Base molecular dos fatores de virulência de Streptococcus equi

Streptococcus equi subespécie equi (S. equi) é responsável pela adenite equina, doença infecto-contagiosa que ocorre com elevadas prevalências em todo o mundo. Desde a primeira descrição desta enfermidade não tem sido possível realizar o controle da mesma, o que pode ser explicado pela variabilidade nos genes de virulência. Ao longo dos anos alguns estudos foram realizados para identificar os fatores de virulência envolvidos na patogenia da enfermidade, no entanto, ainda existem algumas lacunas sobre a ocorrência e mecanismos desses genes na patogenia da doença. Desta forma, objetiva-se com esta revisão discorrer sobre os principais fatores de virulência de S. equi subespécie equi, os genes que participam na expressão dos mesmos e avanços no desenvolvimento de vacinas

Fatores de virulência de Staphylococcus aureus

Nas últimas décadas, Staphylococcus aureus (S. aureus) adquiriu considerável importância relacionada à saúde animal e humana pela elevada patogenicidade e aumento na prevalência de cepas multirresistentes aos antibióticos. Sua elevada patogenicidade está relacionada com mecanismos multifatoriais e complexos determinados pela capacidade da bactéria de expressar uma variedade de fatores de virulência que facilitam a ocorrência de doenças. Objetivou-se com esta revisão compilar informações referentes aos fatores de virulência associados à superfície ou secretados por S. aureus que promovem adesão aos componentes da matriz extracelular do hospedeiro, danificam células hospedeiras e interferem no sistema imunológico. A implementação de estratégias para a prevenção e terapia em infecções associadas a S. aureus exige o aprofundamento dos estudos nos diferentes mecanismos de ação dos fatores de virulência

Phenotypic and Genotypic Characteristics and Resistance Profile of Staphylococcus spp. from Bovine Mastitis

Background: Bovine mastitis remains one of the health problems that cause the most damage to milk producers. The negative impact of mastitis is due to reduced milk production, early slaughter of females, reduced commercial value of the affected animals, losses in the genetic potential of the herd, expenses with medicines and veterinary medical assistance. Staphylococcus spp. stands out as the cause of this disease and has been able to remain in the mammary gland, becoming resistant to several antimicrobials. The aims of the present study were to characterize the phenotypes, genotypes and resistance profiles of Staphylococcus spp. isolates from bovine mastitis cases in the state of Pernambuco, Brazil.Materials, Methods & Results: These isolates were classified according to biochemical tests and the presence of the nuc gene.  The polymerase chain reaction (PCR) for amplification of the mecA and blaZ genes was used to analyze the genetic potentials of antimicrobial resistance. Isolates were also phenotypically tested for resistance to nine antimicrobials (ampicillin, doxicillin, erythromycin, gentamicin, rifampicin, cephalothin, amoxicillin, nalidixic acid and oxacillin). The genetic potentials for biofilm production were evaluated by the amplifications of the icaD, icaA and bap genes. The phenotypic test of gentian violet was used for biofilm formation analyzes. Ninety-three (93.0%) of the isolates among the Staphylococcus spp. samples were classified as Staphylococcus aureus. The lowest percentage of sensitivity observed was for amoxicillin (28.0%). All of the isolates were sensitive to erythromycin and gentamicin, and 15 (15%) exhibited sensitivity to all of the drugs tested. All of the isolates were negative for the mecA gene, and 36 (36%) were positive for blaZ. In the adhesion microplate tests, 44 (44%) of the isolates were capable of biofilm formation. Of these, seven (15.9%) were strong formers, whereas 16 (36.3%) and 21 (47.8%) were moderate and weak formers, respectively. The icaD gene was confirmed in 89 (89%) of the isolates. The icaA gene was confirmed in 61 (61%) samples, and the bap gene in 52 (52%) samples. One of the samples did not possess icaA, icaD or bap and exhibited moderate biofilm formation according to the microplate adherence test. Sixteen isolates simultaneously exhibited the three genes tested for biofilm production (icaA, icaD and bap) and were negative according to the microplate adherence test.Discussion:  The indiscriminate use of antibiotics to treat mastitis is a common practice in the study area, which may have contributed to the high proportion of herds (88.23%; 15/17) with multi-resistant isolates, constituting a selection factor for the dissemination of resistant bacteria among herds.  The absence of the mecA gene in the present study may be associated with the development of resistant bacteria through another mechanism, such as the overproduction of beta-lactamases. The results demonstrate that antimicrobial resistance occurs in Staphylococcus spp. that cause bovine mastitis in herds of Pernambuco and that these isolates have the a great capacity for biofilm formation. It is necessary to sensitize the professionals involved in the milk production chain of Brazil regarding the importance of the adequate use of antimicrobials for the treatment and control of mastitis, since studies in the country indicate the dissemination of resistant bacterial strains

Ocorrência de anticorpos anti-BVDV e BoHV-1 em búfalos (Bubalus bubalis) no estado do Rio Grande do Norte, Brasil

Objetivou-se com este estudo determinar a ocorrência de anticorpos anti-BVDV e anti-BoHV-1 em búfalos no estado do Rio Grande do Norte. Foram analisadas 241 amostras séricas de oito machos e 233 fêmeas em idade reprodutiva por meio da técnica de vírus neutralização. Das amostras analisadas observou-se uma ocorrência de 76,7% de anticorpos anti-BVDV e 49,8% de anticorpos anti-BoHV-1. Entre as fêmeas positivas para ambos os agentes, havia animais com histórico de abortamento, destacando-se a associação da manifestação desse sinal clínico com a ocorrência de animais soropositivos. Foi evidenciada também a presença de machos positivos, o que contribui para a manutenção dos agentes no rebanho. Conclui-se que a elevada ocorrência de anticorpos anti-BVDV e anti-BoHV-1, podem ocasionar problemas reprodutivos na população bubalina estudada e que medidas de controle devem ser adotadas com o intuito de reduzir as perdas econômicas

Análise dos acidentes de trânsito ocasionados por animais nas rodovias federais do estado de Pernambuco, Brasil

Objetivou-se analisar durante o triênio 2012-2014 as ocorrências de acidentes de trânsito ocasionados por animais nas rodovias federais do estado de Pernambuco, com base em informações obtidas no banco de dados do sistema operacional da Polícia Rodoviária Federal, o Siger2. Foram analisadas as variáveis: quantitativo de acidentes por ano, tipo de veículo, rodovia de ocorrência, tipo de pista, traçado da via, condições meteorológicas, fase do dia, tipo do solo (perímetro da via), sexo, idade dos condutores e estado físico das vítimas. No triênio de 2012 a 2014 foram registrados 1.013 acidentes do tipo atropelamento animal. Constatouse maior ocorrência de acidentes no ano de 2012 (40,1%), ocasionados por automóveis (46,9%), na BR 232 (37,5%), em pista simples (72,8%) com trechos em linha reta (92,8%), em céu claro (67,4%), fase de plena noite (65,7%), e no perímetro rural (72,2%). Predominaram os condutores do sexo masculino (86,3%), com idade entre 18 a 40 anos (54,5%) e 63,3% das vítimas foram classificadas como ilesas. Considera-se fundamental a implementação de políticas públicas e medidas mitigatórias que forneçam subsídios para melhorias na conservação e sinalização das rodovias, bem como a elaboração de programas destinados a minimizarem o acesso dos animais as rodovias e campanhas educativas direcionadas aos tutores de animais e condutores, sendo a participação do médico veterinário essencial na elaboração e implementação dessas medidas

OCCURRENCE OF UREAPLASMA DIVERSUM IN THE GENITAL TRACT OF FEMALE BUFFALOES (BUBALUS BUBALIS)

We investigated the occurrence of Ureaplasma diversum in the genital tract of female buffaloes. A total of 292 vaginal swab samples of buffaloes of reproductive age from nine farms were analyzed. These were distributed in five cities of Pernambuco state, Brazil. DNA was detected using polymerase chain reaction (PCR) technique. The frequency of females positive for U. diversum was 2.05% (6/292). Concerning the farms, 22.22% (2/9) of the investigated properties had at least one positive animal. Samples positive on PCR were inoculated in specific media for culturing Ureaplasma spp. However, there was no growth of characteristic colonies. This study documents the occurrence of infection by microorganisms of the species Ureaplasma diversum in the reproductive tract of buffalo females in the state of Pernambuco, Brazil. Thus, epidemiological investigations must be carried out with the presence of this microorganism should be investigated to assess the role of this pathogen as a causative agent of vulvovaginitis and abortions considering that these occurrences may decrease reproductive rates and cause negative economic impact in buffalo farming

Inquérito sorológico e fatores de riscos associados a ovinos soropositivos a Leptospira spp. no estado de Sergipe, Brasil

O objetivo desse estudo foi determinar a ocorrência e os fatores associados à soropositividade para Leptospira spp. em ovinos do estado de Sergipe, Brasil, a partir de 1.200 amostras coletadas de sessenta propriedades das suas três mesorregiões entre os anos de 2011 e 2012. Foi observada, pela reação de soroaglutinação microscópica, 37,7% (452/1.200; IC: 0.357-0.396) de ovinos soropositivos com 93,3% (56) de propriedades com pelo menos um animal positivo. Os sorogrupos reagentes predominantes foram: Sejroe (32,1%), Icterohaemorrhagiae (23,5%) e Grippotyphosa (22,4%), com presença também de reações para Australis (7,1%), Pomona (3,8%), Autumnalis (3,5%), Panama (3,3%), Ballum (1,8%), Andamana (1,3%), Hebdomadis (0,9%) e Seranga (0,4%). As titulações variaram de 100 a 3.200, sendo que 77,2% delas ? 400. Os fatores associados à presença de ovinos soropositivos a Leptospira spp. foram: criações de subsistência (p=0,000, OR=3,08, IC95%=1,99-4,78) e com finalidade de produção de matrizes e reprodutores (p=0,000, OR=2,19, IC95%=1,46-3,28). As infecções por Leptospira spp. estão ostensivamente presentes nos rebanhos ovinos do estado de Sergipe, sendo necessária a adoção de práticas de manejo adequadas, direcionadas ao controle de roedores e criação consorciada com bovinos que podem levar a contaminação dos alimentos e pastagens

Bovine Mastitis Caused by Multidrug-Resistant Nocardia farcinica

Background: Mastitis caused by Nocardia is characterized by pyogranulomatous inflammation related to inadequate hygiene conditions and is difficult to treat. Prompted by the absence of documentation of Nocardia farcinica associated to bovine mastitis in the Northeast region of Brazil, this is the first report to describe bovine mastitis caused by multidrug-resistant N. farcinica. Case: Four milk samples (one from each teat) obtained from a 3-year-old Jersey cow raised on a property located in the metropolitan region of Recife, Pernambuco state, Brazil, were submitted to the Laboratory of Infectious-Contagious Diseases of the Veterinary Hospital at Universidade Federal Rural de Pernambuco. At the laboratory, samples were cultured in base agar enriched with 7% sheep blood (blood agar) in a microbiological incubator at 37°C under aerobic conditions for 72 h. After only 48 h, however, pure bacterial colony growth was observed in all samples. Macroscopic analysis revealed small colonies, with an irregular shape, dry aspect, and greyish in color. Gram-positive rods forming filaments and/or ramifications were observed using a Gram staining method. Nocardia spp. were identified according to morphotinctorial characteristics. Susceptibility testing using the disc-diffusion method in agar (antibiogram) was performed using the following antibiotics: penicillin (10 IU), tetracycline (30 µg), amoxicillin (10 µg), gentamicin (10 µg), cephalexin (30 µg), erythromycin (15 µg), cephalothin (30 µg) and ampicillin (30 µg). However, the organism exhibited resistance to all drugs; as such, a new milk sample was obtained at the same location the initial samples were collected. Samples (approximately 5 mL) were collected aseptically and separately from all four teats in sterile bottles, during which the presence of granular material was noted. Bacterial culture was performed as previously described and, after 48 h, colony growth with the same characteristics as the first isolation were observed, and with same morphotinctorial characteristics in the Gram stain. A resistance profile was observed for 14 of the antimicrobial drugs tested; sensitivity was verified only for ciprofloxacin and amoxicillin with clavulanic acid. One bacterial colony was selected and sent to the Center of Strategic Technology of Northeast (CETENE-PE) for species identification using a matrix-associated laser desorption ionization-time of flight (MALDI-TOF/MS) technique, which confirmed the species to be N. farcinica. Molecular characterization of 16s ribosomal DNA was performed using polymerase chain reaction with universal prokaryotic primers 516F-13R. Subsequently, the amplified product was subjected to sequencing, and the result was analyzed for quality using Phred base calling software; bases with a Phred value > 20 were kept. The sequence was evaluated using GenBank, in which the isolate exhibited 99% similarity to N. farcinica. Discussion: Clinical findings and animal history associated with microbiological culture and bacterial identification using the MALDI-TOF technique, as well as DNA sequencing, confirmed the case of clinical mastitis to be caused by N. farcinica. These bacteria are considered saprophytes, and their occurrence is associated with deficiencies in hygienic-sanitary management, such as not using pre- and post-dipping, which may favor mammary gland infection. Treatment of N. farcinica mastitis is effective only when properly performed, with agent identification and antibiotic sensitivity tests in vitro associated with the adoption of hygienic-sanitary measures. This is the first description of bovine mastitis caused by N. farcinica in the northeast of Brazil. Multidrug resistance should raise awareness of producers searching for laboratory aids in agent identification as well as antibiotic sensitivity tests, and to develop a proper therapeutic protocol based on results obtained in laboratory examinations

Prevalência de anticorpos anti-Neospora caninum em vacas leiteiras procedentes da agricultura familiar no estado de Pernambuco

Objetivou-se com este estudo determinar a prevalência de anticorpos anti-Neospora caninum e analisar os fatores de risco associados à infecção em vacas leiteiras da agricultura familiar na região Intermediária de Caruaru, estado de Pernambuco. Foram coletadas amostras de sangue de 341 vacas leiteiras, procedentes de 25 propriedades rurais, em 16 municípios. As amostras obtidas foram submetidas à técnica de Reação de Imunofluorescência Indireta (RIFI). Para a análise dos fatores de risco foi aplicado um questionário investigativo objetivo sobre o manejo higiênico-sanitário e reprodutivo. Os dados foram analisados por regressão logística, considerando como variável dependente o resultado sorológico. A prevalência de anticorpos IgG anti-N. caninum foi 18,2% (62/341) em vacas leiteiras, com 80% (20/25) de propriedades com animais positivos. Embora este estudo não tenha mostrado evidências de que o número de cães estava associado a altos níveis de anticorpos IgG anti-N. caninum, uma maior prevalência foi observada naquelas propriedades que apresentavam cães em contato com as vacas leiteiras (20,1% - 48/238), carcaças jogadas no próprio campo sem nenhum cuidado higiênico-sanitário (28,9% - 47/225) e não realizavam quarentena (19,7%- 56/284). Esses resultados evidenciam que vacas leiteiras da região Intermediária de Caruaru estão expostas a N. caninum