Ação do laser de baixa intensidade e da eletroestimulação na regeneração nervosa periférica

Universidade Federal de Minas GeraisOs nervos periféricos são freqüentemente alvo de lesões traumáticas e a recuperação funcional é relativa e raramente completa. Dentre vários recursos que visam acelerar e melhorar o processo de regeneração do nervo periférico foi escolhido neste trabalho a radiação a laser de baixa intensidade e a eletroestimulação. Tais recursos terapêuticos possuem relação com o objetivo proposto, que foi o de verificar a eficácia desses agentes físicos na regeneração nervosa periférica após a lesão do tipo axoniotmese. A eficácia da laserterapia de baixa intensidade na regeneração nervosa periférica foi comprovada na nossa revisão bibliográfica e mostrou que mais de 80 % dos estudos experimentais conduzidos sobre o uso da laserterapia na promoção da regeneração nervosa periférica leva a uma positiva recuperação nervosa, após axoniotmese e após cirurgia reparadora. Seguindo as indicações que a laserterapia acelera o processo de regeneração do nervo o primeiro estudo experimental teve como objetivo verificar a eficácia do laser no período inicial de recuperação do nervo ciático após lesão por esmagamento. Os ratos foram irradiados transcutaneamente com laser de GaAlAs (830nm), contínuo, com potência de 60 mW e fluência de 40 J.cm2, com tempo de irradiação de 19 segundos, por cinco dias consecutivos, um grupo a partir do primeiro dia do pós-operatório, e o segundo grupo a partir da segunda semana do pós-operatório e sacrificados no 14º dia após lesão. Nesse experimento foram analisados a função motora por meio do índice funcional do ciático, a morfologia do nervo ciático e do músculo tibial anterior e morfometria das fibras musculares. Nenhuma dessas análises detectaram diferenças estatisticamente significativas entre os grupos tratados e o controle simulado (p>0,05) sugerindo que a laserterapia não foi eficaz na fase inicial da recuperação da lesão nervosa. Entretanto, é possível que a ausência dos efeitos positivos da laserterapia na regeneração nervosa seja devido tanto à inadequação da escolha do laser e do protocolo de irradiação, quanto do modelo de lesão empregado. O segundo trabalho experimental foi realizado para investigar os efeitos precoces da estimulação elétrica na recuperação neuromuscular. A aplicação da eletroestimulação foi baseada pelo eletrodiagnóstico do músculo tibial anterior após a lesão de esmagamento do nervo ciático do rato. Um total de cinco sessões de eletroestimulação foram administradas em dias alternados, iniciado no terceiro dia após a lesão até o final do experimento (14 dias). Nesse experimento foram analisados a função motora por meio do índice funcional do ciático, a morfologia do nervo ciático e do músculo tibial anterior, massa muscular do m. tibial anterior e morfometria das fibras musculares. Em todas as análises os grupos controle e tratado não tiveram diferenças estatísticas entre si, com exceção da análise funcional, cujos resultados demonstraram que a função nos ratos eletroestimulados no 14º dia após lesão foram significativamente menores quando comparados aos animais não tratados. Os resultados sugerem que, diferente da estimulação elétrica direta do nervo, a eletroestimulação muscular nas fases precoces após o trauma devem ser usadas com cuidado, uma vez que poderá inibir a recuperação neuromuscular funcional. Concluindo, os resultados dos dois estudos experimentais sugerem que a efetividade da utilização dos agentes físicos como o laser tanto quanto a eletroestimulação na regeneração nervosa periférica, ainda continua aberta e, se não for apropriadamente definida a parametrização dos equipamentos, protocolos, tempos de aplicação, início do tratamento, eles poderão não só serem ineficazes, mas também, poderão inibir o processo de recuperação da função neuromuscular

Effect of Low-Level Laser Therapy (LLLT) on Acute Neural Recovery and Inflammation-Related Gene Expression After Crush Injury in Rat Sciatic Nerve

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)Background and Objectives Peripheral nerve function can be debilitated by different kinds of injury. Low-level laser therapy (LLLT) has been used successfully during rehabilitation to stimulate recovery. The aim of this study was to evaluate the effects of LLLT (660nm, 60J/cm2, 40mW/cm2) on acute sciatic nerve injury. Materials and Methods Thirty Wistar male rats were divided into three groups: (1) Normal, intact nerves; (2) I3d, crushed nerves evaluated on Day-3 post-injury; (3) I+L3d, crushed nerves submitted to two sessions of LLLT and investigated at 3 days post-injury. Sciatic nerves were removed and processed for gene expression analysis (real-time PCR) of the pro-inflammatory factors TWEAK, Fn14 and TNF- and extracellular matrix remodeling and axonal growth markers, such as TIMP-1, MMP-2, and MMP-9. Zymography was used to determine levels of MMP-2 and MMP-9 activity and Western blotting was used to evaluate TNF- protein content. ShapiroWilk and Levene's tests were applied to evaluate data normality and homogeneity, respectively. One-way ANOVA followed by Tukey test was used for statistical analysis with a significance level set at 5%. Results An increase in TNF- protein level was found in I+L3 compared to Normal and I3d (P<0.05). Zymography showed an increase in proMMP-9 activity, in both I3d and I+L3d groups (P<0.05). The increase was more evident in I+L3d (P=0.02 compared to I3d). Active-MMP-9 isoform activity was increased in I+L3d compared to Normal and I3d groups (P<0.05). Furthermore, the activity of active-MMP-2 isoform was increased in I3d and I+L3 (P<0.05). An increase in TIMP-1 expression was observed in both I3d and I+L3d groups (P<0.05). Conclusions The current study showed that LLLT increased MMPs activity, mainly MMP-9, and TNF- protein level during the acute phase of nerve injury, modulating inflammation. Based on these results, it is recommended that LLLT should be started as soon as possible after peripheral nerve injury. Lasers Surg. Med. 9999:XXXX, 2013. (c) 2013 Wiley Periodicals, Inc.454246252Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)FAPESP [2010/11795-6