Babesia bovis: expression of adhesion molecules in bovine umbilical endothelial cells stimulated with plasma from infected cattle

Ten male, 12-month-old Jersey with intact spleens, serologically and parasitologically free from Babesia were housed individually in an arthropod-free isolation system from birth and throughout entire experiment. The animals were randomly divided into two groups. Five animals (group A) were intravenously inoculated with 6.6 X10(7) red blood cells parasitized with pathogenic sample of Babesia bovis (passage 7 BboUFV-1), for the subsequent "ex vivo" determination of the expression of adhesion molecules. Five non-inoculated animals (group B) were used as the negative control. The expression of the adhesion molecules ICAM-1, VCAM, PECAM-1 E-selectin and thrombospondin (TSP) was measured in bovine umbilical vein endothelial cells (BUVECs). The endothelial cells stimulated with a pool of plasma from animals infected with the BboUFV-1 7th passage sample had a much more intense immunostaining of ICAM-1, VCAM, PECAM-1 E-selectin and TSP, compared to the cells which did not received the stimulus. The results suggest that proinflammatory cytokines released in the acute phase of babesiosis may be involved in the expression of adhesion molecules thereby implicating them in the pathophysiology of babesiosis caused by B. bovis

Resposta de linfonodos em bovinos inoculados a campo com a vacina recombinante rSBm7462 anti Rhipicephalus (Boophilus) microplus)

A dependência exclusiva de compostos químicos para o controle de Rhipicephalus (Boophilus) microplus tornou-se uma das maiores preocupações científicas e econômicas dos últimos anos, e como consequência, estão sendo realizadas pesquisas para o desenvolvimento de vacinas. O objetivo deste trabalho foi avaliar a resposta de linfonodos de bovinos imunizados a campo com o peptídeo rSBm7462 anti R. (B.) microplus. Foram utilizados 14 bovinos mestiços (Bos taurus x Bos indicus), com idades entre 4-10 meses, mantidos em duas propriedades rurais do norte do estado de Minas Gerais. Os animais receberam três imunizações do peptídeo rSBm7462, aplicados por via subcutânea, com intervalo de 30 dias. Após 15 dias de cada imunização, os linfonodos pré-escapulares foram coletados e fixados por 18 horas em formol. Posteriormente, foram incluídos em Paraplast e as amostras foram coradas pela técnica hematoxilina-eosina (HE) para a observação de eventos celulares. Para a identificação do antígeno nos linfonodos dos animais imunizados, foi realizada a técnica de imuno-histoquímica (IHQ) com o método peroxidase-anti-peroxidase (PAP). A resposta de linfonodos dos bovinos inoculados foi avaliada pelas análises de formação de centros germinais (CG), hiperplasia de cordões medulares (CM) e a presença do antígeno rSBm7462 em células PAP+, demonstrando que o peptídeo recombinante rSBm7462 induz uma resposta imune adaptativa T-dependente, caracterizada nos tecidos linfóides secundários pela formação de estruturas que conferem afinidade e memória imunológica

Imunização com o peptídio sintético anti carrapato Rhipicephalus (Boophilus) microplus SBM7462 ® por vias de mucosa

Não achamos o DOI do artigo, por isso ficou sem o url.A vacinação via mucosa consiste na administração de antígenos nestas superfícies. É um método não invasivo indutor de resposta imune sistêmica e local. Neste trabalho avaliou-se a resposta imune à vacina sintética anticarrapato Rhipicephalus(Boophilus) microplus SBm7462 ® , administrada pelas vias oral e nasal. Utilizaram-se 60 camundongos BALB/c, divididos em três grupos de 20 animais cada (I: imunização via oral; II: imunização via nasal; III: animais não imunizados). Aos 9 e 15 dias após a primeira e segunda imunização, coletaram-se, separadamente para cada grupo, os linfócitos T dos animais imunizados, cultivando-os em estufa por 10 dias. Após a incubação, determinou-se a porcentagem de viabilidade celular e a natureza específica dos linfócitos T, os quais se comportaram como linfócitos T de memória. As médias do número de linfócitos TSBm7462-reativos foram submetidas à análise de variância e comparação pelo teste de Tukey, 5% de probabilidade. O Grupo II apresentou uma maior proliferação celular in vitro. Para o ELISA-indireto, foram positivos somente dois animais do Grupo I e oito do grupo II. As vias oral e nasal são vias alternativamente viáveis para imunização com o peptídeo sintético SBm7462 ® , porém requerem maior número de doses para induzir resposta com altos níveis de imunoglobulinas.The mucosal immunization consists on antigen administration in these surfaces it is a not invasive method, inductor of local and systemic immune response. This work evaluated the immune response of the synthetic vaccine anti-tick Rhipicephalus (Boophilus) microplus SBm7462®, via oral and nasal routes. Were used 60 BALB/c mice, divided in three groups of 20 animals each (I: oral immunization; II: nasal immunization; III: animals not immunized). Nine and 15 days after the first and the second immunization was collected, separately for each group, T cells from the immunized animals, cultivating them per 10 days. After the incubation, were determined the percentage of cellular viability and the specific nature of this T cells, which had held as memory T cell. The averages of T cell SBm7462-reagents had been submitted to the analysis of variance and comparison for Tukey test, 5% of probability. Group II presented higher cellular proliferation "in vitro". For ELISA test, were positive only two animals in group I and eight in group II. The oral and nasal routs alternatively viable for immunization with the synthetic peptide SBm7462®, however require greater number of doses to induce responses with high levels of immunoglobulins

Elaboração e avaliação de um candidato à vacina de DNA, utilizando-se genes sintéticos derivados do peptídeo SBm7462 contra o carrapato Rhiphicephalus (Boophilus) microplus

doi não encontrodo.Rhiphicephalus (Boophilus) microplus is one of the most important arthropods in veterinary medicine due economic losses and health problems caused in cattle production. The vaccination represents optimum method evaluated with effective cost to prevent economic losses and to increase the duration and quality of life of the production animals. A synthetic peptide, SBm 7462, derived from Bm86, has been shown great results in control of ticks. The construction and synthesis of one nucleotide sequence based on this peptide might be useful for design a DNA vaccine that has many advances than peptide vaccine. A gene, called seq1, was constructed with a three repetition of nucleotide sequence of SBm 7462. It was cloned into a pCIneo vector expression in mammals and injected in BALB/c mouse. When mice were inoculated with the expression cassette they did not response in ELISA. They elevated antibody titles only when vaccinated with the synthetic peptide SBm7462®. And, the best titles of immunoglobulins were seen when the SBm7462® was administered subcutaneously.Rhiphicephalus (Boophilus) microplus é um dos mais importantes artrópodes em medicina veterinária, em consequências das perdas econômicas e problemas de saúde causados na produção de gado. A vacinação representa o melhor método avaliado com custo efetivo para prevenir perdas econômicas e aumentar a duração e qualidade de vida dos animais de produção. Um peptídeo sintético, SBm 7462, derivado da proteína intestinal Bm86 doR. (B.) microplus, tem obtido excelentes resultados no controle de carrapatos. A construção e síntese de uma sequência nucleotidíca baseada neste peptídeo podem ser úteis para o design de uma vacina DNA que tem muitas vantagens sob uma vacina sintética. Um gene, denominado seq1 foi construído repetindo-se três vezes a sequência nucleotidídica do SBm 7462. Ele foi clonado dentro do vetor pCIneo de expressão em mamíferos e injetado em camundongos BALB/c. Quando camundongos foram inoculados com o cassete de expressão, eles não responderam ao ELISA. Eles elevaram os títulos de anticorpos apenas quando inoculados com o peptídeo sintético SBm7462®. E os melhores títulos de imunoglobulinas foram vistos quando o SBm7462® foi administrado subcutaneamente