Seroprevalence of Theileria equi and Babesia caballi in horses in Spain

Las piroplasmosis equinas son enfermedades parasitarias enzoóticas distribuidas en todo el mundo con una alta incidencia en regiones tropicales y subtropicales. En España, no hay suficientes datos epidemiológicos sobre las piroplasmosis equinas. El objetivo principal del presente estudio fue, por lo tanto, estimar la prevalencia de Theileria equi y Babesia caballi en cinco regiones y obtener información sobre los factores de riesgo. Este estudio se realizó en las regiones central y sudoeste de España, utilizando pruebas de anticuerpos de fluorescencia indirecta (IFAT) en 3,100 muestras de sueros de caballos aparentemente sanos de diferentes edades, razas, colores de pelaje, géneros y ubicaciones geográficas. La seroprevalencia global fue del 52%, consistente en un 44% de seropositivos para T. equi y un 21% para B. caballi. Hubo una asociación significativa entre la edad (p <0,0001), la raza (p <0,004), la ubicación geográfica (p <0,0001) y la seroprevalencia, pero ni el color del pelaje ni el género se asociaron significativamente con la prevalencia. Además, se demostró que la mayoría de las áreas geográficas mostraron una prevalencia de moderada a alta. El valor estadístico j se usó para comparar los resultados obtenidos por el IFAT y el ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas (cELISA) utilizado para analizar algunas muestras (n = 108) y mostró una mayor concordancia para T. equi (j = 0,68) que para B. caballi (j = 0.22). En consecuencia, esto reveló la importancia de desarrollar una técnica apropiada para detectar cada hemoparásito.Equine piroplasmoses are enzootic parasitic diseases distributed worldwide with high incidence in tropical and subtropical regions. In Spain, there is insufficient epidemiological data about equine piroplasmoses. The main aim of the present study was therefore to estimate the prevalence of Theileria equi and Babesia caballi in five regions and obtain information about the risk factors. This study was conducted in the central and south-western regions of Spain, using indirect fluorescence antibody testing (IFAT) in 3,100 sera samples from apparently healthy horses of different ages, breeds, coat colours, genders and geographical locations. The overall seroprevalence was 52%, consisting of 44% seropositive for T. equi and 21% for B. caballi. There was a significant association between age (p < 0.0001), breed (p < 0.004), geographical location (p < 0.0001) and the seroprevalence, but neither the coat colour nor the gender was significantly associated with prevalence. In addition, it was proved that most of the geographic areas showed a moderate to high prevalence. The statistical j value was used to compare the results obtained by the IFAT and the competitive enzyme-linked immunosorbent assay (cELISA) utilised to test some samples (n = 108) and showed a higher concordance for T. equi (j = 0.68) than for B. caballi (j = 0.22). Consequently, this revealed the importance of developing an appropriate technique to detect each haemoparasite.Junta de Extremadura y Fondos FEDER: Ayuda GR15085peerReviewe

Zoonotic "Enterocytozoon bieneusi" genotypes in free-ranging and farmed wild ungulates in Spain

Microsporidia comprises a diverse group of obligate, intracellular, and spore-forming parasites that infect a wide range of animals. Among them, Enterocytozoon bieneusi is the most frequently reported species in humans and other mammals and birds. Data on the epidemiology of E. bieneusi in wildlife are limited. Hence, E. bieneusi was investigated in eight wild ungulate species present in Spain (genera Ammotragus, Capra, Capreolus, Cervus, Dama, Ovis, Rupicapra, and Sus) by molecular methods. Faecal samples were collected from free-ranging (n = 1058) and farmed (n = 324) wild ungulates from five Spanish bioregions. The parasite was detected only in red deer (10.4%, 68/653) and wild boar (0.8%, 3/359). Enterocytozoon bieneusi infections were more common in farmed (19.4%, 63/324) than in wild (1.5%, 5/329) red deer. A total of 11 genotypes were identified in red deer, eight known (BEB6, BEB17, EbCar2, HLJD-V, MWC_d1, S5, Type IV, and Wildboar3) and three novel (DeerSpEb1, DeerSpEb2, and DeerSpEb3) genotypes. Mixed genotype infections were detected in 15.9% of farmed red deer. Two genotypes were identified in wild boar, a known (Wildboar3) and a novel (WildboarSpEb1) genotypes. All genotypes identified belonged to E. bieneusi zoonotic Groups 1 and 2. This study provides the most comprehensive epidemiological study of E. bieneusi in Spanish ungulates to date, representing the first evidence of the parasite in wild red deer populations worldwide. Spanish wild boars and red deer are reservoir of zoonotic genotypes of E. bieneusi and might play an underestimated role in the transmission of this microsporidian species to humans and other animal

Emergencia de la Fiebre Hemorrágica de Crimea-Congo en España

La Fiebre Hemorrágica de Crimea Congo (FHCC) es una enfermedad vírica que se transmite a los seres humanos, principalmente, a través de la picadura de garrapatas duras (Ixodidae). Su agente etiológico, un arbovirus denominado virus de la fiebre hemorrágica de Crimea Congo, pertenece al género Orthonairovirus (Familia Nairoviridae) presentando altas probabilidades de expansión geográfica en la Europa mediterránea debido, entre otros factores, al efecto del cambio climático sobre la población de garrapatas (Estrada-Peña et al., 2013). Como el virus de la FHCC no ocasiona signos clínicos evidentes en animales, la única evidencia de que el virus circula en un determinado foco geográfico es la aparición de casos “centinela” de enfermedad en humanos, en los que ocasiona graves procesos hemorrágicos de alta letalidad. Es una enfermedad eminentemente antrópica que fue descrita por primera vez en 1944, en soldados soviéticos que reocupaban territorios de Crimea; dichas áreas, por abandono de las actividades agrícolas eran abundantes en liebres, hospedadores propios para las larvas y ninfas de ixódidos vectores del virus. Más tarde, en 1956 se aisló el mismo virus en el Congo Belga (actual República Democrática del Congo), de ahí la nomenclatura del proceso vírico en estudio. Pese a que el virus tiene una amplísima dispersión en Eurasia y África, hace unos años se consideraba que existía un bajo riesgo de aparición de casos en España (OMS, 2008); todo ello pese a la presencia de dos factores ecológicos bien establecidos: abundancia de los vectores susceptible de transmisión, garrapatas del género Hyalomma (H. lusitanicum y H. marginatum), y alta densidad de animales vertebrados de grande y pequeño tamaño sobre los que se alimentan los diferentes estadios de las Hyalomma spp., y que actúan como hospedadores amplificadores del virus. (Foto 1). El presente artículo tiene como objeto exponer de un modo sintético los principales aspectos clínicos y epidemiológicos de la FHCC

Genetic Variation of the -tubulin Gene of Babesia caballi Strains

Background: Equine piroplasmosis is caused by two haemoprotozoan parasites: Babesia caballi and Theileria equi. Negative economic impact on international trade has been associated to endemic sites. This is the reason why carrier detection requires reliable diagnostic methods. Various diagnostic modalities can be used alone or in combination including PCR. However, genetic variation of commonly used genes is still of debate. The aim of this research was to sequence the b-tubulin gene of a B. caballi strain from Spain and to compare it with known b-tubulin sequences. Methods: DNA was isolated from a cryopreserved strain from Spain and acute and chronic carrier horses. Firstly, degenerated primer pairs were designed based on GenBank sequences of different Babesia and Theileria species for sequencing. The primers were redesigned to amplify both parasites, simultaneously. Finally, a species-specific pri­mer pair for B. caballi was designed and a Restriction Fragment Length Polymorphism-PCR (PCR-RFLP) assay performed to know the difference of known B. caballi strains. Results: We provided new insights of the b-tubulin gene and a good molecular coverage of this gene, contributing with a number of useful primers to amplify T. equi and B. caballi. Moreover, PCR-RFLP assays based on the exon II of this gene confirmed the causative B. caballi strain in Spanish horses. Conclusion: We reported useful primer pairs for diagnostic and a new sequence of the b-tubulin gene of B. caballi, which will facilitate the development of future assays and the detection of infected horses, preventing thus the spread of this disease worldwide

Genetic variation of the β-tubulin of two "Babesia caballi" strains

ANTECEDENTES: La piroplasmosis equina es causada por dos parásitos hemoprotozoarios: Babesia caballi y Theileria equi. El impacto económico negativo en el comercio internacional se ha asociado a sitios endémicos. Esta es la razón por la cual la detección de portadores requiere métodos de diagnóstico confiables. Se pueden usar varias modalidades de diagnóstico solas o en combinación, incluida la PCR. Sin embargo, la variación genética de los genes de uso común todavía es de debate. El objetivo de esta investigación fue secuenciar el gen de β-tubulina de una cepa de B. caballi de España y compararlo con las secuencias de β-tubulina conocidas. MÉTODOS: se aisló el ADN de una cepa crioconservada de España y caballos portadores agudos y crónicos. En primer lugar, los pares de cebadores degenerados se diseñaron según las secuencias de GenBank de diferentes especies de Babesia y Theileria para la secuenciación. Los cebadores fueron rediseñados para amplificar ambos parásitos, simultáneamente. Finalmente, se diseñó un par de cebadores específicos de especie para B. caballi y se realizó un ensayo de polimorfismo de longitud de fragmentos de restricción (PCR-RFLP) para conocer la diferencia de las cepas conocidas de B. caballi. RESULTADOS: Brindamos nuevos conocimientos sobre el gen de la β-tubulina y una buena cobertura molecular de este gen, contribuyendo con una serie de cebadores útiles para amplificar T. equi y B. caballi. Además, los ensayos de PCR-RFLP basados en el exón II de este gen confirmaron la cepa causante de B. caballi en caballos españoles. CONCLUSIÓN: Se informaron pares de cebadores útiles para el diagnóstico y una nueva secuencia del gen de la β-tubulina de B. caballi, que facilitará el desarrollo de ensayos futuros y la detección de caballos infectados, previniendo así la propagación de esta enfermedad en todo el mundo.BACKGROUND: Equine piroplasmosis is caused by two haemoprotozoan parasites: Babesia caballi and Theileria equi. Negative economic impact on international trade has been associated to endemic sites. This is the reason why carrier detection requires reliable diagnostic methods. Various diagnostic modalities can be used alone or in combination including PCR. However, genetic variation of commonly used genes is still of debate. The aim of this research was to sequence the β-tubulin gene of a B. caballi strain from Spain and to compare it with known β-tubulin sequences. METHODS: DNA was isolated from a cryopreserved strain from Spain and acute and chronic carrier horses. Firstly, degenerated primer pairs were designed based on GenBank sequences of different Babesia and Theileria species for sequencing. The primers were redesigned to amplify both parasites, simultaneously. Finally, a species-specific primer pair for B. caballi was designed and a Restriction Fragment Length Polymorphism-PCR (PCR-RFLP) assay performed to know the difference of known B. caballi strains. RESULTS: We provided new insights of the β-tubulin gene and a good molecular coverage of this gene, contributing with a number of useful primers to amplify T. equi and B. caballi. Moreover, PCR-RFLP assays based on the exon II of this gene confirmed the causative B. caballi strain in Spanish horses.peerReviewe

Influencia de la dehesa en la patología parasitaria del cerdo ibérico

Una raza de cerdo (Ibérico), y las características del medio en que se desarrolla, han determinado con el paso del tiempo, la existencia de un suino al que la selección natural ha dotado de un potencial genético responsable de la gran rusticidad y la capacidad de adaptación que le caracteriza, así como de la producción de piezas cárnicas selectas, que son las que condicionan de manera primordial su sistema de alimentación y explotación. La consecuencia de esta adaptación, en el aspecto sanitario, es sin duda su rusticidad con respecto al ambiente y su mayor resistencia a ciertos procesos patológicos endémicos y característicos de la zona.A breed of pig (Iberian), and the characteristics of the environment in which it develops, have determined over time, the existence of a pig to which natural selection has endowed a genetic potential responsible for the great hardiness and ability of adaptation that characterizes it, as well as the production of select meat pieces, which are the ones that primarily condition its feeding and exploitation system. The consequence of this adaptation, in the health aspect, is undoubtedly its rusticity with respect to the environment and its greater resistance to certain pathological processes endemic and characteristic of the area.peerReviewe

Contribución al estudio de las parasitosis ovina y caprina en la provincia de Cáceres

En este trabajo presentamos resultados parciales de un proyecto de investigación para la elaboración del Mapa Parasitológico de la provincia de Cáceres. Encontramos una parasitación en ovinos de un 82,9% y en caprinos de un 90,1%. En todos los casos determinamos las especies que encontramos y su distribución geográfica.In this work we present parcial results of an investigation project for make out the Parasitological Map of province of Cáceres. We found a parasitation in sheep of a 82,9% and in goats of a 90,1%. In ali cases we determine the especies that we found and their geografic distribution.peerReviewe