Establishment of culture conditions for bio-transformation of R-(+)-limonene to limonene-1,2-diol by colletotrichum nymphaeae CBMAI 0864

Before reaching commercial scale, a biotechnological process must be well characterized in terms of process conditions. Thus, this study aimed to investigate the culture conditions in limonene bio-transformation to limonene-1,2-diol by Colletotrichum nymphaeae. The results revealed that this bio-process was aerobic, suggesting that aeration is an important parameter to be considered on a larger scale (e.g. bio-reactors). Moreover, a single feeding of R-(+)-limonene (15 g.L-1) at the start of the bio-transformation resulted in the highest concentration (4.19 g.L-1) and yield (27.9%, w.w(-1)) of limonene-1,2-diol, indicating that fed-batch operation was not a good choice. In terms of biomass age, 72 h-old biomass performed better when compared to 24 or 48 h-old biomasses. Substrate induction test suggested that this bio-transformation is carried out by non-inducible enzymes. Three successive freeze-thawing processes did not present any observable change in the production, indicating that the biomass could be stored frozen. It was also evidenced that the use of resting cells was as efficient as growing cells, and, therefore, biomass recovery/re-suspension was unnecessary. Although feasible, the bio-transformation in an aqueous-hexadecane biphasic system was not indicated for this process, since lower concentration of diol was obtained. These results are very important to guide scaled-up studies of this bio-transformation process78814CONSELHO NACIONAL DE DESENVOLVIMENTO CIENTÍFICO E TECNOLÓGICO - CNPQCOORDENAÇÃO DE APERFEIÇOAMENTO DE PESSOAL DE NÍVEL SUPERIOR - CAPESFUNDAÇÃO DE AMPARO À PESQUISA DO ESTADO DE SÃO PAULO - FAPESP473981/2012-2; 400411/2016-4não tem2016/21619-

Processo De Tratamento De Efluente Papeleiro Kraft E1 Pelo Sistema De Enzima-mediador: Lacase-hidroxamatos

Este processo refere-se a uma metodologia no tratamento de efluente E1 pelo sistema lacase-mediador. O valor máximo atingido de diminuição de fenóis na ausência de mediadores foi de 23%. O 1-hidroxibenzotriazol (HBT) não apresentou efeito significativo em efluentes kraft. Dos mediadores estudados os hidroxamatos foram os mais eficientes no tratamento do efluente kraft E1 . Entre os hidroxamatos o ácido acetohidroxâmico (AHA-), foi o mais eficiente na degradação de fenóis (70%) e no carbono orgânico total (73%) e não apresentou degradação significativa pela lacase.BR0002329 (B1); BR0002329 (A)C02F3/00C02F3/00BR20000002329C02F3/00C02F3/0

Odabir plijesni Aspergillus fumigatus za proizvodnju prebiotičkih ksilooligosaharida na podlozi od šećerne trske

Sugarcane bagasse is an important lignocellulosic material studied for the production of xylooligosaccharides (XOS). Some XOS are considered soluble dietary fibre, with low caloric value and prebiotic effect, but they are expensive and not easily available. In a screening of 138 fungi, only nine were shortlisted, and just Aspergillus fumigatus M51 (35.6 U/mL) and A. fumigatus U2370 (28.5 U/mL) were selected as the most significant producers of xylanases. These fungi had low β-xylosidase activity, which is desirable for the production of XOS. The xylanases from Trichoderma reesei CCT 2768, A. fumigatus M51 and A. fumigatus U2370 gave a significantly higher XOS yield, 11.9, 14.7 and 7.9 % respectively, in a 3-hour reaction with hemicellulose from sugarcane bagasse. These enzymes are relatively thermostable at 40–50 °C and can be used in a wide range of pH values. Furthermore, these xylanases produced more prebiotic XOS (xylobiose and xylotriose) when compared with a commercial xylanase. The xylanases from A. fumigatus M51 reached a high level of XOS production (37.6 %) in 48–72 h using hemicellulose extracted from sugarcane bagasse. This yield represents 68.8 kg of prebiotic XOS per metric tonne of cane bagasse. In addition, in a biorefinery, after hemicellulose extraction for XOS production, the residual cellulose could be used for the production of second-generation ethanol.Šećerna trska je važan lignocelulozni materijal koji se koristi za ispitivanje proizvodnje ksilooligosaharida. Neki se ksilooligosaharidi upotrebljavaju u prehrani kao topljiva vlakna niske kalorijske vrijednosti s prebiotičkim učinkom, ali su skupi i teško dostupni. Od 138 plijesni u uži je izbor ušlo samo njih devet, od kojih su odabrana samo dva soja što su proizvela najviše ksilanaza, i to Aspergillus fumigatus M51 (35,6 U/mL) i A. fumigatus U2370 (28,5 u/mL). Aktivnost β-ksilozidaze u tim sojevima bila je vrlo slaba, što je pogodovalo nastanku ksilooligosaharida. Djelovanjem ksilanaza su nakon tri sata iz šećerne trske razgradnjom hemiceluloze dobivene veće količine ksilooligosaharida, i to 11,9 % s pomoću plijesni Trichoderma reesei CCT 2768; 14,7 % s pomoću A. fumigatus M51 i 7,9 % s pomoću A. fumigatus U2370. Ti su enzimi relativno termostabilni na temperaturama od 40 do 50 °C, a mogu se koristiti pri različitim pH-vrijednostima. Osim toga, u usporedbi s komercijalnom ksilanazom, ove su ksilanaze proizvele više prebiotičkih ksilooligosaharida (ksilobioze i ksilotrioze). Razgradnjom hemiceluloze izolirane iz šećerne trske pomoću ksilanaze iz plijesni A. fumigatus M51 dobivena je znatna količina (37,6 %) ksilooligosaharida nakon 48-72 sata hidrolize, što odgovara prinosu od 68,8 kg prebiotičkih ksilooligosaharida po toni šećerne trske. Osim toga, nakon izdvajanja hemiceluloze za proizvodnju ksilooligosaharida, preostali dio celuloze može se upotrijebiti u rafineriji za proizvodnju druge generacije biogoriva

Produção e caracterização bioquimica de monoacilglicerol lipase microbiana e aplicação de lipases na hidrolise e esterificação enzimatica

Orientador: Yong Kun ParkTese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de AlimentosResumo: Um mil duzentas e oitenta e cinco linhagens de microrganismos foram isoladas de amostras de solo, frutas, resíduos industriais e testados quanto a capacidade de hidrolisar glicerídeos. Oito linhagens de Fungos foram relacionadas preliminarmente como produtoras de enzimas lipolíticas. Entre estas, uma linhagem identificada como Trichoderma sp apresentou alta produção de lipase. A enzima lipolítica de Trichoderma sp hidrolizou as ligações éster de monoleína, dioleína e do substrato paranitrofenillaurato. A enzima pode ser classificada como uma lipase (glicerol-mono éster hidrolase E.C. 3.1.1.23). Estudou-se a produção de lipase extracelular pela linhagem selecionada de Trichoderma sp e a enzima foi purificada através de fracionamento com sulfato de amônio, cromatografia em coluna de DEAE-celulose e CM-celulose. A enzima purificada foi caracterizada e apresentou atividade ótima em pH 5.6 a 40 - 45°C. A atividade enzimática foi severamente afetada pela presença de MgSO4, MnSO4, FeSO4, na concentração de 1 mM de sal em relação ao volume final da mistura de reação, enquanto que KCl, CaCl2, NiSO4, inibiram moderamente a atividade de lipase.O reagente cisteína na concentração de 1 mM em relação ao volume final da mistura de reação inibiu significativamente a atividade enzimática. Verificou-se que a lipase de Trichoderma sp hidrolisa eficientemente monoleína e paranitrofenillaurato. A enzima não tem afinidade por trioleína. A hidrólise de óleo de oliva por via enzimática foi estudada utilizando-se lipases combinadas. Foi verificado que o sistema composto de lipase de Cândida rugosa e lipase de Penicillium sp hidrolisou 95,9% do óleo com o tempo de reação de 20 horas. A esterificação enzimática de ácido graxo e glicerol por lipase de Penicillium sp foi examinada e verificou-se que a enzima esterificou cerca de 71% de monoglicerídeo após 40 horas de reaçãoAbstract: The screening of lipase producing microorganisms was performed using 1,283 strains of microorganism which were isolated from samples of soil, fruits, and industrial residues. It was found that eight strains of fungi produced high activity of extracellular lipase and one of them produced exceptionally high lipase activity. This strains was identified as Trichederma sp, and he lipase from the strain hydrolised only monoolein, diolein and p-nitrephenyl laurate. For this reason, the lipase was classified as monoglyecride lipase (monoacylglycerol lipase E.C. 3.1.1.23). The lipase from Tric:hederma sp, was produced by solid state fermentation and submerse fermentation. The enzyme extracts were purified by fractionation with ammonium sulfate, DEAE-cellulose and CM-cellulose column chromatography. The purified enzyme was e:haracteri2ed and found that optimum pH and temperature were 5.6 and 40-45°C. MgSO4, MnSO4 and FeSO4, 1 mM, markably inhibited enzyme activity and KCl, CaCl2 and NiS04, 1 mM, slightly inhibited, Cysteine 1 mM significantly inhibited the enzyme activity. The enzyme also efficiently hydrolised monoolein and p-nitrophenyl laurate but not triolein. It was studied a combined enzyme system, which was a mixture of triacylglycerol lipase (from Candida ruqosa) and monoacylglycerol lipase (from Penicillium sp.), for hydrolyses of olive oil. It was found that the combined enzyme system was able to hydrolyse 95.9% the oil, when the reaction time was 20 hours. Enzymatic esterification using glycerol and fatty acid by lipase from Penicillium sp was also examined. It was found that the reaction system esterified 71% monoglyceride after 40 hours of reaction timeDoutoradoDoutor em Ciência de Alimento

Produção, purificação, estudos das propriedades e aplicação da B-galactosidase de Scopulariopsis Sp

Orientador: Young Kun ParkDissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de AlimentosUm mil e sessenta e sete linhagens de fungos foram isoladas do solo e.testadas quanto à capacidade de produzir ß-galactosidase. Foi encontrada uma linhagem, classificada como Scopulariopsis sp, que produz alta atividade de ß ¿galactosidase. Estudou-se a produção e a purificação de ß -galactosidase de Scopulariopsis sp e determinou-se as características da enzima purificada. A enzima foi produzida por fermentação semi-sólida, usando-se farelo de trigo para cultura do microorganismo. A enzima bruta suficientemente hidrolisa lactose em soro de leite. A enzima bruta foi purificada fracionamento, com sulfato de amônia e cromatografia em coluna por de DEAE-celulose e CM-celulose. A enzima purificada foi caracterizada verificando-se sua homogeneidade eletroforeticamente e seu peso molecular estimado ser 95 000, através do método de eletroforese em gel SDS poliacrilamida. O pH ótimo para atividade enzimática foi entre 3,6 a 5,0, usando-se ONPG (Orto-Nitrofenil ß -D-Galactoperanosideo) como substrato e com lactose como substrato o pH ótimo foi 4,5. A temperatura ótima para atividade enzimática foi 65 °C para ONPG e 55 °C para lactose. A atividade enzimática não sofre efeito pela adição de íons metálicos como CaC12, MgC12, KCl e outros reagentes como MnS04, NiS04, CuS04, porém foi verificado que AgN03 tem algum efeito inibitório sobre a atividade enzimática. Galactose inibe a ação da enzima, enquanto glicose não inibe. Dietilditiocarbamato de sódio (10mM). p-hidroximercuribenzoato (10 mM). mercaptoetanol (10 mM). não inibem a atividade enzimática Por isto, grupos sulfidrilas da molécula da enzima não estão envolvidos na atividade catalítica. A ß -galactosidase de, Scopulariopsis sp hidrolisou quase completamente (95 %) a lactose contida em soro ácido de leite (pH 4,5), após 50 horas de incubação a 55 °C, quando a atividade enzimática era 250 unidades por 100ml de soro de leiteAbstract: One thousand and sixty seven strain of fungi were isolated from soil and examined for their capacity for production of ß-galactosidase. It was found that one strain wich is classified a Scopulariopsissp has produced the highest activity of ß-galactosidase. Production and purification of ß-galactosidase from Scopulariopsis sp were attempted and characterization of the purified enzyme was performed. The enzyme was produced by semisolid fermentation using wheat bran culture of the microrganismo The crude enzyme suffici ently hydrolyzeq lactose in acid whey. The crude enzyme was purified by fractionation with ammonium sulfate, a DEAE-cellulose and CM-cellulose column graphies. The purified enzyme was characterized and found that chromato¬ was electrophoretically homogeneous and its molecular weight was estimated to be 95 000 by SDS-polyacrylamide gel electrophoresis. The optimum pH of the enzyme activity was between 3,6 and 5,0 when ONPG was used as substrate, and with lactose as substrate the optimum pH was 4,5. The optimum temperature was 65 °C to ONPG and 55 °C to Lactose. The activity did not suffer any effect by the addition of metals ions as CaC12, MgCI2, KCI and others reagents such as MnS04, NiS04, CuS04 but AgN03 has some innhibitery effect on the enzyme activity. Galactose inhibits enzyme activity where as glucose did not. Sodium diethildithio carbomate (10 mM), p-hydroxymercuribenzoate (10 mM), mercaptoethanol (10 mM) did not inhibit enzyme activity. Thus sulfydryl groups molecule are not involved in the catalytic activity. The ß-galactosidase from Scopulariopsis sp, hidrolyzed quite completely (95 %) the lactose content present in acid whey (pH 4,5) after 50 hr of incubation at 55 °C, when the enzyme activity was 250 units per100 ml of acid wheyMestradoMestre em Ciência de Alimento

Helge Larsen: Fra liberalisme til radikalisme. Københavns liberale Vælgerforening 1883-1908. (Odense Universitetsforlag, 1985). 165 s., 146,40 kr.

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Pectinases: aplicações industriais e perspectivas Pectinolytic enzymes: industrial applications and future perspectives

<abstract language="eng">Pectic substances are structural heteropolysaccharides that occur in the middle lamellae and primary cell walls of higher plants. They are composed of partially methyl-esterified galacturonic acid residues linked by alpha-1, 4-glycosidic bonds. Pectinolytic enzymes are complex enzymes that degrade pectic polymers and there are several classes of enzymes, which include pectin esterases, pectin and pectate lyases and polygalacturonases. Plants, filamentous fungi, bacteria and yeasts are able to produce pectinases. In the industrial world, pectinases are used in fruit juice clarification, in the production of wine, in the extraction of olive oil, fiber degumming and fermentation of tea, coffee and cocoa