da infecção pelo HIV e corrigindo para grupos etários, as gestantes HIV+ com contato com T. gondii tem menores níveis de células CD4+ do que as gestantes HIV+ sem contato com T.gondii. A ocorrência maior da toxoplasmose em gestantes HIV+ pode ser atribuída a fatores de risco semelhantes, como exposição a maior contato social. A baixa ocorrência da toxoplasmose em grupos mais jovens pode se relacionar com menor acesso a carne contendo cistos, já que a transmissão ambiental por oocistos está associada à maior incidência em crianças. Todos estes dados reforçam a necessidade de pesquisa da toxoplasmose na África Austral, especialmente na presença da epidemia pelo HIV

CD19 LYMPHOCYTE PROLIFERATION INDUCED BY Bifidobacterium animalis subsp. lactis IN C57BL/6 MICE EXPERIMENTALLY INFECTED WITH Toxoplasma gondii

Toxoplasmosis is frequently acquired through the oral route by the ingestion of cysts or oocysts of Toxoplasma gondii. Once ingested, the parasites penetrate the intestinal epithelial cells and rapidly disseminate to all organs in the host. During T. gondii infection, the intestinal microbiota plays an important role in stimulating a protective immune response against the parasite. In this sense the use of probiotics is worthy of note since they are live microorganisms that have beneficial effects on the host through stimulation of the immune response that can be important in the control of T. gondii proliferation and dissemination in the host. In the present study, the action of the probiotic Bifidobacterium animalis subsp. lactis was investigated in C57BL/6 mice infected with oocysts of ME49 strain of T. gondii. The probiotic had an immunomodulatory action, inducing CD19 lymphocyte proliferation and consequently increasing anti-T. gondii antibody level.Bifidobacterium animalis subsp. lactisprovided protection in supplemented mice, compared to the control group. In addition, supplemented animals had milder inflammatory process in the small intestine, indicating that the probiotic protects the intestinal mucosa during infection with T. gondii. It was concluded that the probioticB. animalis subsp. lactis induces humoral immune response capable of providing protection against T. gondii infection

Increased frequency of anti-retina antibodies in asymptomatic patients with chronic t. gondii infection

PURPOSE: To search for anti-retina antibodies that serve as markers for eye disease in uveitis. MATERIALS AND METHODS: Stored sera from patients with uveitis, ocular toxoplasmosis (n = 30) and non-infectious, immune-mediated uveitis (n = 50) and from asymptomatic individuals who were positive (n = 250) and negative (n = 250) for anti-Toxoplasma antibodies were tested. Serum anti-retina IgG was detected by an optimized ELISA using a solid-phase whole human retina extract, bovine S-antigen or interphotoreceptor retinoid-binding protein. RESULTS: Uveitis patients showed a higher mean reactivity to whole human retina extract, interphotoreceptor retinoid-binding protein and S-antigen in comparison to the asymptomatic population. These findings were independent of the uveitis origin and allowed the determination of the lower anti-retina antibody cut-off for the three antigens. Asymptomatic anti-Toxoplasma serum-positive individuals showed a higher frequency of antihuman whole retina extract antibodies in comparison to asymptomatic anti-Toxoplasma serum-negative patients. The bovine S-antigen and interphotoreceptor retinoid-binding protein ELISAs also showed a higher mean reactivity in the uveitis groups compared to the asymptomatic group, but the observed reactivities were lower and overlapped without discrimination. CONCLUSION: We detected higher levels of anti-retina antibodies in uveitis patients and in a small fraction of asymptomatic patients with chronic toxoplasmosis. The presence of anti-retina antibodies in sera might be a marker of eye disease in asymptomatic patients, especially when whole human retina extract is used in a solid-phase ELISA

Leishmaniose visceral canina e doença de Chagas em cães de Araguaína, Tocantins

The present study analyzed serum samples from 111 male and female dogs of various ages from the municipality\ud of Araguaína in the State of Tocantins, Brazil. Serological diagnosis of canine visceral leishmaniasis (CVL) was initially\ud performed at the Central Laboratory (Laboratório Central – LACEN) of Araguaína, resulting in 61 positive samples\ud by an indirect immunofluorescence assay (IIFA) (≥1:40) and 50 non-reactive samples. The same samples were analyzed\ud at the São Paulo Institute of Tropical Medicine (Instituto de Medicina Tropical de São Paulo – IMTSP) by an enzyme-\ud linked-immunosorbent assay (ELISA), resulting in 57 positive samples (51.35%) and 54 negative samples (48.64%).\ud The Kappa coefficient of agreement between the tests was 0.74. The serum samples were also subjected to a diagnostic\ud assay for\ud Trypanosoma cruzi (Trypomastigote Excreted/Secreted Antigens\ud -TESA-blot) that detected five suspect animals;\ud three of those animals were positive for leishmaniasis by ELISA but negative by IIFA. These findings suggest that the\ud canine population of Araguaína may be simultaneously infected with\ud Leishmania chagasi\ud and\ud T. cruzi.\ud The results\ud obtained demonstrate the difficulty of using serology to detect CVL, thus emphasizing the necessity for a reference test\ud to diagnose CVL, particularly in regions where the infection is endemic.Neste estudo foram analisadas amostras de soros de 111 cães machos e fêmeas, de idades variadas, provenientes\ud do município de Araguaína, estado do Tocantins, Brasil. O diagnóstico sorológico para leishmaniose visceral canina\ud foi realizado, inicialmente, no Laboratório Central (LACEN) de Araguaína, resultando em 61 amostras positivas\ud na Reação de Imunofluorescência Indireta - RIFI (≥1:40) e 50 amostras não reativas. As mesmas amostras foram\ud analisadas no Instituto de Medicina Tropical de São Paulo (IMTSP) pelo\ud Enzyme-Linked-Immunosorbent Assay\ud (ELISA), sendo 57 amostras positivas (51,35%) e 54 amostras negativas (48,64%), com coeficiente de concordância\ud entre os testes (Kappa = 0,74). Os soros foram submetidos também a um teste de diagnóstico para\ud Trypanosoma cruzi\ud (Trypomastigote Excreted/Secreted Antigens\ud -TESA-\ud blot\ud ), o qual detectou cinco animais suspeitos, dos quais três foram\ud positivos para leishmaniose no ELISA, mas negativos na RIFI. Estas observações mostram que a população canina de\ud Araguaína pode também estar infectada simultaneamente com\ud Leishmania chagasi\ud e\ud T. cruzi.\ud Estes resultados mostram\ud a dificuldade da sorologia na detecção da Leishmaniose Visceral Canina (LVC), reforçando a necessidade de um teste de\ud referência para o diagnóstico da leishmaniose visceral canina, principalmente em regiões endêmicas para tais infecções

Detecção quantitativa de oocistos de Toxoplasma gondii, por um teste modificado de Kato Katz usando coloração de Kinyoun (KKK), em gatos infectados experimentalmente com a cepa ME49

We detected Toxoplasma gondii oocysts in feces of experimentally infected cats, using a Kato Katz approach with subsequent Kinyoun staining. Animals serologically negative to T. gondii were infected orally with 5x10² mice brain cysts of ME49 strain. Feces were collected daily from the 3rd to the 30th day after challenge. Oocysts were detected by qualitative sugar flotation and the quantitative modified Kato Katz stained by Kinyoun (KKK). In the experimentally infected cats, oocysts were detected from the 7th to 15th day through sugar flotation technique, but oocysts were found in KKK from the 6th to 16th day, being sensitive for a larger period, with permanent documentation. The peak of oocysts excretion occurred between the 8th to 11th days after challenge, before any serological positive result. KKK could be used in the screening and quantification of oocysts excretion in feces of suspected animals, with reduced handling of infective material, decreasing the possibility of environmental and operator contamination.Detectamos oocistos de Toxoplasma gondii em fezes de gatos experimentalmente infectados, usando a abordagem de Kato Katz, com subseqüente coloração pelo método de Kinyoun. Animais sorologicamente negativos ao T. gondii foram infectados por via oral com 5x10² cistos da cepa ME49 de cérebros de camundongos. Fezes foram colhidas diariamente a partir do 3º até o 30º dia pós-infecção. Oocistos foram detectados por centrífugo-flutuação em sacarose qualitativa e pelo método quantitativo de Kato Katz modificado corado pela técnica de Kinyoun (KKK). Em gatos experimentalmente infectados, oocistos foram detectados do 7º ao 15º dia pela técnica de centrífugo-flutuação em sacarose, mas oocistos foram detectados do 6º ao 16º dia pelo KKK, sendo sensível por um período maior, com documentação permanente. O pico da excreção de oocistos ocorreu entre 8º a 11º dia pós-infecção, antes de resultado sorológico positivo. KKK pode ser utilizado na triagem e quantificação da excreção de oocistos em fezes de animais suspeitos, com redução da manipulação de material infectante, diminuindo a possibilidade de contaminação ambiental e do operador