Variabilité structurale des glycoconjugués (étude réalisée chez les Hyménoptères, les Oiseaux et les Protistes parasitaires)

Le terme glycosylation renvoie à des molécules très diverses: glycoprotéines, glycolipides ou polysaccharides. Chacune de ces formes présente une incroyable diversité structurale, variant selon les espèces considérées. Les travaux effectués au cours de ma thèse regroupent l'exploration des capacités de glycosylation de différents organismes eucaryotes. Dans un premier temps, mes travaux ont consisté à étudier la O-glycosylation de type mucine. L'analyse des O-glycannes libérés des mucines salivaires de la guêpe Vespula germanica a permis d'isoler pour la première fois des structures O-glycanniques chargées, substituées par de la phosphoéthanolamine chez un insecte. En marge de ces structures majoritaires, des O-glycannes complexes, minoritaires, ont été identifiés. Chez le frelon Vespa cabro, aucun O-glycanne chargé n'a été observé, mais une famille de composés neutres, différents de ceux décrits chez la guêpe, a pu être caractérisée. Par ailleurs, à partir de différentes sources biologiques contenant des O-glycannes sulfatés, nous avons mis au point et validé une méthode de purification rapide et spécifique qui à l'avenir permettra de caractériser plus simplement des structures sulfatées au sein d'un mélange complexes d'oligosaccharides. La seconde partie de mes travaux porte sur la conservation de la N-glycosylation chez les parasites intracellulaires obligatoires à travers l'étude des microsporidies Encephalitozoon cuniculi et Antonospora locustae ainsi que de Toxoplasma gondii, représentant du phylum des Apicomplexa. Chez les microsporidies, nos études structurales ont permis de confirmer l'absence de N-glycosylation et l'existence d'une voie de O-mannosylation fonctionnelle, semblable à celle observée chez les levures, en accord avec les prédictions in silico. Enfin, chez T. gondii, nous avons établi que les structures N-glycanniques portées par les protéines parasitaires résultaient à la fois d'une voie de N-glycosylation propre au parasite et de la récupération d'intermédiaires de biosynthèse provenant de l'hôte. Ce phénomène original, jamais décrit auparavant, offre de nouvelles perspectives dans l'étude des interactions privilégiées existant entre hôte et parasite intracellulaire. Des études préliminaires indiquent par ailleurs que ce phénomène de récupération pourrait également s'appliquer aux glycosphingolipides.LILLE1-BU (590092102) / SudocSudocFranceF

Glycosylation of BclA glycoprotein from Bacillus cereus and Bacillus anthracis exosporium Is domain-specific

The spores of the Bacillus cereus group (B. cereus, Bacillus anthracis, and Bacillus thuringiensis) are surrounded by a paracrystalline flexible yet resistant layer called exosporium that plays a major role in spore adhesion and virulence. The major constituent of its hairlike surface, the trimerized glycoprotein BclA, is attached to the basal layer through an N-terminal domain. It is then followed by a repetitive collagen-like neck bearing a globular head (C-terminal domain) that promotes glycoprotein trimerization. The collagen-like region of B. anthracisis known to be densely substituted by unusual O-glycans that may be used for developing species-specific diagnostics of B. anthracis spores and thus targeted therapeutic interventions. In the present study, we have explored the species and domain specificity of BclA glycosylation within the B. cereus group. First, we have established that the collagen-like regions of both B. anthracis and B. cereus are similarly substituted by short O-glycans that bear the species-specific deoxyhexose residues anthrose and the newly observed cereose, respectively. Second we have discovered that the C-terminal globular domains of BclA from both species are substituted by polysaccharide-like O-linked glycans whose structures are also species-specific. The presence of large carbohydrate polymers covering the surface of Bacillus spores may have a profound impact on the way that spores regulate their interactions with biotic and abiotic surfaces and represents potential new diagnostic targets

Major O-glycans in the spores of two microsporidian parasites are represented by unbranched manno-oligosaccharides containing alpha-1,2 linkages.

International audienceProtein glycosylation in microsporidia, a fungi-related group comprising exclusively obligate intracellular parasitic species, is still poorly documented. Here, we have studied glycoconjugate localization and glycan structures in spores of Encephalitozoon cuniculi and Antonospora locustae, two distantly related microsporidians invading mammalian and insect hosts, respectively. The polar sac-anchoring disc complex or polar cap, an apical element of the sporal invasion apparatus, was strongly periodic acid-thiocarbohydrazide-Ag proteinate-positive. Mannose-binding lectins reacted with the polar cap and recognized several bands (from 20 to 160 kDa) on blots of E. cuniculi protein extracts. Physicochemical analyses provided the first determination of major glycostructures in microsporidia. O-linked glycans were demonstrated to be linear manno-oligosaccharides containing up to eight alpha1, 2-linked mannose residues, thus resembling those reported in some fungi such as Candida albicans. No N-linked glycans were detected. The data are in accordance with gene-based prediction of a minimal O-mannosylation pathway. Further identification of individual mannoproteins should help in the understanding of spore germination mechanism and host-microsporidia interactions

Oligomannose-rich membranes of dying intestinal epithelial cells promote host colonization by adherent-invasive E. coli

A novel mechanism is revealed by which clinical isolates of adherent-invasive Escherichia coli (AIEC) penetrate into the epithelial cell layer, replicate, and establish biofilms in Crohn's disease. AIEC uses the FimH fimbrial adhesin to bind to oligomannose glycans on the surface of host cells. Oligomannose glycans exposed on early apoptotic cells are the preferred binding targets of AIEC, so apoptotic cells serve as potential entry points for bacteria into the epithelial cell layer. Thereafter, the bacteria propagate laterally in the epithelial intercellular spaces. We demonstrate oligomannosylation at two distinct sites of a glycoprotein receptor for AIEC, carcinoembryonic antigen related cell adhesion molecule 6 (CEACAM6 or CD66c), on human intestinal epithelia. After bacterial binding, FimH interacts with CEACAM6, which then clusters. The presence of the highest-affinity epitope for FimH, oligomannose-5, on CEACAM6 is demonstrated using LC-MS/MS. As mannose-dependent infections are abundant, this mechanism might also be used by other adherent-invasive pathogens

L’âge du Fer en Basse-Normandie. Gestes funéraires en Gaule au Second-Âge du Fer. Volumes I et II

Cet ouvrage est la publication des actes du 33e colloque international de l’AFEAF, qui s’est tenu à Caen, du 20 au 24 mai 2009. De même que le colloque, il comprend deux parties. La première, qui contient dix-sept contributions, traite de l’actualité des recherches sur l’Âge du fer en Basse-Normandie, une région qui a connu un renouvellement important de la documentation permettant d’appréhender les dynamiques d’occupation et les formes d’organisation territoriale durant la Protohistoire. Plusieurs bilans synthétiques concernant l’habitat rural, les sites fortifiés et la culture matérielle, sont, entre autres, proposés ici. La seconde partie de l’ouvrage traite du thème de la mort et des pratiques funéraires durant la période Ve-Ier siècles avant J.-C. ; elle contient vingt-deux contributions. Ce sujet a été abordé en privilégiant quelques axes de réflexion, de façon à faciliter les comparaisons entre régions. À travers des bilans synthétiques, le thème spécialisé du colloque est traité à l’échelle de la Gaule, avec les éclairages de plusieurs régions de l’Europe celtique.This is the publication of the proceedings of the 33rd AFEAF symposium held in Caen from the 20th to the 24th of May 2009. Like the symposium, this book is divided in two parts. The first part, with its 17 contributions, deals with the current knowledge about the Iron Age in Lower Normandy. An important renewal of the documentation concerning this region allows a better understanding of the occupational processes and territorial organization existing throughout Protohistory. This first part also includes several summary reports on rural settlements, fortified sites as well as finds. The second part of the book, with 22 contributions, deals with the subject of death and funerary practices during the 5th to 1st centuries BC. The subject was discussed focussing on a chosen number of thoughts as to make it easier to compare between different regions. Various summary reports allow an overview of this specialized topic throughout Gaul with perspectives from other regions of Celtic Europe