Estudo comparativo da susceptibilidade de linhagens de células diplóides humanas ao vírus da citomegalia (VCM)

A comparative study of the susceptibility of different strains of human diploid cells (FH1, FH3, FH4, FH11, FH13, FH14, FH15) to cytomegalovirus disclosed a relation between the capacity of growing and producing a consistent cytophatic effect of human cytomegalovirus strains and the homogeneous characteristics of the tissue cultures. The cell strains FH3 and FH16 were insusceptible when fibroblasts and epithelial cells were present in the same culture. After a certain number of passages, when the fibroblastic characteristics of cells in the cultures was established, the cytophatic effect could be consistently observed.São apresentados os resultados de um estudo comparativo da susceptibilidade de diversas linhagens de células diplóides humanas (FH1, FH3, FH4, FH11 , FH13, FH14, FH16) ao vírus da citomegalia (VCM). Das linhagens referidas, tôdas se mostraram sensíveis aos vírus estudados, com exceção das linhagens FH3 e FH16; estas vieram mostrar o mesmo grau de susceptibilidade depois de várias sub-culturas, no momento em que o aspecto morfológico da camada celular passou de heterogêneo - células fibroblásticas e epiteliais - a homogêneo - células fibroblásticas

Identificação sorológica intratípica de poliovírus pelo "método da comparação dos índices de neutralização"

The comparison of neutralization indices (SMIT & WILTERDINK, 1966) was used for the intratypic serodifferentiation of 49 strains of poliovirus of types 1, 2 and 3, isolated from clinical cases with and without known contact with Sabin oral vaccine. This method was, as well, compared with the Wecker test and the RCT40 marker, in relation to the strains of poliovirus of type 3. The immune sera used in the neutralization tests were obtained from guinea pigs inoculated with vaccine strains LSc2ab, P712Ch2ab and Leon 12a1b. The types 1 and 3 strains isolated from cases without contact with oral vaccine were identified as heterologous to the respective vaccinal strains. All the strains isolated from cases with known contact (vaccinated and contacts) were identified as isologous to the vaccinal strains, but two, one of which (type 1) was considered as intermediate and the other (type 3) was heterologous. It was not possible to explain conveniently the results obtained in relation to type 2 strains because the neutralization indices of Lansing prototype strain by serum P712Ch2ab varied from one test to the other. The intratypic serodifferentiation of type 3 polioviruses by comparison of neutralization indices gave results comparable to the method of Wecker, showing to be a satisfactory method in view of the simplicity of its technique and particulary useful in epidemiologic surveys. The RCT40 marker gave results that show the necessity of using the intratypic serodifferentiation technique when dealing with type 3 strains.O método da comparação dos índices de neutralização (SMIT & WILTERDINK, 1966) foi utilizado na identificação sorológica intratípica de 49 poliovírus, pertencentes aos três tipos imunológicos e isolados de casos clínicos com e sem contato conhecido com a vacina oral de Sabin. O método foi também comparado com o método de Wecker e com o marcador RCT40 no estudo da identificação intratípica das estirpes do tipo 3. Os soros imunes necessários às reações de neutralização foram preparados em cobaias com as estirpes vacinais LSc2ab, P712Ch2ab e Leon 12a1b. As estirpes - dos tipos 1 e 3 - isoladas dos indivíduos sem contato conhecido com a vacina oral, foram todas identificadas como heterólogas às respectivas estirpes vacinais e as provenientes dos indivíduos com contato (recém-vacinados e contatos) foram identificadas como isólogas às respectivas estirpes vacinais, exceto duas, das quais uma (do tipo 1) foi identificada como intermediária e a outra (do tipo 3) como heteróloga. Não foi possível interpretar convenientemente os resultados das provas de identificação das estirpes do tipo 2, porque o índice de neutralização do protótipo Lansing, ao contrário dos índices das estirpes de referência dos tipos 1 e 3, não deu resultados constantes em provas consecutivas na presença do sôro anti-P712Ch2ab. No estudo da identificação intratípica dos poliovírus do tipo 3, o método da comparação dos índices de neutralização forneceu resultados plenamente concordantes com os obtidos pelo método de Wecker, com isto evidenciando ser um método igualmente satisfatório e, devido à relativa simplicidade de sua técnica, melhor indicado para inquéritos epidemiológicos, quando se examina a procedência de numerosas estirpes. Os resultados obtidos com o marcador RCT40 mostraram a importância de utilizar provas de diferenciação sorológica intratípica na identificação dos vírus da poliomielite em áreas de vacinação, devido à instabilidade do caráter RCT40 das estirpes do tipo 3

Occurrence of human astrovirus in S. Paulo City, Brazil

Human astrovirus was detected during a 13-month longitudinal study of the incidence of diarrhoea viruses among hospitalized children (Foram detectados astrovírus humanos durante estudo longitudinal de 13 meses sobre a incidência de vírus diarréicos em 146 crianças menores de 2 anos de idade, hospitalizadas em clínica pediátrica de um hospital universitário, na cidade de São Paulo, SP, Brasil. Das 67 crianças internadas com diarréia aguda, 3% foram positivas para astrovírus, por ocasião de sua admissão, pelo Ensaio Imunoenzimático Monoclonal Amplificado (ASTROVIRUS BIOTIN-AVIDIN ELISA, CDC, USA). As 79 crianças sem diarréia, admitidas durante o mesmo período por outra causa (controles), foram negativas para astrovírus, por ocasião de seu internamento. Entretanto, 4,8% do total de crianças hospitalizadas sofreram infecções por astrovírus durante sua permanência no hospital. Este é o primeiro estudo sobre a ocorrência de astrovírus humanos no Brasil, que assim participam significativamente na etiologia da gastroenterite infantil em nosso meio

Level of immunity to poliomyelitis in a group of children vaccinated according to the current official vaccination scheme (S. Paulo, Brazil)

The efficacy of oral polio vaccine (OPV) was determired in infants immunized according to the currently recommended vaccination scheme in the city of S. Paulo. Trivalent OPV was administered to the infants at 8 week intervals, begining at 2 months of age, in well controled conditions at the Experimental Health Unit of the Escola Paulista de Medicina. The study showed that the administration of 2 doses of OPV resulted in poor seroresponses and was not sufficient for effective immunization of the infants to all three poliovirus types. Only the infant group which received a complete series of 3 vaccine doses exhibited an adequate level of immunity, as high as 75% of triple-immunes. The prevalence of antibodies to type 1, 2 and 3 polioviruses was 83%, 96% and 88%, respectively. If, however, the operational conditions observed in the health units of the city of S. Paulo and the low socio-economic level of the majority of the population are considered, it is expected that primary immunization based on 3 doses of OPV is inadequate in order to mantain the disease under effective control. It is advisable to increase the number of vaccine doses from three to five, in order to overcome the adverse effects upon routine OPV vaccination and assure a high level of immunity to poliomyelitis of our child population.A eficiência da vacinação antipoliomielítica foi determinada em um grupo de crianças que receberam a vacina Sabin segundo o esquema de imunização atualmente em vigor na Capital de São Paulo, Brasil. A vacina oral trivalente foi administrada às crianças em condições bem controladas no Centro de Saúde Experimental da Escola Paulista de Medicina, iniciando-se a série básica aos 2 meses de idade. Os resultados mostraram que duas doses de vacina foram insuficientes para se imunizar adequadamente contra os três tipos de vírus da poliomielite. Somente o grupo de crianças que rebeceu a série básica completa de 3 doses de vacina exibiu um nível de imunidade satisfatório, atingindo o taxa de 75% de triplo-imunes. A imunidade contra cada um dos diferentes tipos de poliovírus mostrou-se mais elevada, alcançando após a aplicação de 3 doses de vacina, respectivamente para os tipos 1, 2 e 3, as taxas de 83%, 96% e 88%. Como, porém, as condições de vacinação atualmente existentes nas unidades sanitárias da Capital de São Paulo, Brasil, estão longe de corresponder às do presente estudo, quer seja do ponto de vista operacional, quer quanto ao nível sócio-econômico da maioria da população atendida, é de se esperar que 3 doses básicas de vacina não sejam suficientes para se atingir o nível de imunidade coletivo necessário para manter a paralisia infantil sob efetivo controle. Aconselha-se aumentar o número de doses de vacina da série básica de três para cinco, a fim de que os efeitos desfavoráveis possam ser superados na prática da vacinação oral, com o objetivo de assegurar à população infantil um elevado nível de imunidade contra a doença.Universidade de São Paulo Faculdade de Saúde Pública Departamento de EpidemiologiaUniversidade de São Paulo Instituto de Ciências Biomédicas Departamento de Microbiologia e ImunologiaEscola Paulista de Medicina Departamento de Medicina PreventivaUNIFESP, EPM, Depto. de Medicina PreventivaSciEL

Diarréia aguda associada a rotavírus durante a infância na cidade de São Luís (MA): Estudo longitudinal de 2 anos

A total of 479 diarrhoeic children and 337 children without diarrhoea (controls) less than 5 years old were investigated in a two-year study in the city of S. Luís (MA), with the purpose to determine the incidence, the age distribution and the seasonality of rotaviruses, as well as to establish the severity of the disease in this region between the North and the Northeast of Brazil. rotavirus incidence was highest in children of the 1st. year of life, showing an average of 25% per year among the diarrhoeic patients attending the two main hospitals and three health units at the periphery of the city. It was shown that rotaviruses are significant enteropathogens in children less than 18 months old. Frequency of rotaviruses droped in diarrhoeic patients 18 to 23 months old to only 4%, the same percentage observed in children of the control group. A typical seasonal distribution of rotaviruses was not seen during the two years of study. There was a peak in the incidence of rotaviruses in 1986, during the rainy season, and two peaks in 1987, one in the rainy season and one in the dry season. It was also shown that severity of diarrhoea in rotavirus positive cases was higher than in the negative cases. Rotavirus diarrhoeic patients had more loose stools per day, and higher frequencies of vomiting and fever, resulting more often (>; 2 times) in moderate or severe dehydration. Finally, it is concluded that the introduction of immunoprophylaxis may reduce significantly the high mortality rates in early childhood observed in S. Luís.Um total de 479 casos de diarréia aguda e de 337 crianças sem diarréia (controles) foi investigado em um estudo longitudinal de 2 anos na cidade de São Luís (MA) em crianças menores de 5 anos de idade, a fim de estabelecer a incidência e a distribuição etária e sazonal de rotavírus, bem como determinar a severidade da doença nesta região do Brasil. A incidência de Rotavírus apresentou os maiores índices durante o primeiro ano de vida das crianças, com média anual de 25% entre os pacientes atendidos nos principais hospitais pediátricos da cidade e em Unidades de Saúde da periferia. O estudo mostrou que a relevância dos rotavírus como agentes etiológicos da diarréia aguda na infância já acaba aos 18 meses de idade das crianças desta região, quando os valores de positividade caem a apenas 4%, como no grupo controle. A distribuição bimensal de rotavírus não apresentou perfil tipicamente sazonal, ocorrendo 1 pico de incidência no ano de 1986, durante a estação chuvosa, e 2 picos no ano de 1987, dos quais um na estação chuvosa e outro, durante a época seca do ano. O estudo também mostrou que a doença diarreica é mais severa entre os casos positivos para rotavírus do que entre negativos, apresentando maior freqüência de evacuações diárias, de vômitos e febre, levando ao índice acima de 2 vezes maior de casos de desidratação moderada ou severa. Finalmente, é feita uma análise em relação ao efeito que a imunoprofilaxia poderá ter sobre os elevados índices de mortalidade infantil registrados nesta região do país

Genetic variability in G2 and F2 region between biological clones of human respiratory syncytial virus with or without host immune selection pressure

Human respiratory syncytial virus (HRSV) is an important respiratory pathogens among children between zero-five years old. Host immunity and viral genetic variability are important factors that can make vaccine production difficult. In this work, differences between biological clones of HRSV were detected in clinical samples in the absence and presence of serum collected from children in the convalescent phase of the illness and from their biological mothers. Viral clones were selected by plaque assay in the absence and presence of serum and nucleotide sequences of the G2 and F2 genes of HRSV biological clones were compared. One non-synonymous mutation was found in the F gene (Ile5Asn) in one clone of an HRSV-B sample and one non-synonymous mutation was found in the G gene (Ser291Pro) in four clones of the same HRSV-B sample. Only one of these clones was obtained after treatment with the child's serum. In addition, some synonymous mutations were determined in two clones of the HRSV-A samples. In conclusion, it is possible that minor sequences could be selected by host antibodies contributing to the HRSV evolutionary process, hampering the development of an effective vaccine, since we verify the same codon alteration in absence and presence of human sera in individual clones of BR-85 sample

Genetic characterization of adenovirus strains isolated from patients with acute conjunctivitis in the city of São Paulo, Brazil

Genome analysis was carried out on adenovirus strains isolated from patients with acute follicular conjunctivitis in the city of São Paulo, Brazil. Eighteen conjunctival scrapings, collected between December 1993 and March 1994, were analyzed by two methods: a combination of polymerase chain reaction with restriction fragment length polymorphism and viral DNA restriction analysis, carried out using 10 restriction endonucleases: BamHI, BglI, BglII, HindIII, KpnI, SacI, SalI, SmaI, XbaI, and XhoI. Among 11 adenovirus detected by cell culture isolation, nine were Ad8, and two were Ad7. By restriction analysis the Ad8 isolates were typed as two new variants-Ad8/D11 (seven of nine samples) and Ad8/D12 (two of nine samples). Ad7 isolates were identified as a subtype of the widespread genome type Ad7b and the virulent type Ad7h, a predominant genome type circulating in Argentina, Chile, and Uruguay but absent in Brazil until 1991. J. Med. Virol 61:143-149, 2000.Yokohama City Univ, Sch Med, Dept Ophthalmol, Kanazawa Ku, Yokohama, Kanagawa 2360004, JapanAoki Eye Clin, Sapporo, Hokkaido, JapanUniversidade Federal de São Paulo, Dept Ophthalmol, São Paulo, BrazilUniv São Paulo, Inst Ciencias Biomed, Dept Microbiol, Lab Clin & Mol Virol, BR-05508 São Paulo, BrazilUniversidade Federal de São Paulo, Dept Ophthalmol, São Paulo, BrazilWeb of Scienc