Oleanolic Acid Initiates Apoptosis in Non-Small Cell Lung Cancer Cell Lines and Reduces Metastasis of a B16F10 Melanoma Model In Vivo

Drug resistance, a process mediated by multiple mechanisms, is a critical determinant for treating lung cancer. The aim of this study is to determine if oleanolic acid (OA), a pentacyclic triterpene present in several plants, is able to circumvent the mechanisms of drug resistance present in non-small cell lung cancer (NSCLC) cell lines and to induce their death.OA decreased the cell viability of the NSCLC cell lines A459 and H460 despite the presence of active, multidrug-resistant (MDR) MRP1/ABCC1 proteins and the anti-apoptotic proteins Bcl-2 and survivin. These effects are due to apoptosis, as evidenced by the capacity of OA to induce fragmentation of DNA and activate caspase 3. Induction of NSCLC cell death by OA cannot be explained by inhibition of the MDR proteins, since treatment with triterpene had little or no effect on the activity or expression of MRP1. Moreover, treatment with OA had no effect on the expression of the anti-apoptotic protein Bcl-2, but increased the expression of the pro-apoptotic protein Bax, altering the Bcl-2/Bax balance towards a pro-apoptotic profile. OA also decreased the expression of the anti-apoptotic protein survivin. Furthermore, OA decreased the expression of the angiogenic vascular endothelial growth factor (VEGF) and decreased the development of melanoma-induced lung metastasis.Our data provide a significant insight into the antitumoral and antimetastatic activity of OA in NSCLC and suggest that including OA in the NSCLC regimens may help to decrease the number of relapses and reduce the development of metastases

Genome-wide transcriptional profiling of peripheral blood leukocytes from cattle infected with Mycobacterium bovis reveals suppression of host immune genes

Background Mycobacterium bovis is the causative agent of bovine tuberculosis (BTB), a pathological infection with significant economic impact. Recent studies have highlighted the role of functional genomics to better understand the molecular mechanisms governing the host immune response to M. bovis infection. Furthermore, these studies may enable the identification of novel transcriptional markers of BTB that can augment current diagnostic tests and surveillance programmes. In the present study, we have analysed the transcriptome of peripheral blood leukocytes (PBL) from eight M. bovis-infected and eight control non-infected age-matched and sex-matched Holstein-Friesian cattle using the Affymetrix® GeneChip® Bovine Genome Array with 24,072 gene probe sets representing more than 23,000 gene transcripts. Results Control and infected animals had similar mean white blood cell counts. However, the mean number of lymphocytes was significantly increased in the infected group relative to the control group (P = 0.001), while the mean number of monocytes was significantly decreased in the BTB group (P = 0.002). Hierarchical clustering analysis using gene expression data from all 5,388 detectable mRNA transcripts unambiguously partitioned the animals according to their disease status. In total, 2,960 gene transcripts were differentially expressed (DE) between the infected and control animal groups (adjusted P-value threshold ≤ 0.05); with the number of gene transcripts showing decreased relative expression (1,563) exceeding those displaying increased relative expression (1,397). Systems analysis using the Ingenuity® Systems Pathway Analysis (IPA) Knowledge Base revealed an over-representation of DE genes involved in the immune response functional category. More specifically, 64.5% of genes in the affects immune response subcategory displayed decreased relative expression levels in the infected animals compared to the control group. Conclusions This study demonstrates that genome-wide transcriptional profiling of PBL can distinguish active M. bovis-infected animals from control non-infected animals. Furthermore, the results obtained support previous investigations demonstrating that mycobacterial infection is associated with host transcriptional suppression. These data support the use of transcriptomic technologies to enable the identification of robust, reliable transcriptional markers of active M. bovis infection.This work was supported by Investigator Grants from Science Foundation Ireland (Nos: SFI/01/F.1/B028 and SFI/08/IN.1/B2038), a Research Stimulus Grant from the Department of Agriculture, Fisheries and Food (No: RSF 06 405) and a European Union Framework 7 Project Grant (No: KBBE-211602-MACROSYS). KEK is supported by the Irish Research Council for Science, Engineering and Technology (IRCSET) funded Bioinformatics and Systems Biology PhD Programme http://bioinfo-casl.ucd.ie/PhD

Paris Santé Nutrition. Une approche transversale pour lutter contre le surpoids et l'obésité chez les enfants de 5 à 15 ans

Paris Santé Nutrition. Une approche transversale pour la lutte contre le surpoids et l’obésité chez les enfants de 5 à 15 ans. La question de l’obésité infantile est de plus en plus préoccupante en France. Cependant, une intervention précoce chez l’enfant en surpoids ou obèse est préconisée car elle limite l’évolution vers l’obésité à l’âge adulte. Depuis 2009, la ville de Paris, à travers le programme Paris Santé Nutrition, s’est donnée pour but de lutter contre l’obésité infantile. Elle mène ainsi une action volontariste d’éducation nutritionnelle et de promotion de l’activité physique qui associe les familles, les animateurs de la ville, des spécialistes de la santé et des élus locaux à une réponse transversale face à l’obésité infantile. A partir d’investigations menées auprès de responsables du programme Paris Santé Nutrition, nous nous proposons d’analyser comment les politiques nationales de lutte contre l’obésité et d’amélioration de l’état nutritionnel de la population sont déclinées dans ce programme. Entre autres, nous étudierons les choix faits pour traduire leurs orientations sous la forme d’ateliers d’éducation à la nutrition ou encore d’ateliers d’activité physique adaptée. Nous insisterons sur la méthodologie de la mise en réseau des acteurs de terrain afin d’améliorer la détection et la prise en charge des problèmes de poids dans des circuits d’accompagnement novateurs.Paris Santé Nutrition. A cross-cutting approach to fight against excess weight and obesity among 5 to 15 year old children. The issue of childhood obesity is becoming a growing concern in France. Early intervention in overweight or obese children has thus been recommended, as it reduces a child’s chances of becoming obese in adulthood. Since 2009, Paris, through the programme Paris Santé Nutrition has sought to fight against childhood obesity. The city has also taken resolute action that revolves around nutrition education and promotes physical activities involving families, city leaders, health experts and local elected officials in a cross-cutting response to childhood obesity. Based on a study undertaken among those in charge of the Paris Santé Nutrition programme, we analyse how national policies against obesity and policies that seek to improve the public’s nutritional status are applied in this programme. Among other things, we examine how these policies are reflected within nutrition education workshops or adapted physical activity workshops. We focus our methodology on the networking of local actors in order to enhance the identification and management of weight-related problems through innovative support channels

Altération de la différenciation, de la capacité fonctionnelle et de la survie des cellules dendritiques myéloïdes : (facteurs intrinsèques et environnementaux)

Les cellules dendritiques CD, actuellement considérées comme les meilleures cellules présentatrices d'antigène, sont essentielles à l'établissement de la réponse immunitaire. Elles permettent notamment l'activation lymphocytaire. Au regard de leur importante implication dans la défense du soi, on comprend aisément qu'un éventuel dysfonctionnement n'est pas sans conséquences. Dans cette optique, nous nous sommes attachés à identifier des facteurs intrinsèques ou environnementaux conduisant à une altération de la fonction dendritique. Nous avons d'abord étudié l'expression et la fonction des transporteurs ABC (P-gp et MRP) au cours de la différenciation des CD. Ces molécules très souvent décrites pour leurs aptitudes d'efflux de médicaments anticancéreux ont, par ailleurs, des propriétés dans la réponse immunitaire. Nos résultats soulignent une absence de P-gp mais une expression protéique et fonctionnelle notable de la MRP dans les CD issues de monocytes sanguins. La protéine MRP ne semble pourtant pas avoir un rôle essentiel au cours de la génération des CD. Par la suite, nous avons apprécié l'impact de contaminants environnementaux bien connus, les hydrocarbures polycycliques aromatiques HPA, sur la différenciation des CD. Ces composés induisent un plus faible niveau d'expression des molécules CD1a, CD80 et CD40. Par ailleurs, la capacité fonctionnelle des cellules ainsi générées est également réduite. Il semble donc que les CD soient des cibles de l'immunotoxicité médiée par les HPA. Enfin, nous avons démontré une susceptibilité des CD à l'apoptose médiée par les molécules HLA de classe II (HLA-DR). Cette mort est d'autant plus marquée que les cellules sont matures et performantes dans la présentation antigénique. Cette apoptose est vraisemblablement un mécanisme de contrôle de la réponse immunitaire dans les ganglions. Au final, nos résultats ont permis d'identifier des facteurs intrinsèques et environnementaux limitant le fonctionnement des CD.RENNES1-BU Sciences Philo (352382102) / SudocSudocFranceF

L'apoptose médiée par les CMH de classe II des cellules dendritiques matures agit par l'activation de l'iso-enzyme delta de la protéine kinase C

The mature dendritic cell (DC) is considered to be the most potent antigen-presenting cell. Regulation of the DC, particularly its survival, is therefore critical. Mature DC are markedly more sensitive to HLA-DR-mediated apoptosis than immature DC. To further characterize this key survival difference, we compared the intracellular signals initiated via HLA-DR in mature versus immature DC. Apoptosis was unchanged by inhibition of tyrosine kinases or phosphatases. HLA-DR-mediated re-localization of protein kinase C (PKC)-d to the nucleus was detected in mature DC by confocal microscopy and by immunoblotting. Activation of PKC-d in mature DC was revealed by the detection of the PKC-d catalytic fragment in the nuclear fraction isolated from mature DC which had been stimulated via HLA-DR. The broad-spectrum PKC inhibitor, Calphostin C, as well as the PKC-d-selective inhibitor, Rottlerin, inhibited HLA-DR-mediated apoptosis of mature cells. Taken together, these data reveal a role for the PKC-d isoenzyme in regulating HLA class II-mediated apoptosis of mature DC. Thus, the lifespan of the mature DC could be controlled by signals generated in the course of antigen presentation, and thereby prevent DC persistence and prolonged stimulation of T and B lymphocytes