Biofilm formation and virulence factors distribution among clinical isolates of Pseudomonas aeruginosa: BFVFDACIPA

Introduction: Pseudomonas aeruginosa is an opportunistic microorganism frequently isolated in the hospital environment and has been classified by the World Health Organization as a critical pathogen due to its resistance to antibiotics and its varied virulence factors. Objective: To evaluate biofilm formation and the expression of virulence factors of 30 clinical isolates and 2 standard strains of P. aeruginosa. In addition, this work aims to analyze the distribution of virulence factors in the different categories of biofilm formation. Methodology: Biofilm formation assays were performed in polystyrene microplate with crystal violet coloring and the strains were classified in groups. Other virulence factors were studied with specific phenotypic detection methods. Results: All P. aeruginosa were able to form biofilms, with 46.9% classified as strong formers, 25% as moderate and 28.12% as weak biofilm formers. Most isolates expressed the virulence factors analyzed and among them, pyoverdine was the most prevalent, followed by the production of lipases B, hemolysin, and protease. Lipases A showed the lowest incidence. Conclusion: Although no significant correlation was detected between biofilm formation of P. aeruginosa clinical isolates and virulence factors, it was observed that in the strong formers group there was expression of alkaline protease and lipases B in all strains. The results suggest that the pathogenicity of P. aeruginosa is a multifactorial phenomenon and that virulence factors, although present in most isolates, occur independently of the biofilm formation category of the studied strains.Introdução: Pseudomonas aeruginosa é um micro-organismo oportunista frequentemente isolado no ambiente hospitalar e que foi classificado pela Organização Mundial da Saúde como patógeno crítico devido a sua resistência aos antibióticos e aos seus variados fatores de virulência. Objetivo: avaliar a formação de biofilme e a expressão de fatores de virulência de 30 isolados clínicos e 2 cepas padrão de P. aeruginosa. Além disso, este trabalho objetivou analisar a distribuição dos fatores de virulência nas diferentes categorias de formação do biofilme. Metodologia: ensaios de formação de biofilme foram realizados em microplacas de poliestireno com coloração cristal violeta e as cepas foram classificadas em grupos. Outros fatores de virulência foram estudados com métodos específicos de detecção fenotípica. Resultados: todas as P. aeruginosa foram capazes de formar biofilmes, com 46,9% classificadas como fortes formadoras, 25% como moderadas e 28,12% como fracas formadoras de biofilmes. A maioria dos isolados expressouos fatores de virulência analisados e dentre eles, a pioverdina foi o mais prevalente, seguido pela produção de lipases B, hemolisina e protease. As lipases A apresentaram menor incidência. Conclusão: embora não tenha sido detectada correlação significativa entre formação de biofilme e os fatores de virulência nos isolados clínicos, foi observado que nos formadores fortes houve expressão de protease alcalina e lipases B em todas as cepas. Os resultados sugerem que a patogenicidade de P. aeruginosa é um fenômeno multifatorial e que os fatores de virulência, embora presentes na maioria dos isolados, ocorrem independentemente da categoria de formação do biofilme das cepas estudadas

Detection of resistance genes in pyometra isolated bacteria in bitches

Pyometra has several immunological and molecular changes that are responsible for uterine inflammation and the disease may or may not have infections. This study aimed to isolate and identify bacteria in the uterine content of bitches with pyometra, to analyze the susceptibility profile to antibiotics, detect β-lactamase enzyme production by phenotypic tests, and resistance genes to β-lactams. Eighteen samples of uterine content were collected by aspiration puncture. The samples were inoculated in bacteriological media and identified by biochemical tests. Subsequently, antibiogram tests, screening for detection of β-lactamases, and Real-Time PCR for detection of resistance genes was performed. Escherichia coli, Klebsiella spp., Enterobacter aerogenes, Citrobacter spp., Staphylococcus spp., and Streptococcus spp. were identified in the analyzed samples of uterine content. In the antibiogram test, 90.5% of the isolates showed resistance to at least one antibiotic, and of these, 36.8% were considered MDR, with three Staphylococcus spp., three E. coli, and one Klebsiella spp. Concerning bacterial resistance to the groups of antibiotics tested, 38.1% of the isolates were resistant to at least one type of β-lactam, 33.3% to tetracycline, 19.0% to aminoglycosides, and 14.3% to fluoroquinolones, macrolides, and trimethoprim-sulfamethoxazole. In the phenotypic test to detect β-lactamase production, E. coli samples were negative and Klebsiella spp. was positive for the production of AmpC, which presented the blaCMY, blaSPM, and blaSIM genes. Bacteria that are resistant to antibiotics represent a great challenge and laboratory support is therefore essential, without which therapeutic success decreases and death may be inevitable.A piometra apresenta diversas alterações imunológicas e moleculares que são responsáveis pela inflamação uterina, e a doença pode ser infecciosa ou não. O objetivo deste estudo foi isolar e identificar bactérias no conteúdo uterino de cadelas com piometra, analisar o perfil de suscetibilidade aos antibióticos, detectar a produção de enzimas β-lactamase por testes fenotípicos e genes de resistência aos β-lactâmicos. Dezoito amostras de conteúdo uterino foram coletadas por punção aspirativa. As amostras foram inoculadas em meio bacteriológico e identificadas por testes bioquímicos. Posteriormente, foram realizados testes de antibiograma, triagem para detecção de β-lactamases e PCR em tempo real para detecção de genes de resistência. Escherichia coli, Klebsiella spp., Enterobacter aerogenes, Citrobacter spp., Staphylococcus spp. e Streptococcus spp. foram identificados nas amostras de conteúdo uterino analisadas. No teste de antibiograma, 90,5% dos isolados apresentaram resistência a pelo menos um antibiótico, e destes, 36,8% foram considerados MR, sendo três Staphylococcus spp., três E. coli e uma Klebsiella spp. Sobre a resistência bacteriana aos grupos de antibióticos testados, 38,1% dos isolados foram resistentes a pelo menos um tipo de β-lactâmico, 33,3% à tetraciclina, 19,0% aos aminoglicosídeos e 14,3% às fluorquinolonas, macrolídeos e trimetoprim-sulfametoxazol. No teste fenotípico para detecção da produção de β-lactamase, as amostras de E. coli foram negativas, e Klebsiella spp. foi positiva para a produção de AmpC, que apresentou os genes blaCMY, blaSPM e blaSIM. As bactérias resistentes aos antibióticos representam um grande desafio e, portanto, o suporte laboratorial é essencial, sem o qual o sucesso terapêutico diminui e a morte pode ser inevitável

Genes de resistência a ?-lactamases na água bruta do Rio Meia Ponte – Goiás / Genes of resistance to ?-lactamase in the raw water of the Meia Ponte River - Goiás

O rio Meia Ponte é um dos corpos hídricos mais importante do estado de Goiás, sendo que, beneficia não somente a população, mais também, o meio ambiente. Entretanto, com o aumento de antibióticos e poluentes presentes na água no rio, tem contribuído para o aumento de resistência a antimicrobianos e provocado prejuízos para a saúde da população consumidora dessa água. O objetivo teste estudo foi demonstrar e identificar bactérias resistentes a ?-lactamase, utilizando métodos de PCR convencional. Foi obtido amplificação de 11,1% para o gene blaCTX-M, 66,7% para os genes blaTEM e blaKPC das nove amostras de Escherichia coli testadas neste estudo. Para o gene blaSME não se obteve amplificação dentre das amostras estudadas. A identificação dessas resistências bacterianas é de extrema importância, pois podem ocasionar um problema relacionado á saúde, dificultando nas formas de tratamento do paciente que obtiver contato com essas bactérias resistentes.

HELICOBACTER PYLORI INFECTION AND RISK FACTORS IN THE DEVELOPMENT OF GASTRODUODENAL DISEASES IN A POPULATION FROM THE CENTRAL-WEST REGION OF BRAZIL

Resumo: Helicobacter pylori é uma bactéria gram-negativa associada ao desenvolvimento de patologias severas como o adenocarcinoma gástrico. Aproximadamente 50% da população mundial está infectada por este microrganismo. A infecção está associada a fatores socioeconômicos, sociodemográficos e estilo de vida. Em função disso o presente estudo teve o objetivo de avaliar os fatores de risco e patologias gástricas associadas a infecção pela H. pylori. Foram aplicados 117 questionários que contemplavam fatores sociodemográficos, econômicos, sintomatologia e estilo de vida de pacientes submetidos a endoscopia digestiva alta. O diagnóstico foi realizado a partir do exame histopatológico e molecular. A prevalência da infecção foi de 69,2%, sendo 70,4% entre adultos e 79% do sexo feminino. Não foi observada diferença estatística nos níveis educacional, socioeconômico e condições expostas na infância. O hábito de consumir álcool demonstrou significância para a infecção (p=0,049). A sintomatologia mais frequente foi o arroto (p= 0,023). Entre as patologias gástricas, a gastrite foi o desfecho clínico mais encontrado. O conhecimento dos fatores de risco para a infecção bacteriana é de extrema relevância para dar subsídios para implementação de políticas públicas voltadas para a prevenção e erradicação do microrganismo. Palavras-chave: Bactéria. Prevalência. Fatores de risco. Dispepsia.   Abstract: Helicobacter pylori is a gram-negative bacterium associated with the development of severe pathologies such as gastric adenocarcinoma. Approximately 50% of the world population is infected by this microorganism. Infection is associated with socioeconomic, sociodemographic and lifestyle factors. Therefore, the present study had the goal of evaluating the risk factors and gastric pathologies associated with H. pylori infection. A total of 117 questionnaires were used, which included sociodemographic, economic, symptomatology and patient lifestyle factors submitted to upper digestive endoscopy. The diagnosis was done based on histopathological and molecular. The prevalence of infection was 69.2%, being 70.4% among adults and 79% females. No statistical difference was observed in educational, socioeconomic and childhood conditions. The alcohol consumption habit showed significance for the infection (p = 0.049). The most frequent symptomatology was belching (p = 0.023). Among the gastric pathologies, gastritis was the most frequent clinical outcome. The knowledge of the risk factors for bacterial infection is extremely relevant to provide subsidies for the implementation of public policies aimed at the prevention and eradication of the microorganism. Key words: Bacteria. Risk factors. Dyspepsia

EVALUATION OF WATER QUALITY FOR CONSUMPTION AND PREVALENCE OF ANTIBIOTIC-RESISTANT BACTERIA:

Resumo: O consumo inadequado de água representa um risco para a saúde, porque leva a um aumento na incidência de doenças infecciosas propagadas pela água. Amostras de água coletadas em torneiras foram avaliadas quanto à presença de coliformes e outras bactérias, testes fenotípicos foram realizados para identificá-los e definir seus padrões de susceptibilidade antimicrobiana. Também foram analisadas a presença de metais potencialmente tóxicos e os padrões físico-químicos estabelecidos para a água consumida pelo homem. Por meio da avaliação microbiológica foi possível observar que a quantidade de coliformes na maioria das amostras é superior à recomendada pelos órgãos que regulam os padrões de potabilidade da água. Além disso, através da análise microbiológica foi possível identificar a presença de bactérias relacionadas a doenças comuns em humanos, das quais muitas apresentavam resistência a múltiplos antibacterianos. Os resultados das análises físico-químicas e dos metais potencialmente tóxicos demonstraram que esses parâmetros estão de acordo com os padrões estabelecidos para água potável pelas instituições normativas. Assim, o presente trabalho alerta para o problema da contaminação bacteriana em água para consumo de regiões quilombolas e também para o crescente problema da transmissão de genes de resistência antimicrobiana em água. Palavras chave: Coliformes. Água subterrânea. Multidroga-resistente. Físico-químico. Metais tóxicos.   Abstract: Inappropriate water consumption represents a health risk because it leads to an increase in the incidence of infectious diseases propagated by water. Samples of water collected in taps were evaluated for the presence of coliforms and other bacteria, phenotypic tests were performed to identify them and define their patterns of antimicrobial susceptibility. Were also analyzed for the presence of potentially toxic metals and for the physico-chemical standards established for human consumed water. By means of the microbiological evaluation it was possible to observe that the quantity of coliforms in the majority of the samples is superior to that recommended by the organs that regulate the water potability standards. In addition, through the microbiological analysis it was possible to identify the presence of bacteria related to common diseases in humans, of which many presented resistance to multiple antibacterial. Physico-chemical analyzes and potentially toxic metals were performed, the results demonstrated that these parameters are in agreement with the standards established for potable water by the normative institutions. Thus, the present work alerts to the problem of bacterial contamination in water for consumption of quilombola regions and also to the growing problem of the transmission of antimicrobial resistance genes in water. Keywords: Coliform. Groundwater. Multidug-resistance. Physico-chemical. Toxic metals. &nbsp

AVALIAÇÃO GENOTÓXICA E MICROBIOLÓGICA DA ÁGUA DE NASCENTES E LAGOS DO JARDIM BOTÂNICO DE GOIÂNIA – GO

O crescimento da população mundial resulta em grandes impactos ambientais, consequentemente na qualidade da água. O estudo teve como objetivo verificar o impacto da ação antropogênica na qualidade microbiológica, citotóxica e genotóxica da água do Jardim Botânico de Goiânia, Goiás. Análise microbiológica com determinação do Número mais provável (NMP) para coliformes totais e fecais, identificação das principais cepas contaminantes através de meios seletivos, diferenciais e provas bioquímicas; investigação da citotoxicidade e genotoxicidade da água pelo teste em Allium cepa. As amostras de água coletadas no Jardim Botânico apresentaram contaminação por coliformes totais entre 1,3 x 103 a 7,4 x 106 e coliformes fecais entre 1,6 x 102 a 3,2 x 104. Gêneros potencialmente patogênicos como Escherichia coli, Klebsiella spp., Salmonella spp. e Pseudomonas spp. foram identificados. As amostras de água coletadas em dois lagos, apresentaram resultados significativos para citotoxicidade e genotoxicidade no sistema de A. cepa. Todas as amostras avaliadas da água do Jardim Botânico, apresentaram baixa qualidade higiênico-sanitária, além de possível ação citotóxica e genotóxica em dois lagos. Esses resultados e mais a presença de degradação ambiental, entulhos e lixo no local, sugerem impacto antropogênico significativo nesse ambiente. Palavras-chave: Número mais provável. Coliformes. Allium cepa

Resistance Profile of P. aeruginosa isolates to ?-lactams antimicrobials/ Perfil de resistência da P. aeruginosa isola para ?-lactams antimicrobianos

?-lactamases are enzymes that hydrolyze the ?-lactam ring, inactivating the action of ?-lactam antibiotics. The objective of this work was to diagnose phenotypically and molecularly 14 ?-lactamase resistance genes expressed in Pseudomonas aeruginosa and to correlate the results found. A total of 99 samples of Pseudomonas aeruginosa were selected and the antibiogram was performed. Real-time PCR is being performed using the Sybr Green system to amplify the genes corresponding to the resistances found in phenotyping. Of the 99 samples, 14 were identified as phenotypically resistant to the antimicrobial Aztreonam. The blaSME, blaOXA, blaGIM genes were simultaneously found in three (21.4%) samples. According to the statistical test, when evaluating the amplification results obtained for piperacillin + tazobactam, the molecular method was more sensitive for the detection of the gene coding for multidrug resistance, presenting values of (p <0.05). This information suggests gene researches are more sensitive and specific when compared with to the antibiogram test

Comparison between surgical procedures and conservative treatments to reduce disability caused by low back pain - systematic review and meta-analysis / Comparação entre procedimentos cirúrgicos e tratamentos conservadores para redução de incapacidade causada pela dor lombar - revisão sistemática e metanálise

Introduction- Low back pain affects all age groups and through surgical procedures or conservative treatments, the effects caused are reduced, usually assessed by the Oswestry questionnaire. Objective-. The purpose of this meta-analysis was to compare the decrease in disability after surgical and conservative intervention, using the Oswestry Disability Index. Methods- This is a systematic review and meta-analysis, searching the databases: PubMed, SciELO and LILACS. Articles that provided data on the Oswestry deficiency index were considered, with a randomized methodology after surgical and conservative intervention in low back pain at 12 and 24 months of intervention. After tabulation of the data according to the PRISMA protocol, the test was performed to determine the difference between the means. Statistical analyzes were performed using the STATA® 16.0 software. Results- There was an average reduction of 15 points in the Oswestry questionnaire, after conservative treatment in 12 months and after 24 months, the average reduction was approximately 12 points. Surgical intervention, when compared to therapy, was superior with an average difference of approximately 15 points after 12 months and an average difference of 15 points after 24 months. Conclusion- The approach chosen despite the results needs to be assessed according to the condition of each patient. Surgical treatment, even with better results, presents risks of surgical complications that cannot be omitted. In conservative treatment, it is necessary to check the patient's response to treatment, so as not to prolong the individual's time of disability and pain

Resistance profile from staphylococcus aureus and pseudomonas aeruginosa obtained from tracheostomized children in the four seasons of the year: Perfil de resistência de staphylococcus aureus e pseudomonas aeruginosa obtidos de crianças traqueostomizadas nas quatro estações do ano

Objective: The objective of this study was to microbiologically characterize the tracheal secretion of tracheostomized children, evaluate biofilm formation and study the phenotypic and molecular profile of the antimicrobial resistance of Sthapylococcus aureus and Pseudomonas aeruginosa isolates. Methods: 88 samples of tracheal secretions were collected. The material was processed to perform phenotypic tests and bacterial identification. Tests were used to identify biofilms using Congo red agar test and microdilution in a 96-well plate, and the qPCR method was used to verify resistance. Results: Twelve Staphylococcus aureus samples and 30 Pseudomonas aeruginosa were isolated of pediactric tracheostomized patients. All the S. aureus samples were positive to biofilm formation in Congo red agar test. In the antibiogram test, S. aureus showed resistance to seven antimicrobials. Regarding the identification of resistance genes, blaZ was amplified in 57.1% and mecA in 28.6% of the isolated S. aureus. Pseudomonas aeruginosa showed blaOXA with 66,7% e blaKPC with 58,3%. In plasmid DNA, blaNDM stood out with 58,3% positive. Conclusions: The control of resistant bacteria involved in biofilms in the stoma of tracheostomized patients is a great challenge, since the simple cannula change does not always allow the control of the microbiota, which increases the vulnerability of patients to future respiratory complications

Polimorfismo C677T do gene mthfr na susceptibilidade à hipertensão arterial: evidências baseadas em metanálise / C677T polymorphism of the mthfr gene in susceptibility to arterial hypertension: evidences based on meta-analysis

Introdução: A hipertensão arterial sistêmica (HAS) é uma doença multifatorial, e, dentre os fatores destaca-se a genética, com ênfase ao polimorfismo C677T do gene mthfr, que após codificado, regula o metabolismo da homocisteína, substância danosa aos vasos sanguíneos quando em alta concentração. Objetivo: Avaliar a associação do polimorfismo C677T do gene mthfr e a hipertensão arterial sistêmica. Métodos: Trata-se de revisão sistemática com metanálise, com busca nas bases de dados: PubMed e SciELO, de acordo com os critérios de elegibilidade. Os dados de 20 artigos foram extraídos e os testes estatísticos, considerando limite de significância igual a 5%, foram realizados com o auxílio do software RevMan® 5.4. Resultados: A avaliação genotípica do polimorfismo C677T do gene mthfr apontou relação entre os genótipos TT (mutante) e CT (heterozigoto) com a HAS (respectivamente, OR=1,21; IC95%=1,03-1,43 e OR=1,52; IC95%=1,19-1,95). Na avaliação alélica, a associação ocorreu com o alelo T (OR=1,33; IC95%=1,17-1,53). Os resultados sugerem que o genótipo CC (selvagem) e o alelo C conferem proteção contra a HAS (CC: OR=0,66; IC95%=0,54-0,81 e C: OR=0,82; IC95%=0,74-0,90). Conclusão: Existe associação entre o polimorfismo C677T do gene mthfr e a hipertensão arterial sistêmica. A presença do alelo T em homozigose ou heterozigose aumenta a suscetibilidade genética individual para o desenvolvimento da HAS.