Reproductive and nutritional management on ovarian response and embryo quality on rabbit does

Rabbit does in modern rabbitries are under intensive reproductive rhythms. Females are high milk producers with high energetic expenses due to the extensive overlap between lactation and gestation. This situation leads to a negative energy balance with a mobilization of body fat especially in primiparous rabbit does. Poor body condition and poor health status severely affect the reproductive features (fertility rate and lifespan of the doe as well as ovarian physiology). This paper reviews some reproductive and nutritional approaches used in the last years to improve the reproductive performance of rabbit females, mainly focusing on the influence on ovarian response and embryo quality and with emphasis on epigenetic modifications in pre-implantation embryos and offspring consequences

Optimization of RNA concentration for genome editing by CRISPR in rabbit zygotes

Site-specific genetic modification aiming to delete (knock-out) a gene provides an unequivocal answer to elucidate the function of such particular gene in the whole organism. Site-specific genetic modification has been achieved by homologous recombination, generally in embryonic stem cells, which has made the mouse the most widely used mammalian model

Control del déficit energético y actividad ovárica de conejas primíparas sometidas a destete temprano

El objetivo de este estudio fue estudiar el efecto de un destete temprano, realizado a los 25 días post-parto (dpp), con el fin de reducir el déficit energético de las conejas primíparas y mejorar su eficacia reproductiva. Para ello, se estudió el efecto sobre las reservas corporales y la actividad ovárica de 34 conejas primíparas lactantes. Se sacrificó un grupo (n=10) a los 25 dpp (L25), otro (n=13) se destetó a los 25 dpp y se sacrificó a los 32 dpp (NL32) y un tercero (n=11), no se destetó y se sacrificó a los 32 dpp (L32). El peso vivo de los animales, las concentraciones de ácidos grasos no esterificados (AGNE) y de proteínas plasmáticas totales en el suero fueron similares en todos los grupos. Aunque el grupo NL32, después del destete, consumió menos alimento que el grupo L32 (122±23,5 vs. 402±26,7g/d, respectivamente; P < 0,001), sus contenidos estimados de lípidos (16,9±1,09%; P < 0,008), proteína (19,7±0,07%; P < 0,0001) y energía corporales (1147±42,7 MJ/kg; P < 0,006) fueron mayores, y sus concentraciones plasmáticas de glucosa (158±24,5mg/dl; P < 0,04) fueron menores que las del grupo L25 (11,9±1,3%, 18,5±0,08%, 942±51,3 MJ/kg y 212±27,9 mg/dl ) y que las del grupo L32, (13,4±1,03%, 18,5±0,1%, 993±40,4 MJ/kg and 259±29,5 mg/dl), respectivamente. El recuento de la población folicular en los ovarios fue similar en los tres grupos. La maduración nuclear (% de oocitos en metafase II) y la citoplásmica (% de gránulos corticales total o parcialmente migrados) fue significativamente menor en el grupo sacrificado a los 25 dpp (L25), que en los grupos NL32 y L32 (67 vs. 79,7 y 78,3%; P < 0,05; 16 vs. 38,3 y 60,0%; P<0,05, respectivamente). En conclusión, las reservas energéticas de la coneja primípara aumentan si es destetada a 25 dpp. Sin embargo, esta estrategia no es suficiente desde el punto de vista reproductivo, ya que a los 32 dpp, la actividad ovárica de las conejas es similar independientemente de si han sido destetadas previamente o no

In vitro maturation of guinea pig oocytes supplemented with Epidermal Growth Factor and Insulin-Like Growth Factor I

Insights in oocyte maturation process in guinea pigs are essential for the development of in vitro culture systems in this species, since it represents an interesting animal model in reproduction field (Suzuki et al. Mol Reprod Dev 2003; 64, 219–25). The goal of this study was to elucidate the influence of both Epidermal Growth Factor (EGF) and Insulin-like Growth Factor I (IGF-I) on in vitro oocyte maturation (IVM) medium of guinea pig. We assessed meiotic and cytoplasmic oocyte maturation, in terms of cortical granules (CG) and mitochondrial distribution, apoptotic rate and steroidogenic response of cumulus-oocyte-complexes (COCs) after IVM. A pool of 500 COCs from adult guinea pigs were cultured in groups of 40 COCs in four replicates in TCM-199 with 2 mM/mL glutamine, 0.1 mg/mL sodium pyruvate and 0.003% BSA for 17h (38ºC, 5%CO2) (Sigma Chemical Company)

In vivo and in vitro maturation of rabbit oocyte affects gene expression, mitochondrial distribution and apoptosis

In vivo-matured cumulus–oocyte complexes are valuable models in which to assess potential biomarkers of rabbit oocyte quality that contribute to enhanced IVM systems. In the present study we compared some gene markers of oocytes and cumulus cells (CCs) from immature, in vivo-matured and IVM oocytes. Moreover, apoptosis in CCs, nuclear maturation, mitochondrial reallocation and the developmental potential of oocytes after IVF were assessed. In relation to cumulus expansion, gene expression of gap junction protein, alpha 1, 43 kDa (Gja1) and prostaglandin-endoperoxide synthase 2 (Ptgs2) was significantly lower in CCs after in vivo maturation than IVM. In addition, there were differences in gene expression after in vivo maturation versus IVM in both oocytes and CCs for genes related to cell cycle regulation and apoptosis (V-Akt murine thymoma viral oncogene homologue 1 (Akt1), tumour protein 53 (Tp53), caspase 3, apoptosis-related cysteine protease (Casp3)), oxidative response (superoxide dismutase 2, mitochondrial (Sod2)) and metabolism (glucose-6-phosphate dehydrogenase (G6pd), glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase (Gapdh)). In vivo-matured CCs had a lower apoptosis rate than IVM and immature CCs. Meiotic progression, mitochondrial migration to the periphery and developmental competence were higher for in vivo-matured than IVM oocytes. In conclusion, differences in oocyte developmental capacity after IVM or in vivo maturation are accompanied by significant changes in transcript abundance in oocytes and their surrounding CCs, meiotic rate, mitochondrial distribution and apoptotic index. Some of the genes investigated, such as Gja1, could be potential biomarkers for oocyte developmental competence in the rabbit model, helping improve in vitro culture systems in these species

Estudio de diferentes protocolos de restricción alimentaria sobre el desarrollo fetoplacentario en la coneja

Two feed strategies (ad libitum throughout pregnancy and restriction during the first 20 days), combined with oestrus synchronization with eCG or not in nulliparous rabbit does, were studied

Effect of epidermal growth factor on nuclear and cytoplasmic in vitro maruration of guinea pig oocytes

The guinea pig may represent an animal model for research on ovarian infertility and improvement of the in vitro maturation (IVM) conditions is needed in this species. The aim of the present work was to immunolocalize the Epidermal Growth Factor (EGF)-Receptor in the guinea pig ovaries and to study the effect of EGF on meiotic and cytoplasmic maturation, and apoptotic rate in cumulus-oocyte-co mplexes (COCs). Immunohistochemistry was performed in paraffined ovaries using a rabbit polyclonal antibody EGF-R (1:100; Santa Cruz Biotechnology) and the ABC Vector Elite kit (Vector Laboratories). For the IVM, COCs were collected by aspiration of follicles >700μm under a stereoscopic microscope

Métodos de sincronización de celo en conejas primíparas lactantes a 25 días post-parto

La sincronización del celo es una técnica necesaria en las explotaciones cunícolas. En este trabajo se han utilizado un total de 60 conejas primíparas lactantes en día 25 post-parto (pp) distribuidas en 5 grupos de 12 animales: el grupo PG recibió un 2.5% de propilen glicol en el agua de bebida desde el día 22 pp, el grupo eCG se trató con 25 UI de eCG (i.m.) el día 23 pp, el grupo BIO fue separado transitoriamente de sus camadas durante 24 horas, el grupo PGBIO se suplementó con 2,5% de PG y además se le separó transitoriamente de su camada, y por último, el grupo C que no fue sincronizado. Estudiamos el efecto de estos tratamientos sobre el peso vivo, la composición corporal, el consumo de alimento, la concentración de los ácidos grasos no esterificados (AGNE), la glucosa y las proteínas plasmáticas, el crecimiento de los gazapos y la fisiología ovárica. Aunque todos los grupos tuvieron el mismo consumo de pienso, las conejas del grupo PG presentaron menos cantidad de proteína (P<0,003) y de grasa corporal (P<0,06) el día 25 pp que al principio del tratamiento. En los grupos PG y PGBIO, las concentraciones de AGNE no se modificaron y las concentraciones de proteínas plasmáticas eran más altas el día 22 que el 25 pp. En todos los grupos las concentraciones de glucosa aumentaron (P<0,001) y las camadas crecieron significativamente (P<0,001). Las poblaciones foliculares ováricas en el día 25 pp, así como la maduración nuclear in vitro de los oocitos no se vieron afectadas por ningún tratamiento. El grupo PG presentó una baja proporción de oocitos no madurados citoplásmicamente (P<0,05). En conclusión, ninguno de los tratamientos aplicados, incluido el hormonal, ha presentado resultados definitivamente mejores que el grupo control, por lo que es necesario estudiar otras combinaciones o métodos para poder conseguir mejorar sustancialmente los parámetros reproductivos en conejas primíparas lactantes en el día 25 pp

La suplementación de los piensos de las conejas con EPA y DHA mejora el perfil insaturado de los ácidos grasos de la leche y sus parámetros reproductivos

Se ha valorado la influencia del enriquecimiento de las dietas de conejas reproductoras con ácidos grasos poliinsaturados de cadena larga (AGPI) de origen animal (EPA y DHA) durante 2 ciclos sobre sus parámetros reproductivos y la composición de su leche. Un total de 124 conejas se alimentaron desde la recría hasta el segundo destete con dos dietas isofibrosas, isoenergéticas e isoproteicas formuladas con dos fuentes de grasa distintas. El grupo control (C;n=62) recibió un pienso con un 3% de grasa mezcla mientras que el del grupo experimental (P;n=62) contenía un 6% de un suplemento con un 50% de extracto etéreo concentrado en DHA y EPA a partir de aceite de salmón atlántico (Optomega-50, Optivite International Ltd., Barcelona, España)

Expression of B-nerve growth factor in rabbit male tract and seminal plasma

Nerve growth factor (NGF) has been recently identified as an ovulation inductor factor (OIF) in the seminal plasma (SP) (Ratto et al. PNAS 2012; 109:15042-7). The presence of OIF in rabbit has been suggested but this protein has not yet been identified. Our aim was to study the mRNA expression in the rabbit male reproductive tract and to identify the protein β-NGF in the SP