Aplicación de la técnica de PCR en la detección de Ralstonia solanacearum en campos paperos = PCR applied to the detection of Ralstonia solanacerum in potato fields

La murchera de la papa causada por Ralstonia solanacearum es una amenaza permanente para el cultivo con consecuencias devastadoras en condiciones predisponentes. La incidencia de esta enfermedad en Uruguay es variable; desde la década de 1970 se registran brotes agudos periódicos difíciles de prevenir y controlar. Se ha detectado a R. solanacearumen todas las regiones de producción, lo que dificulta el mantenimiento de áreas libres de patógeno y la continuidad del cultivo. Dado que no existen agentes químicos efectivos, las estrategias de control apuntan a la prevención, recomendando la rotación de cultivos, la desinfección de herramientas y el uso de semilla certificada libre del patógeno. En este trabajo se optimizó la detección molecular de R. solanacearum en suelo mediante PCR con el objetivo de conocer la persistencia del patógeno en el campo. El método se aplicó al análisis de tres campos con diferentes antecedentes de murchera, y se demostró que el patógeno es capaz de permanecer viable por más de 10 años. También se determinaron las ventajas y limitaciones de esta metodología en su aplicación a muestras complejas. Estos resultados constituyen un importante aporte que genera conocimiento que permitirá a los productores delinear mejores estrategias para el manejo de la enfermedad al momento de planificar los cultivos

Catabolisme de purines chez Aspergillus nidulans (caractérisation du transporteur AzgA)

Chez Aspergillus nidulans, au moins trois perméases sont impliquées dans le transport des purines. AzgA transporte l hypoxanthine et l adénine. UapA transporte l acide urique et la xanthine. UapC est une perméase mineure qui transporte toutes ces purines. L expression des gènes uapA et uapC est induite en présence d acide urique par l intermédiaire de la protéine UaY et réprimée en présence d ammonium du fait de l inactivation de l'activateur transcriptionnel AreA.Ce travail présente la caractérisation du gène azgA et de la protéine qu il code. AzgA définit un sous-groupe de transporteurs appartenant à la famille Xanthine/uracil permeases, très distante de celui qui comporte UapA et UapC. L expression d azgA est induite par d acide urique et réprimée par l ammonium. Au cours de la germination des conidiospores, les trois gènes sont induits par d acide urique, réprimés par l ammonium bien que nettement moins que dans le mycélium et induits en absence d acide urique, ce qui pourrait être lié au developpement ou être une réponse spécifique à la carence en source d azote. La fixation à l ADN de l activateur UaY, une protéine à complexe binucléaire à zinc a été analysée. UaY agit sous forme de dimère, le domaine UaY(103-147) étant responsable de cette dimérisation. La Phe112 est importante vis-à-vis de la stabilisation de la structure dimérique, qui est déstabilisée par la mutation F112I. Cette modification diminue l activation de la transcription d au moins cinq gènes controlés par UaY ainsi que l affinité apparente pour l ADN. Chez les revertants analysés, des mutations intragéniques affectent soit la fixation de UaY sur l ADN soit sa fonction d activation.At least three permeases are involved in purine transport in Aspergillus nidulans. The AzgA protein is the main transporter for adenine and hypoxanthine and UapA transport xanthine and uric acid. The UapC protein is a low-capacity transporter for all natural purines. Expression of uapA and uapC genes in mycelium is induced by purines and repressed by ammonium through the action of the pathway-specific UaY regulator and the general GATA factor AreA, respectively.Here we present the characterisation of azgA gene and its protein product. AzgA protein defines an UapA-UapC distant sub-family of Xanthine/uracil permeases family. azgA expression is induced by uric acid and repressed by ammonium. During the isotropic growth phase of conidial germination, the expression of the three purine transporter genes are induced by uric acid. The ammonium repression is very low. Transcriptional activation occurs in the absence of purine induction and independently of the nitrogen and carbon source present in the medium. This work establishes the presence of a novel system triggering purine transporter transcription during germination.We have studied the UaY-DNA interactions. UaY, a Zn binuclear cluster transcription factor, binds as a dimmer through UaY(103-147) domain. Phe112 is important for the dimmeric structure stabilisation, which is diminished in a F112I mutant. This modification reduces the transcription activation of almost five genes under UaY control as well as its affinity to its targets. Revertants re-establish wild type phenotype by altering the interactions between this activator and its DNA targets or by affecting the activation function.ORSAY-PARIS 11-BU Sciences (914712101) / SudocSudocFranceF

Aplicación de la técnica de PCR en la detección de Ralstonia solanacearum en campos paperos

<p>La murchera de la papa causada por Ralstonia solanacearum es una amenaza permanente para el cultivo con consecuencias devastadoras en condiciones predisponentes. La incidencia de esta enfermedad en Uruguay es variable; desde la década de 1970 se registran brotes agudos periódicos difíciles de prevenir y controlar. Se ha detectado a R. solanacearumen todas las regiones de producción, lo que dificulta el mantenimiento de áreas libres de patógeno y la continuidad del cultivo. Dado que no existen agentes químicos efectivos, las estrategias de control apuntan a la prevención, recomendando la rotación de cultivos, la desinfección de herramientas y el uso de semilla certificada libre del patógeno. En este trabajo se optimizó la detección molecular de R. solanacearum en suelo mediante PCR con el objetivo de conocer la persistencia del patógeno en el campo. El método se aplicó al análisis de tres campos con diferentes antecedentes de murchera, y se demostró que el patógeno es capaz de permanecer viable por más de 10 años. También se determinaron las ventajas y limitaciones de esta metodología en su aplicación a muestras complejas. Estos resultados constituyen un importante aporte que genera conocimiento que permitirá a los productores delinear mejores estrategias para el manejo de la enfermedad al momento de planificar los cultivos.</p

Wood decay and its preservation

Tema del mesLa madera es un elemento básico en las construcciones, debido a que es un material renovable, abundante y de manejo relativamente sencillo. Sin embargo es biodegradable, susceptible de ser atacado por organismos vivos (xilófagos, “comedores de madera”). Por esto debe protegerse a través de algún tipo de tratamiento. Los mecanismos involucrados en ambos aspectos: biodeterioro y protección de madera deben abordarse desde la interdisciplinariedad. Para lograr el desarrollo de conocimiento y resolver las problemáticas desde diferentes puntos de vista, necesitamos combinar los saberes de varias especialidades: ingeniería química y agronómica forestal, microbiología clásica y microbiología molecular y asesoramiento continuo de entomología y estadística. La investigación central ha sido desarrollar preservantes de bajo costo y ambientalmente amigables y la puesta a punto de técnicas de evaluación de durabilidad adquirida en maderas tratadas. Además, realizamos docencia de grado y próximamente de posgrado; editamos un libro y difundimos los resultados de las investigaciones en congresos, seminarios y revistas científicas. El grupo ha creado vínculos en nuestro medio, con sectores interesados en la aplicación de nuestras investigaciones, y en el exterior a través de investigadores y docentes de Universidades de Venezuela, Turquía y Brasil, con quienes hemos realizado trabajos en conjunto, pasantías, etcétera.Wood is a widespread element in construction, it is a renewable, abundant and relatively easy handling material. However, it is biodegradable capable of being attacked by living organisms (xylophagous, “wood-eaters”). For this reason, wood needs to be protected through some kind of treatment. The series of mechanisms involved in both aspects, the biodeterioration and protection of wood can only be approached from an interdisciplinary point of view. Knowledge development has been achieved through, and to address various problems from different points of view, we needed to combine knowledge from various specialties; chemical engineering, agronomy, forestry, classical microbiology and molecular microbiology, and the ongoing advice of entomology and statistics. The focus of research has been finding new low cost and environmentally friendly wood preservatives, and the development and production of new preservatives for different application techniques. The group is now teaching undergraduate courses and soon will be teaching graduate courses. Research results are disseminated at conferences, seminars and scientific journals while publishing a book on the subject. The group has established links both within the country, with stakeholders in the implementation of our research, and abroad with researchers and professors from universities in Venezuela, Turkey and Brazil with whom we have worked together, internships, etc