Susceptibilidad de cultivos celulares de fibroblastos y macrófagos de murciélagos (Artibeus sp.) al virus dengue

El dengue es la enfermedad viral re-emergente transmitida por artrópodos más importante a nivel mundial y constituye uno de los mayores retos de la salud pública. En México, la Secretaría de Salud encontró que el número de casos de dengue incrementa año con año y durante el 2009 se reportaron 31836 casos, de los cuales 25929 son casos confirmados de Fiebre por Dengue (FD) y 5907 son casos confirmados de Dengue Hemorrágico (DH). A pesar de la morbilidad mundial causada por la infección con Virus Dengue (VD), ni la patogenia, ni el ciclo de trasmisión de este virus han sido comprendidas completamente. Hasta el momento se sabe que los humanos, así como los primates y los mosquitos son las únicas especies susceptibles de manera natural al virus; además, únicamente los humanos desarrollan las manifestaciones clínicas propias de la infección. Se ha visto que los pacientes con dengue muestran una variedad de tipos celulares como las células dendríticas, monocitos, macrófagos, linfocitos y células endoteliales que son infectadas a diferentes tiempos en el curso de la enfermedad, a demás, cultivos de líneas celulares de fibroblastos, macrófagos, epiteliales y endoteliales han mostrado poder replicar al virus de manera in vitro. En estudios previos realizados por nuestro grupo se encontró anticuerpos contra el VD y la presencia de la proteína no estructural NS1 y del VD2 en algunas especies de murciélagos, entre los que también se encuentran murciélagos Artibeus sp., siendo esta la primera evidencia que demuestra la presencia del VD en murciélagos de México. El objetivo del presente estudio es determinar si los cultivos de fibroblastos y macrófagos de murciélagos del Artibeus sp. son susceptibles a la infección por VD2. En este estudio se encontró que los cultivos primarios de fibroblastos procedentes de biopsias de la oreja de Artibeus sp. son refractarios a la infección. En cuanto a los cultivos primarios de macrófagos derivados de sangre periférica y bazo se encontró por citometría de flujo que existen dos poblaciones de monocitos/macrófagos que presentan el receptor de superficie CD14. Se detectó que las células CD14 positivas son permisivas al VD2 y además estas células se infectan con mayor velocidad que los macrófagos de humano. Como se sabe, el humano es el único reservorio que se ha descrito en el continente americano que puede replicar al VD de manera natural, el hecho de haber encontrado valores mayores de producción de proteína NS1 en los macrófagos de murciélago que en los de humano podría indicar una mayor o similar susceptibilidad a la infección. Este resultado resalta la posibilidad de que el VD pueda infectar a los murciélagos además de al ser humano en nuestro medio. Es necesario señalar que en nuestro país poco se sabe de las enfermedades transmitidas a través de la fauna silvestre, en especial los murciélagos, siendo este trabajo pionero en ese aspecto

Transcriptional identification of genes light-interacting in the extraretinal photoreceptors of the crayfish Procambarus clarkii

Crayfish serve as a model for studying the effect of environmental lighting on locomotor activity and neuroendocrine functions. The effects of light on this organism are mediated differentially by retinal and extraretinal photoreceptors located in the cerebroid ganglion and the pleonal nerve cord. However, some molecular aspects of the phototransduction cascade in the pleonal extraretinal photoreceptors remain unknown. In this study, transcriptome data from the pleonal nerve cord of the crayfish Procambarus clarkii (Girard,1852) were analyzed to identify transcripts that potentially interact with phototransduction process. The Illumina MiSeq System and the pipeline Phylogenetically Informed Annotation (PIA) were employed, which places uncharacterized genes into pre-calculated phylogenies of gene families. Here, for the first time 62 transcripts identified from the pleonal nerve cord that are related to light-interacting pathways are reported; they can be classified into the following 11 sets: 1) retinoid pathway in vertebrates and invertebrates, 2) photoreceptor specification, 3) rhabdomeric phototransduction, 4) opsins 5) ciliary phototransduction, 6) melanin synthesis, 7) pterin synthesis, 8) ommochrome synthesis, 9) heme synthesis, 10) diurnal clock, and 11) crystallins. Moreover, this analysis comparing the sequences located on the pleonal nerve cord to eyestalk sequences reported in other studies reveals 94–100% similarity between the 55 common proteins identified. These results show that both retinal and pleonal non-visual photoreceptors in the crayfish equally expressed the transcripts involved in light detection. Moreover, they suggest that the genes related to ocular and extraocular light perception in the crayfish P. clarkii use biosynthesis pathways and phototransduction cascades commons