28 research outputs found
Transgenic Plants as Biofactories for the Production of Biopharmaceuticals: A Case Study of Human Placental Lactogen
"Nicotiana tabacum" L. cv Xanthi como sistema heterólogo para la producción de lactógeno placentario humano (hPL)
152 p. : il., col.El lactógeno placentario humano (hPL) es una hormona polipeptídica que forma parte de la pequeña lista de factores del crecimiento capaces de tratar la diabetes tipo 1 mediante el transplante de islotes humanos. Esta hormona tiene la capacidad de mejorar la supervivencia de los islotes humanos antes y/o después de su transplante. En este trabajo se aborda la producción de hPL en sistemas heterólogos vegetales basados en Nicotiana tabacum cv Xanthi. El cDNA del hPL ha sido introducido en el genoma vegetal del tabaco mediante Agrobacterium tumefaciens, portando los vectores de expresión pNEKhPL1 y pNEKhPL2. La actividad transcripcional se ha confirmado mediante PCR en tiempo real, y los niveles de producción de hPL en plantas transgénicas han alcanzado el 1% de la cantidad de proteína total soluble (PTS). Tras purificar la proteína mediante cromatografía de afinidad a iones metálicos, se ha testado su actividad biológica. Los ensayos in vitro de proliferación y señalización intracelular han demostrado que la proteína producida en plantas mantiene su actividad intacta, y por lo tanto, que las plantas son capaces de producir la hormona funcional. En este trabajo también se han caracterizado la estabilidad de la proteína hPL a lo largo del ciclo de vida del tabaco, y su transmisión a la siguiente generación. La cantidad de proteína recombinante en las hojas jóvenes de las plantas cultivadas en el invernadero ha sufrido un 26% de disminución tras 90 días de cultivo, obteniendo el máximo de proteína a los 30 días. La progenie de plantas pNEKhPL2 han alcanzado el 1.1% de la PTS. También se ha analizado la producción de hPL en callos obtenidos a partir de tejido foliar de plantas transgénicas, que se han utilizado para establecer suspensiones celulares. En este sistema se han obtenido 280.5 µg l-1 de hPL total demostrando que tanto las plantas como las suspensiones son sistemas idóneos para producir hPL recombinant
Estrategia diagnóstica eficiente en la sospecha de sobrecarga férrica
146 p.La elevación de los marcadores séricos del metabolismo férrico es un problema muy frecuente. Existen algoritmos para su manejo pero ninguno se ha realizado en base a hechos clínicos sino que sea basado en consenso de expertos. El objetivo principal fue crear y validar un algoritmo diagnóstico efectivo y eficiente de alta sobrecarga férrica en los pacientes con sobrecarga bioquímica de hierro. Métodos: Se realizaron dos fases, una fase de derivación o creación del algoritmo y una fase de validación del algoritmo. El diseño empleado fue el de un corte transversal de una cohorte retrospectiva para la derivación del algoritmo y un corte transversal de una cohorte prospectiva para la validación del algoritmo. Los sujetos del estudio fueron pacientes consecutivos remitidos por los servicios de hematología, digestivo y medicina interna con sobrecarga bioquímica de hierro (ferritina y/o IST) confirmada en una segunda extracción a los que se les realizan pruebas genéticas y una RM 1,5 teslas para la medición de la concentración hepática de hierro. Resultados: El algoritmo con los puntos de corte de la OMS, permite descartar alta sobrecarga de hierro hepático en el 70% de la población con la ferritina y el IST con un valor predictivo negativo muy alto (99%). La ferritina, el IST y la mutación C282Y Hmz confirman alta sobrecarga de Hierro hepático en un 3% con un valor predictivo positivo del 78%. En 1 de cada 4 pacientes habría que hacer RM
Estrategia diagnóstica eficiente en la sospecha de sobrecarga férrica
146 p.La elevación de los marcadores séricos del metabolismo férrico es un problema muy frecuente. Existen algoritmos para su manejo pero ninguno se ha realizado en base a hechos clínicos sino que sea basado en consenso de expertos. El objetivo principal fue crear y validar un algoritmo diagnóstico efectivo y eficiente de alta sobrecarga férrica en los pacientes con sobrecarga bioquímica de hierro. Métodos: Se realizaron dos fases, una fase de derivación o creación del algoritmo y una fase de validación del algoritmo. El diseño empleado fue el de un corte transversal de una cohorte retrospectiva para la derivación del algoritmo y un corte transversal de una cohorte prospectiva para la validación del algoritmo. Los sujetos del estudio fueron pacientes consecutivos remitidos por los servicios de hematología, digestivo y medicina interna con sobrecarga bioquímica de hierro (ferritina y/o IST) confirmada en una segunda extracción a los que se les realizan pruebas genéticas y una RM 1,5 teslas para la medición de la concentración hepática de hierro. Resultados: El algoritmo con los puntos de corte de la OMS, permite descartar alta sobrecarga de hierro hepático en el 70% de la población con la ferritina y el IST con un valor predictivo negativo muy alto (99%). La ferritina, el IST y la mutación C282Y Hmz confirman alta sobrecarga de Hierro hepático en un 3% con un valor predictivo positivo del 78%. En 1 de cada 4 pacientes habría que hacer RM
Sample size requirement in trials that use the composite endpoint major adverse cardiovascular events (MACE):new insights
Piloting the informed health choices resources in Barcelona primary schools: A mixed methods study
IntroductionThe main objective of the Informed Health Choices (IHC) project is to teach people to assess treatment claims and make informed health choices. For this purpose, the IHC learning resources were developed for primary school children. The aim of this study is to explore students' and teachers' experience when using the IHC resources in primary schools in Barcelona (Spain). MethodsWe conducted a mixed methods study for piloting the IHC resources in a convenience sample of primary schools in Barcelona. The intervention included a workshop with teachers, and nine lessons with students. We collected data using multiple approaches. We performed quantitative and qualitative analyses, and integrated the findings in a joint display. Finally, we formulated recommendations for using the IHC resources in this setting. ResultsTwo schools, with a total of 143 students in 4th and 5th grade and six teachers, participated in the study. One school followed the suggested IHC teaching plan and competed all the lessons; the other school modified the plan substantially and did not complete all the lessons. Overall, students and teachers from both schools understood, were interested in, and were able to apply the content of the lessons. During the lessons, the textbook was useful for students; nevertheless, for the teachers, the usefulness of the IHC resources was variable. Teachers adapted the IHC resources to increase student participation and used Information and Communications Technologies tools. We observed more facilitators than barriers to teach the lessons. The teachers suggested some ideas to improve the lessons based on activities they developed and implemented. The integration analysis showed great convergence of the quantitative and qualitative findings. We propose seven recommendations for using the IHC resources in this setting. ConclusionsStudents and teachers from primary schools in Barcelona showed a positive experience when using IHC resources; however, these resources should be adapted to promote classroom participation
Learning to make informed health choices: Protocol for a pilot study in schools in Barcelona.
--- - b: - "Introduction:" - "Methods:" - "Ethical
considerations:" sup: - th - th i: - ad hoc content: - " The
Informed Health Choices (IHC) project has developed learning
resources to teach primary school children (10 to 12-year-olds)
to assess treatment claims and make informed health choices. The
aim of our study is to explore both the students' and teachers'
experience when using these resources in the context of
Barcelona (Spain). " - " During the 2019-2020 school year, we
will conduct a pilot study with 4 " - " and 5 " - "-year primary
school students (9 to 11-year-olds) from three schools in
Barcelona. The intervention in the schools will include: 1)
assessment of the IHC resources by the teachers before the
lessons, 2) non-participatory observations during the lessons,
3) semi-structured interviews with the students after a lesson,
4) assessment of the lessons by the teachers after a lesson, 5)
treatment claim assessment by the students at the end of the
lessons, and 6) assessment of the IHC resources by the teachers
at the end of the lessons. We will use " - " questionnaires and
guides to register the data. We will perform a quantitative and
qualitative analysis of the data to explore understandability,
desirability, suitability, usefulness, facilitators and barriers
of the resources. The most relevant results will be discussed
and some recommendations on how to use, how to adapt (if
needed), and how to implement the IHC resources to this context
will be agreed. The findings of the contextualization activities
could inform the design of a cluster-randomised trial, to
determine the effectiveness of the IHC resources in this context
prior to scaling-up its use. " - " The study protocol has
obtained an approval exemption from the Ethics Committee of the
Hospital de la Santa Creu i Sant Pau (Barcelona, Spain).
Traumatic stress symptoms among Spanish healthcare workers during the COVID-19 pandemic: a prospective study
Abstract
Aim
To investigate the occurrence of traumatic stress symptoms (TSS) among healthcare workers active during the COVID-19 pandemic and to obtain insight as to which pandemic-related stressful experiences are associated with onset and persistence of traumatic stress.
Methods
This is a multicenter prospective cohort study. Spanish healthcare workers (N = 4,809) participated at an initial assessment (i.e., just after the first wave of the Spain COVID-19 pandemic) and at a 4-month follow-up assessment using web-based surveys. Logistic regression investigated associations of 19 pandemic-related stressful experiences across four domains (infection-related, work-related, health-related and financial) with TSS prevalence, incidence and persistence, including simulations of population attributable risk proportions (PARP).
Results
Thirty-day TSS prevalence at T1 was 22.1%. Four-month incidence and persistence were 11.6% and 54.2%, respectively. Auxiliary nurses had highest rates of TSS prevalence (35.1%) and incidence (16.1%). All 19 pandemic-related stressful experiences under study were associated with TSS prevalence or incidence, especially experiences from the domains of health-related (PARP range 88.4–95.6%) and work-related stressful experiences (PARP range 76.8–86.5%). Nine stressful experiences were also associated with TSS persistence, of which having patient(s) in care who died from COVID-19 had the strongest association. This association remained significant after adjusting for co-occurring depression and anxiety.
Conclusions
TSSs among Spanish healthcare workers active during the COVID-19 pandemic are common and associated with various pandemic-related stressful experiences. Future research should investigate if these stressful experiences represent truly traumatic experiences and carry risk for the development of post-traumatic stress disorder
"Nicotiana tabacum" L. cv Xanthi como sistema heterólogo para la producción de lactógeno placentario humano (hPL)
152 p. : il., col.El lactógeno placentario humano (hPL) es una hormona polipeptídica que forma parte de la pequeña lista de factores del crecimiento capaces de tratar la diabetes tipo 1 mediante el transplante de islotes humanos. Esta hormona tiene la capacidad de mejorar la supervivencia de los islotes humanos antes y/o después de su transplante. En este trabajo se aborda la producción de hPL en sistemas heterólogos vegetales basados en Nicotiana tabacum cv Xanthi. El cDNA del hPL ha sido introducido en el genoma vegetal del tabaco mediante Agrobacterium tumefaciens, portando los vectores de expresión pNEKhPL1 y pNEKhPL2. La actividad transcripcional se ha confirmado mediante PCR en tiempo real, y los niveles de producción de hPL en plantas transgénicas han alcanzado el 1% de la cantidad de proteína total soluble (PTS). Tras purificar la proteína mediante cromatografía de afinidad a iones metálicos, se ha testado su actividad biológica. Los ensayos in vitro de proliferación y señalización intracelular han demostrado que la proteína producida en plantas mantiene su actividad intacta, y por lo tanto, que las plantas son capaces de producir la hormona funcional. En este trabajo también se han caracterizado la estabilidad de la proteína hPL a lo largo del ciclo de vida del tabaco, y su transmisión a la siguiente generación. La cantidad de proteína recombinante en las hojas jóvenes de las plantas cultivadas en el invernadero ha sufrido un 26% de disminución tras 90 días de cultivo, obteniendo el máximo de proteína a los 30 días. La progenie de plantas pNEKhPL2 han alcanzado el 1.1% de la PTS. También se ha analizado la producción de hPL en callos obtenidos a partir de tejido foliar de plantas transgénicas, que se han utilizado para establecer suspensiones celulares. En este sistema se han obtenido 280.5 µg l-1 de hPL total demostrando que tanto las plantas como las suspensiones son sistemas idóneos para producir hPL recombinant