Surface Structures Involved in Plant Stomata and Leaf Colonization by Shiga-Toxigenic Escherichia Coli O157:H7

Shiga-toxigenic Escherichia coli (STEC) O157:H7 uses a myriad of surface adhesive appendages including pili, flagella, and the type 3 secretion system (T3SS) to adhere to and inflict damage to the human gut mucosa. Consumption of contaminated ground beef, milk, juices, water, or leafy greens has been associated with outbreaks of diarrheal disease in humans due to STEC. The aim of this study was to investigate which of the known STEC O157:H7 adherence factors mediate colonization of baby spinach leaves and where the bacteria reside within tainted leaves. We found that STEC O157:H7 colonizes baby spinach leaves through the coordinated production of curli, the E. coli common pilus, hemorrhagic coli type 4 pilus, flagella, and T3SS. Electron microscopy analysis of tainted leaves revealed STEC bacteria in the internal cavity of the stomata, in intercellular spaces, and within vascular tissue (xylem and phloem), where the bacteria were protected from the bactericidal effect of gentamicin, sodium hypochlorite or ozonated water treatments. We confirmed that the T3S escN mutant showed a reduced number of bacteria within the stomata suggesting that T3S is required for the successful colonization of leaves. In agreement, non-pathogenic E. coli K-12 strain DH5α transformed with a plasmid carrying the locus of enterocyte effacement (LEE) pathogenicity island, harboring the T3SS and effector genes, internalized into stomata more efficiently than without the LEE. This study highlights a role for pili, flagella, and T3SS in the interaction of STEC with spinach leaves. Colonization of plant stomata and internal tissues may constitute a strategy by which STEC survives in a nutrient-rich microenvironment protected from external foes and may be a potential source for human infection

Opportunities for antibiotic optimisation and outcome improvement in patients with negative blood cultures: study protocol for a cluster-­randomised crossover trial, the NO-­BACT study.

Introduction Patients with negative blood cultures (BCx) represent 85%–90% of all patients with BCx taken during hospital admission. This population usually includes a heterogeneous group of patients admitted with infectious diseases or febrile syndromes that require a blood culture. There is very little evidence of the clinical characteristics and antibiotic treatment given to these patients. Methods and analysis In a preliminary exploratory prospective cohort study of patients with BCx taken, the clinical/therapeutic characteristics and outcomes/ antimicrobial stewardship opportunities of a population of patients with negative BCx will be analysed. In the second phase, using a cluster randomised crossover design, the implementation of an antimicrobial stewardship intervention targeting patients with negative BCx will be evaluated in terms of quality of antimicrobial use (duration and de-escalation), length of hospital stay and mortality. Ethics and dissemination This study has been and registered with clinicaltrials.gov. The findings of our study may support the implementation in clinical practice of an antimicrobial stewardship intervention to optimise the use of antibiotics in patients with negative BCx. The results of this study will be published in peer-reviewed journals and disseminated at national and international conferences. Trial registration number NCT03535324.Instituto de Salud Carlos III PI17 / 01809Plataforma Española de Investigación Clínica y Ensayos Clínicos, SCReN (Red Española de Investigación Clínica), financiada por la Subdirección General de Evaluación y Promoción de la Investigación ISCIII: PT17 / 0017/0012. Cofinanciado por el Fondo Europeo de Desarrollo Regional (FEDER)

Caracterización de la cimentación y suelo subyacente de la Giralda de Sevilla/España

The objective of this work is to investigate the Giralda's typology and composition of its foundation, as well as the characteristics of the underlying foundation soil, coincident with the celebration of the 800 th anniversary of completing the muslin tower. The results of the investigation show us some important aspects as foundation deep, around 5 meters from the actual pavement; the existence of a small overwide in it; its composition made of calcarenite bedstone; the preparation of the support... In relation to the soil it has been fixed its bearing capacity; the abasements along the different phases in the tower's building and its time evolution; the differential abasement that justify the very small heeling and other soil characteristics, that explain the stability of this Universal Monument.Este estudio se ha realizado con el objetivo de investigar la naturaleza, tipología y composición de la cimentación de la Giralda, así como las características del terreno subyacente que sirve de apoyo, coincidiendo con la celebración de los 800 años de la terminación de la torre musulmana. Los resultados obtenidos han puesto de manifiesto aspectos tan importantes como la profundidad de la cimentación, en tomo a 5 m desde la actual cota de acerado; la existencia de un pequeño sobreancho en la misma; su composición, a base de sillares de piedra calcarenita; la preparación del terreno de apoyo... Por lo que respecta al suelo, se ha determinado su capacidad portante; los asientos producidos en las diferentes fases de la construcción de la torre y su evolución en el tiempo; el asiento diferencial que justifica la muy ligera inclinación que presenta

Puntos de inflexión en los gradientes de composición de las comunidades de plantas acuáticas de diferentes continentes

Unravelling patterns and mechanisms of biogeographical transitions is crucial if we are to understand compositional gradients at large spatial extents, but no studies have thus far examined breakpoints in community composition of freshwater plants across continents. Using a dataset of almost 500 observations of lake plant community composition from six continents, we examined, for the first time, if such breakpoints in geographical space exist for freshwater plants and how well a suite of ecological factors (including climatic and local environmental variables) can explain transitions in community composition from the subtropics to the poles. Our combination of multivariate regression tree (MRT) analysis and k-means partitioning suggests that the most abrupt breakpoint exists between temperate to boreal regions on the one hand and freshwater plant communities harbouring mainly subtropical or Mediterranean assemblages on the other. The spatially structured variation in current climatic conditions is the most likely candidate for controlling these latitudinal patterns, although one cannot rule out joint effects of eco-evolutionary constraints in the harsher high-latitude environments and post-glacial migration lags after Pleistocene Ice Ages. Overall, our study supports the foundations of global regionalisation for freshwater plants and anticipates further biogeographical research on freshwater plant communities once datasets have been harmonised for conducting large-scale spatial analyses.publishedVersio

Puntos de inflexión en los gradientes de composición de las comunidades de plantas acuáticas de diferentes continentes

Sección: SIBECOL-AIL Meeting in Aveiro-2022[EN] Unravelling patterns and mechanisms of biogeographical transitions is crucial if we are to understand compositional gradients at large spatial extents, but no studies have thus far examined breakpoints in community composition of freshwater plants across continents. Using a dataset of almost 500 observations of lake plant community composition from six continents, we examined, for the first time, if such breakpoints in geographical space exist for freshwater plants and how well a suite of ecological factors (including climatic and local environmental variables) can explain transitions in community composition from the subtropics to the poles. Our combination of multivariate regression tree (MRT) analysis and k-means partitioning suggests that the most abrupt breakpoint exists between temperate to boreal regions on the one hand and freshwater plant communities harbouring mainly subtropical or Mediterranean assemblages on the other. The spatially structured variation in current climatic conditions is the most likely candidate for controlling these latitudinal patterns, although one cannot rule out joint effects of eco-evolutionary constraints in the harsher high-latitude environments and post-glacial migration lags after Pleistocene Ice Ages. Overall, our study supports the foundations of global regionalisation for freshwater plants and anticipates further biogeographical research on freshwater plant communities once datasets have been harmonised for conducting large-scale spatial analyses[ES] Desentrañar los patrones y mecanismos que subyacen a las transiciones biogeográficas es un requisito fundamental a la hora de comprender los gradientes de composición de las comunidades ecológicas a grandes extensiones espaciales, si bien ningún estudio ha examinado explícitamente estos puntos de inflexión para comunidades de plantas acuáticas de diferentes continentes. Utilizando una completa base de datos que condensa un total de casi 500 observaciones individuales sobre las comunidades florísticas lacustres de seis continentes, este trabajo pretende delinear las transiciones biogeográficas en plantas acuáticas a escala global, así como valorar el papel que desempeñan diversos mecanismos ecológicos (a saber, las condiciones climáticas y las características locales del hábitat) sobre estos puntos de inflexión en el espacio geográfico comprendido entre las latitudes subtropicales y los polos. Nuestros resultados obtenidos mediante la ejecución simultánea de árboles de regresión multivariante (MRT) y algoritmos de agrupación por k-medias demuestran la existencia de un punto de inflexión entre las regiones templadas y boreales y los lagos localizados en las bandas subtropicales y en las inmediaciones del Mediterráneo. La estructura espacial que subyace a la distribución de los condicionantes climáticos en nuestro planeta parece ser el principal mecanismo de control de dichas transiciones biogeográficas, si bien estos patrones latitudinales también podrían explicarse en base a constricciones eco-evolutivas en las regiones más septentrionales y a la colonización diferencial de los territorios norteños antaño cubiertos por el hielo durante el Último Máximo Glacial. En síntesis, nuestro estudio proporciona una base teórica preliminar para futuras investigaciones encaminadas a delimitar las unidades geográficas de los principales componentes de la flora acuática contemporánea y también anticipa un creciente interés por los estudios de carácter fitogeográfico en las aguas continentales, si bien los análisis venideros deberán prestar especial atención a la armonización de datos biológicos potencialmente heterogéneos en naturaleza y con orígenes disparesSIJGG was funded by the European Union Next Generation EU/PRTR (grant no. AG325). Academy of Finland supported JH, JGG (grant no. 331957), and JA (grant no. 322652). CFL appreciates financial support from the Spanish Ministry of Science and Technology (grant no. CL2017- 84176R). BAL was supported by National Research, Development, and Innovation Office (grant no. NKFIH, OTKA FK127939) and by the Bolyai János Research Scholarship of the Hungarian Academy of Sciences. SK was supportedby NWO Vidi (grant no. 203098). LR was funded by MESRSI (Ministry of Higher Education, Scientific Research and Innovation of Morocco) as part of the BiodivRestore Program (RESPOND Project) and by the Tour du Valat Foundation. Sampling of the Brazilian coastal lakes was financed by NWO (grant no. W84-549), the National Geographic Society (grant no. 7864-5), and CNPq (grants no. 480122, 490409, 311427

The Hemorrhagic Coli Pilus (HCP) of Escherichia coli O157:H7 Is an Inducer of Proinflammatory Cytokine Secretion in Intestinal Epithelial Cells

Enterohemorrhagic Escherichia coli (EHEC) O157:H7, the causative agent of hemorrhagic colitis and the hemolytic uremic syndrome (HUS), produces long bundles of type IV pili (TFP) called hemorrhagic coli pili (HCP). HCP are capable of mediating several phenomena associated with pathogenicity: i) adherence to human and bovine epithelial cells; ii) invasion of epithelial cells; iii) hemagglutination of rabbit erythrocytes; iv) biofilm formation; v) twitching motility; and vi) specific binding to laminin and fibronectin. HCP are composed of a 19 kDa pilin subunit (HcpA) encoded by the hcpA chromosomal gene (called prepilin peptidase-dependent gene [ppdD] in E. coli K-12).In this study we investigated the potential role of HCP of E. coli O157:H7 strain EDL933 in activating the release of pro- and anti-inflammatory cytokines from a variety of host epithelial cells. We found that purified HCP and a recombinant HcpA protein induced significant release of IL-8 and TNF-alpha, from cultured polarized intestinal cells (T84 and HT-29 cells) and non-intestinal HeLa cells. Levels of proinflammatory IL-8 and TNF-alpha, but not IL-2, IL6, or IL-10 cytokines, were increased in the presence of HCP and recombinant HcpA after 6 h of incubation with >or=50 ng/ml of protein, suggesting that stimulation of IL-8 and TNF-alpha are dose and time-dependent. In addition, we also demonstrated that flagella are potent inducers of cytokine production. Furthermore, MAPK activation kinetics studies showed that EHEC induces p38 phosphorylation under HCP-producing conditions, and ERK1/2 and JNK activation was detectable after 3 h of EHEC infection. HT-29 cells were stimulated with epidermal growth factor stimulation of HT-29 cells for 30 min leading to activation of three MAPKs.The HcpA pilin monomer of the HCP produced by EHEC O157:H7 is a potent inducer of IL-8 and TNF-alpha release, an event which could play a significant role in the pathogenesis of hemorrhagic colitis caused by this pathogen

Medicinal and ethnoveterinary remedies of hunters in Trinidad

BACKGROUND: Ethnomedicines are used by hunters for themselves and their hunting dogs in Trinidad. Plants are used for snakebites, scorpion stings, for injuries and mange of dogs and to facilitate hunting success. RESULTS: Plants used include Piper hispidum, Pithecelobium unguis-cati, Bauhinia excisa, Bauhinia cumanensis, Cecropia peltata, Aframomum melegueta, Aristolochia rugosa, Aristolochia trilobata, Jatropha curcas, Jatropha gossypifolia, Nicotiana tabacum, Vernonia scorpioides, Petiveria alliacea, Renealmia alpinia, Justicia secunda, Phyllanthus urinaria,Phyllanthus niruri,Momordica charantia, Xiphidium caeruleum, Ottonia ovata, Lepianthes peltata, Capsicum frutescens, Costus scaber, Dendropanax arboreus, Siparuma guianensis, Syngonium podophyllum, Monstera dubia, Solanum species, Eclipta prostrata, Spiranthes acaulis, Croton gossypifolius, Barleria lupulina, Cola nitida, Acrocomia ierensis (tentative ID). CONCLUSION: Plant use is based on odour, and plant morphological characteristics and is embedded in a complex cultural context based on indigenous Amerindian beliefs. It is suggested that the medicinal plants exerted a physiological action on the hunter or his dog. Some of the plants mentioned contain chemicals that may explain the ethnomedicinal and ethnoveterinary use. For instance some of the plants influence the immune system or are effective against internal and external parasites. Plant baths may contribute to the health and well being of the hunting dogs

Mitigación con Sistemas Silvopastoriles en Latinoamérica: Aportes para la incorporación en los sistemas de Medición Reporte y Verificación bajo la CMNUCC

En Latinoamérica el 46% de las emisiones de GEI proviene del cambio de usos de la tierra y el 20% de la agricultura, en donde el 58% y el 70% de las emisiones son debidas a la ganadería. El continuo crecimiento de este sector (+32% previsto al 2050) ha impulsado la expansión de la frontera agropecuaria en los bosques, generando múltiples impactos ambientales entre los cuales se encuentra la emisión de Gases Efecto Invernadero (GEI). Sin embargo, el sector tiene un alto potencial de mitigación reconocido por políticas, estrategias y programas de mitigación nacionales como las Contribuciones Nacionalmente Determinadas (NDC) y de desarrollo sectorial como las Acciones de Mitigación nacionalmente Apropiadas (NAMA). Entre estas acciones se incluye la implementación de sistemas silvopastoriles, cuya medición monitoreo y reporte a escala nacional presenta un estado de avance muy limitado, dejando su aporte a la mitigación invisible. A través de un Grupo Técnico de Trabajo ad hoc se han analizado el avance de los países de la región en la incorporación de los sistemas silvopastoriles en los sistemas nacionales de Medición/Monitoreo, Reporte y Verificación (MRV) de los Inventarios Nacionales de Gases Efecto Invernadero, y los requerimientos a cumplir para esto, generando una hoja de ruta a corto-medio plazo así como unas orientaciones técnicas para reducir la brecha existente

Mitigación con Sistemas Silvopastoriles en Latinoamérica: Aportes para la incorporación en los sistemas de Medición Reporte y Verificación bajo la CMNUCC

En Latinoamérica el 46% de las emisiones de GEI proviene del cambio de usos de la tierra y el 20% de la agricultura, en donde el 58% y el 70% de las emisiones son debidas a la ganadería. El continuo crecimiento de este sector (+32% previsto al 2050) ha impulsado la expansión de la frontera agropecuaria en los bosques, generando múltiples impactos ambientales entre los cuales se encuentra la emisión de Gases Efecto Invernadero (GEI). Sin embargo, el sector tiene un alto potencial de mitigación reconocido por políticas, estrategias y programas de mitigación nacionales como las Contribuciones Nacionalmente Determinadas (NDC) y de desarrollo sectorial como las Acciones de Mitigación nacionalmente Apropiadas (NAMA). Entre estas acciones se incluye la implementación de sistemas silvopastoriles, cuya medición monitoreo y reporte a escala nacional presenta un estado de avance muy limitado, dejando su aporte a la mitigación invisible. A través de un Grupo Técnico de Trabajo ad hoc se han analizado el avance de los países de la región en la incorporación de los sistemas silvopastoriles en los sistemas nacionales de Medición/Monitoreo, Reporte y Verificación (MRV) de los Inventarios Nacionales de Gases Efecto Invernadero, y los requerimientos a cumplir para esto, generando una hoja de ruta a corto-medio plazo así como unas orientaciones técnicas para reducir la brecha existente