High Resolution Melting en el diagnóstico de Amiloidosis hereditaria por Transtiretina. Análisis de bases poblacionales y búsqueda de casos en nuestro medio.

El acumulo de depósitos amiloides compuestos por transtiretina, se asocia a dos tipos de amiloidosis, la variante senil o “Wild Type ATTR” (ATTRwt) y la variante hereditaria (ATTRm) (1). Un correcto diagnóstico y clasificación, diferenciando ambas formas es de gran importancia tanto para el tratamiento del paciente como para los familiares. En los últimos años han aparecido publicaciones que revelan que ambas entidades están infradiagnosticadas (2). Para analizar la prevalencia de la variante hereditaria, hemos analizado los datos disponibles en Genome Aggregation Database (gnomAD). Además hemos diseñado un estudio para evaluar la existencia de casos de amiloidosis genética en nuestro medioPor otro lado, la variante senil, puede estar implicada en un número considerable de casos de insuficiencia cardiaca con FEVI preservada, pudiendo llegar a ser tan frecuente o más que la amiloidosis primaria de cadenas ligeras (3). Por esto, el número de pacientes en los que se debería hacer el diagnóstico diferencial de amiloidosis ATTR es alto. Actualmente la única manera de diferenciar la variante senil de la genética es realizando la secuenciación del gen para detectar variantes productoras de enfermedad. La posibilidad de disponer de un método de cribado más rápido, simple y barato que la secuenciación sería de gran utilidad en el contexto de un estudio poblacional de la enfermedad, por lo que hemos realizado la puesta a punto y validación de la técnica High Resolution Melting (HRMA).Por último y a nivel de investigación básica de la enfermedad, hemos realizado la puesta a punto de la técnica de isoelectroenfoque (IEF) para la detección de la proteína TTR wild type y de la mutada en suero.Estudio de prevalencia de amiloidosis ATTRmPara realizar el estudio de prevalencia, se ha analizado la base de datos gnomAD. Tras seleccionar la variantes missense fueron analizadas 72 variantes del gen TTR y se clasificaron según su patogenicidad. El grupo más estudiado fue el correspondiente a variantes patológicas. La prevalencia de variantes patológicas a nivel global se ha establecido en 1:230 habitantes, frecuencia mucho más alta de la esperada según lo descrito hasta ahora en la bibliografía donde los datos que solemos encontrarnos cifran la prevalencia en 1:100.000 habitantes (4,5). El 88% de este grupo corresponde a p.Val142Ile (prevalencia 1:332 habitantes). p.Val50Met es la segunda variante patológica más frecuente (prevalencia de 1:4.925) representando el 5% de este grupo.En segundo lugar se realizó una clasificación poblacional según los grupos representados en gnomAD. El grupo de población africana/afroamericana presenta una prevalencia de variantes patológicas de 1:27, más del 90% de las mutaciones registradas en este grupo pertenecen a p.Val142Ile (prevalencia 1:27) lo cual concuerda con lo establecido en la bibliografía (6,7) . El grupo de población europea presenta una prevalencia de variantes patológicas de 1:1269, el 54% de las variantes recogidas en este grupo pertenecen a p.Val50Met (prevalencia 1:2792). Los datos obtenidos en este grupo distan mucho de la prevalencia establecida clásicamente en la literatura para este grupo de población situada en 1:100.000 habitantes en zonas no endémicas (8).En cuanto al resto de poblaciones recogidas en GnomAD, la prevalencia desprendida de este estudio en población latina es de 1:1.016. La bibliografía recoge que la mutación más frecuente en este grupo es p.Val50Met (9,10) sin embargo según nuestros resultados es p.Val142Ile (prevalencia 1:748). Por último, la población asiática (prevalencia 1:1.806). No disponemos de una cifra de prevalencia anterior en esta población, siendo pocos los casos descritos en la literatura. Llama la atención que en este grupo no se ha registrado la mutación p.Val50Met a pesar de ser responsable del foco endémico de Japón (11). Estudio de casos en nuestro medio. Se realizó un estudio en nuestro hospital con la finalidad de identificar casos de amiloidosis ATTR en nuestro medio. 134 pacientes fueron seleccionados siguiendo los criterios de inclusión (Insuficiencia cardíaca con fracción de eyección preservada sin historia de enfermedad cardíaca valvular, antecedentes clínicos de disautonomía o síndrome del túnel del carpo bilateral, polineuropatía de etiología no filiada, pruebas de imagen compatibles con amiloidosis) y exclusión establecidos (pacientes menores de 18 años, rechazo del paciente a participar en el estudio). De estos 4 fueron diagnosticados de amiloidosis ATTRm, 13 de amiloidosis ATTRwt y 15 de amiloidosis cardiaca no filiada. Además se han identificado 3 portadores de una variante patogénica asintomáticos. Los casos diagnosticados de amiloidosis ATTRm fueron portadores de la variante p.Glu74Gln, p.Val142Ile en heterocigosis en dos hermanas caucásicas y p.Val142Ile en homocigosis en una paciente procedente de Ghana. Técnicas de cribado genéticoHemos realizado la puesta a punto y validación de la técnica HRMA (12). La concordancia de los resultados obtenidos ha sido del 100%. Todas las muestras cuyo resultado fue positivo en HRMA, presentaban un cambio de base en el exón estudiado y todas las muestras negativas en HRMA eran de pacientes sin variantes en el exón estudiado. Además ha sido posible detectar pacientes con mutaciones en homocigosis. La técnica HRMA es una técnica que ahorra costes y tiempos de trabajo en cribados poblacionales. Por todo esto podemos decir que en el contexto de un cribado poblacional HRMA es una técnica útil en el diagnóstico diferencial de amiloidosis ATTRwt y ATTRm.Detección de la proteína mutada en sueroHemos realizado la puesta a punto de la técnica IEF. Con esta técnica podemos detectar la presencia de variantes de TTR siempre y cuando posean un punto isoeléctrico (pI) diferente y puede ser de utilidad en aquellos casos en los que la espectrometría de masas no pueda ser utilizada. Hemos analizado un paciente sin variantes en el gen TTR y la paciente portadora de la mutación p. Glu74Gln. Los resultados obtenidos en nuestro trabajo, nos permiten diferenciar ambas proteínas correctamente, sin embargo no permite realizar una cuantificación de cada una de las fracciones correctamente debido a que la definición de las bandas no resulta del todo adecuada. Poder realizar la cuantificación de cada una de las bandas, podría resultar interesante en el estudio de las variaciones que pueda tener la relación TTR nativa / TTR mutada a lo largo del curso de la enfermedad o en portadores asintomáticos (13,14). 1. Wechalekar AD, Gillmore JD, Hawkins PN. Systemic amyloidosis. Lancet. 2016;387(10038):2641–54.2. Galant NJ, Westermark P, Higaki JN, Chakrabartty A. Transthyretin amyloidosis: an under-recognized neuropathy and cardiomyopathy. Clin Sci. 2017;131(5):395–409.3. García-Pavía P, Muñoz-Beamud F, Casasnovas C. Recomendaciones para el diagnóstico y tratamiento de la polineuropatía amiloidótica familiar por transtiretina. Med Clin (Barc). 2015;145(5):211–7.4. Hawkins PN, Ando Y, Dispenzeri A, Gonzalez-Duarte A, Adams D, Suhr OB. Evolving landscape in the management of transthyretin amyloidosis. Ann Med. 2015;47(8):625–38. 5. Parman Y, Adams D, Obici L, Galán L, Guergueltcheva V, Suhr OB, et al. Sixty years of transthyretin familial amyloid polyneuropathy (TTR-FAP) in Europe: where are we now? A European network approach to defining the epidemiology and management patterns for TTR-FAP. Curr Opin Neurol. 2016;29(Suppl 1):S3-S136. Jacobson DR, Alexander AA, Tagoe C, Buxbaum JN. Prevalence of the amyloidogenic transthyretin (TTR) V122I allele in 14 333 African-Americans. Amyloid. 2015;22(3):171–4. 7. Buxbaum J, Alexander A, Koziol J, Tagoe C, Fox E, Kitzman D. Significance of the amyloidogenic transthyretin Val 122 Ile allele in African Americans in the Arteriosclerosis Risk in Communities (ARIC) and Cardiovascular Health (CHS) Studies. Am Heart J. 2010;159(5):864–70.8. Plante-Bordeneuve V. Transthyretin familial amyloid polyneuropathy: an update. J Neurol. 2018;265(4):976–83.9. Schmidt HH, Waddington-Cruz M, Botteman MF, Carter JA, Chopra AS, Hopps M, et al. Estimating the global prevalence of transthyretin familial amyloid polyneuropathy. Muscle Nerve. 2017;57(5):829-37.10. Pinto MV, Barreira AA, Bulle AS, Freitas MRG, França Jr MC, Gondim FAA, et al. Brazilian consensus for diagnosis, management and treatment of transthyretin familial amyloid polyneuropathy. Arq Neuropsiquiatr. 2018;76(9):609–21.11. Kato-Motozaki Y, Ono K, Shima K, Morinaga A, Machiya T, Nozaki I, et al. Epidemiology of familial amyloid polyneuropathy in Japan: Identification of a novel endemic focus. J Neurol Sci. 2008;270(1–2):133–40.12. Reed GH, Kent JO, Wittwer CT. High-resolution DNA melting analysis for simple and efficient molecular diagnostics. Pharmacogenomics. 2007;8(6):597-608.13. Buxbaum J, Koziol J, Connors LH. Serum transthyretin levels in senile systemic amyloidosis: Effects of age, gender and ethnicity. Amyloid. 2008;15(4):255–61.14. Buxbaum J, Anan I, Suhr O. Serum transthyretin levels in Swedish TTR V30M carriers. Amyloid. 2010;17(2):83–5.<br /

A new crocodylomorph related ootaxon from the late Maastrichtian of the Southern Pyrenees (Huesca, Spain)

Crocodylomorph eggs and eggshells are known as old as the Late Jurassic and are frequent components of most multiootaxic eggshell assemblages. Classified within the oofamily Krokolithidae, thei histo- and ultrastructures are conservative throughout geological time, characterised by inverted-trapezoid-shaped shell units that grow from highly spaced basal knobs and present a diagnostic tabular ultrastructure. Here, we report 327 eggshell fragments from a new fossil site from the Maastrichtian of the Southern Pyrenees, Veracruz 1, and erect a new oogenus and oospecies, Pachykrokolithus excavatum oogen. et oosp. nov. characterised by crocodyloid morphotype and a prominent rugosocavate ornamentation. Eggshells from the slightly older locality of Blasi 2b, previously reported as aff. Krokolithidae, are also assigned to this new ootaxon. Different crocodylomorph taxa coexisted during the Late Cretaceous of the Tremp Basin, hindering the attribution of Pachykrokolithus excavatum oogen. et oosp. nov. to a single clade. Nevertheless, allodaposuchid eusuchians were dominant in this ecosystem, and are the most probable producers of Pachykrokolithus excavatum oogen. et oosp. nov. eggs

Shearwater Eggs in Lobos 3, a Holocene Site of Fuerteventura (Canary Islands)

Two eggs (L29 and N28) were recovered in the Holocene site of Lobos 3, (Islote de Lobos, north Fuerteventura, Canary Islands), the site has been interpreted as a purple dye workshop from the Early Roman Empire Epoch. For the first time, eggs from a Holocene deposit of the Canary Islands have been analyzed in terms of size, shape, and biomineral structure, and studied on the basis of several thin sections and SEM analysis. The analysis of the remains allowed the assignation of both eggs to Procellariidae birds, thanks to the relative proportion of the eggshell layers and the vesiculation patterns. The size of the eggs allowed the assignation of L29 to cf. Calonectris/Puffinus, and to cf. Puffinus for N28. The absence of more structural analysis on Procellariiformes eggshells prevent a more specific assignation. The accumulation pattern of the eggs is compatible with a seasonal occupation pattern of the Roman site

El perfeccionismo en adolescentes con trastornos de la conducta alimentaria

Perfectionism has been considered a significant risk factor for psychopathology and a typical personality characteristic in people suffering from eating disorders (ED). This study aims to know the relationship between perfectionism and depressive symptomatology, self-esteem and body dissatisfaction in adolescents diagnosed with ED. The sample was composed by 100 adolescents (M age = 14.91, SD = 1.094) diagnosed with ED who went outpatiently to a specific child-juvenile ED unit of the National Health System. All patients completed the perfectionism scale of the Inventory of Eating Disorders (EDI-3), the Spanish Child Depression Questionnaire (CEDI-II), the Rosenberg Self-Esteem Scale (RSES), and the Body Form Questionnaire (BSQ-34). Results indicate that the perfectionism scale of EDI-3 correlates significantly positively with CEDI-II (r =, 336, p =, 001) and BSQ-34 (r =, 199, p =, 45), and in a negative way with the RSES (r = -, 337, p =, 001). Adolescents diagnosed with ED who score higher on perfectionism show greater depressive symptoms and body dissatisfaction, and lower self-esteem. We believe that emphasizing the treatment of perfectionism could result in a psychopathological improvement of these patients.El perfeccionismo ha sido considerado un factor de riesgo significativo para la psicopatología y una característica de personalidad típica en las personas que sufren trastornos de la conducta alimentaria (TCA). Este estudio pretende conocer la relación entre el perfeccionismo y la sintomatología depresiva, autoestima e insatisfacción corporal en adolescentes diagnosticados de TCA. La muestra se compuso de 100 adolescentes (M edad = 14,91, DT = 1,094) diagnosticados de TCA que acudían ambulatoriamente a una unidad específica de TCA infanto-juvenil del Sistema Nacional de Salud. Todos los pacientes cumplimentaron la escala perfeccionismo del Inventario de Trastornos de la Conducta Alimentaria (EDI-3), el Cuestionario Español de Depresión Infantil (CEDI-II), la Escala de Autoestima de Rosenberg (RSES), y el Cuestionario sobre la Forma Corporal (BSQ-34). Los resultados indican que la escala perfeccionismo del EDI-3 correlaciona significativamente de forma positiva con el CEDI-II (r = ,336, p = ,001) y BSQ-34 (r = ,199, p = ,45), y de forma negativa con el RSES (r = -,337, p = ,001). Los adolescentes diagnosticados de TCA que puntúan más alto en perfeccionismo presentan mayor sintomatología depresiva e insatisfacción corporal, y menor autoestima. Consideramos que un abordaje específico sobre el perfeccionismo podría redundar en una mejoría psicopatológica de estos pacientes

Funcionamiento familiar y su relación con la satisfacción con la vida familiar en adolescentes con autismo

Families in which a member meets criteria for the diagnosis of Autism Spectrum Disorder (ASD) may present some vulnerability to construct dysfunctional family structures, becoming a risk factor that hinders the emotional development of their members. The present study aims to study the relationship between the type of family structure and the satisfaction with family life of 30 adolescents aged between 12 and 18 years. For this, the Family Functioning Scale FACES- 20 Spanish version has been used and the Satisfaction Scale with family life (ESVF). The results obtained in this sample, the type of family structure does not have a statistically significant relations hip with the satisfaction of family life. However, related and agglutinated families are those that relate positively, suggesting that, the greater family cohesion, the greater satisfaction with the family life of adolescents with ASD.Las familias en las que algún miembro cumple criterios para el diagnóstico de Trastorno del Espectro Autista (TEA, en adelante) pueden presentar cierta vulnerabilidad a construir estructuras familiares disfuncionales, constituyéndose en un factor de riesgo que dificulta el desarrollo emocional de sus miembros. El presente estudio tiene como objetivo el estudio de la relación entre el tipo de estructura familiar y la satisfacción con la vida familiar de 30 adolescentes con edades comprendidas entre los 12 y los 18 años. Para ello, se han utilizado la Escala de Funcionamiento familiar FACES- 20 versión española y la Escala de Satisfacción con la vida de familia (ESVF). Los resultados obtenidos en esta muestra, el tipo de estructura familiar no tiene una relación estadísticamente significativa con la satisfacción de la vida familiar. No obstante, las familias relacionadas y aglutinadas son las que se relacionan de forma positiva, sugiriendo que, a mayor cohesión familiar, mayor satisfacción con la vida de familia de los adolescentes con TEA

First record of a giant bird (Ornithuromorpha) from the uppermost Maastrichtian of the Southern Pyrenees, northeast Spain

Throughout the evolutionary history of Avialae, several members of this clade have evolved into giant forms, in different time periods and ecological contexts. In Europe, the first birds that show this condition, the Gargantuaviidae, occur during the Late Cretaceous (late Campanian–early Maastrichtian), but it is during the Paleogene when more groups evolve large forms. However, until now, there was no record of any giant bird during the late Maastrichtian of Europe, close to the K/Pg boundary. Here we describe a cervical vertebra (MPZ 2019/264) from Beranuy (Huesca, NE Spain), which is the first fossil evidence of a giant bird from the late Maastrichtian of Europe, within Chron C29r. The vertebra displays some features, such as a well-marked heterocoelous articulation, lateral pneumatic foramina, ventral carotid processes, and a low neural spine, that support its inclusion within the clade Ornithuromorpha. This phylogenetic assignment is supported by two cladistic analyses. The vertebra is clearly different from the one assigned to Gargantuavis, meaning that it belonged to a distinct taxon. Although the kinship between these two taxa of giant birds is still unclear, this finding demonstrates that large-sized birds were part of the ecological communities of the Ibero-Armorican island from the late Campanian to the Late Maastrichtian, being present during the last hundreds of thousands of years prior to the K/Pg extinction event.Fil: Pérez Pueyo, Manuel. Universidad de Zaragoza; EspañaFil: Puértolas Pascual, Eduardo. Universidad de Zaragoza; España. Universidade Nova de Lisboa; PortugalFil: Moreno Azanza, Miguel. Universidad de Zaragoza; España. Universidade Nova de Lisboa; PortugalFil: Cruzado Caballero, Penélope. Universidad de La Laguna; España. Universidad de Zaragoza; España. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Patagonia Norte. Instituto de Investigación en Paleobiología y Geología; ArgentinaFil: Gasca, José Manuel. Universidad de Zaragoza; EspañaFil: Núñez Lahuerta, Carmen. Universidad de Zaragoza; España. Universidade Nova de Lisboa; PortugalFil: Canudo, José Ignacio. Universidad de Zaragoza; Españ

Shearwater Eggs in Lobos 3, a Holocene Site of Fuerteventura (Canary Islands)

Two eggs (L29 and N28) were recovered in the Holocene site of Lobos 3, (Islote de Lobos, north Fuerteventura, Canary Islands), the site has been interpreted as a purple dye workshop from the Early Roman Empire Epoch. For the first time, eggs from a Holocene deposit of the Canary Islands have been analyzed in terms of size, shape, and biomineral structure, and studied on the basis of several thin sections and SEM analysis. The analysis of the remains allowed the assignation of both eggs to Procellariidae birds, thanks to the relative proportion of the eggshell layers and the vesiculation patterns. The size of the eggs allowed the assignation of L29 to cf. Calonectris/Puffinus, and to cf. Puffinus for N28. The absence of more structural analysis on Procellariiformes eggshells prevent a more specific assignation. The accumulation pattern of the eggs is compatible with a seasonal occupation pattern of the Roman site

Shearwater Eggs in Lobos 3, a Holocene Site of Fuerteventura (Canary Islands)

Two eggs (L29 and N28) were recovered in the Holocene site of Lobos 3, (Islote de Lobos, north Fuerteventura, Canary Islands), the site has been interpreted as a purple dye workshop from the Early Roman Empire Epoch. For the first time, eggs from a Holocene deposit of the Canary Islands have been analyzed in terms of size, shape, and biomineral structure, and studied on the basis of several thin sections and SEM analysis. The analysis of the remains allowed the assignation of both eggs to Procellariidae birds, thanks to the relative proportion of the eggshell layers and the vesiculation patterns. The size of the eggs allowed the assignation of L29 to cf. Calonectris/Puffinus, and to cf. Puffinus for N28. The absence of more structural analysis on Procellariiformes eggshells prevent a more specific assignation. The accumulation pattern of the eggs is compatible with a seasonal occupation pattern of the Roman site

Targeted sequencing of selected functional genes in patients with wild-type transthyretin amyloidosis

Abstract Objective Wild-type transthyretin (ATTRwt) amyloidosis is caused by the misfolding and deposition of the transthyretin protein (TTR) in the absence of mutations in the TTR gene. Studies regarding the variant form of ATTR amyloidosis (ATTRv) suggest that the presence of single-nucleotide polymorphisms (SNP) in genes other than the TTR, may influence the development of the disease. However, other genetic factors involved in the aetiopathogenesis of ATTRwt are currently unknown. This work investigates the presence of sequence variants in genes selected for their possible impact on ATTRwt amyloidosis. To do so, targeted sequencing of 84 protein-coding genes was performed in a cohort of 27 patients diagnosed with ATTRwt. Results After applying quality and frequency filtering criteria, 72 rare or novel genetic variants were found. Subsequent classification according to the ACMG-AMP criteria resulted in 17 variants classified as of uncertain significance in 14 different genes. To our knowledge, this is the first report associating novel gene variants with ATTRwt amyloidosis. In conclusion, this study provides potential insights into the aetiopathogenesis of ATTRwt amyloidosis by linking novel coding-gene variants with the occurrence of the disease