7 research outputs found
Method of obtaining of nonneuronal cultures of astrocytes, derivated from human mesenchymal stem cells
Objective. Elaboration of method for obtaining of nonneuronal cultures of astrocytes, derivatives from human mesenchymal stem cells of various origin.
Materials and methods. Mesenchymal stem cells were obtained from human peripheral and umbilical blood in accordance to standard procedure, using the immune-magnet separation method and distributed into three groups, depending on primary material of origin and the cellular differentiation technique applied: the cells, which were obtained from the umbilical blood and if our modified technique of differentiation (CBMSC) used, and the cells, which were obtained from peripheral blood and the differentiation technique used was standard (PBMSC-1) and modified (PBMSC-2) protocols. As primary antibodies standard sets β- III-Tubulin (Sigma, USA), GFAP, Nestin (Abcam) served, while as secondary antibodies - іmmunoglobulins G, conjugated by activators CNTF, BMP2/4 and FGF1 (Sigma, USA) in accordance to instruction. For visualization of the results obtained microscope EVOS FL LIFE TECHNOLOGIES was used with obtaining of view under ×40 objective.
Results. From majority of cells from the PBMSC-1 group the answer was not obtained, while from approximately 80% of all stimulated cells of the PBMSC-2 group the answer was obtained, and the both lines content consisted of 20 - 30% of GFAP-positive cells. This makes background to consider, that expression of GFAP only is insufficient to identify the mature and functional astrocytes.
Conclusion. Astrocytes from group PBMSC-1 have had answered very rarely on ATP-stimulation, while astrocytes from groups CBMSC and PBMSC-2 demonstrated characteristic answer. Thus, there was demonstrated, that morphologically close astrocytic lines and single cells owes different functional profile
ВПЛИВ ЕКСПЕРИМЕНТАЛЬНОГО ТУРНІКЕТА НА ІНТЕНСИВНІСТЬ ПЕРОКСИДНОГО ОКИСНЕННЯ ЛІПІДІВ У ВНУТРІШНІХ ОРГАНАХ ЩУРА
Кровотеча (К), що додатково ускладнюється ішемізуючим впливом кровоспинного джгута (Дж), активує пероксидне окиснення ліпідів (ПОЛ). Останнє за звичайних умов, не маючи системного патологічного впливу, може набирати розмаху, створюючи передумови до запуску синдрому системної запальної відповіді та розвитку синдрому поліорганної недостатності.
Мета дослідження – вивчити стан ПОЛ у печінці, нирках, легенях та серці в патогенезі експериментальної ішемії-реперфузії (ЕІР) у періоді гострої реакції на кровотечу та періоді ранніх проявів травматичної хвороби і порівняти зі змінами, що виникають на тлі ізольованої ішемії-реперфузії (Дж).
Матеріали і методи. Об’єктом дослідження стали 140 білих щурів-самців, яких поділили на 3 групи. Тварини контрольної групи були виведені з експерименту без оперативних втручань, тоді як у дослідних групах було змодельовано: накладання кровоспинного джгута на стегно (Дж) протягом двох годин; ізольовану крововтрату зі стегнової вени (40 %) (К); двогодинну ішемію, поєднану з крововтратою (Дж+К). Забій проводили на 1; 3; 7 та 14 доби після травми.
Результати досліджень та їх обговорення. Усі види експериментального втручання – ізольована кровотеча, ізольований турнікет та кровотеча, поєднана із кровоспинним джгутом, викликали достовірну за показниками активацію ПОЛ в усіх досліджуваних внутрішніх органах за рахунок гіперпродукції малонового діальдегіду (МДА), дієнових та трієнових кон’югатів.
Висновки. Отримані результати експериментів засвідчили суттєву активацію пероксидного окиснення ліпідів – у печінці й дещо слабше виражену – в нирках, серці та легенях. При цьому ізольоване накладання кровоспинного джгута запустило активацію ПОЛ, найвираженішу, аналогічно, в печінці. Показники групи Дж залишалися достовірно підвищеними, порівняно з початковим рівнем навіть на 14 добу, хоча і не так маніфестовано, як на тлі К та Дж+К
ПОРУШЕННЯ ВМІСТУ ВІДНОВЛЕНОГО ГЛУТАТІОНУ В ЛЕГЕНЯХ ЩУРІВ НА ТЛІ ГОСТРОЇ КРОВОВТРАТИ, УСКЛАДНЕНОЇ ІШЕМІЄЮ-РЕПЕРФУЗІЄЮ КІНЦІВКИ, ТА ЇХ КОРЕКЦІЯ КАРБАЦЕТАМОМ
Introduction. The lungs are organs that are particularly sensitive to systemic pathogens caused by acute blood loss and ischemic-reperfusion syndrome. They are based on the activation of lipoperoxidation processes with depletion of antioxidant protection. However, the dynamics of the content of reduced glutathione in the lungs under conditions of acute blood loss, ischemia-reperfusion of the limb and their combination is insufficiently studied, there is no data on the corrective effect of carbacetam.
The aim of the study – to determine the features of disorders of the content of reduced glutathione in the lungs of rats in the dynamics of acute blood loss complicated by ischemia-reperfusion of the limb, and the effectiveness of their correction with carbacetam.
Research Methods. The study was performed on 216 white nonlinear male rats weighing 200–220 g. All experiments were performed under thiopental-sodium anesthesia. In animals, limb ischemia-reperfusion and acute blood loss were simulated and these lesions were combined. In a separate group, the detected disorders were corrected with carbacetam. After 1 and 2 hours, as well as after 1, 7 and 14 days in the lungs of experimental animals was determined the content of reduced glutathione.
Results and Discussion. Under conditions of ischemia-reperfusion of the limb, the content of reduced glutathione in the lungs after 1 h of the experiment compared with the control increases significantly, which is obviously compensatory. In the future, the rate is statistically likely to decrease, but up to 14 hours again increases and reaches the level of control. In the conditions of acute blood loss, the content of reduced glutathione in all terms of observation in comparison with the control is significantly reduced and becomes smaller in comparison with the group in which only ischemia-reperfusion of the limb was modeled. After the complication of acute blood loss by ischemia-reperfusion of the limb, the disorders of the glutathione antiperoxidase system became even greater, especially after 7 and 14 days of the experiment. The use of carbacetam in conditions of ischemia-reperfusion of the limb, acute blood loss and their combination is accompanied by a pronounced positive effect, which was to reduce the cost of reduced glutathione in the neutralization of prooxidants and endotoxins in the lungs.
Conclusions. Simulation of acute blood loss and its complication by limb ischemia-reperfusion compared with control is accompanied by a decrease in the content of reduced glutathione in the lungs from 1 h to 14 days. Additional ischemia-reperfusion of the limb after 7 and 14 days causes a statistically greater decrease in the studied indicator. The use of carabcetam in these conditions compared with animals without correction in the lungs after 7 and 14 days is accompanied by less depletion of reduced glutathione. Вступление. Легкие относятся к органам, которые особо чувствительны к системным патогенным факторам, обусловленным острой кровопотерей и ишемическо-реперфузионным синдромом. В их основе лежит активация процессов липопероксидации с истощением антиоксидантной защиты. Однако динамика содержания восстановленного глутатиона (GSH) в легких в условиях острой кровопотери, ишемии-реперфузии конечности и их сочетания изучена недостаточно, нет данных о корректирующем влиянии карбацетама.
Цель исследования – выяснить особенности нарушений содержания восстановленного глутатиона в легких крыс в динамике острой кровопотери, осложненной ишемией-реперфузией конечности, и эффективность их коррекции карбацетамом.
Методы исследования. Исследование проведено на 216-ти белых нелинейных крысах-самцах массой 200–220 г. Все эксперименты выполнены под тиопентал-натриевым наркозом. У животных моделировали ишемию-реперфузию конечности, острую кровопотерю и сочетали эти повреждения. В отдельной группе проводили коррекцию выявленных нарушений карбацетамом. Через 1 и 2 ч, а также через 1, 7 и 14 суток в легких экспериментальных животных определяли содержание GSH.
Результаты и обсуждение. В условиях ишемии-реперфузии конечности содержание в легких GSH через 1 ч эксперимента, по сравнению с контролем, существенно возрастало, что, очевидно, носило компенсаторный характер. В дальнейшем показатель статистически достоверно снижался, однако к 14 ч повторно повышался и достигал уровня контроля. При острой кровопотери содержание GSH во все сроки наблюдения, по сравнению с контролем, существенно снижалось и становилось меньше по сравнению с группой, в которой моделировали только ишемию-реперфузию конечности. После осложнения острой кровопотери ишемией-реперфузией конечности глутатионовая антипероксидазная система нарушалась еще больше, особенно через 7 и 14 суток эксперимента. Применение карбацетама в условиях ишемии-реперфузии конечности, острой кровопотери и их сочетания сопровождалось выраженным положительным эффектом, который заключался в уменьшении затрат GSH в нейтрализации прооксидантных факторов и эндотоксинов в легких.
Выводы. Моделирование острой кровопотери и ее осложнения ишемией-реперфузией конечности, по сравнению с контролем, сопровождается уменьшением содержания в легких GSH с 1 ч до 14 суток. Дополнительная ишемия-реперфузия конечности через 7 и 14 суток приводит к статистически большему снижению исследуемого показателя. Применение в этих условиях карбацетама, по сравнению с животными без коррекции в легких, через 7 и 14 суток сопровождается меньшим истощением GSH.Вступ. Легені належать до органів, які особливо чутливі до системних патогенних чинників, зумовлених гострою крововтратою та ішемічно-реперфузійним синдромом. В їх основі лежить активація процесів ліпопероксидації з виснаженням антиоксидантного захисту. Однак динаміку вмісту відновленого глутатіону (GSH) у легенях за умов гострої крововтрати, ішемії-реперфузії кінцівки та їх поєднання вивчено недостатньо, немає даних про коригувальний вплив карбацетаму.
Мета дослідження – зʼясувати особливості порушень вмісту відновленого глутатіону в легенях щурів у динаміці гострої крововтрати, ускладненої ішемією-реперфузією кінцівки, та ефективність їх корекції карбацетамом.
Методи дослідження. Дослідження проведено на 216-ти білих нелінійних щурах-самцях масою 200–220 г. Усі експерименти виконано під тіопентал-натрієвим наркозом. У тварин моделювали ішемію-реперфузію кінцівки, гостру крововтрату і поєднували ці ушкодження. В окремій групі проводили корекцію виявлених порушень карбацетамом. Через 1 і 2 год, а також через 1, 7 та 14 діб у легенях піддослідних тварин визначали вміст GSH.
Результати й обговорення. За умов ішемії-реперфузії кінцівки вміст у легенях GSH через 1 год експерименту, порівняно з контролем, істотно зростав, що, очевидно, мало компенсаторний характер. У подальшому показник статистично вірогідно знижувався, проте до 14 год повторно підвищувався і досягав рівня контролю. При гострій крововтраті вміст GSH у всі терміни спостереження, порівняно з контролем, суттєво знижувався і ставав меншим порівняно з групою, в якій моделювали лише ішемію-реперфузію кінцівки. Після ускладнення гострої крововтрати ішемією-реперфузією кінцівки глутатіонова антипероксидазна система порушувалась ще більше, особливо через 7 і 14 діб експерименту. Застосування карбацетаму за умов ішемії-реперфузії кінцівки, гострої крововтрати та їх поєднання супроводжувалося вираженим позитивним ефектом, який полягав у зменшенні затрат GSH у нейтралізації прооксидантних чинників і ендотоксинів у легенях.
Висновки. Моделювання гострої крововтрати та її ускладнення ішемією-реперфузією кінцівки, порівняно з контролем, супроводжується зменшенням вмісту в легенях GSH з 1 год до 14 діб. Додаткова ішемія-реперфузія кінцівки через 7 і 14 діб призводить до статистично більшого зниження досліджуваного показника. Застосування за цих умов карбацетаму, порівняно з тваринами без корекції в легенях, через 7 і 14 діб супроводжується меншим виснаженням GSH
Effect of dietary propylene glycol or anti-ketosis supplement on biochemical parameters of cows blood plasma
Experiment was carried out in 6 groups of Ukrainian dairy black-and-white cows of 5 animals in a group. Cows were divided into 2 subgroups of 15 animals, each of one formed 3 groups: 1 control and 2 experimental. The diet of the first subgroup contains a soybean meal, and the second – a similar amount of soybean cake. To the ration of cows of 2-nd and 3-rd group propylene glycol or new developed dietary supplement were added. The trial lasted during the last month of the dry period and the first month of lactation. Addition of propylene glycol increased the concentration of glucose in the cows blood plasma (P < 0.05). Adding propylene glycol to the diet with soybean meal reduces the triacylglycerol content in the plasma by 21.22% (P < 0.05), addition of complex supplement to this diet, on the contrary, increases the content of triacylglycerols by 21.21% (P < 0.05). On the diet with soybean meal, propylene glycol and complex supplement reduced the amount of non-esterified fatty acids by 14.29% and 21.43% (P < 0.05), while with the soybean cake diet these differences were 21.22 and 40.39% (P < 0.05–0.001). Under the influence of feeding propylene glycol and the complex supplement, the total amount of ketone bodies in the blood plasma of cows consuming the soybean meal diet decreased 1.65 and 1.75 times (P < 0.001), and in the plasma of cows fed soybean cake diet 1.71 and 1.80 times (P < 0.001).Проведено дослід на 6 групах корів української молочної чорно-рябої породи по 5 тварин у групі. Корів розділили на 2 підгрупи по 15 голів, у кожній з яких сформували 3 групи по 5 голів: контрольну і 2 дослідні. Раціон першої підгрупи містив соєвий шрот, а другої – аналогічну кількість соєвої макухи. До раціону корів 2-ї та 3-ї груп додавали відповідно пропіленгліколь або кормову добавку. Дослід тривав протягом останнього місяця сухостою та першого місяця лактації. Додавання пропіленгліколю або кормової добавки збільшувало концентрацію глюкози у плазмі крові корів (P < 0,05). Додавання пропіленгліколю до раціону з соєвим шротом зменшувало вміст триацилгліцеролів у плазмі крові на 21,22% (P < 0,05), а при додаванні до цього раціону комплексної добавки вміст триацилгліцеролів, навпаки, зріс на 21,21% (P < 0,05). За використання раціону з соєвим шротом пропіленгліколь та комплексна добавка зменшували кількість неестерифікованих жирних кислот на 14,29 та 21,43% (P < 0,05), а при раціоні з соєвою макухою – на 21,22 та 40,39% (P < 0,05–0,001). Під впливом згодовування пропіленгліколю і комплексної добавки сумарна кількість кетонових тіл у плазмі крові корів, які отримували раціон з соєвим шротом, зменшилась у 1,65 та 1,75 раза (P < 0,001), а у плазмі крові корів, яких утримували на раціоні з соєвою макухою – у 1,71 та 1,80 рази (P < 0,001)
ІСТОРІЯ РОЗВИТКУ ШВИДКОЇ МЕДИЧНОЇ ДОПОМОГИ: ВІД МИНУЛОГО ДО СЬОГОДЕННЯ
The article describes the main stages of ambulance development as an integral part of medicine and medicine of disasters.У статті висвітлено основні етапи становлення та розвитку швидкої медичної допомоги як невід'ємної ланки екстремальної медицини та медицини катастроф
Вплив шишок хмелю і вітаміну Е на рубцеву ферментацію у корів після отелення
After calving cows get into negative energy balance accompanied by glucose deficiency and excessive release of fatty acids from adipose tissue. In assessing the metabolic status of cows during this period, the focus is on the violation of carbohydrate and lipid metabolism, but such important aspect as the ammonia intoxication, what is one of the factors of liver degeneration remains often out of attention. The main contribution to the formation of ammonia in the rumen is performed by gram-positive hyper ammonia producing bacteria (HAB). The activities of these bacteria are inhibited by ionophore antibiotics that are prohibited for use as a feed supplement in the EU. The substitute for antibiotics may be hop cones contained substances that selectively affect gram-positive bacteria, including HAB. However, ionophores inhibit cellulolytic bacteria activity too. High doses of dietary vitamin E can stimulate fiber degradation in the rumen. The purpose of our study was the possibility of use hops cones and vitamin E as a complex for prevention of metabolic disorders in the transition cows.
The experiment used twenty Ukrainian dairy black-and-white breed cows; milk yield 6000-7000 kg for previous lactation; divided into two groups 10 animals each. The first group is control. Diet of the second group was supplemented with (per kg DM) 1 g of dry hop cones and 300 mg of α-tocopherol acetate as a 0.6 g of Rovimix E-50 (NRC 2001 recommends 80 mg/kg for dry cows and 30 mg/kg for lactating cows). Experiment lasted during transition period (from 3 wk prepartum until 3 wk postpartum).
Supplementation the diet with hop cones and vitamin E has affected rumen fermentation. In particular, the feed additive stimulated cellulosolytic and suppressed proteolytic activities (p<0.01). Reduced proteolytic activity led to a decrease in ammonia concentration in the rumen (p<0.05). At the same time, the amount of microbial nitrogen in the rumen of the experimental group of cows has moderately increased, what indicates the absence of depress effect of the additive on the rumen microbiota in general. Differences in carbohydrate indices were not found. The concentration of lactate in rumen fluid of the cows of both groups did not differ, the total concentration of volatile fatty acids increased somewhat, however, this changes was quantitatively and statistically insignificant. Daily milk yield of the experimental group cows elevated by 4.5 % compared to the control group. Due to higher milk fat content, fat corrected milk yield was higher by 6.4 %.У досліді використано 2 групи сухостійних корів української молочної чорно-рябої породи з продуктивністю за попередню лактацію 6-7 тис. кг молока, по 10 тварин у групі. Тварини отримували стандартний збалансований раціон. Перша група – контрольна. До раціону корів другої групи додавали 300 мг α-токоферолу ацетату (0,6 г Ровімікс Е-50) та 1 г/кг сухих шишок хмелю на кг сухої речовини корму протягом останніх 3-х тижнів сухостою та перших трьох тижнів після отелення. Введення до раціону корів шишок хмелю та вітаміну Е вплинуло на перебіг рубцевої ферментації. Зокрема, досліджувана кормова добавка стимулювала целюлозолітичну та пригнічувала протеолітичну активність (p<0,01). Унаслідок вищої целюлозолітичної активності у вмісті зростала концентрація летких жирних кислот. Зниження протеолітичної активності призвело до зменшення концентрації аміаку в рубці (p<0,05). При цьому кількість мікробного азоту у вмісті рубця корів дослідної групи помірно зросла, що вказує на відсутність негативної дії добавки на мікрофлору в цілому. Добовий надій корів дослідної групи збільшився на 4,5 % порівняно до надою корів контрольної групи. Внаслідок дещо вищої жирності молока, надій на базисну жирність зріс на 6,4 %
Особливості вимірювання рівня рідини в басейні витримки відпрацьованого ядерного палива
There is a problem of reliable and precise level measurement in the high temperature and humidity applications (such as cooling pond for spent nuclear fuel). The influence of high pressure and temperature of water and steam on the results of water level measurement by polymetric sensors in the cooling-down pond for spent nuclear fuel is examined. The formulation for the static permittivity of water and steam at high temperatures and pressures is used for the modelling of the signal propagation and estimation of the level measurement error. The equations for the level measurement error under extreme conditions are presented. The reflectors (special parts of the transmission line) are used for the correction of the level measurement error caused by the dielectric permittivity change (temperature and pressure change, humidity change in the cooling pond).Рассмотрено влияние избыточного давления и высокой температуры воды в бассейне выдержки отработавшего ядерного топлива на погрешность измерения уровня рефлектометрическими датчиками. Получены и проанализированы соотношения для оценки погрешности измерения уровня воды в бассейне выдержки в экстремальных условиях в случае коррекции по реперному отражателю.Розглянуто вплив надлишкового тиску і високої температури води в басейні витримки відпрацьованого ядерного палива на похибку вимірювання рівня рефлектометричними датчиками. Отримано і проаналізовано співвідношення для оцінки похибки вимірювання рівня води в басейні витримки в екстремальних умовах у разі корекції за реперним відбивачем