Avaliação do potencial osteogênico de células de sangue de cordão umbilical humano e periósteo de ratos e do potencial osteocondutor de xenoenxerto bovino na terapia de perdas ósseas

The repair of extensive bone loss still represents a great challenge in modern Medicine. New alternatives appear to provide this claim, among this, the use of cell therapies to obtain directelly bone tissue or by acellular bone substitutes biomaterials, as xenografts. The major aim of this study was to evaluate the osteogenic potential of human umbilical cord blood (h-UCB) and rat periosteum (r-P) cells and verify the osteoconductive efficacy of the use of a xenograft for bone loss therapy. To performe this study we used in vitro and in vivo assays. The in vitro assay was divided in two steps where in step 1 the cells were harvested and cultivated of h-UCB and r-P. In the step 2, the platement of pos-expansion cells (passage 2) was achieved in order to accompany the differentiation of cells in osteoblasts and mineralized matrix formation, using qualitative (morphologic analysis and citochemistry/Von Kossa) and quantitative parameters (calcium and alkaline phosphatase assay) at experimental times 7, 14, 21 e 28 days an upon apropriated conditions of osteogenic medium (dexamethazone, ascorbic acid and betaglycerophosphate). At in vivo study, a critical size defect (8 mm of diameter) was created in the skull of Wistar rats (n=50) and treated according the following groups: blood clot (Group 1), autogenous bone graft (Group 2) and noncellular xenograft made up bovine hydroxyapatite and collagen I (Group 3). Macroscopic, radiographic and histopathologic evaluations of necropsied samples were achieved in 0, 7, 30 and 90 days after surgery. The data in vitro confirm osteodifferentiation process from r-P cells since 14 days and from h-UCB since 21 days. The data in vivo show that although no treatment promoted the total closure of bone defect, autogenous bone group had better bone repair after 90 days, followed by xenograft group that exhibited direct bone neoformation onto, and around, the particles confirming its osteoconductivity. In conclusion, cells from h-UCB and r-P were obtained, cultivated and osteodifferentiated in vitro and, the xenograft tested in vivo showed biocompatibility and osteoconductive potential in rat calvaria critical size defectO reparo de perdas ósseas extensas ainda constitui-se um grande desafio na Medicina moderna. Novas alternativas vêm surgindo para suprir esta demanda, dentre elas, a utilização da terapia celular para gerar diretamente tecido ósseo ou de biomateriais osteosubstitutos acelulares, como os xenoenxertos. O objetivo geral deste estudo foi avaliar o potencial osteogênico de células de sangue de cordão umbilical humano (SCU-h) e de periósteo de ratos (P-r) e verificar a eficácia osteocondutora da utilização de um xenoenxerto para a terapia de perdas ósseas. Este estudo constou de duas partes: in vitro e in vivo. Na fase 1 in vitro, foram coletadas e cultivadas células de SCU-h e de P-r, na fase 2, foi realizado o plaqueamento das células pós-expansão (passagem 2), com a finalidade de acompanhar nos tempos experimentais de 7, 14, 21 e 28 dias, sob condições apropriadas de meio osteogênico (dexametazona, ácido ascórbico e betaglicerofosfato), a diferenciação das células em osteoblastos e formação de matriz mineralizada, utilizando parâmetros qualitativos (análise morfológica e citoquímica/Von Kossa) e quantitativos (dosagem de cálcio e atividade enzimática de fosfatase alcalina). No estudo in vivo, foram utilizados ratos Wistar (n=50), realizando-se um defeito crítico em calvária (8 mm de diâmetro) para posteriormente observar reparo ósseo dentro de três condições propostas: Coágulo sanguíneo (Grupo 1), Osso autógeno (Grupo 2) e Xenoenxerto acelular a base de hidroxiapatita e colágeno I bovinos (Grupo 3). Realizou-se avaliação radiográfica, macroscópica e histopatológica das amostras necropsiadas em 0, 7, 30 e 90 dias pós-cirurgia. Os dados in vitro confirmam processo de osteodiferenciação em células de P-r a partir de 14 dias e de SCU-h a partir de 21 dias. Os dados in vivo mostram que, embora nenhum dos tratamentos tenha proporcionado o fechamento total do defeito ósseo, osso autógeno teve melhor reparo ósseo em 90 dias, seguido pelo grupo xenoenxerto, que exibiu neoformação óssea direta dentro e ao redor de seus grânulos confirmando sua osteocondutividade. Em conclusão, foi possível obter, cultivar e osteodiferenciar in vitro células de SCU-h e P-r bem como observar in vivo a biocompatibilidade e capacidade osteocondutora do xenoenxerto aplicado em defeito crítico em calvária de ratos

Immunohistochemical evaluation of bone repair in critical-sized defects in rat calvaria treated with low-level laser (gallium-aluminum-arsenide - GaAlAs)

The use of low-level laser (LLL) has been described as a method that can promote improvement in bone repair. However, there are only few data in the literature about the precise molecular biological processes resulting from the effect of therapy with LLL in the repair of critical-size defects. The aim of this study was to evaluate the modulation of bone extracellular matrix in bone defects (Ө = 8mm) created on rat calvaria. The bone healing was analysed after 2, 4 and 8 weeks in two groups: control and irradiated (laser gallium-aliminum arsenide / GaAlAs, 830 nm, energy dose of 2.5 J/cm2 and power of 50 mW in a total of seven applications, one every 48 hours). Immunohistochemistry was performed to determine the immunoreactivity of osteocalcin and subsequently proceeded histomorphometric analysis and statistical analysis. Comparison between irradiated group and control did not present intergroups significance in the tested periods, although the group of GaAlAs laser had a greater statistical difference 8 weeks with other experimental times and higher rate of deposition of osteocalcin on the total volume of bone, interpreted as a more mature newly formed tissue. In accord to the expression peak of osteocalcin have been delayed, the profile of other bone biomarkers deserves to be further investigated to understand the process of early biostimulation promoted by GaAlAs laser.O uso do laser de baixa potência (LBP) tem sido descrito como um método que pode promover melhora no reparo ósseo. Entretanto, ainda são escassos na literatura dados precisos sobre os processos biológicos moleculares decorrentes do efeito da terapia com LBP no reparo de defeitos de tamanho crítico. O objetivo deste estudo foi avaliar a modulação de matriz extracelular óssea em defeitos ósseos (Ө=8mm) criados em calvárias de ratos. O reparo ósseo foi analisado após 2, 4 e 8 semanas em dois grupos: controle e irradiado (com laser de arsenieto de gálio e alumínio/GaAlAs, a 830 nm, dose de energia de 2,5 J/cm2 e potência de 50 mW, em um total de sete aplicações, uma a cada 48 horas). Foi realizada técnica imunoistoquímica para averiguar a imunoexpressão de osteocalcina e em sequência procedeu-se análise histomorfométrica e análise estatística. Em comparação do grupo irradiado ao controle, não houve significância intergrupos nos períodos testados, embora o grupo do laser de GaAlAs tenha apresentado maior diferença estatística de 8 semanas com os demais tempos experimentais e maior razão de depósito de osteocalcina sobre o volume total de osso, interpretada como uma maior maturidade do tecido neoformado. Pelo pico de expressão da osteocalcina ter sido tardio, o perfil de outros biomarcadores ósseos merece ser melhor investigado para compreender o processo de bioestimulação precoce promovido pelo laser de GaAlAs

Uso da rugoscopia palatina como ferramenta biométrica: um estudo populacional em Niterói-RJ, Brasil

Introdução: Pesquisas por métodos biométricos auxiliares em perícias têm crescido na Odontologia Legal. Objetivo: Este estudo avaliou a eficácia da rugoscopia palatina na identificação humana. Material e método: Foram utilizados 184 modelos de gesso de estudantes voluntários em Niterói-RJ, para delineamento de suas rugosidades palatinas, sendo classificadas segundo quantidade, direção (sistema de Carrea) e formato individual (sistema de Silva), e comparadas às variáveis demográficas sexo, cor da pele e idade. A análise estatística foi realizada com o teste qui-quadrado para amostras independentes, considerando-se p<0,05. Resultado: Houve maior prevalência de 2-7 rugas em homens. O tipo IV de Carrea e o tipo 1 de Silva foram mais evidentes, porém sem diferenças intergrupos significativas, de acordo com as variáveis propostas. Conclusão: A rugoscopia palatina é uma ferramenta biométrica viável e fornece informações morfológicas individuais relevantes, embora sua análise cega e em tempo único não exiba acurácia na estratificação populacional

Immunohistochemical evaluation of MMP-2, MMP-9 and CD31/microvascular density in squamous cell carcinomas of the floor of the mouth

The aim of this study was to evaluate the immunoexpression of MMP-2, MMP-9 and CD31/microvascular density in squamous cell carcinomas of the floor of the mouth and to correlate the results with demographic, survival, clinical (TNM staging) and histopathological variables (tumor grade, perineural invasion, embolization and bone invasion). Data from medical records and diagnoses of 41 patients were reviewed. Histological sections were subjected to immunostaining using primary antibodies for human MMP-2, MMP-9 and CD31 and streptavidin-biotin-immunoperoxidase system. Histomorphometric analyses quantified positivity for MMPs (20 fields per slide, 100?points grade, ×200) and for CD31 (microvessels <50?µm in the area of the highest vascularization, 5 fields per slide, 100?points grade, ×400). Statistical design was composed by non-parametric Mann-Whitney U test (investigating the association between numerical variables and immunostainings), chi-square frequency test (in contingency tables), Fisher's exact test (when at least one expected frequency was less than 5 in 2×2 tables), Kaplan-Meier method (estimated probabilities of overall survival) and Iogrank test (comparison of survival curves), all with a significance level of 5%. There was a statistically significant correlation between immunostaining for MMP-2 and lymph node metastasis. Factors associated negatively with survival were N stage, histopathological grade, perineural invasion and immunostaining for MMP-9. There was no significant association between immunoexpression of CD31 and the other variables. The intensity of immunostaining for MMP-2 can be indicative of metastasis in lymph nodes and for MMP-9 of a lower probability of survivalO objetivo deste estudo foi avaliar a imunoexpressão de MMP-2, MMP- 9 e CD31/densidade microvascular em carcinomas espinocelulares de soalho bucal e correlacionar os resultados com variáveis demográficas, de sobrevida, clínicas (estadiamento TNM) e histopatológicas (grau de diferenciação tumoral, invasão perineural, embolização e invasão óssea). Dados de prontuários e de diagnósticos de 41 pacientes foram revisados. Cortes histológicos foram submetidos à imunomarcação usando anticorpos primários para MMP-2, MMP-9 e CD31 humanos e sistema streptoavidina-biotina-imunoperoxidase. Análise histomorfométrica quantificou a positividade para MMPs (20 campos, grade de 100 pontos por lâmina, ×200) e para CD31 (microvasos <50 μm na área de maior vascularização, 5 campos, grade de 100 pontos por lâmina, ×400). O planejamento estatístico foi composto pelo teste não paramétrico U de Mann-Whitney (verificação da associação entre variáveis numéricas e imunomarcações), teste de frequências do qui-quadrado (em tabelas de contingência), teste exato de Fisher (quando pelo menos uma frequência esperada foi menor do que 5 em tabelas 2x2), método de Kaplan-Meier (estimativa de probabilidades de sobrevida global) e teste de Iogrank (comparação das curvas de sobrevida), todos com nível de significância de 5%. Houve correlação estatisticamente significante entre imunomarcação para MMP-2 e metástase em linfonodo. Os fatores relacionados negativamente com a sobrevida foram estadiamento N, gradação histopatológica, invasão perineural e imunomarcação de MMP- 9. Não houve associação significativa entre imunoexpressão de CD31 e as demais variáveis. A intensidade de imunomarcação para MMP-2 pode ser indicativa de metástase em linfonodo e para MMP-9 de uma menor probabilidade de sobrevida

Avaliação de usuários sobre atributos da atenção primária à saúde bucal na Estratégia Saúde da Família

Health assessment is an important path in the process of transformation and improvement of a health service. The PCATool (Primary Care Assessment Tool) is one of the main tools used to evaluate the first level of health care. The aim is to evaluate the Primary Oral Health Care in a Family Health Center from the perspective of adult users. This is a cross-sectional study carried out in 2016 at the Francisco Moura Vieira Family Health Center in Sobral, Ceará. To collect the data, the Primary Care Assessment Instrument - Oral Health (PCATool-SB), user version, was used. 172 users participated in the study. The analysis of the results showed a high orientation to Primary Health Care in the attributes of First Contact (Use) and Coordination (Information System), while the other essential attributes and derivatives indicated low orientation. There was no association between scores and sociodemographic variables. The results indicate a need to restructure the attention given in the unit, mainly in the adequacy of the ratio of professionals and demand.Avaliação em saúde é uma importante ferramenta no processo de transformação e melhoria de um serviço de saúde. O PCATool (Instrumento de Avaliação da Atenção Primária) é um dos principais instrumentos usados para avaliar o primeiro nível de atenção à saúde. &nbsp;&nbsp;O objetivo do trabalho foi avaliar a Atenção Primária à Saúde Bucal em um Centro de Saúde da Família na perspectiva de usuários adultos. Trata-se de uma pesquisa transversal realizada em 2016 no Centro de Saúde da Família Francisco Moura Vieira em Sobral, Ceará. Para coleta dos dados foi usado o Instrumento de Avaliação da Atenção Primária - Saúde Bucal (PCATool-SB), versão usuário. Participaram do estudo 172 usuários. As análises dos resultados mostraram uma alta orientação a Atenção Primária à Saúde nos atributos de Primeiro Contato (Utilização) e Coordenação (Sistema de Informações), enquanto os demais atributos essenciais e derivados indicaram baixa orientação. Não houve associação entre os escores e as variáveis sociodemográficas. Os resultados indicam uma necessidade de restruturação da atenção prestada na unidade, principalmente na adequação da relação número de profissionais e demanda