Características morfológicas e estudo da vascularização do corpo lúteo cíclico de cabras ao longo do ciclo estral

Corpus luteum is a temporary endocrine gland that regulates either the estrous cycle and pregnancy. It presents extreme dependency on the adequate blood supply. This work aims to evaluate goat corpus luteum (CL) vascular density (VD) over the estrous cycle. For that purpose, 20 females were submitted to estrus synchronization/ovulation treatment using a medroxyprogesterone intra-vaginal sponge as well as intramuscular (IM) application of cloprostenol and equine chorionic gonadotrophine (eCG). After sponge removal, estrus was identified at about 72hs. Once treatment was over, female goats were then subdivided into 4 groups (n=5 each) and slaughtered on days 2, 12, 16 and 22 after ovulation (p.o). Ovaries were collected, withdrawn and weighted. CL and ovaries had size and area recorded. Blood samples were collected and the plasma progesterone (P4) was measured through RIA commercial kits. The VD was 24.42±6.66, 36.26±5.61, 8.59±2.2 and 3.97±1.12 vessels/mm² for days 2, 12, 16 and 22 p.o, respectively. Progesterone plasma concentrations were 0.49±0.08, 2.63±0.66, 0.61±0.14 and 0.22±0.04ng/ml for days 2, 12, 16 e 22 p.o, respectively. Studied parameters were affected by the estrous cycle phase. Values greater than 12 p.o were observed. In the present work we observed that ovulation occurred predominantly in the right ovary (70% of the animals), which in turn presented bigger measures than the contra lateral one. There is a meaningful relationship between the weight and size of the ovary and these of CL (r=0.87, r=0.70, respectively, p<0.05). It is possible to conclude that morphology of goat's ovaries and plasma progesterone concentration changed according to estrous cycle stages. We propose these parameters can be used as indicators of CL functional activity.O corpo lúteo é uma glândula endócrina temporária que regula tanto o ciclo estral quanto a prenhez, apresentando extrema dependência de aporte sanguíneo adequado. Objetivaram-se avaliar mudanças morfométricas dos ovários e densidade vascular (DV) dos corpos lúteos (CL) de cabras ao longo do ciclo estral (AOLC). Vinte animais foram submetidos ao tratamento para indução/sincronização do estro, usando esponjas intravaginais commedroxiprogesterona, associadas a aplicações intramusculares de cloprostenol e gonadotrofina coriônica eqüina. Após remoção das esponjas, o estro foi identificado em aproximadamente de 72h. Concluído o tratamento, as cabras foram subdivididas em 4 grupos (n=5 cada) para abate nos dias 2, 12, 16 e 22 após ovulação (p.o.). Posteriormente, foram retirados os ovários e realizadas as mensurações de peso, tamanho e área do órgão e dos CL. Amostras de sangue foram coletadas e a progesterona sérica (P4) mensurada utilizando-se RIA convencional. A DV média dos CL AOLC foi 24,42±6,66; 36,26±5,61; 8,59±2,2 e 3,97±1,12 vasos/mm2 para os dias 2, 12, 16 e 22 p.o., respectivamente. A concentração média de P4 foi de 0,49±0,08; 2,63±0,66; 0,61±0,14 e 0,22±0,04ng/ml para os dias 2, 12, 16 e 22 p.o., respectivamente. Os parâmetros em estudo também se mostraram afetados pela fase do ciclo estral, sendo observados os maiores (p < 0,05) valores no dia 12 p.o. Neste experimento, a ovulação ocorreu predominantemente no ovário direito (70% dos animais), o qual apresentou medidas maiores que o contralateral. Observou-se ainda alta correlação significativa entre o peso do ovário e o do CL (r=0,87; p<0,05) e entre o tamanho destes órgãos (r=0,70; p<0,05). Conclui-se que, a morfologia dos ovários de cabras e a concentração sérica de progesterona variam em função da fase do ciclo estral e podem ser utilizadas como parâmetro na avaliação funcional do órgão

The measurement of testosterone and oestradiol-17[beta] using iodinated tracers and incorporating an affinity chromatography extraction procedure

The development of sensitive radioimmunoassays (RIA) for testosterone and oestradiol-17[beta], utilising 125I-radioligands, is described. Use of an homologous bridge at the same site of attachment, for both the radioligand and the steroid-carrier protein conjugate employed in raising antibodies, normally results in a loss of assay sensitivity and precision. This was overcome in the oestradiol assay by utilising an heterologous configuration at the site of attachment (11[alpha] vs 11[beta]). In contrast, for testosterone, even though an homologous bridge and site of attachment was used for the radioligand and the steroid-carrier protein conjugate, a very sensitive assay with extremely high antibody titres (dilution of 1:2 x 106) was achieved. This finding was repeated with a different antiserum suggesting that the "bridge binding" phenomenon may be related to the position of attachment to the steroid molecule. In addition, an antibody-Sepharose 4B affinity chromatography extraction procedure has been developed for both oestradiol and testosterone. This approach allows the measurement of very low concentrations of steroids from large volumes of a variety of biological fluids. As antibody-linked Sepharose 4B uses high concentrations of antibody, steroids of similar structure are extracted from biological fluids. However, the cross-reactivity of these related steroids are very low in the RIA's, ensuring good specificity.Peer Reviewedhttp://deepblue.lib.umich.edu/bitstream/2027.42/25490/1/0000031.pd

Sincronização da onda folicular com hCG prévia à indução da luteólise com cloprostenol em bovinos

O efeito da aplicação de diferentes doses de hCG sobre a emergência de nova onda de crescimento folicular e o número de folículos recrutados dessa onda, a formação de corpo lúteo acessório, o diâmetro do folículo dominante e do corpo lúteo espontâneo no dia da aplicação do luteolítico, a subseqüente taxa de sincronização e o intervalo da aplicação de PGF2&#945; à manifestação do estro foram avaliados. Vinte fêmeas bovinas mestiças em diestro, divididas em quatro tratamentos, contendo cinco animais cada, foram usadas. No tratamento 1, os animais receberam 500 UI I.M. hCG no dia 0, dia em que se iniciou o tratamento, e 150 &#956;g D(+) cloprostenol no dia 6; já nos tratamentos 2, 3 e 4, receberam, respectivamente, 1000, 2000 e 3000 UI hCG, pela mesma via de aplicação, e 150 &#956;g D(+) cloprostenol no dia 6. A atividade ovariana foi monitorada diariamente, com auxílio do aparelho de ultra-sonografia, do dia 0 ao estro, ou até o dia 11 após o tratamento, nos animais que não responderam à prostaglandina. Não houve diferença entre os efeitos de 500, 1000, 2000 e 3000 UI hCG sobre a dinâmica folicular, a taxa de sincronização e o intervalo da aplicação de PGF2&#945; ao estro. Houve, no entanto, tendência de as dosagens de 2000 e 3000 UI induzirem à emergência de nova onda de crescimento folicular mais rapidamente que 500 ou 1000 UI destes hormônios.The effect of different doses of hCG administration on the emergence of a new follicular growth wave and the number of recruited follicles from this wave, the accessory corpus luteum formation, the diameter of the dominant follicle and of the spontaneous corpus luteum on the day of a luteolitic administration and subsequent synchronization rate and the interval between the PGF2&#945; administration and the estrus manifestation were evaluated. Twenty crossbred female cattle in diestrus, divided in four treatments containing five animals each were used. In treatment 1, the animals received 500 IU IM of hCG on day 0 (day which started the treatment) and 150 &#956;g of D(+) Cloprostenol on day 6. In treatments 2, 3 and 4, the animals received 1000, 2000 and 3000 IU, respectively, on day 0 and 150 &#956;g of D(+) Cloprostenol on day 6. The ovarian activity was monitored daily, with the help of an ultra-sound apparatus, from day 0 to the estrus, or up to day 11 after the treatment on those animals which did not response to prostaglandin. There were no significant differences among the effects of 500, 1000, 2000 and 3000 IU of hCG on the follicular dynamic, synchronization rate and the interval between the PGF2&#945; and the estrus manifestation. There was, however, a tendency of 2000 and 3000 IU doses to induce an emergence of a new follicular growth wave faster than 500 or 1000 IU of these hormones

Sincronização da onda folicular com buserelina prévia à indução da luteólise com cloprostenol em bovinos

Este experimento foi realizado para verificar o efeito da aplicação de diferentes doses de um análogo de GnRH (buserelina) sobre a emergência de nova onda de crescimento folicular e o número de folículos recrutados dessa onda, a formação de corpo lúteo acessório, o diâmetro do folículo dominante e do corpo lúteo espontâneo no dia da aplicação do luteolítico e subseqüente taxa de sincronização e o intervalo da aplicação de PGF2&#945; à manifestação do estro. Vinte fêmeas bovinas em diestro, mestiças Holandês x Zebu e Simental x Zebu foram, distribuídas em quatro tratamentos contendo cinco animais cada. No tratamento 1, os animais receberam 4 mg IM de buserelina no dia z 0 (dia em que se iniciou o tratamento) e 150 mg de D(+) cloprostenol no dia 6. Nos tratamentos 2, 3 e 4, receberam, respectivamente, 6, 8 e 10 mg de buserelina, pela mesma via de aplicação, e 150mg de D(+) cloprostenol no dia 6. A atividade ovariana foi monitorada diariamente, com auxílio do aparelho de ultra-sonografia, do dia 0 ao estro, ou até o dia 11 pós-tratamento, naqueles animais que não responderam à prostaglandina. A aplicação de 8 ou 10 mg de buserelina em fase indeterminada do diestro, nas fêmeas bovinas mestiças, promoveu emergência de nova onda de crescimento folicular mais rápida que aplicações de 4 ou 6 mg do mesmo hormônio; enquanto os outros parâmetros avaliados não diferiram entre os animais dos tratamentos.This experiment was carried out to verify the effect of the administration of different doses of GnRH (buserelin) analogue on the emergence of a new follicular growth wave and the number of recruited follicles from this wave, accessory corpus luteum formation, the dominant follicle diameter and the spontaneous corpus luteum on the luteolitic administration day and subsequent synchronization rate and the interval between the PGF2&#945; application and the estrus manifestation. Twenty crossbreed female cattle in diestrus, crossbred Holstein x Zebu and Simental x Zebu were allotted to four treatment groups, each containing five animals. In the treatment 1 the animals received 4 mg IM. of buserelin at day 0 (day in which the treatment began) and 150 mg of D (+) Cloprostenol at day 6. In treatments 2, 3 and 4, the animals received 6, 8 and 10 mg of buserelin, respectively, by the same application way, and 150 mg of D (+) Cloprostenol at day 6. The ovarian activity was daily monitored, with the help of an ultra-sound machine, from day 0 to estrus or until day 11 on those animals, which did not answer to prostaglandin. The application of 8 or 10 mg of buserelin at an unknown phase of diestrus, in female crossbred cattle, promoted an emergence of a new follicular growth wave faster than the applications of 4 or 6 mg of the same hormones, while the other evaluated parameters did not differ among treatments

Luteal dynamics in goats: morphological and endocrine features

The aim of this study was to establish the morphologic and endocrine characteristics of luteal dynamics in goats. It was used Toggenburg female goats that showed natural estrus in a 48-hour interval. After estrus, ultrasonographic evaluations of the ovaries were daily performed during 21 days using a portable device (5MHz probe). Blood sample was collected for plasma progresterone (P4) determination. Corpora lutea were detected for the first time on day 5 and progressively increased in size until D9 (1.26 ± 0.08 cm²), with no variation on subsequent days. In females with one ovulation, the first visualization of the corpora lutea was earlier than in those with multiple ovulation (4.54 ± 0.18 vs 5.74 ± 0.25 days). At the moment of the first visualization, luteal area was smaller in animals with single ovulation. Plasma P4 concentration progressively increased until day 9 and it did not show significant increase until luteolysis, characterized by a sharp decrease in P4 concentration, reaching values below 1 ng/mL in 24 hours. The luteal area slowly and gradually decreased in size. It was observed a significant positive correlation between P4 concentration and area during luteogenesis and luteolysis (r = 0.63 and r = 0.50, respectively). When corpus luteum reached its maximum size (D9), female with more than one corpora lutea, with a greater luteal tissue area, did not show P4 concentration higher than those with one ovulation (5.92 ± 0.59 vs 7.04 ± 0.79 ng/mL). These results show that luteal dynamics in Toggenbur goats follow a similar pattern to those observed in other goat breeds and luteal tissue growth was positively correlated with corpora lutea functionality.Objetivou-se neste estudo estabelecer as características morfológicas e endócrinas da dinâmica luteal em cabras. Foram utilizadas fêmeas da raça Toggenburg que manifestaram estro natural em um intervalo de 48 horas. Após o estro, foram realizadas avaliações ultrassonográficas diárias dos ovários durante 21 dias, utilizando-se um aparelho portátil (5 MHz). Amostras de sangue foram coletadas para dosagem de progesterona (P4) no plasma. Os corpos lúteos foram detectados pela primeira vez no D5 e aumentaram progressivamente de tamanho até o D9 (1,26 ± 0,08 cm²), não havendo variação nos dias subsequentes. Nas fêmeas com uma ovulação, a primeira visualização do corpo lúteo foi mais precoce que naquelas com ovulação múltipla (4,54 ± 0,18 vs 5,74 ± 0,25 dias). No momento da primeira visualização, a área luteal foi menor nos animais com uma ovulação. A concentração plasmática de P4 aumentou progressivamente até o D9 e não apresentou aumento significativo até o momento da luteólise, caracterizada por uma acentuada queda da concentração de P4, atingindo valores inferiores a 1 ng/mL em um intervalo de 24 horas. A área luteal diminuiu de forma lenta e gradual. Foi observada uma correlação positiva significativa entre a área e a concentração de P4 durante a lutegêonese e a luteólise (r = 0,63 e r = 0,50; respectivamente). No dia em que o corpo lúteo atinge sua área máxima (D9), as fêmeas com mais de um corpo lúteo, com maior área de tecido luteal, não apresentaram concentração de P4 superior à daquelas com uma ovulação (5,92 ± 0,59 vs 7,04 ± 0,79 ng/mL). Esses resultados indicam que a dinâmica luteal em caprinos da raça Toggenburg segue padrões semelhantes aos observados em outras raças e em outras espécies e que o crescimento de tecido luteal refletiu positivamente na funcionalidade do corpo lúteo