An empirical approach towards the efficient and optimal production of influenza-neutralizing ovine polyclonal antibodies demonstrates that the novel adjuvant CoVaccine HT(TM) is functionally superior to Freund's adjuvant

Passive immunotherapies utilising polyclonal antibodies could have a valuable role in preventing and treating infectious diseases such as influenza, particularly in pandemic situations but also in immunocompromised populations such as the elderly, the chronically immunosuppressed, pregnant women, infants and those with chronic diseases. The aim of this study was to optimise current methods used to generate ovine polyclonal antibodies. Polyclonal antibodies to baculovirus-expressed recombinant influenza haemagglutinin from A/Puerto Rico/8/1934 H1N1 (PR8) were elicited in sheep using various immunisation regimens designed to investigate the priming immunisation route, adjuvant formulation, sheep age, and antigen dose, and to empirically ascertain which combination maximised antibody output. The novel adjuvant CoVaccine HT™ was compared to Freund’s adjuvant which is currently the adjuvant of choice for commercial production of ovine polyclonal Fab therapies. CoVaccine HT™ induced significantly higher titres of functional ovine anti-haemagglutinin IgG than Freund’s adjuvant but with fewer side effects, including reduced site reactions. Polyclonal hyperimmune sheep sera effectively neutralised influenza virus in vitro and, when given before or after influenza virus challenge, prevented the death of infected mice. Neither the age of the sheep nor the route of antigen administration appeared to influence antibody titre. Moreover, reducing the administrated dose of haemagglutinin antigen minimally affected antibody titre. Together, these results suggest a cost effective way of producing high and sustained yields of functional ovine polyclonal antibodies specifically for the prevention and treatment of globally significant diseases.Natalie E. Stevens, Cara K. Fraser, Mohammed Alsharifi, Michael P. Brown, Kerrilyn R. Diener, John D. Haybal

Factsheets voor de (eco)toxicologische risicobeoordelingsstrategie van het Rijksinstituut voor Volksgezondheid en Milieu - Deel V

This report contains five factsheets describing risk assessment methods used at the Centre for Substances and Integral Risk Assessment (SIR) and the Expert Centre for Substances (SEC) of the National Institute for Public Health and the Environment (RIVM). The main aim is to enhance transparency and consistency in the risk assessment methods used at RIVM-SIR and RIVM-SEC. The factsheet on hepatic tumours in mice describes whether or not mouse liver tumours are considered relevant for human risk assessment. The factsheet on historical control data for tumour incidence provides the RIVM strategy on how to use historical control data in the evaluation of carcinogenicity data. The factsheet on Mononuclear Cell Leukaemia in the F344 rat strain discusses the relevance of an increased incidence of mononuclear cell leukaemia (MNCL) in F344 rats for humans and provides an approach to human hazard and risk assessment. In the factsheet on energy and moisture content and assimilation efficiency of bird and mammal food, two large datasets on the energy and water content and assimilation efficiency of various types of bird and mammal food, are merged and analysed. The last factsheet on sorption of dissociating compounds describes the main principles and limitations of QSAR models and the HPLC method for determining the adsorption coefficients of organic ionisable substances. The five factsheets reflect a state-of-the-art approach and are meant to facilitate discussion with other national and international parties involved in risk assessment.Dit rapport bundelt vijf factsheets waarin methodieken worden beschreven die worden gebruikt voor de risicobeoordeling van stoffen bij het Centrum voor Stoffen en Integrale Risicobeoordeling (SIR) en het Stoffen Expertise Centrum (SEC) van het Rijksinstituut voor Volksgezondheid en Milieu (RIVM). Het voornaamste doel is om de inzichtelijkheid en eenduidigheid van de bij RIVM-SIR en -SEC gevolgde methodieken te vergroten. De vijf factsheets vormen de weerslag van de huidige stand van wetenschap. Ze zijn bedoeld om de discussie met andere (inter)nationale partijen op het gebied van risicobeoordeling te bevorderen. De factsheet over levertumoren in de muis beschrijft onder welke voorwaarden levertumoren in de muis als relevant voor risicobeoordeling in de mens worden beschouwd. In de factsheet over historische controle gegevens van tumorincidentie wordt aangegeven hoe het RIVM bij de evaluatie van carcinogeniteit omgaat met historische controles gegevens. In de factsheet over Mononucleaire Cel Leukemie in de F344 rat wordt de relevantie voor de mens van een toename in de incidentie van mononucleaire cel leukemie (MNCL) in F344 ratten besproken en wordt een strategie voor de gevaar- en risicobeoordeling geleverd. In de factsheet 'Energie- en vochtgehalte en assimilatie-efficientie van voedsel voor vogel- en zoogdieren' zijn twee grote datasets met gegevens over het energie- en watergehalte van verschillende voedselbronnen voor vogels en zoogdieren samengevoegd en geanalyseerd. De laatste factsheet over sorptie van dissocierende stoffen geeft een uiteenzetting van de belangrijkste principes en beperkingen van de QSAR- modellen en HPLC-methoden voor het bepalen van het adsorptiegedrag van een stof

Factsheets voor de (eco)toxicologische risicobeoordelingsstrategie van het Rijksinstituut voor Volksgezondheid en Milieu - Deel V

Dit rapport bundelt vijf factsheets waarin methodieken worden beschreven die worden gebruikt voor de risicobeoordeling van stoffen bij het Centrum voor Stoffen en Integrale Risicobeoordeling (SIR) en het Stoffen Expertise Centrum (SEC) van het Rijksinstituut voor Volksgezondheid en Milieu (RIVM). Het voornaamste doel is om de inzichtelijkheid en eenduidigheid van de bij RIVM-SIR en -SEC gevolgde methodieken te vergroten. De vijf factsheets vormen de weerslag van de huidige stand van wetenschap. Ze zijn bedoeld om de discussie met andere (inter)nationale partijen op het gebied van risicobeoordeling te bevorderen. De factsheet over levertumoren in de muis beschrijft onder welke voorwaarden levertumoren in de muis als relevant voor risicobeoordeling in de mens worden beschouwd. In de factsheet over historische controle gegevens van tumorincidentie wordt aangegeven hoe het RIVM bij de evaluatie van carcinogeniteit omgaat met historische controles gegevens. In de factsheet over Mononucleaire Cel Leukemie in de F344 rat wordt de relevantie voor de mens van een toename in de incidentie van mononucleaire cel leukemie (MNCL) in F344 ratten besproken en wordt een strategie voor de gevaar- en risicobeoordeling geleverd. In de factsheet 'Energie- en vochtgehalte en assimilatie-efficientie van voedsel voor vogel- en zoogdieren' zijn twee grote datasets met gegevens over het energie- en watergehalte van verschillende voedselbronnen voor vogels en zoogdieren samengevoegd en geanalyseerd. De laatste factsheet over sorptie van dissocierende stoffen geeft een uiteenzetting van de belangrijkste principes en beperkingen van de QSAR- modellen en HPLC-methoden voor het bepalen van het adsorptiegedrag van een stof.This report contains five factsheets describing risk assessment methods used at the Centre for Substances and Integral Risk Assessment (SIR) and the Expert Centre for Substances (SEC) of the National Institute for Public Health and the Environment (RIVM). The main aim is to enhance transparency and consistency in the risk assessment methods used at RIVM-SIR and RIVM-SEC. The factsheet on hepatic tumours in mice describes whether or not mouse liver tumours are considered relevant for human risk assessment. The factsheet on historical control data for tumour incidence provides the RIVM strategy on how to use historical control data in the evaluation of carcinogenicity data. The factsheet on Mononuclear Cell Leukaemia in the F344 rat strain discusses the relevance of an increased incidence of mononuclear cell leukaemia (MNCL) in F344 rats for humans and provides an approach to human hazard and risk assessment. In the factsheet on energy and moisture content and assimilation efficiency of bird and mammal food, two large datasets on the energy and water content and assimilation efficiency of various types of bird and mammal food, are merged and analysed. The last factsheet on sorption of dissociating compounds describes the main principles and limitations of QSAR models and the HPLC method for determining the adsorption coefficients of organic ionisable substances. The five factsheets reflect a state-of-the-art approach and are meant to facilitate discussion with other national and international parties involved in risk assessment.RIV

Evaluation of immunocastration conjugates based on GnRH linked to carrier molecules in a male rodent model

Gonadotropin-releasing hormone (GnRH) stimulates the pituitary gland to secrete sex hormones. In the present study, we evaluated different conjugates of GnRH to abrogate sex hormone secretion in a male rat model. Firstly, GnRH-I was conjugated to keyhole limpet haemocyanin (KLH) using either whole-sequence GnRH-I or an analogue of GnRH-I (CHWSYGLRPG-NH2) using glutaraldehyde cross linkage. Six-week-old Sprague-Dawley male rats (n=6) were immunized intramuscularly with the conjugates adsorbed onto alum, equivalent to 50 μg of GnRH peptide and administered in weeks 1, 3, 5 and 7. The study was concluded in week 15. Comparison was made with untreated controls and previously established anti-fertility conjugates: CHWSYGLRPG-NH2 (GnRH-I) or CHWSHDWKPG-NH2 (analogue of lamprey GnRH-III, lGnRH-III) linked to tetanus toxoid (using a heterobifunctional reagent to achieve cross linkage). Antibody production, hormone levels and testicular diameter changes were assessed, together with, sperm movement and effects on organ weights. Similar high levels of antibody secretion were observed in all the immunized groups, although whole GnRHI- KLH produced a sustained level of production for an additional week. Similarly, testosterone levels were significantly (p<0.05) reduced in all immunized groups. There were no significant changes observed in body weight and testicular diameter of immunized animals compared with the untreated controls. However, in terms of sperm motility and sperm number, the best anti-fertility effects were observed with lGnRH-III-TT and GnRH-I-KLH and to a lesser extent whole GnRH-I-KLH. These groups also showed significant increase in kidney weight. Finally, considering all the above-mentioned subjects in addition to availability and easier and cheaper way of preparation,we came to this conclusion that whole GnRH-IKLH satisfactorily met most of our favourite criteria and could be used in immunocastration vaccine production purposes successfully