Влияние стрессоустойчивости на экспрессию проаутофагического белка Beclin-1 в миокарде после экспериментального ушиба сердца

Objective. Evaluation of myocardial expression of the pro-autophagic protein Beclin-1 after cardiac contusion in experimental animals with different stress resistance.Materials and methods. The study included 68 white mongrel male rats weighing 250–300 g. After ranking for extreme variants of stress resistance, moderately stress-resistant rats (N=36) were excluded from the study. The remaining animals were split into the control (N=16) and study (N=16) groups, each group composed of 8 high stress resistant and 8 low stress resistant rats. In the study group, 24 hours after inflicted cardiac contusion, 5×5 mm myocardial tissue specimens were sampled from the intraventricular septum, anterior walls of the left and right ventricles, histological sections were made, and a reaction with primary polyclonal Anti-Beclin-1 antibodies was performed. Beclin-1 expression was evaluated under the microscope.Results. Immunohistochemical evaluation revealed a statistically significant increase in Beclin-1 protein expression (P=0.0002) in the cytoplasm of cardiomyocytes in the study group vs the control group, regardless of animals’ baseline stress resistance. However, expression of Beclin-1 protein in the myocardium of highly stress-resistant rats (Me=4.3; LQ=4.0; HQ=4.3) was significantly higher versus low-resistant animals (Me=3.6; LQ=3.3; HQ=3.6) (P=0.0009).Conclusion. Increased expression of Beclin-1 protein in the post-traumatic period of experimental cardiac contusion indicates autophagic flux activation. Intensity of autophagy varied depending on the animal’s stress resistance.Цель исследования. Оценка выраженности экспрессии проаутофагического белка Beclin-1 в миокарде при различной стрессоустойчивости после экспериментального ушиба сердца.Материалы и методы. В исследование включили 68 белых беспородных крыс-самцов массой 250–300 г. Животных ранжировали по крайним вариантам стрессоустойчивости. Среднестрессоустойчивых крыс (n=36) исключили из исследования. Затем сформировали контрольную (n=16) и опытную (n=16) группы. В каждой группе выделили подгруппы, включавшие крыс с высокой и низкой стрессоустойчивостью, по 8 животных в каждой. В опытной группе через 24 ч после моделирования ушиба сердца из межжелудочковой перегородки, передних стенок левого и правого желудочков иссекали фрагменты миокарда 5×5 мм, изготавливали гистологические срезы, проводили реакцию с первичными поликлональными антителами Anti-Beclin-1. Полученные образцы исследовали под микроскопом.Результаты. Иммуногистохимическое исследование выявило статистически значимое увеличение (p=0,0002) экспрессии белка Beclin-1 в цитоплазме кардиомиоцитов в опытной группе по сравнению с контрольной вне зависимости от исходной стрессоустойчивости. Однако в миокарде высокоустойчивых к стрессу травмированных крыс наблюдали более выраженный уровень экспрессии белка Beclin-1 (Me=4,3; LQ=4,0; HQ=4,3) в сравнении с низкоустойчивыми особями (Me=3,6; LQ=3,3; HQ=3,6) (p=0,0009).Заключение. Выявленное увеличение экспрессии белка Beclin-1 в посттравматическом периоде экспериментального ушиба сердца свидетельствует об активации процессов аутофагии. Выраженность аутофагии различалась в зависимости от стрессоустойчивости организма животного

Comparative evaluation of heart rate variability after septoplasty and tonsillectomy

The aim of the research was to determine the fluctuations of the autonomic nervous system based on the analysis of changes in certain heart rate variability (HRV) at patients after septoplasty and tonsillectomy. A study of Holter monitoring of 28 patients with nasal septum deviation and of 30 patients with chronic tonsillitis was conducted. Surgical procedures were performed under local infiltration anesthesia with 0,5% novocaine solution. We evaluated standard deviation of RR intervals (SDNN) - 24-hour monitoring, day and night data. After septoplasty for night and day validity period average SDNN did not differ (p < 0,05), but SDNN were significantly different (p < 0,05). Average values for the night and day were different from each other at the patients after tonsillectomy (p < 0,05). SDNN scatter was the same. SDNN in both groups did not differ per day both for average values and for variability (p < 0,05). Septoplasty provokes more pronounced stress response as compared with tonsillectomy. Local anesthesia for septoplasty and tonsillectomy causes a disturbance of adaptive reactions on the part of the autonomic nervous system. HRV analysis can be called an objective and individual method of diagnosis of acute stress conditions in the otorhinolaryngological surgery

Диарея, ассоциированная с Сlostridium difficile, в онкологической клинике

Purpose of the study. To conduct typing of toxigenic strains of Clostridium difficile, obtained from oncological patients who are in hospital.Material and Methods. The study included 130 patients with Clostridium difficile – associated diarrhea. First, the presence of toxins A+B+ in the feces was determined by enzyme immunoassay on an automatic miniVidas analyzer from BioMieux SA (France). For screening using real-time PCR, 26 toxigenic Clostridium difficile were selected. For the study used the system GeneXpert company «Cepheid» (Sweden).Results. Of the 1287 patients with diarrhea who were treated in an oncologic hospital, 130 (10,1%) tested positive for toxin A+B+ Clostridium difficile. For the study using real-time PCR, 26 samples were taken. The average age of patients is 57 years. 10 (38,5%) toxigenic strains were identified as hypervirulent ribotype. 7/10 strains were isolated for 3 consecutive month. The average age of patients with hypervirulent strains was 45 years. Patients participating in the study, in most cases were from the surgical departments – 61,5%, from the therapeutic – 34,7%.Conclusion. The study showed that the prevalence of Clostridium difficile infection in our clinic is lower than in other countries. Although hypervirulent strains accounted for 1/3 of all typed Clostridium difficile, special attention should be paid to them. Delayed diagnosis, delay in the onset of specific therapy in cancer patients can lead to a deterioration in the quality of life and in some cases be fatal. PCR diagnostics can determine the hypervirulent ribotype and carry out epidemiological measures aimed at preventing local outbreaks in the hospital.Цель. Провести типирование токсигенных штаммов Clostridium difficile, полученных от онкологических больных, находящихся в стационаре.Материалы и методы. В исследование было включено 130 пациентов с Clostridium difficile ассоциированной диареей из хирургических и терапевтических отделений. Сначала методом иммуноферментного анализа на автоматическом анализаторе miniVidas фирмы «BioMieux SA» (Франция) определяли наличие в кале токсинов А+В+. Для скрининга с помощью метода ПЦР в реальном времени было отобрано 26 токсигенных Clostridium difficile. Для исследования использовали систему GeneXpert фирмы «Cepheid» (Швеция).Результаты. Из 1287 пациентов с диареей, проходивших лечение в стационаре НМИЦ онкологии им. Н.Н. Блохина, положительный результат на токсин А+В+ Clostridium difficile оказался у 130 пациентов (10,1%). Для исследования с помощью метода ПЦР в реальном времени было взято 26 образцов. Средний возраст больных – 57 лет. 10 (38,5%) токсигенных штаммов определили как гипервирулентный риботип. 7/10 штаммов были выделены в течение 3 последовательных месяцев. Средний возраст пациентов с гипервирулентным штаммом составил 45 лет. Пациенты, учавствовавшие в исследовании, в большинстве случаев были из хирургических отделений (61,5%), из терапевтических – 34,7%.Заключение. Исследование показало, что распространенность Clostridium difficile инфекции в нашей клинике ниже, чем в других странах. Несмотря на то, что гипервирулентные штаммы составили 1/3 от всех типированных Clostridium difficile, на них надо обратить особое внимание. Несвоевременная диагностика, запаздывание с началом специфической терапии у онкологических пациентов может привести к ухудшению качества жизни и в отдельных случаях привести к летальному исходу. ПЦР-диагностика позволяет определить гипервирулентный риботип и провести эпидемиологические мероприятия, направленные на предотвращение локальных вспышек в стационаре

СРАВНИТЕЛЬНЫЙ АНАЛИЗ АКТИВНОСТИ ГЛИКОПЕПТИДОВ И ЛИНЕЗОЛИДА В ОТНОШЕНИИ НОЗОКОМИАЛЬНЫХ ШТАММОВ ГРАМПОЛОЖИТЕЛЬНЫХ МИКРООРГАНИЗМОВ, ВЫДЕЛЕННЫХ ОТ ОНКОЛОГИЧЕСКИХ ПАЦИЕНТОВ

The purpose of the study: to compare the activity of vancomycin, teicoplanin and linezolid and to determine their place in the current treatment of nosocomial infections caused by gram-positive microflora.Material and Methods. 640 gram-positive microorganisms (S. aureus, E. faecium, E. faecalis) isolated in 2018 from various pathological materials from cancer patients treated at N.N. Blokhin National Medical Research Center of Oncology were studied. Literature data from 1982 to 2019, concerning efficacy of glycopeptides (vancomycin, teicoplanin) and linezolid against these pathogens were analyzed.Results. Data analysis showed that percentage of methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA) was 89 % and percentage of vancomycinresistant enterococci (VRE) was 5.1 % among Enterococcus faecalis and 16.4 % among Enterococcus faecium. The susceptibility of the studied gram-positive microorganisms to teicoplanin, vancomycin and linezolid ranged from 83.3 to 98.8 % (p&gt;0.5). In general, teicoplanin, vancomycin, and linezolid had equally high microbiological activity against nosocomial strains of S. aureus and Enterococcus spp. Also, according to the literature data, a comparative assessment of the clinical effectiveness and cost-effectiveness of glycopeptides and linezolid was assessed.Conclusion. Vancomycin and teicoplanin are still the main drugs for the treatment of various infections caused by resistant gram-positive microflora. However, teicoplanin, with an efficacy equal to that of vancomycin, has a number of significant advantages over the latter: better tolerability, lower frequency of adverse reactions, and pharmacokinetic features that make it possible to use it once a day both intravenously and intramuscularly. Both drugs, along with linezolid, can be used to treat infections caused by gram-positive microorganisms in cancer patients. Цель исследования – сопоставление активности ванкомицина, тейкопланина и линезолида для определения их места в сегодняшней практике лечения нозокомиальных инфекций, вызванных грамположительной флорой.Материал и методы. Исследованы 640 грамположительных микроорганизмов (S. aureus, E. facium, E. faecalis), выделенных в 2018 г. из различных патологических материалов от онкологических больных в ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Блохина» МЗ РФ, а также проанализированы литературные данные с 1982 по 2019 г. об эффективности препаратов из группы гликопептидов (ванкомицин, тейкопланин) и линезолида в отношении данных возбудителей инфекции.Результаты. Анализ данных показал, что процент метициллин-резистентных Staphylococcus aureus (MRSA) составлял 89 %, ванкомицин-резистентных энтерококков (VRE) – 5,1 % среди Enterococcus faecalis и 16,4 % среди Enterocoсcus faecium. Чувствительность исследуемых грамположительных микроорганизмов к тейкопланину, ванкомицину и линезолиду составляла от 83,3 до 98,8 % (p&gt;0,5). В целом, тейкопланин, ванкомицин и линезолид обладали равновысокой микробиологической активностью в отношении нозокомиальных штаммов S. aureus и Enterococcus spp. Также по литературным данным произведена сравнительная оценка клинической эффективности и рентабельности применения гликопептидов и линезолида.Заключение. Ванкомицин и тейкопланин по-прежнему являются основными препаратами при лечении различных инфекций, вызываемых устойчивой грамположительной флорой. В то же время тейкопланин при равной с ванкомицином эффективности обладает по сравнению с последним рядом существенных преимуществ: лучшая переносимость, меньшая частота побочных реакций, фармакокинетические особенности, позволяющие применять его 1 раз в сут как внутривенно, так и внутримышечно, возможность ступенчатой терапии. Оба препарата, наряду с линезолидом, могут применяться для лечения инфекций, вызванных грамположительными микроорганизмами, у онкологических больных.

Нозокомиальные инфекции, вызванные Pseudomonas aeruginosa, в онкологической клинике

The purpose of the study was to evaluate the frequency of isolation of multi-resistant Pseudomonas aeruginosa and identify the mechanisms of resistance to carbapenems.Material and methods. We analyzed 866 strains of Pseudomonos aeruginosaisolated from clinical samples from cancer patients in the period 2014–2016. the level of resistance to piperacillin/tazobactam, ceftazidime, cefepime, imipenem, meropenem, ciprofloxacin, amikacin in dynamics was determined. carbapenem-resistant (car-R) strains were examined for the presence of enzymes.Results. Between 2014 and 2016, the number of strains resistant to piperacillin/tazobactam was 20.1–12.9 %, to ceftazidime – 33.0–32.9 %, to cefepime – 25.6–32.9 %, ciprofloxacin – 36.8–43.8 %, amikacin – 23.8–24.9 %. No statistically significant differences were found (p&gt;0.05). However, an increase in the number of car-R strains from 31.7 to 43.8 % was observed (p&lt;0.05). of 7 strains of P. aeruginosainvestigated for the presence of acquired carbapenemases, the production of metal-beta-lactamase of group Vimwas detected in 2 strains, and class acarbapenemases of the gEs-5 group in one strain.Conclusion. P. aeruginosaresistance to all antibiotic groups did not exceed 50 % and remained almost unchanged for 3 years, with the exception of the increase in car-R strains. three out of 7 (42.9 %) carbapenem-resistant strains were genetically stable.Цель исследования – оценить частоту выделения мультирезистентных Pseudomonas aeruginosaи выявить механизмы резистентности к карбапенемам.Материал и методы. Проанализировано 866 штаммов синегнойных палочек, выделенных из патологических материалов от онкологических больных в 2014–16 гг. Определен уровень резистентности к пиперациллину/тазобактаму, цефтазидиму, цефепи-му, имипенему, меропенему, ципрофлоксацину, амикацину в динамике. Резистентные к карбапенемам (car-R) штаммы исследовали на наличие ферментов.Результаты. Число штаммов, резистентных к пиперациллину/тазобактаму в период 2014–2016 гг., составляло 20,1 % и 12,9 %, цефтазидиму – 33,0–32,9 %, цефепиму – 25,6–32,9 %, ципрофлоксацину – 36,8–43,8 %, амикацину – 23,8–24,9 %. Разница во всех случаях недостоверна (p&gt;0,05). В то же время наблюдалось увеличение числа car-R штаммов с 31,7 до 43,8 % (p&lt;0,05). Анализ 7 штаммов в отношении приобретенных карбапенемаз выявил продукцию металло-бета-лактамаз группы Vimу 2 штаммов, gEs-5 – у 1 штамма.Заключение. Резистентность P. aeruginosaко всем группам антибиотиков не превышала 50 % и практически не изменялась в течение 3 лет, за исключением нарастания car-R штаммов. Из 7 (42,9 %) изученных карбапенем-резистентных штаммов 3 были устойчивы генетически

Infections caused by Clostridium difficile in cancer patients

The purpose of the study was to determine the role of antibiotics as a risk factor of Clostridium difficile-associated diarrhea in hospitalized cancer patients.Material and Methods. The study included 844 hospitalized cancer patients with diarrhea. The presence of Clostridium difficile toxins A and B in the fecal samples was determined by enzyme immunoassay.Results. Clostridium difficile toxins A and B were detected in 100 cancer patients (42 % men and 58 % women). The incidence of Clostridium difficile-associated diarrhea was higher in women than in men (р&lt;0.02). Patients with hemoblastosis and gastrointestinal tumors were more susceptible to the development of Clostridium difficile associated diarrhea (p&lt;0.02). The use of cephalosporin antibiotics was the main risk factor (р&lt;0.001). In our study, 46 % of the patients took antibiotics.Conclusion. Clostridium difficile was shown to play a significant role in the development of diarrhea in cancer patients, and early detection of Clostridium difficile infection contributes to the early onset of therapy

Cytomegalovirus infection of brain tumors and CMV immunotherapy

Objective. The article presents the literature of the last ten years and the results of our own research on the importance of cytomegalovirus (CMV) in the development of brain tumors, especially glioblastoma and medulloblastoma. Two alternative views are discussed - the pros and cons of the role of the virus in the induction and stimulation of tumor growth.Materials and methods. 256 samples of biotic material of tissues of various brain tumors were studied. Among them are histologically diagnosed: in 123 cases glial tumors of various grade of malignancy, in 51 cases meningiomas, in 25 cases medulloblastomas, in 16 cases oligodendroastrocytomas of the second grade of malignancy, in 14 cases metastatic tumors. Tumor fragments were obtained from biopsy material 1.5-2.0 hours after surgical removal. To detect the presence of CMV in the tumor tissue real-time polymerase chain reaction (PCR) using "DNA sorb A and B" kits was performed, the company "Amplisens" (Russia), according to the manufacturer’s instructions and BioRal device (USA) with standard DNA detection kits of CMV "DNA Technology" (Russia). Cytological imprints on slides were also made from tumor tissue fragments, which were examined by indirect immunofluorescence method with monoclonal antibodies to CMV pP-65 protein using the "MonoScan CMV" kit.Results. The frequency of detection of CMV antigen or its DNA in brain tissue depends on the research method - the immunofluorescence method detects pP-65 antigen by monoclonal antibodies 2-2.5 times more often than the PCR method of CMV in tumor tissue. In the tissue of different histogenesis of brain tumors both the pP-65 antigen and CMV DNA are detected with different frequencies. CMV was most often detected in tumors of glial origin and medulloblastomas. No CMV DNA was detected in the peripheral blood of patients with brain tumors at the time of admission for examination and surgical treatment, indicating an earlier contamination of the tumor focus with this virus. Data on the mechanisms of CMV induction and stimulation of tumor growth by activating cell proliferation, including nerve stem cells, are presented. Works using specific antiviral therapy and CMV specific cell immunotherapy in the treatment of gliomas have been analyzed in detail.Conclusions. The paper concludes on the important clinical and prognostic value of determining CMV infection in brain tumors and indicates the need for CMV viral and cellular immunotherapy in the combined treatment of malignant brain tumors