Analyse der RNA-Editierung an der Q/R-Stelle der Glutamat-Rezeptoruntereinheiten GluR 2, GluR 5 und GluR 6 im chronisch epileptischen Hirngewebe des Menschen

Für die Epileptogenese spielen exzitatorisch wirkende Glutamat-Rezeptoren eine entscheidende Rolle. Eine Editierung von mRNA erhöht die funktionelle Rezeptorheterogenität und führt an den Q/R-Stellen der Untereinheiten (UE) GluR 2, GluR 5 und GluR 6 u. a. zur verminderten Ca2+-Leitfähigkeit der Kanäle. In dieser Untersuchung wurde der Q/R-Editierungsgrad der UE GluR 2, GluR 5 und GluR 6 im Hippocampus und temporalen Neocortex von chronisch epileptischem Hirngewebe des Menschen mit Hilfe der RT-PCR bestimmt und mit der Editierung aus Autopsiegewebe verglichen. Für die UE GluR 5 und GluR 6 fanden sich im chronisch epileptischen Gewebe gleichsinnige Abnahmen der Q/R-Editierung im Hippocampus und signifikante Zunahmen im temporalem Neocortex gegenüber der Kontrollgruppe. Die Veränderungen dürften mit der RNA-abhängigen Adenosindeaminasen 1 (ADAR 1) zusammenhängen, die für die Q/R-Editierung der UE GluR 5 und GluR 6 verantwortlich ist. Die verminderte Funktion von ADAR 1 im Hippocampus könnte einen verstärkten neurotoxisch wirksamen Ca2+-Einstrom bewirken, während sich die Zunahme im temporalen Neocortex als Adaptionsprozeß interpretieren läßt

Altered mRNA Editing and Expression of Ionotropic Glutamate Receptors after Kainic Acid Exposure in Cyclooxygenase-2 Deficient Mice

Kainic acid (KA) binds to the AMPA/KA receptors and induces seizures that result in inflammation, oxidative damage and neuronal death. We previously showed that cyclooxygenase-2 deficient (COX-2−/−) mice are more vulnerable to KA-induced excitotoxicity. Here, we investigated whether the increased susceptibility of COX-2−/− mice to KA is associated with altered mRNA expression and editing of glutamate receptors. The expression of AMPA GluR2, GluR3 and KA GluR6 was increased in vehicle-injected COX-2−/− mice compared to wild type (WT) mice in hippocampus and cortex, whereas gene expression of NMDA receptors was decreased. KA treatment decreased the expression of AMPA, KA and NMDA receptors in the hippocampus, with a significant effect in COX-2−/− mice. Furthermore, we analyzed RNA editing levels and found that the level of GluR3 R/G editing site was selectively increased in the hippocampus and decreased in the cortex in COX-2−/− compared with WT mice. After KA, GluR4 R/G editing site, flip form, was increased in the hippocampus of COX-2−/− mice. Treatment of WT mice with the COX-2 inhibitor celecoxib for two weeks decreased the expression of AMPA/KA and NMDAR subunits after KA, as observed in COX-2−/− mice. After KA exposure, COX-2−/− mice showed increased mRNA expression of markers of inflammation and oxidative stress, such as cytokines (TNF-α, IL-1β and IL-6), inducible nitric oxide synthase (iNOS), microglia (CD11b) and astrocyte (GFAP). Thus, COX-2 gene deletion can exacerbate the inflammatory response to KA. We suggest that COX-2 plays a role in attenuating glutamate excitotoxicity by modulating RNA editing of AMPA/KA and mRNA expression of all ionotropic glutamate receptor subunits and, in turn, neuronal excitability. These changes may contribute to the increased vulnerability of COX-2−/− mice to KA. The overstimulation of glutamate receptors as a consequence of COX-2 gene deletion suggests a functional coupling between COX-2 and the glutamatergic system