Studies on whole cell fluorescence-based screening for epoxide hydrolases and Baeyer-Villiger monoxygenases

Biocatalysis reactions were performed on microtiter plates (200 µL) aiming at the utilization of fluorogenic substrates (100 µmol L-1) for rapid whole cell screening for epoxide hydrolases (EHs) and Baeyer-Villiger monoxygenases (BVMOs). A final protocol was achieved for EHs, with 3 new enzymatic sources being detected (Agrobacterium tumefaciens, Pichia stipitis, Trichosporom cutaneum). The fluorogenic assay for BVMO did not work as expected. However, an approach to possible variables involved (aeration; pH) provided the first detection of a BVMO activity in T. cutaneum.Reações de biocatálise foram realizadas em microplacas (200 µL) visando a utilização de substratos fluorogênicos (100 µmol L-1) para prospecção rápida de epóxido hidrolases (EHs) e Baeyer-Villiger monoxigenases (BVMOs) em microrganismos (células inteiras). Um protocolo final foi alcançado para EHs, com a detecção de 3 novas fontes enzimáticas (Agrobacterium tumefaciens, Pichia stipitis, Trichosporom cutaneum). O ensaio fluorogênico para BVMO não ocorreu como esperado. A abordagem de algumas variáveis envolvidas (aeração; pH) proporcionou a detecção inédita da atividade enzimática de BVM em T. cutaneum.911916Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq