Role of cytochrome c heme lyase in the import of cytochrome c into mitochondria

The import of cytochrome c into Neurospora crassa mitochondria was examined at distinct stages in vitro. The precursor protein, apocytochrome c, binds to mitochondria with high affinity and specificity but is not transported completely across the outer membrane in the absence of conversion to holocytochrome c. The bound apocytochrome c is accessible to externally added proteases but at the same time penetrates far enough through the outer membrane to interact with cytochrome c heme lyase. Formation of a complex in which apocytochrome c and cytochrome c heme lyase participate represents the rate-limiting step of cytochrome c import. Conversion from the bound state to holocytochrome c, on the other hand, occurs 10-30-fold faster. Association of apocytochrome c with cytochrome c heme lyase also takes place after solubilizing mitochondria with detergent. We conclude that the bound apocytochrome c, spanning the outer membrane, forms a complex with cytochrome c heme lyase from which it can react further to be converted to holocytochrome c and be translocated completely into the intermembrane space

Regulierung “light“ für kleinere Banken? Chancen und Gefahren für den Finanzplatz Schweiz

Die jüngste globale Finanzkrise brachte die erheblichen Mängel der damaligen Regulierung von Banken zum Vorschein. Die im Anschluss entstandene Dichte und Komplexität der Regulierung stellt in der Schweiz besonders kleinere Banken vor grosse Herausforderungen. Um dem entgegenzuwirken und die Heterogenität des Schweizer Finanzplatzes zu schützen, plant die Eidgenössische Finanzmarktaufsicht (FINMA), die Komplexität der Regulierung für Kleinbanken zu reduzieren. Dies sei laut FINMA, durch die Vereinfachung bzw. Befreiung gewisser Anforderungen im Bereich Eigenmittel und Liquidität sowie einer Überarbeitung des Prüfwesens zu erreichen. Die vorliegende Arbeit analysiert das regulatorische Umfeld für Kleinbanken in der Schweiz und befasst sich mit der Frage, welche Chancen und Risiken die von der FINMA vorgeschlagenen Erleichterungen für den heimischen Finanzplatz beinhalten. Dazu wird die Bedeutung des Bankensektors für die Schweizer Wirtschaft und anhand der bestehenden Sekundärliteratur die Notwendigkeit einer angemessenen Regulierung aufgezeigt. Anschliessend wird die Organisation des Schweizer Aufsichtssystems erläutert und die unterschiedlichen Arten von Banken in der Schweiz beschrieben. Die genauere Betrachtung der geplanten Erleichterungen für Kleinbanken gibt Aufschluss darüber, welche Institute und welche Bereiche von der Regulierung betroffen sein könnten

Anpassung eines Emulators zur Durchfuhrung von ¨ Hardwaretreiber-Unit-Tests am Beispiel des F-DPU Prozessors der ESA Raumfahrtmission PLATO

Softwareentwicklung in Raumfahrtprojekten erfordert von Entwicklern, den implementierten Code besonders ausführlich zu testen. Dabei werden sie vor die Herausforderung gestellt, dass die Zielhardware noch nicht oder nur in geringen Mengen zur Verfügung steht und dass bestimmte Fehlerfälle darauf nicht ausgelöst werden können. Eine mögliche Lösung für diese Probleme ist die Verwendung von Emulatoren. Diese Arbeit untersucht den quelloffenen Emulator Quick Emulator (QEMU) und den kommerziellen Emulator Terma Emulator (TEMU) von Terma jeweils auf ihre Eignung für die Durchführung von Hardwaretreiber Unittests der PLATO Fast Data Processing Unit Anwendungssoftware. Hierfür werden Kriterien definiert, auf die die ausgewählten Emulatoren untersucht werden. Diese Kriterien umfassen auf der einen Seite die Anpassung der Emulatoren auf das AHB Status Register der PLATO F-DPU. Ziel ist es auf den angepassten Emulatoren Unittests für die AHB Status Treiber der PLATO ASW auszuführen. Außerdem werden die Emulatoren auf die Möglichkeiten zum Einfügen von Fehlern, Einbettung in kontinuierliche Integration und Generierung von Daten für Testüberdeckung untersucht. Die Untersuchung ergibt, dass TEMU alle Kriterien vollständig oder teilweise erfüllt, für die Nutzung und den entsprechenden Support allerdings Gebühren gezahlt warden müssen. Die Anpassbarkeit beschränkt sich außerdem auf selbst implementierte Geräte. QEMU kann ebenfalls auf die F-DPU Hardware angepasst werden. Werkzeuge für die Fehlerinjektion und das Erfassen der Testüberdeckung sind in QEMU standardmäßig nicht implementiert. Da das Projekt quelloffen ist, können fehlende Funktionen selbst implementiert werden. Die Nutzung ist außerdem kostenfrei. Die Auswertung der Untersuchung führt zu dem Ergebnis, dass beide Emulatoren prinzipiell für die Durchführung von Tests für die PLATO F-DPU ASW geeignet sind. Die Entscheidung für einen der Emulatoren hängt von der Gewichtung der Kriterien Kosten, Verfügbarkeit und Anpassbarkeit ab

Per Zeitmaschine in die Klimageschichte

Wenn Klimaforscher in die Vergangenheit blicken, wollen sie für die Zukunft lernen. Daher rekonstruieren Victor Brovkin und seine Mitarbeiter am Hamburger Max-Planck-Institut für Meteorologie historische Klimaveränderungen und analysieren, durch welche Prozesse sie sich selbst verstärkten. Ihre Erkenntnisse helfen, die Zukunft des Blauen Planeten zu prognostizieren

Ein Ass im Klima-Poker

Forscher der Max-Planck-Institute für Evolutionsbiologie in Plön und für Meteorologie in Hamburg weisen einen Weg aus den festgefahrenen Klimakonferenzen

Expression in mammalian cells of a cloned gene encoding murine DNA methyltransferase

Mammalian DNA cytosine-5-methyltransferase (MTase, EC 2.1.1.37) is an essential component for establishing and maintaining cell-type specific methylation patterns in the genome. The cDNAfor the murine enzyme was previously cloned in segments. We have reconstructed the entire gene, encoding a protein of 1517 amino acids, from a set of overlapping CDNA clones. We report the assembly of two expression constructs in bacterial/mammalian shuttle vectors. Transcription in the first construct (pEMT) is driven by the cytomegalovirus enhancer/promoter and encodes a fusion protein with 15 additional aa at the N terminus, while the second construct (pJMT) is driven by the simian virus 40 early promoter/enhancer upstream from the natural ATG codon. Immunofluorescence microscopy and immunoblot analysis have shown that both constructs direct the synthesis of MTase in COS-1 cells. Enzyme activity in whole-cell lysates of transfected COS-1 cells transfected with pEMT and pJMT are on average tenfold and fivefold higher than in control, respectively. The specific activities of the recombinant and endogenous mouse-cell enzyme are similar. These expression constructs will be of use in studies of DNA methylation in mammals

Genomewide homozygosity mapping and molecular analysis of a candidate gene located on 22q13 (fibulin-1) in a previously undescribed vitreoretinal dystrophy

OBJECTIVES To localize the gene that causes an autosomal recessively inherited vitreoretinal dystrophy that has not been described, to our knowledge, and to analyze a candidate gene mapped to 22q13 (fibulin-1 [FBLN1]). METHODS Homozygosity mapping with 500 microsatellite markers spread over the whole genome (mean distance, 7.2 centimorgans [cM]) and mutation analysis of the complete coding region of FBLN1. RESULTS Homozygosity for all analyzed markers was found in the 4 affected siblings in a region on chromosome 22 encompassing 12 cM from D22S444 (centromeric) to D22S1170 (telomeric). Lod scores were between 0.017 and 2.36 (theta = 0). A mutation analysis of the complete coding region of FBLN1, which encodes interacting extracellular matrix proteins, revealed 4 previously undescribed single nucleotide polymorphisms. CONCLUSIONS A genomewide homozygosity mapping analysis supported the hypothesis that the gene responsible for a unique vitreoretinal dystrophy is located on chromosome 22q13. No obviously pathogenic mutation was found in the candidate gene, FBLN1

Tissue-specific expression of a FMR1/β-galactosidase fusion gene in transgenic mice

Fragile X syndrome is one of the most common genetic causes of mental retardation, yet the mechanisms controlling expression of the fragile X mental retardation gene FMR1 are poorly understood. To identify sequences regulating FMR1 transcription, transgenic mouse lines were established using a fusion gene consisting of an E.coli β-galactosidase reporter gene (lacZ) linked to a 2.8 kb fragment spanning the 5′-region of FMR1. Five transgenic mouse lines showed lacZ expression in brain, in particular in neurons of the hippocampus and the granular layer of the cerebellum. Expression of the reporter gene was also detected in Leydig cells and spermatogonia in the testis, in many epithelia of adult mice, and in the two other steroidogenic cell types, adrenal cortex cells and ovarian follicle cells. Embryonic tissues which showed strong activity of the reporter gene included the telencephalon, the genital ridge, and the notochord. This expression pattern closely resembles the endogenous one, indicating that the 5′ FMR1 gene promoter region used in this study contains most cis-acting elements regulating FMR1 transcriptio

Uniparental disomy 7 in Silver—Russell syndrome and primordial growth retardation

Maternal uniparental disomy for the entire chromosome 7 has so far been reported in three patients with intrauterine and postnatal growth retardation. Two were detected because they were homozygous for a cystic fibrosis mutation for which only the mother was heterozygous, and one because he was homozygous for a rare COL1A2 mutation. We investigated 35 patients with either the Silver-Russell syndrome or primordial growth retardation and their parents with PCR markers to search for uniparental disomy 7. Four of 35 patients were found to have maternal disomy, including three with isodisomy and one with heterodisomy. The data confirm the hypothetical localization of a maternally imprinted gene (or more than one such gene) on chromosome 7. It is suggested to search for UPD 7 in families with an offspring with sporadic Silver-Russell syndrome or primordial growth retardatio