Localización in situ de inclusiones del virus tristeza de los cítricos con anticuerpos desarrollados contra la proteína recombinante no estructural p20

Se describe el desarrollo de un inmunoensayo para la localización in situ de inclusiones virales inducidas por el virus tristeza de los cítricos (Citrus tristeza virus =CTV) mediante microscopía de luz con anticuerpos preparados contra la proteína recombinante p20 no estructural del CTV. Se emplearon cortes manuales de aproximadamente 100 ìm de grosor a partir de corteza de varetas de plantas de cítricos sanas e infectadas por el CTV. Los cortes se fijaron en 70 % de etanol y se incubaron subsecuentemente con anticuerpos anti-p20 desarrollados ya sea en rata o conejo en diluciones de 1:5,000 y 1:10,000 y 1:1,000 y 1:3,000 respectivamente, y con conjugados comerciales IgG anti-especie en diluciones de 1:30,000 para cada uno de ellos, agregando al final la solución cromogénica compuesta por NBT/BCIP. Las inclusiones virales se visualizaron en un microscopio de luz a 10 y 40 aumentos en forma de áreas irregulares con coloración azul obscura en el área del floema y fibras del floema en cortes efectuados con plantas infectadas por el CTV; los tejidos provenientes de plantas sanas no presentaron ningún tipo de coloración, lo que permitió discriminar plantas sanas e infectadas por el CTV

Detección del virus tristeza de los cítricos mediante anticuerpos contra la proteína recombinante p25 de la cápside bajo un sistema de inmunoimpresión

El virus tristeza de los cítricos Citrus tristeza virus (CTV) es de distribución mundial y ocasiona una de las enfermedades de mayor importancia económica en el cultivo de los cítricos. El análisis masivo de muestras de cítricos para la detección del CTV se lleva a cabo en forma rutinaria mediante la técnica serológica ELISA, o a través de su variante de inmunoimpresión directa en membranas de nitrocelulosa. En el presente trabajo se evaluó el empleo de anticuerpos desarrollados contra la proteína recombinante p25 del CTV para la detección del virus bajo un sistema inmunoimpresión en membranas de nitrocelulosa, empleando plantas de cítricos sanas y plantas con infección natural en el campo. Con la combinación de anticuerpos desarrollados en cabra (CB) anti-CTV y de conjugado comercial anti-IgG de cabra acoplada a fosfatasa alcalina, se obtuvo una reacción positiva con plantas infectadas por el CTV y negativa con plantas sanas. Asimismo, la combinación de anticuerpos CB anti-CTV conjugados con biotina y empleando avidina-AP como conjugado comercial, fue igualmente efectiva para discriminar plantas sanas e infectadas por el CTV. Adicionalmente, los anticuerpos CB anti-CTV desarrollados contra la proteína recombinante p25 de la cápside del CTV mostraron resultados comparables con los kits comerciales de inmunoimpresión de Plant Print y Agdia para la detección del CTV

Caracterización de cepas mexicanas de bacillus thuringiensis tóxicas para larva de lepidópteros y coleópteros

Se caracterizaron las cepas de Bacillus thuringiensis C-4, C-9, GM-7, y GM-10, que fueron asiladas del noreste de México, y seleccionadas por su alta toxicidad contra lepidópteros y coleópteros de importancia agrícola, siguiendo las guías de la Agencia de Protección del Medio Ambiente (EPA) de los Estados Unidos de Norte América. La serotipificación reveló que ninguna de las cepas estudiadas produjo β-exotoxina o fue activa contra mosquitos. Se encontró que GM-7 y GM-10 fueron sensibles a los fagos R-41 y CP-51. Todas las cepas sintetizaron proteínas del cristal de 130–140 kDa. Las cepas C-4, GM-7, y GM-16 10 expresaron genes cry1, y la C-9 expresó los genes cry3 y cry7/8. Además, se observó que sólo la δ-endotoxina (cristal) de C4 y C9, solas o en combinación con esporas, causaron necrosis tisular cuando se inyectaron subcutáneamente, y ésta fue similar a la causada por la cepa productora de β-exotoxina HD-41. Esta necrosis se suprimió significativamente con el uso de pentoxifilina, que es un inhibidor de la producción de factor de necrosis tumoral-α, lo cual sugirió que esta citosina estuvo involucrada en el efecto observado. Los resultados demuestran que las cepas GM-7 y GM-10 son seguras para mamíferos de acuerdo a los lineamientos de la EPA. Además, se discute el potencial de la cepa C-9 para el control de varios coleópteros de importancia agrícola, y la inducción de necrosis tisular en ratones por C-4 y C-9

La capacitación y su impacto en la rotación de personal.

El presente trabajo es una investigación documental y práctica sobre una de las problemáticas a las que se enfrenta el sector empresarial: La Capacitación Laboral y su relación con la rotación de personal. Se hace una narrativa de la capacitación laboral desde sus inicios y describe el marco legal por el cual está protegida la capacitación Laboral en México. Se establece que Elton Mayo y Kurt Lewin en el Siglo XX marcan el inicio de los estudios que centran la atención en el ser humano como base para la productividad. Además se desglosa el marco legal que en México se encarga de establecer y aplicar la capacitación laboral. También se describe el desarrollo de la capacitación laboral de un CEDIS (Centro de Distribución) en Puerto Vallarta Jalisco y la manera en que se presentó la rotación de personal del mismo. Se realizó un análisis entre HHC (Horas Hombre de Capacitación)y la PRP (Porcentaje de Rotación de Personal) para obtener un promedio mensual tanto de HHC y PRP. Se concluye que las HHC son muy bajas y coinciden con los reportes internacionales que señalan que en México se invierte poco en capacitación laboral. En la investigación de este caso practico Cedis Danone/Bonafont se pudo detectar una relación entre las Horas Hombre de Capacitación y los Porcentajes de Rotación de Personal

Toxicidad de la clase Cryl de Bacillus Thuringiensis y su unión a receptores en Trichoplusia ni

Tesis (Doctorado en Ciencias con Especialidad en Biotecnología) UANLUANLhttp://www.uanl.mx

Producción y evaluación de anticuerpos desarrollados contra la proteína recombinante de la cápside del virus tristeza de los cítricos

En el presente trabajo se desarrollaron anticuerpos específicos contra la proteína recombinante del gen p25 de la cápside (rCP) del virus tristeza de los cítricos (Citrus tristeza virus = CTV), y se evaluaron en pruebas ELISA indirecta con tejido sano e infectado con el CTV. La combinación de anticuerpos rCP desarrollados en cabra para el aislamiento MX14, como anticuerpo primario (tapizado), y los desarrollados en conejo para los aislamientos MX08, MX14 y B227, como anticuerpos intermedios, funcionaron eficientemente con valores de densidad óptica (DO405) entre 0.400 y 1.400, para tejido infectado por el CTV, y menores a 0.100, con tejido de plantas sanas. La combinación de anticuerpos rCP T1(cabra anti-CTV MX14) como anticuerpo primario y C3 (conejo anti-CTV MX08) como anticuerpo secundario fue igualmente efectiva como el kit comercial de Agdia, para discriminar muestras positivas y negativas de una colección de 32 aislamientos del CTV de Nuevo León, México. Adicionalmente, las rCP de los aislamientos MX14 y B227, mezcladas con tejido sano, fueron igualmente efectivas que el tejido infectado por el CTV como control positivo en pruebas ELISA, con valores de 0.300 y 0.400 de DO405. Se discute la aportación de los resultados obtenidos en apoyo a la Campaña Nacional de Detección del Virus Tristeza de los Cítricos en México

Desarrollo y uso de un sistema serológico para la detección del virus de la tristeza en el análisis masivo de muestras de cítricos

En el presente trabajo se reporta el desarrollo y uso de un sistema serológico para la detección del virus tristeza de los cítricos (Citrus tristeza virus = CTV), en el análisis masivo de muestras de cítricos, con base en la técnica ELISA, en la modalidad de doble sándwich indirecto (DASI), empleando anticuerpos desarrollados contra la proteína recombinante (prb) del gen p25 de la cubierta proteica del virus. El trabajo consistió en la evaluación de anticuerpos específicos prb anti-CTV desarrollados en cabras y conejos, a manera de un kit completo ELISA-DASI. La evaluación se llevó a cabo con tejido proveniente de plantas sanas de cítricos e infectadas por el CTV. La combinación de los anticuerpos prb de cabra T1 empleados como anticuerpos primarios (atrapantes de antígeno) para el tapizado de las placas y de conejo C3 empleados como anticuerpos intermedios (detección del antígeno), fueron eficientes para la detección del CTV presente en muestras de cítricos de una colección internacional de aislamientos del CTV de orígenes geográficos diversos, y se demostró con ello la capacidad de reconocer aislamientos del CTV que causan un amplio espectro de síntomas en diferentes hospedantes cítricos. Asimismo, la combinación de anticuerpos prb cabra T1/conejo C3 fue igualmente eficiente en la discriminación de plantas sanas y plantas infectadas por el CTV que los anticuerpos empleados por la Agencia de Erradicación de Tristeza de California (Central California Tristeza Eradication Agency = CCTEA) empleados en el análisis masivo de muestras de cítricos, así como con un kit comercial disponible para la detección del CTV. Adicionalmente, se demostró la eficiencia de la combinación de los anticuerpos prb T1/C3 para el análisis masivo de muestras de cítricos colectadas dentro del programa regular anual de monitoreo del CTV llevado a cabo por la CCTEA. La evaluación incluyó el análisis de 41,195 muestras provenientes de 301 plantaciones comerciales de los distritos 1, 2 y 3 de California. Mediante el empleo de los anticuerpos prb T1/C3, se encontraron y eliminaron 26 árboles (0.063 %) infectados por el CTV. Los resultados obtenidos en el presente trabajo demuestran que los anticuerpos desarrollados contra la prb del CTV se pueden utilizar como anticuerpos primarios e intermedios para, respectivamente, capturar y detectar antígenos del CTV en ensayos de ELISA, en la modalidad de doble sándwich indirecto