The role of the βKlotho gene in uterine endometrial cancer

Objectives: Endometrial cancer is the most common cancer of the female genital organs in developed countries, accounting for approximately 50% of all gynecological cancers. The Klotho gene was discovered in 1997 as an anti-aging gene that, when overexpressed, may extend the lifespan, but when disrupted, may be a factor responsible for premature aging syndrome. The aim of the study is to assess the relationship between the clinical and pathological features of endometrial cancer and βKlotho gene expression.Material and methods: The expression of βKlotho gene was studied in 138 cases of endometrioid endometrial carcinoma specimens using Real Time PCR reaction in RNA isolated tissue samples by commercial tests. The expression profile was correlated with the clinicopathological characteristics of endometrial carcinoma. The chi-square independence test and Fisher’s test for four-field tables were used to assess the statistical significance of the observed relationships.Results: Significant relationships were found between βKlotho gene expression and FIGO clinical stage, the degree of histological differentiation and the presence of metastases in the lymph nodes. Higher levels of gene expression correlate with lower degrees of clinical staging according to FIGO, the presence of highly-differentiated endometrial cancer (G1) and the absence of lymph node metastases.Conclusions: The βKlotho gene expression might be involved in endometrioid endometrial cancer tumorgenesis. TheβKlotho may in future be used as an useful indicator for endometrial cancer, although further studies are needed

Ekspresja genów kodujących enzymy związane z O-GlcNAcylacją w rakach błony śluzowej trzonu macicy: korelacja z parametrami kliniczno-patologicznymi

Objectives: O-GlcNAcylation is an abundant modification of cellular proteins which consist of single N-acetylglucosamine residues attached by O-linkage to serine or threonine residues. Abnormal O-GlcNAcylation seems to be a feature of malignant cancer cells. The aim of the present study was to determine the relationship between the expression of genes encoding O-GlcNAc cycling enzymes (OGT and MGEA5) and clinicopathological parameters of endometrial carcinomas. Materials and methods: The mRNA expression levels of O-GlcNAc cycling enzymes in series of 76 samples of endometrial carcinoma were studied by real time RT-PCR method. Results: The OGT and MGEA5 mRNA expression was significantly higher in tumors of higher histological grade than in well-differentiated tumors. Statistically significant association was found between OGT and MGEA5 mRNA expression and depth of myometrial invasion. Both OGT and MGEA5 expression profiles showed no significant association with the clinical stage of endometrial cancer. Conclusion: O-GlcNAcylation may be an important regulatory modification involved in endometrial cancer pathogenesis but the actual significance of this modification for endometrial cancer progression needs to be investigated further.Cel pracy: O-GlcNAcylacja jest powszechną modyfikacją białek komórkowych polegającą na przyłączeniu wiązaniem O-glikozydowym pojedynczych reszt N-acetyloglukozoaminy do reszt seryny i treoniny. Zaburzenia O-GlcNAcylacji wydają się być istotną cechą związaną z agresywnością komórek nowotworowych. Celem prezentowanej pracy było określenie zależności pomiędzy ekspresją genów kodujących enzymy związane z O-GlcNAcylacją białek a kliniczno-patologicznymi parametrami raka błony śluzowej trzonu macicy. Materiał i metody: Poziom ekspresji mRNA enzymów analizowano techniką real time RT-PCR w 76 preparatach raków błony śluzowej trzonu macicy. Wyniki: Nowotwory o wyższym stopniu złośliwości histologicznej wykazywały wyższą ekspresję mRNA dla OGT i MGEA5 w porównaniu z rakami dobrze zróżnicowanymi. Stwierdzono również istotną statystycznie zależność pomiędzy ekspresją badanych genów a głębokością naciekania mięśniówki macicy. Nie stwierdzono natomiast zależności pomiędzy ekspresją mRNA OGT i MGEA5 a stopniem klinicznego zaawansowania nowotworu. Wniosek: Wydaje się, że O-GlcNAcylacja może być ważną regulatorową modyfikacją włączoną w patogenezę raka błony śluzowej trzonu macicy ale dokładne określenie jej roli w progresji tego nowotworu wymaga dalszych badań

Molecular basis of gynecological oncology – TopBP1 protein and its participation in the transcription process

Breast and ovarian cancer are among the most common malignancies of women in the world. About 5 – 10% of the cases are considered familial. Germline mutations in the BRCA1 and BRCA2 genes are strong predictors of breast and/or ovarian cancer development. However, currently known susceptibility genes including BRCA1, BRCA2, ATM, Chk2, PALB2, and BRIP1 explain less than 25% of familial breast and/ovarian cancers. Other genes, such as TopBP1 are also likely to be involved in hereditary predisposition to breast and/or ovarian cancer. TopBP1 protein displays structural and functional similarities with BRCA1, and these two proteins have been suggested to function partially in the same cellular processes. TopBP1 protein is involved in DNA repair and cell cycle checkpoint control. Moreover, TopBP1 interacts with transcription factors, such as E2F1, p53, Miz-1, HPV16 E2, and regulates their activity

Dojrzałość histologiczna raka błony śluzowej trzonu macicy. Analiza kliniczna i patomorfologiczna

Objective: Retrospective clinical and pathomorphological analysis of patients undergoing surgery due to endometrial carcinoma; analysis of the correlation between histological grading of endometrial cancer and selected pathomorphological results. Material and methods: Statistical analysis was based on the pathomorphological results in a group of 353 patients operated because of endometrial carcinoma at the Clinical Department of Gynecologic Oncology, Medical University of Lodz, between 2003 and 2013. A possible correlation between histological grading, clinical staging, myometrial infiltration, parametrial invasion and nodal metastases to ilio-obturator lymph nodes was investigated. Results: Among poorly differentiated carcinomas G3, myometrial infiltration above half of its thickness was observed in 67.44% of the cases, whereas in the G2 and G1 groups it was detected in 60.82% and 39.33% of the affected individuals, respectively. Parametrial invasion was found in 24.39% of G3 cases, i.e. 4.23 times more often than in G2 (5.76%) and 10.65 times more often than in G1 (2.29%). Nodal metastases to ilio-obturator lymph nodes were present in 27.50% of poorly, 10.86% of moderately, and 8.11% of well-differentiated carcinomas. Uterine appendages were infiltrated in 23.25% of G3 cases – 3.45 times more than in G2 (6.73%) and 6.82 times more than in G1 (3.41%). Conclusions: Histologic grading for carcinoma at the time of diagnosis is significantly related to clinical staging. No correlation between patient age and carcinoma grading or its clinical staging was observed. Risk of lymph node invasion for well-differentiated carcinomas is similar to the risk for moderately differentiated carcinomas, and should also be an indication for lymphadenectomy in that group of patients.Cel pracy: Retrospektywna analiza kliniczno-patomorfologiczna pacjentek operowanych z powodu raka błony śluzowej trzonu macicy. Badanie dojrzałości histologicznej raka błony śluzowej trzonu macicy wobec wybranych parametrów wyników badań histopatologicznych. Materiał i metody: Analizę statystyczną przeprowadzono na podstawie wyników badań histopatologicznych w grupie 353 pacjentek operowanych z powodu raka endometrium w latach 2003-2013 w Oddziale Klinicznym Ginekologii Onkologicznej Uniwersytetu Medycznego w Łodzi Zbadano zależności zróżnicowania histologicznego nowotworu z jego stopniem zaawansowania klinicznego, głębokością naciekania błony mięśniowej macicy, naciekaniem przymacicz, obecnością przerzutów do biodrowo – zasłonowych węzłów chłonnych. Wyniki: Wśród nowotworów niskozróżnicowanych G3 naciek błony mięśniowej ponad połowę grubości stwierdzono w 67,44% przypadków, podczas gdy wśród G2 w 60,82% przypadków, a wśród G1 w 39,33% przypadków. Naciek na przymacicza obecny był wśród nowotworów G3 w 24,39% przypadków tj. 4,23 razy więcej niż wśród G2 (5,76%) i 10,65 razy więcej niż wśród G1(2,29%). Przerzuty do węzłów chłonnych wśród nowotworów niskozróżnicowanych występowały w 27,50% przypadków, wśród nowotworów średniozróżnicowanych w 10,86% przypadków, podczas gdy wśród wysokozróżnicowanych niewiele mniej, bo w 8,11% przypadków. Natomiast naciek na przydatki wśród nowotworów G3 dotyczył 23,25% przypadków tj. 3,45 razy więcej niż wśród G2 (6,73%) i 6,82 razy więcej niż wśród G1 (3,41%) Wnioski: Stopień zaawansowania klinicznego nowotworu w chwili rozpoznania jest zależny od jego zróżnicowania komórkowego. Nie wykazano związku między wiekiem pacjentek operowanych a dojrzałością histologiczną nowotworu ani stopniem zaawansowania. Ryzyko zajęcia układu chłonnego w nowotworach wysokozróżnicowanych jest porównywalne z ryzykiem nowotworów średniozróżnicowanych i powinno stanowić wskazanie do limfadenektomii również w tej grupie chorych

Molekularne podstawy ginekologii onkologicznej – białko TopBP1 jako strażnik integralności genomu

Breast cancer is the most common malignancy in women. Its estimated annual incidence is about one million cases worldwide. A number of risk factor have been identified, among them early menarche, late menopause, nulliparity and positive family history. Moreover, a number of highly penetrant breast and ovarian cancer susceptibility genes, such as BRCA1 and BRCA2, have been identified. Recent findings suggest TopBP1 to be a breast and ovarian cancer susceptibility gene. Moreover, TopBP1 protein may be an important prognostic marker of breast cancer. TopBP1 protein is involved in DNA replication, mitosis and meiosis, as well as DNA repair. Deregulation of these processes may have pathological implications in cancer.Rak piersi jest najczęściej występującym nowotworem u kobiet. Rocznie na świecie notuje się około miliona nowych zachorowań. Zidentyfikowano liczne czynniki ryzyka raka piersi, do których zalicza się wczesny wiek pierwszej miesiączki, późny wiek menopauzy, niezachodzenie w ciążę oraz przypadki raka piersi u najbliższych krewnych.Ponadto zidentyfikowano liczne geny wysokiej penetracji, których mutacje wpływają na ryzyko zachorowania na raka piersi i jajnika. Do genów tych zalicza się przede wszystkim BRCA1 i BRCA2. Ostatnie wyniki badań sugerują, że również gen TopBP1 może wpływać na ryzyko wystąpienia raka piersi i jajnika, jak również może stanowić istotny czynnik prognostyczny dla złośliwych nowotworów piersi. Białko TopBP1 uczestniczy w wielu istotnych procesach komórkowych, w tym w replikacji DNA, w mitozie i mejozie, a także w naprawie uszkodzeń DNA. Zaburzenia tych procesów mogą mieć bezpośredni lub pośredni wpływ na proces transformacji nowotworowej

The thymidine phosphorylase as the platelet-derived endothelial cell growth factor of endometrial cancer

Abstract Objectives: The aim of the study was to assess the correlation between the activity of thymidine phosphorylase (TP) and the platelet derived-endothelial cell growth factor (PD-ECGF) expression in endometrial carcinoma. Methods: The study group consisted of 40 tissue samples taken from patients with endometrial carcinoma, who underwent surgery in First Clinic of Gynecology and Oncologic Gynecology of Medical University in Lodz. The control tissue samples were taken from patients who were operated on for non-oncologic reason. The activity of TP was measured by the spectrophotometric method in the cytosol of tumor cells, and the immunohistochemical staining of PD-ECGF was performed in the same tumors. The results of TP activity were compared with the microvessel density (MD) assessed by immunohistochemical analysis and with clinico-pathological features like tumor grade and FIGO stage. Result: A positive correlation between the enzyme activity and expression of TP/PD-ECGF protein was found. Moreover, a significantly higher TP activity was confirmed in malignant tumors from endometrial cancer patients when compared to the controls. A positive correlation between the enzyme activity and MD was also stated, but there was no connection to the grade of tumors and FIGO stage. Since the TP activity proved to be related to PD-ECGF expression and angiogenesis, we can state that TP seems to be an active form of PD-ECGF growth factor in endometrial carcinoma. This is in agreement with the results of many publications on other malignancies. The proper modulation of this activity may be useful in adjuvant therapies

Analysis of pre- and postoperative pathological findings in endometrial cancer

Objective: The study was conducted to compare pre- and postoperative histopathological findings in women with endometrial cancer as well as to evaluate the diagnostic value of dilatation and curettage procedure in patients with endometrial pathology. Material and method: We evaluated histopathological findings of patients diagnosed with endometrial cancer during postoperative histopathological examination. All patients were treated in the Clinical Department of Gynecologic Oncology, Nicolaus Copernicus Memorial Specialist Hospital in Łódź between 2010 and 2015. A comparison of postoperative and preoperative findings based on specimens obtained by dilatation and curettage was performed. The vast majority of preoperative diagnoses and pathological assessments were performed outside the Clinical Department of Gynecologic Oncology in Łódź. A total of 115 patients were included in the study. Results: In the analyzed group, the type of cancer in preoperative examination matched the postoperative diagnosis in 86.96%. The compatibility of grading (assessed for endometrioid endometrial cancer) reached only 53.9%. Endometrioid endometrial cancer was the most common cancer in the examined set of curettage specimens. Histopathological compliance was 30.3% for G1 endometrioid endometrial cancer, 73.1% for G2 endometrioid cancer and 37.5% for G3 endometrioid cancer. Preoperative grading was overestimated in 10.75% and underestimated in 30.11% of cases. A shift from G1 to G2 was most commonly reported. Conclusions: Preoperative consultation with pathologists with extensive oncology experience before making medical decisions as well as treatment and postoperative assessment in medical centers experienced in gynecologic oncology seem to be crucial in predicting outcomes in this group of patients

Ekspresja genów kodujących E-kadherynę i β1-integrynę w nowotworach błony śluzowej trzonu macicy

Objectives: The metastatic ability of tumors is characteristic for malignant neoplasms and constitutes the main cause of therapeutics failures. Metastasis formation involves the sequence of processes such as proteolytic degradation of the basement membrane, migration, intravasation, extravasation, proliferation and angiogenesis. Cadherins and integrins are groups of proteins directly involved in these processes. In the present study we analyzed the mRNA expression of CDH1 and ITGB1 genes by real-time polymerase chain reaction (RT-PCR). The study included 106 endometrial carcinomas. CDH1 and ITGB1 mRNA expression was found in all of the studied samples. Generally, the CDH1 and ITGB1 mRNA expression was significantly higher in well-differentiated rather than poorly differentiated tumors. Materials and methods: The mRNA expression levels of CDH1 and ITGB1 in series of 83 samples of endometrial carcinoma were studied by real time RT-PCR method. Statistical analysis of the obtained results was performed. Results: CDH1 and ITGB1 gene expression was observed in all examined tissues and was correlated with cancer malignancy (G). In high grade malignant tumors (G1), CDH1 and ITGB1 gene expression was the highest, in G2 and G3 tumors the expression of both genes was gradually lowering. Moreover, the statistically significant correlation between CDH1 and ITGB1 gene expression was observed. (Spearman test, r=0.29, pCel pracy: Powstawanie przerzutów jest nieodłączną cechą nowotworów złośliwych, a także przyczyną wielu niepowodzeń terapeutycznych. Proces ten jest sekwencją następujących po sobie zjawisk takich jak, proteolityczna degradacja błon plazmatycznych, migracja komórek, proliferacja i neowaskularyzacja. Do grup białek bezpośrednio zaangażowanych w wymienione powyżej procesy należą między innymi, kadheryny oraz integryny. Celem przeprowadzonych badań była ocena ekspresji genów kodujących E-kadherynę (CDH1) i β1-integrynę (ITGB1) w nowotworach błony śluzowej trzonu macicy oraz korelacja uzyskanych wyników z danymi kliniczno-patologicznymi. Materiał i metody: Materiał użyty do badań stanowiło 106 preparatów raka błony śluzowej trzonu macicy. W preparatach tych oznaczono ekspresję CDH1 i ITGB1 na poziomie mRNA metodą real-time PCR. Wyniki badań zostały poddane analizie statystycznej. Wyniki: Ekspresję genów CDH1 oraz ITGB1 stwierdzono we wszystkich badanych preparatach i była ona znamiennie statystycznie skorelowana ze stopniem złośliwości nowotworu. W nowotworach o wysokim stopniu zrożnicowania komórkowego (G1) była najwyższa, natomiast wartość jej obniżała się wraz ze wzrostem stopnia złośliwości nowotworu, w przypadku obu analizowanych genów. Stwierdzono także występowanie istotnej statystycznie korelacji między ekspresją CDH1 i ITGB1 (test rang Spearmana, r=0,29,

Topoisomerase IIβ Binding Protein 1 c.*229C>T (rs115160714) Gene Polymorphism and Endometrial Cancer Risk

TopBP1 (topoisomerase IIβ binding protein 1) protein is involved in DNA replication, DNA damage checkpoint response and transcriptional regulation. In this study we investigated whether alterations in the TopBP1 gene can influence the risk of endometrial cancer. We examined the association between five single nucleotide polymorphisms (rs185903567, rs116645643, rs115160714, rs116195487, and rs112843513) located in the 3′UTR region of the TopBP1 gene and endometrial cancer risk as well as allele-specific gene expression. One hundred twenty-one endometrial cancer patients were genotyped for these SNPs. Allele-specific TopBP1 mRNA and protein expressions were determined by real time PCR and western blotting methods, respectively. Only one SNP (rs115160714) showed an association with endometrial cancer. Compared to homozygous common allele carriers, heterozygous for the T variant had significantly increased risk of endometrial cancer [adjusted odds ratio (OR) = 5.59, 95 % confidence interval (CI): 1.96–15.91, p = 0.0003]. Mean TopBP1 mRNA and protein expression were higher in the individuals with the CT genotype. There was a significant association between the rs115160714 and tumor grade and FIGO classification. Most carriers of minor allele had a high grade tumors (G3) classified as FIGO III/IV. The results of our study raise a possibility that a genetic variation of TopBP1 may be implicated in the etiology of endometrial cancer

Wpływ metforminy na przeżywalność komórek raka jajnika linii SKOV-3 oraz ekspresję genów kodujących enzymy związane z O-GlcNAcylacją

Objectives: The aim of the study was to evaluate the cytotoxic effect of metformin on the ovarian cancer cells SKOV-3 and analyze the impact of this compound on the expression of genes coding for O-GlcNAc cycling enzymes, i.e. O-GlcNAc transferase (OGT) and β-N-acetylglucosaminidase (OGA). Materials and methods: Viability and proliferation of control cells and cells treated with metformin were evaluated by MTT test and trypan blue staining. OGT and OGA mRNA expressions analysis was performed using real-time PCR method. Results: A metformin concentration-dependent decrease of SKOV-3 cell viability was observed. The IC50 parameter for metformin cytotoxicity was 14 mM. The SKOV-3 cell doubling time was 45 hours. The cell population treated with 10 mM metformin did not double even after 72 hours. There was no significant difference in mRNA level of OGA between control cells and cells treated with metformin. The OGT mRNA level was significantly higher in cells treated with metformin for 24 hours as compared to the control cells. The increase of OGT mRNA was dependent on time of incubation. Cells treated with metformin for 48 hour showed higher expression of OGT than cells treated for 24 hours. Conclusion: Antiproliferative activity of metformin suggests that this compound may be considered as a candidate for potential chemotherapeutic agent. However, taking into account its impact on the expression of O-GlcNAc transferase, further studies on the molecular mechanism of metformin action are necessary.Cel pracy: Celem pracy była analiza wpływu metforminy na proliferację komórek raka jajnika linii SKOV-3 oraz ekspresję genów, kodujących białka zaangażowane w proces O-GlcNAcylacji – O-GlcNAc transferazy (OGT) i β-N-acetylo-D-glukozaminidazy (OGA). Materiał i metody: Przeżywalność komórek po działaniu metforminy oznaczano metodą spektrofotometryczną z użyciem bromku 3-(4,5-dimetylo-2-tiazolilo)-2,5-difenylo-2H-tetrazoliowego (MTT). Żywotność komórek oceniano stosując metodę barwienia błękitem trypanu. Analizę ekspresji genów OGT i OGA na poziomie mRNA przeprowadzono przy użyciu techniki real-time PCR. Wyniki: Zaobserwowano obniżenie przeżywalności komórek poddanych działaniu metforminy wraz ze wzrostem stosowanych stężeń. Cytotoksyczność metforminy została oszacowana na podstawie parametru IC50 wynoszącego 14mM, w odniesieniu do komórek linii SKOV-3. Czas potrzebny do podwojenia komórek linii SKOV-3 wynosił 45 godzin, natomiast w przypadku prób traktowanych 10 mM metforminą nie uzyskano efektu podwojenia liczby komórek nawet po 72 godzinach. Wniosek: Metformina z uwagi na jej antyproliferacyjne działanie może być rozpatrywana jako potencjalny chemioterapeutyk, niemniej z uwagi na fakt, iż zmienia ona ekspresję jednego z dwóch enzymów odpowiedzialnych za proces O-glikozylacji białek - O-GlcNAc transferazy, należy dogłębnie zbadać ten molekularny mechanizm