Sensibilidad a trimetoprima-sulfametoxazol de Streptococcus pyogenes aislados de infecciones invasivas

Se cree erróneamente que los estreptococos del grupo A (EGA) son universalmente resistentes atrimetoprima-sulfametoxazol (TMS). Esto se debe a que la timidina presente en los medios habitualmente usados para determinar sensibilidad in vitro a antibióticos antagoniza el efecto antibiótico de TMS.El objetivo de este trabajo fue determinar la sensibilidad de EGA a TMS, en presencia y ausencia de timidina.A tal fin, fueron analizados 95 aislamientos clínicos obtenidos de tejidos normalmente estériles con infeccióninvasiva por EGA. La pruebas de sensibilidad por difusión con discos de TMS fueron realizadas en agar MuellerHinton adicionado ya sea con 5% de sangre de carnero (MH-SC) o con 5% de sangre equina lisada (MH-SEL).La sangre equina lisada contiene timidina fosforilasa, que degrada este nucleósido. Como método de referenciase utilizó la epsilometría (Etest). El control de calidad con la cepa Enterococcus faecalis ATCC 29212 fue satisfactorio para ambos medios. La sensibilidad a TMS por difusión fue 100% en MH-SEL; en agar MH-SC 6 (6.3%)aislamientos resultaron resistentes; por Etest todos fueron sensibles, excepto uno de esos seis que presentósensibilidad intermedia (CIM = 1.5/28.5 µg/ml). En este aislamiento no se encontraron las mutaciones genéticasde EGA más frecuentemente asociadas a resistencia a TMS. Probablemente, si se establecieran mejores puntosde corte para difusión, específicos para EGA, podría optimizarse la correlación con métodos de dilución o conEtest, aun empleando MH-SC.Fil: Vigliarolo, Laura. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Exactas; ArgentinaFil: Gazzeli, L.. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Exactas; ArgentinaFil: Bonofiglio, Laura. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Departamento de Microbiología, Inmunología y Biotecnología. Cátedra de Microbiología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay; ArgentinaFil: Mollerach, Marta Eugenia. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Departamento de Microbiología, Inmunología y Biotecnología. Cátedra de Microbiología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay; ArgentinaFil: Lopardo, Horacio Angel. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Exactas; Argentin

A new class of glycomimetic drugs to prevent free fatty acid-induced endothelial dysfunction

Background: Carbohydrates play a major role in cell signaling in many biological processes. We have developed a set of glycomimetic drugs that mimic the structure of carbohydrates and represent a novel source of therapeutics for endothelial dysfunction, a key initiating factor in cardiovascular complications. Purpose: Our objective was to determine the protective effects of small molecule glycomimetics against free fatty acid­induced endothelial dysfunction, focusing on nitric oxide (NO) and oxidative stress pathways. Methods: Four glycomimetics were synthesized by the stepwise transformation of 2,5­dihydroxybenzoic acid to a range of 2,5­substituted benzoic acid derivatives, incorporating the key sulfate groups to mimic the interactions of heparan sulfate. Endothelial function was assessed using acetylcholine­induced, endotheliumdependent relaxation in mouse thoracic aortic rings using wire myography. Human umbilical vein endothelial cell (HUVEC) behavior was evaluated in the presence or absence of the free fatty acid, palmitate, with or without glycomimetics (1µM). DAF­2 and H2DCF­DA assays were used to determine nitric oxide (NO) and reactive oxygen species (ROS) production, respectively. Lipid peroxidation colorimetric and antioxidant enzyme activity assays were also carried out. RT­PCR and western blotting were utilized to measure Akt, eNOS, Nrf­2, NQO­1 and HO­1 expression. Results: Ex vivo endothelium­dependent relaxation was significantly improved by the glycomimetics under palmitate­induced oxidative stress. In vitro studies showed that the glycomimetics protected HUVECs against the palmitate­induced oxidative stress and enhanced NO production. We demonstrate that the protective effects of pre­incubation with glycomimetics occurred via upregulation of Akt/eNOS signaling, activation of the Nrf2/ARE pathway, and suppression of ROS­induced lipid peroxidation. Conclusion: We have developed a novel set of small molecule glycomimetics that protect against free fatty acidinduced endothelial dysfunction and thus, represent a new category of therapeutic drugs to target endothelial damage, the first line of defense against cardiovascular disease

Influencia de la concentración inhibitoria mínima de penicilina en la acción sinérgica de su combinación con gentamicina frente a estreptococos del grupo viridans Influence of penicillin minimal inhibitory concentration in the synergy between penicillin and gentamicin in viridans group streptococci

Los porcentajes de resistencia a penicilina entre los estreptococos del grupo viridans han llegado a niveles superiores al 60% en algunos estudios realizados en la década pasada, y en recientes trabajos se los encontró asociados a un mayor índice de mortalidad en las bacteriemias. Aún no se conoce cuál es el nivel de concentración inhibitoria mínima de penicilina para el cual resulta imposible lograr un efecto sinérgico con algún aminoglucósido. Con este propósito, se estudió la sensibilidad a penicilina de 28 cepas de estreptococos del grupo viridans aisladas de materiales clínicamente significativos en el Hospital de Pediatría "Prof. Dr. Juan P. Garrahan". Se seleccionaron siete aislamientos pertenecientes al grupo mitis con distintas características de sensibilidad, y con ellos se ensayó la curva de muerte frente a penicilina, gentamicina y penicilina más gentamicina, con concentraciones de penicilina por encima y por debajo de su concentración inhibitoria mínima. En ningún caso se observó sinergia cuando la concentración de penicilina fue inferior a la concentración inhibitoria mínima, al menos en este grupo particular de estreptococos que presentaron concentraciones inhibitorias mínimas de gentamicina ³ 16 µg/ml. Se encontró sinergia en cinco de las siete cepas cuando se trabajó con concentraciones de penicilina superiores a la concentración inhibitoria mínima. En las otras dos, se detectaron enzimas modificadoras de aminoglucósidos.<br>Penicillin resistance rates higher than 60% have been recorded in viridans group streptococci by some authors during the 90's and recently such resistance was associated with higher levels of mortality in bacteremia. The lowest minimal inhibitory concentration of penicillin for which synergy with aminoglycosides is not yet possible is still unknown. In order to try to dilucidate this puzzle, a study on the susceptibility to penicillin of 28 strains of viridans group streptococci isolated from significant samples in the Hospital de Pediatría "Prof. Dr. Juan P. Garrahan" was carried out. Seven mitis group isolates presenting different susceptibility patterns were selected for performing time-killing curves with penicillin, gentamicin, and penicillin plus gentamicin, using higher and lower penicillin concentrations than their minimal inhibitory concentrations. Synergy was not observed when the penicillin concentration was lower than the minimal inhibitory concentration, at least in these strains with minimal inhibitory concentrations of gentamicin ³ 16 µg/ml. When using penicillin in higher concentrations than the minimal inhibitory concentration, synergy was found in five of the seven strains. Aminoglycoside-modifying enzymes were found in the two other streptococci

Abscisic acid enhances cold tolerance in honeybee larvae

The natural composition of nutrients present in food is a key factor determining the immune function and stress responses in the honeybee (Apis mellifera). We previously demonstrated that a supplement of abscisic acid (ABA), a natural component of nectar, pollen, and honey, increases honeybee colony survival overwinter. Here we further explored the role of ABA in in vitro-reared larvae exposed to low temperatures. Four-day-old larvae (L4) exposed to 25\ub0C for 3 days showed lower survival rates and delayed development compared to individuals growing at a standard temperature (34\ub0C). Cold-stressed larvae maintained higher levels of ABA for longer than do larvae reared at 34\ub0C, suggesting a biological significance for ABA. Larvae fed with an ABA-supplemented diet completely prevent the low survival rate due to cold stress and accelerate adult emergence. ABA modulates the expression of genes involved in metabolic adjustments and stress responses: Hexamerin 70b, Insulin Receptor Substrate, Vitellogenin, and Heat Shock Proteins 70. AmLANCL2, the honeybee ABA receptor, is also regulated by cold stress and ABA. These results support a role for ABA increasing the tolerance of honeybee larvae to low temperatures through priming effects