Identificação das vias de sinalização anti-apoptóticas em células estaminais cancerígenas de osteossarcoma

Introdução: O osteossarcoma é o cancro ósseo maligno primário mais frequente em crianças e adolescentes. Este tumor resulta da ocorrência de mutações genéticas e epigenéticas em células estaminais mesenquimais durante o processo de diferenciação osteoblática. Estudos recentes demonstraram que o osteossarcoma contém uma subpopulação de células com características de células estaminais cancerígenas (CSCs) e que são elas as responsáveis pela iniciação e progressão do tumor, bem como pela resistência às terapias convencionais incluindo a quimioterapia e radioterapia. Este trabalho teve por objectivo explorar o papel da via intrínseca ou mitocondrial da apoptose na resposta das CSCs aos efeitos citotóxicos da doxorubicina (DOX). Métodos: As CSCs foram isoladas a partir da linha celular humana de OS MNNG/HOS pelo método de formação de esferas e incubadas com diferentes concentrações de DOX durante 48h. A citotoxicidade da DOX foi avaliada com base em vários parâmetros: efeitos sobre a viabilidade celular (método colorimétrico de MTT); proliferação celular (método de incorporação com BrdU) e indução de apoptose (ensaio de TUNEL). Os níveis de expressão das proteínas anti-apoptóticas Bcl-2 e Bcl-XL, pró-apoptóticas Bak e Bax, e da caspase-3 foram analisados pela técnica de Western blot após incubação com DOX. Resultados: A cultura das células aderentes MNNG/HOS em condições de baixa aderência e na ausência de soro permitiu fazer o isolamento das CSCs sob a forma de colónias esféricas com elevada capacidade de auto-renovação. Os estudos de citotoxicidade mostraram que as CSCs são mais resistentes à DOX do que as células parentais MNNG/HOS. A concentração de DOX necessária para reduzir a viabilidade celular das CSCs em 50% foi de 2,21±0,50 μM, significativamente (p<0,05) superior à obtida para as células parentais MNNG/HOS (0,67±0,17 μM). Pelo contrário, a concentração de DOX que reduziu a proliferação celular em 50% foi de 0,03±0,01 μM para as CSCs, significativamente inferior (p<0,05) ao valor observado nas células parentais MNNG/HOS (0,19±0,06 μM). Nas células parentais MNNG/HOS observou-se um aumento na percentagem de células em apoptose dependente da dose de DOX variando de 1% a 21%, enquanto nas CSCs, a percentagem foi aproximadamente constante, nunca ultrapassando os 3% para o mesmo intervalo de concentrações. A exposição das CSCs à DOX induziu um aumento significativo nos níveis de expressão das proteínas anti-apoptóticas Bcl-2 e Bcl-XL e uma concomitante diminuição na expressão da proteína pró-apoptótica Bak e da caspase-3. Conclusões: A linha celular humana de OS MNNG/HOS contém uma subpopulação de células com propriedades de células estaminais que são relativamente mais resistentes à DOX do que as células parentais. A sobreexpressão da Bcl-2 e da Bcl-XL em simultâneo com a diminuição da Bak xvi parecem contribuir para a maior resistência destas células à apoptose induzida pela DOX. A capacidade que as CSCs têm em reduzirem a sua taxa de proliferação quando expostas a concentrações não tóxicas de DOX, permite-lhes evadirem efeitos citotóxicos da DOX que tem como alvo preferencial células com elevada actividade proliferativa. Palavras-chave: osteossarcoma; células estaminais cancerígenas; doxorrubicina; proteínas anti- e pró-apoptóticas, apoptos

Policy recommendations on creative tourism development in small cities and rural areas

Based on CREATOUR’s findings, this policy-oriented briefing report proposes recommendations to authorities and agencies at all levels (national, regional, and local) relating to the development of creative tourism initiatives in small cities and rural areas in Portugal. It is centrally informed by the needs of the CREATOUR pilot organizations, which were articulated within discussions between researchers and practitioners. We also considered public policies related to rural tourism development and the types of public policies needed to foster and support cultural and creative organizations in small cities and rural areas. The recommendations recognize and reinforce the need to develop new structures to foster ongoing interconnections between the cultural and tourism sectors

Antihypertensives knowledge – assessment in higher education students through digital game-based learning

Hypertension has been described as the most prevalent risk factor for cardiovascular diseases, which are the main cause of death worldwide. In Portugal, in 2015, its prevalence was of 36%. This pathology’s therapeutic success depends upon a good knowledge about the therapeutic alternatives available.There is, therefore, imperative to insure that the learning process is efficient. In order to improve it, in a more appealing and effective way, there has been an increase in the employ of digital tools.info:eu-repo/semantics/publishedVersio

Recomendações políticas para o desenvolvimento do turismo criativo em cidades de pequena dimensão e áreas rurais

Com base nos resultados do CREATOUR, o presente relatório, apontado a políticas concretas, propõe recomendações às autoridades e organismos a todos os níveis (nacional, regional e local) a propósito do desenvolvimento de iniciativas de turismo criativo em cidades de pequena dimensão e áreas rurais de Portugal. O relatório tem primordialmente por base as necessidades das organizações-piloto do CREATOUR, por sua vez decorrentes de discussões entre investigadores e profissionais. Foram também tomadas em consideração as políticas públicas sobre o desenvolvimento do turismo rural e os tipos de políticas públicas necessários à promoção e apoio das organizações culturais e criativas em cidades de pequena dimensão e áreas rurais. As recomendações reconhecem e sublinham a necessidade de desenvolver novas estruturas destinadas a promover formas permanentes de interligação entre os setores cultural e turístico

Embryonic and larval development of Gobius paganellus (Pisces: Gobiidae)

The full developmental sequence from egg to juvenile of Gobius paganellus under controlled conditions is described. Embryonic development lasted 9-10 days at 18.5-20.0ºC and 10-11 days at 15.0-16.5ºC. Newly hatched larvae measured 3.90 mm, had the mouth and anus opened, pigmented eyes and almost no yolk. They ¢rst settled 25 days after hatching (10.0-10.5mm total length [TL]) and showed juvenile behaviour and body form 36 days after hatching (14.0mmTL). However, they only showed full juvenile pigmentation patterns 15 days later (17.0mmTL) (16.0-16.5ºC). In addition, a preliminary di¡erentiation between the newly hatched larvae of the most common Gobius species of south-western European shores is presented

Turismo criativo - Guia para profissionais: Como regenerar comunidades e lugares aliando cultura, turismo e criatividade?.

O presente folheto visa esclarecer e orientar profi ssionais do setor cultural e criativo e do setor do turismo que desenvolvam ou pretendam desenvolver projetos de turismo criativo com base em práticas colaborativas, em particular, em áreas rurais e cidades de pequena dimensão

Comparative Effectiveness of COVID-19 Vaccines in Preventing Infections and Disease Progression from SARS-CoV-2 Omicron BA.5 and BA.2, Portugal

We estimated comparative primary and booster vaccine effectiveness (VE) of SARS-CoV-2 Omicron BA.5 and BA.2 lineages against infection and disease progression. During April-June 2022, we implemented a case-case and cohort study and classified lineages using whole-genome sequencing or spike gene target failure. For the case-case study, we estimated the adjusted odds ratios (aORs) of vaccination using a logistic regression. For the cohort study, we estimated VE against disease progression using a penalized logistic regression. We observed no reduced VE for primary (aOR 1.07 [95% CI 0.93-1.23]) or booster (aOR 0.96 [95% CI 0.84-1.09]) vaccination against BA.5 infection. Among BA.5 case-patients, booster VE against progression to hospitalization was lower than that among BA.2 case-patients (VE 77% [95% CI 49%-90%] vs. VE 93% [95% CI 86%-97%]). Although booster vaccination is less effective against BA.5 than against BA.2, it offers substantial protection against progression from BA.5 infection to severe disease.The acquisition of sequencing equipment and reagents used in this study by the Instituto Nacional de Saúde Doutor Ricardo Jorge was partially funded by the HERA project (grant no. 2021/PHF/23776) supported by the European Commission through the European Centre for Disease Control, and also partially funded by the GenomePT project (grant no. POCI-01-0145-FEDER-022184), supported by COMPETE 2020–Operational Programme for Competitiveness and Internationalisation, Lisboa Portugal Regional Operational Programme, Algarve Portugal Regional Operational, under the Portugal 2020 Partnership Agreement, through the European Regional Development Fund, and by the Portuguese Science and Technology Foundation. Algarve Biomedical Center Laboratory received public funding through the Project ALG-D2-2021-06 Variants Screen in Southern Portugal– Monitoring Variants of Concern in Southern Portugal and the Portuguese Science and Technology Foundation national support through the Comprehensive Health Research Center (grant no. UIDP/04923/2020)info:eu-repo/semantics/publishedVersio