Caracterización y biocompatibilidad de matrices de colágeno para uso en regeneración ósea

El colágeno, la proteína más abundante del hueso, juega un rol fundamental en la integridad biológica y estructural del esqueleto. Previamente se han usado membranas de colageno sin un orden molecular, para fabricar matrices para la regeneración del tejido óseo. El colágeno es así un candidato natural para mejorar o reemplazar tejidos u órganos dañados. El objetivo del presente trabajo es caracterizar matrices de colágeno ordenado o no (con una distribución al azar) y estudiar su biocompatiblidad con células óseas en cultivo. Se estilizó colágeno extraído del tendón de Aquiles bovino, nativo, obtenido en nuestro laboratorio con un grado de pureza de un 98% [Ruderman et al., 2007]. Se fabricaron matrices de colágeno no ordenado y de colágeno ordenado según patentes. Las características de la superficie de membranas fueron observadas por SEM y microscopia óptica (coloración de Sirius red). Las membranas ordenadas mostraron una topografía típica en forma de canales en correlación con un ordenamiento molecular. Se evaluó la biocompatibilidad de células osteoblásticas y macrófagos murinos crecidos sobre los dos tipos de películas de colágeno (No ordenado y ordenado). Se estudió la adhesión, proliferación (conteo de células teñidas con Giemsa) y diferenciación al fenotipo osteoblasto (expresión de fosfatasa alcalina y nódulos de mineralización). Se encontró que las células (osteoblasticas y macrófagos) crecidas sobre las matrices de colágeno ordenado se adhieren mas (1.5-1.7 veces) y crecen mejor (2.3–2.6 veces) que sobre las matrices de colágeno no ordenado. Macrófagos Raw 264.7 teñidos con naranja de acridina revelaron mayor cantidad de células muertas sobra las matrices de colágeno no ordenado. Preosteoblástos MC3T3E1 (4 semanas en medio osteogénico) expresaron más fosfatasa alcalina (2.6 veces) y mineral en la matriz de colágeno. Los estudios preliminares sugieren que las matrices preparadas en base a colágeno natural podrían ser aplicadas en la regeneración del tejido

The Lightfield microscope eyepiece

Lightfield microscopy has raised growing interest in the last few years. Its ability to get three-dimensional information about the sample in a single shot makes it suitable for many applications in which time resolution is fundamental. In this paper we present a novel device, which is capable of converting any conventional microscope into a lightfield microscope. Based on the Fourier integral microscope concept, we designed the lightfield microscope eyepiece. This is coupled to the eyepiece port, to let the user exploit all the host microscope's components (objective turret, illumination systems, translation stage, etc.) and get a 3D reconstruction of the sample. After the optical design, a proof-of-concept device was built with off-the-shelf optomechanical components. Here, its optical performances are demonstrated, which show good matching with the theoretical ones. Then, the pictures of different samples taken with the lightfield eyepiece are shown, along with the corresponding reconstructions. We demonstrated the functioning of the lightfield eyepiece and lay the foundation for the development of a commercial device that works with any microscope

Target analysis and retrospective screening of mycotoxins and pharmacologically active substances in milk using an ultra-high-performance liquid chromatography/high-resolution mass spectrometry approach

Milk is a nutritious food suitable for infants and adults, and it plays an important role in the human diet. However, it may also be a vehicle for food contaminants. In this report, we developed a method using ultra-high-performance liquid chromatography coupled with high-resolution mass spectrometry (UHPLC-Q-Exactive Orbitrap HRMS; Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA) for simultaneous identification of target pharmacologically active substances and mycotoxins in milk. We also used the Q-Orbitrap operating in full scan mode to identify other possible drugs and microbial metabolites that occurred in samples. Fifty-six commercially available milk samples from the Italian market were analyzed. Investigated analytes were extracted using a QuEChERS (quick, easy, cheap, effective, rugged, and safe) approach. Method detection and quantification limits and performance criteria set by European regulations were fulfilled. Pharmacologically active substances were detected in 49% of samples (range 0.007–4.53 ng/mL), including nontarget mycotoxins. Retrospective analysis allowed us to identify other antibiotics and pharmacologically active substances, as well as nonregulated fungal/bacterial metabolites at a relatively high incidence. From the obtained values, the need for continuous monitoring of contaminants in the milk production chain is clear. This is the first study to assess the presence of pharmacologically active substances, mycotoxins, and other microbial metabolites in Italian milk samples using the UHPLC-Q-Orbitrap HRMS system

Target analysis and retrospective screening of multiple mycotoxins in pet food using UHPLC-Q-Orbitrap HRMS

A comprehensive strategy combining a quantitative method for 28 mycotoxins and a post-target screening for other 245 fungal and bacterial metabolites in dry pet food samples were developed using an acetonitrile-based extraction and an ultrahigh-performance liquid chromatography coupled to high-resolution mass spectrometry (UHPLC-Q-Orbitrap HRMS) method. The proposed method showed satisfactory validation results according to Commission Decision 2002/657/EC. Average recoveries from 72 to 108% were obtained for all studied mycotoxins, and the intra-/inter-day precision were below 9 and 14%, respectively. Results showed mycotoxin contamination in 99% of pet food samples (n = 89) at concentrations of up to hundreds µg/kg, with emerging Fusarium mycotoxins being the most commonly detected mycotoxins. All positive samples showed co-occurrence of mycotoxins with the simultaneous presence of up to 16 analytes per sample. In the retrospective screening, up to 54 fungal metabolites were tentatively identified being cyclopiazonic acid, paspalitrem A, fusaric acid, and macrosporin, the most commonly detected analytes

The impact of using combinatorial optimisation for static caching of posting lists

Abstract. Caching posting lists can reduce the amount of disk I/O required to evaluate a query. Current methods use optimisation proce-dures for maximising the cache hit ratio. A recent method selects posting lists for static caching in a greedy manner and obtains higher hit rates than standard cache eviction policies such as LRU and LFU. However, a greedy method does not formally guarantee an optimal solution. We investigate whether the use of methods guaranteed, in theory, to find an approximately optimal solution would yield higher hit rates. Thus, we cast the selection of posting lists for caching as an integer linear pro-gramming problem and perform a series of experiments using heuristics from combinatorial optimisation (CCO) to find optimal solutions. Using simulated query logs we find that CCO yields comparable results to a greedy baseline using cache sizes between 200 and 1000 MB, with modest improvements for queries of length two to three

Caracterización y biocompatibilidad de matrices de colágeno para uso en regeneración ósea

El colágeno, la proteína más abundante del hueso, juega un rol fundamental en la integridad biológica y estructural del esqueleto. Previamente se han usado membranas de colageno sin un orden molecular, para fabricar matrices para la regeneración del tejido óseo. El colágeno es así un candidato natural para mejorar o reemplazar tejidos u órganos dañados. El objetivo del presente trabajo es caracterizar matrices de colágeno ordenado o no (con una distribución al azar) y estudiar su biocompatiblidad con células óseas en cultivo. Se estilizó colágeno extraído del tendón de Aquiles bovino, nativo, obtenido en nuestro laboratorio con un grado de pureza de un 98% [Ruderman et al., 2007]. Se fabricaron matrices de colágeno no ordenado y de colágeno ordenado según patentes. Las características de la superficie de membranas fueron observadas por SEM y microscopia óptica (coloración de Sirius red). Las membranas ordenadas mostraron una topografía típica en forma de canales en correlación con un ordenamiento molecular. Se evaluó la biocompatibilidad de células osteoblásticas y macrófagos murinos crecidos sobre los dos tipos de películas de colágeno (No ordenado y ordenado). Se estudió la adhesión, proliferación (conteo de células teñidas con Giemsa) y diferenciación al fenotipo osteoblasto (expresión de fosfatasa alcalina y nódulos de mineralización). Se encontró que las células (osteoblasticas y macrófagos) crecidas sobre las matrices de colágeno ordenado se adhieren mas (1.5-1.7 veces) y crecen mejor (2.3–2.6 veces) que sobre las matrices de colágeno no ordenado. Macrófagos Raw 264.7 teñidos con naranja de acridina revelaron mayor cantidad de células muertas sobra las matrices de colágeno no ordenado. Preosteoblástos MC3T3E1 (4 semanas en medio osteogénico) expresaron más fosfatasa alcalina (2.6 veces) y mineral en la matriz de colágeno. Los estudios preliminares sugieren que las matrices preparadas en base a colágeno natural podrían ser aplicadas en la regeneración del tejido.Facultad de Ciencias Exacta

Caracterización y biocompatibilidad de matrices de colágeno para uso en regeneración ósea

El colágeno, la proteína más abundante del hueso, juega un rol fundamental en la integridad biológica y estructural del esqueleto. Previamente se han usado membranas de colageno sin un orden molecular, para fabricar matrices para la regeneración del tejido óseo. El colágeno es así un candidato natural para mejorar o reemplazar tejidos u órganos dañados. El objetivo del presente trabajo es caracterizar matrices de colágeno ordenado o no (con una distribución al azar) y estudiar su biocompatiblidad con células óseas en cultivo. Se estilizó colágeno extraído del tendón de Aquiles bovino, nativo, obtenido en nuestro laboratorio con un grado de pureza de un 98% [Ruderman et al., 2007]. Se fabricaron matrices de colágeno no ordenado y de colágeno ordenado según patentes. Las características de la superficie de membranas fueron observadas por SEM y microscopia óptica (coloración de Sirius red). Las membranas ordenadas mostraron una topografía típica en forma de canales en correlación con un ordenamiento molecular. Se evaluó la biocompatibilidad de células osteoblásticas y macrófagos murinos crecidos sobre los dos tipos de películas de colágeno (No ordenado y ordenado). Se estudió la adhesión, proliferación (conteo de células teñidas con Giemsa) y diferenciación al fenotipo osteoblasto (expresión de fosfatasa alcalina y nódulos de mineralización). Se encontró que las células (osteoblasticas y macrófagos) crecidas sobre las matrices de colágeno ordenado se adhieren mas (1.5-1.7 veces) y crecen mejor (2.3–2.6 veces) que sobre las matrices de colágeno no ordenado. Macrófagos Raw 264.7 teñidos con naranja de acridina revelaron mayor cantidad de células muertas sobra las matrices de colágeno no ordenado. Preosteoblástos MC3T3E1 (4 semanas en medio osteogénico) expresaron más fosfatasa alcalina (2.6 veces) y mineral en la matriz de colágeno. Los estudios preliminares sugieren que las matrices preparadas en base a colágeno natural podrían ser aplicadas en la regeneración del tejido.Facultad de Ciencias Exacta