Efeitos dos óleos essenciais de Rosmarinus officinalis Linn. e Origanum vulgare Linn. de diferentes origens em Sporothrix brasiliensis e complexo Sporothrix schenckii

Rosmarinus officinalis L. (rosemary) and Origanum vulgare L. (oregano) are known to have antimicrobial properties, but studies on sporotrichosis are scarce. This study aimed to evaluate the anti-Sporothrix spp. activity of essential oils from commercial products and oils extracted from aerial parts of these plants and analyze their chemical constituents. S. schenckii complex and S. brasiliensis (n: 25) isolated from humans, cats, dogs, and environmental soil were tested through M27-A3 guidelines of CLSI with modification for phytotherapics. The essential oils of R. officinalis L. were similar for MIC50 and MFC50 ≤2.25mg/mL for extracted oil; and 4.5mg/mL and 9mg/mL, respectively, for commercial oil. Both products showed MIC90 of 18mg/mL and MFC90 of 36mg/mL. In O. vulgare L., the extracted oil had better activity with MIC50 and MFC50 ≤2.25mg/mL, and MIC90 and MFC90 of 4.5mg/mL, whereas the commercial oil showed MIC50 and MFC50 of 9mg/mL and MIC90 18mg/mL, respectively, and MFC90 of 36mg/mL. Through gas chromatography (CG/FID), thymol and α-terpinene were majority for extracted oil of O. vulgare L., and carvacrol and γ-terpinene made up the majority of the commercial oil. Both essential oils of R. officinalis L. showed 1,8-cineole and α-pinene as major. The fungal isolates were susceptible to all tested essential oils, including in itraconazole-resistant S. brasiliensis isolates. The extracted and commercial oils of the plants presented in vitro anti-Sporothrix spp. activity, and they are promising for treatment of sporotrichosis, including in cases refractory to itraconazole. More studies should be performed about toxicity and in vivo efficacy for its safe use.Rosmarinus officinalis L. (alecrim) e Origanum vulgare L. (orégano) são conhecidos pelas propriedades antimicrobianas, entretanto seus estudos na esporotricose são escassos. Este trabalho objetivou avaliar a atividade anti-Sporothrix spp. de óleos extraídos e comerciais dessas plantas e analisar seus constituintes químicos. Isolados do complexo S. schenckii e S. brasiliensis (n: 25) de humanos, gatos, cães e solo, foram testados pela diretriz M27-A3 do CLSI com modificações para fitoterápicos. Os óleos de R. officinalis L. foram similares com CIM50 e CFM50 ≤2.25mg/mL para extraído; e 4.5mg/mL e 9mg/mL, respectivamente, para comercial. Ambos os produtos demonstraram CIM90 de 18mg/mL e CFM90 de 36mg/mL. Em O. vulgare L., o óleo extraído apresentou melhor atividade com CIM50 e CFM50≤2.25mg/mL e CIM90 e CFM90 de 4.5mg/mL, ao passo que o óleo comercial mostrou CIM50 e CFM50 de 9mg/mL; e CIM90 de 18mg/mL e CFM90 de 36mg/mL. Por meio da cromatografia gasosa (CG/FID), timol e α-terpineno foram majoritários para o óleo extraído de O. vulgare L., e carvacrol e γ-terpineno para o comercial. Ambos os óleos de R. officinalis L. apresentaram 1,8-cineol e α-pineno como prevalentes. Os isolados foram sensíveis a todos os óleos essenciais testados, inclusive S. brasiliensis, resistentes ao itraconazol. Os óleos extraídos e comerciais de R. officinalis L. e O. vulgare L. apresentaram atividade anti-Sporothrix spp. in vitro e são promissores para o tratamento da esporotricose, inclusive em casos refratários ao itraconazol. Mais estudos devem ser realizados sobre toxicidade e eficácia in vivo para seu uso seguro

Atividade antibacteriana de óleos essenciais de Origanum vulgare (orégano) e Ocimum basilicum (manjericão) e sua aplicação em massa para embutido cárneo / Antimicrobial activity of essential oils of Origanum vulgare (oregano) and Ocimum basilicum (basil) and its application in meat sausage

A busca por aditivos naturais em alimentos tem aumentado devido à reação negativa dos consumidores em relação aos aditivos químicos adicionados intencionalmente em produtos industrializados com a finalidade de aumentar a vida útil dos mesmos. Na mesma proporção o interesse sobre óleos essenciais e suas aplicações em alimentos também tem crescido e isto se dá devido ao seu elevado potencial antimicrobiano e antioxidante, tornando-se uma alternativa e gerando uma nova perspectiva de uso. Neste contexto, o objetivo deste estudo foi verificar a atividade antimicrobiana de óleos essenciais de Origanum vulgare (orégano) e Ocimum basilicum (manjericão), e sua aplicação em um produto cárneo para controle de microrganismos indesejáveis. O efeito antimicrobiano foi analisado pelo teste de disco-difusão e pela determinação da concentração bactericida mínima (CBM) frente a Salmonella enterica sorotipos Typhimurium e Enteritidis, Escherichia coli O157:H7, Staphylococcus aureus e Listeria monocytogenes. Realizou-se avaliação microbiológica em massa para embutido cárneo experimentalmente contaminada com Salmonella enterica adicionada dos óleos essenciais nas concentrações 0,5%, 1,0% e 1,5%, após 0, 24, 48 e 72 horas de estocagem a 4°C. Nos testes de disco-difusão e CBM, o óleo essencial mais eficaz foi o de O. vulgare, seguido da mistura dos óleos essenciais de O. vulgare e O. basilicum. O óleo essencial de O. vulgare e a mistura dos óleos essenciais de O. vulgare e O. basilicum na concentração 0,5% e 1,0% não foram capazes de eliminar S. Enteritidis e S. Typhimurium da massa experimentalmente contaminada. Entretanto, na concentração de 1,5%, S. Enteritidis foi eliminada por ambos os tratamentos e S. Typhimurium somente pelo óleo essencial de O. vulgare. Quando avaliado sensorialmente, o embutido cárneo na concentração de 1,5% não obteve boa aceitação pelos consumidores. Apesar de ter apresentado efeito preventivo da contaminação da massa para embutido por Salmonella, o uso dos óleos essenciais estudados resultaram em alterações de sabor inaceitáveis pelos consumidores

Chemical characterization, antioxidant, cytotoxic, and antibacterial activities of Eugenia uniflora L. and Psidium cattleianum Sabine essential oils against Klebsiella pneumoniae and Acinetobacter baumannii/ Caracterização química, antioxidante, citotóxica e antibacteriana dos óleos essenciais de Eugenia uniflora L. e Psidium cattleianum Sabine contra Klebsiella pneumoniae e Acinetobacter baumannii

INTRODUCTION: Eugenia uniflora L. and Psidium cattleianum Sabine essential oils (EO) can be biologically active and serve as novel sources of antibiotics for Klebsiella pneumoniae and Acinetobacter baumannii bacteria.METHODS: The EO of E. uniflora L. (EOE) and P. cattleianum Sabine (EOP) were extracted from de leaves of the plants and chemically characterized by gas chromatography-mass spectrometry (GC-MS). The antioxidant potential was evaluated by the DPPH (2,2-diphenyl-1-picryl-hydrazyl-hydrate) technique and the cytotoxicity evaluated in mammalian VERO cell line by MTT (3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide) assay. The antibacterial activity of EOE and EOP was assessed by the broth microdilution method.RESULTS: The major compounds of EOE were benzofuran (24.38%), germacrene B (20.12%), ?-elemene (9.33%) and ?-cubebene (8.55%), and for EOP were ?-pinene (24.25%), ?-caryophyllene (20.45%), and eucalyptol (10.43%). Both EO tested showed low antioxidant effect and dose-dependent cytotoxicity in VERO cell line. The EOE was less toxic for the mammalian cells with an IC50 (half maximal inhibitory concentration) index of 75.0 mg.mL-1. The EOP and EOE were more active against A. baumannii, with a minimum inhibitory concentration (MIC) of 14.0 and 56.0 mg.mL-1 and a minimal bactericide concentration (MBC) of 14.0 and 112.0 mg.mL-1, respectively.  CONCLUSIONS: Although EOE and EOP have low antioxidant and antibacterial activity against A. baumanni and K. pneumoniae new approaches can be applied to improve this effect in vivo.  

Atividade in vitro do óleo essencial de Cuminum cyminum contra Haemonchus contortus de ovinos / In vitro activity of the essential oil of Cuminum cyminum against Haemonchus contortus of sheep

A maior dificuldade encontrada por criadores de ovinos é o controle dos nematódeos gastrintestinais, estes constituem uma das principais causas de perdas na produção. A utilização intensa, há décadas, de anti-helmínticos, induziu a instalação de resistência a praticamente todos os princípios ativos disponíveis. Existe a necessidade de novas propostas de controle, visando isto, o objetivo deste estudo foi avaliar o óleo essencial de Cuminum cyminum, in vitro, contra ovos, larvas de primeiro estágio e larvas de terceiro estágio de Haemonchus contortus, descrever os principais constituintes e a CI 50. O óleo foi extraído de sementes através do aparelho de clevenger e para determinar os principais constituintes foi realizada a cromatografia gasosa acoplada a espectrometria de massa. Os ovos e larvas foram obtidos através da coleta de fezes de ovinos infectados. Foram realizados os testes de inibição da eclosão de ovos, inibição da migração larval e inibição do desenvolvimento larval. As concentrações utilizadas do óleo foram: 9,4; 4,7; 2,35; 1,17; 0,58 mg/mL, todos os testes acompanhados de controle positivo anti-helmíntico comercial, controle negativo água destilada e controle com tween. Os resultados obtidos na maior concentração do óleo (9,4mg/mL) foram de 98,62% para inibição da eclosão, 69,12% para inibição do desenvolvimento e 23,45% para inibição da migração. Podemos concluir que o óleo essencial apresentou resultados promissores, que podem acrescentar futuramente no controle destes parasitos

Potencial terapéutico de Bixa orellana L. y Triticum aestivum Fármacos activos en el tratamiento de lesiones térmicas

Lesões térmicas configuram um tipo diferenciado de ferida cutânea, necessitando de atenção adequada. Sendo assim, objetivou-se avaliar a ação terapêutica de extratos de Bixa orellana L. e Triticum aestivum como ativos em formulações tópicas frente a lesões térmicas de 2º grau em modelo experimental. Primeiramente, identificou-se os compostos do óleo de urucum. No ensaio, feridas induzidas experimentalmente foram tratadas diariamente com: fórmula contendo óleo de urucum e extrato aquoso de trigo (LCFT 2001), fórmula com óleo de urucum e extrato etanólico de trigo (LCFT 2002), pomada comercial (CP), ausência de tratamento (CN). Aos dois, cinco, oito, 14 e 25 dias, avaliou-se clinicamente a presença de exsudato, edema, necrose, crosta, granulação e epitelização. Também, determinou-se a área de lesão, e amostras de pele foram coletadas para avaliação histológica e tensiométrica. Clinicamente, aos oito dias, as fórmulas apresentaram menor percentual de crosta que os grupos controle e ainda LCFT 2001 demonstrou maior percentual de granulação. Histologicamente, aos cinco dias o LCFT 2002 apresentou angiogênese semelhante ao CP, porém menor inflamação. Aos oito dias, as fórmulas continham angiogênese em arcos, enquanto os grupos controle angiogênese fina e o LCFT 2001 demonstrou inflamação exuberante, enquanto o CP com inflamação moderada. Conclui-se que formulações contendo extratos de trigo e urucum, estimulam a cicatrização de lesões térmicas.Thermal lesions constitute a differentiated type of skin wound, requiring adequate attention. Thus, the objective of this study was to evaluate the therapeutic action of Bixa orellana L. and Triticum aestivum extracts as active in topical formulations against 2nd degree thermal lesions in an experimental model. First, the annatto oil compounds were identified. In the trial, experimentally induced wounds were treated daily with: formula containing annatto oil and aqueous wheat extract (LCFT 2001), formula containing annatto oil and ethanolic wheat extract (LCFT 2002), commercial ointment (CP), no treatment (CN). At two, five, eight, 14 and 25 days, the presence of exudate, edema, necrosis, crust, granulation and epithelialization was clinically evaluated. Also, the lesion area was determined, and skin samples were collected for histological and tensiometric evaluation. Clinically, at eight days, the formulas presented lower percentage of crust than the control groups and LCFT 2001 showed higher percentage of granulation. Histologically, at five days, LCFT 2002 presented angiogenesis similar to CP, but less inflammation. At eight days, the formulas contained angiogenesis in arches, whereas the control groups fine angiogenesis and the LCFT 2001 showed exuberant inflammation, while the CP with moderate inflammation. It is concluded that formulations containing extracts of wheat and annatto stimulate the healing of thermal lesions.Las lesiones térmicas constituyen un tipo diferenciado de herida en la piel, que requiere atención adecuada. Así, el objetivo de este estudio fue evaluar la acción terapéutica de los extractos de Bixa orellana L. y Triticum aestivum como activos en formulaciones tópicas contra lesiones térmicas de segundo grado en un modelo experimental. Primero, se identificaron los compuestos de aceite de annato. En el ensayo, las heridas inducidas experimentalmente se trataron diariamente con: fórmula que contiene aceite de achiote y extracto acuoso de trigo (LCFT 2001), fórmula que contiene aceite de achiote y extracto de trigo etanólico (LCFT 2002), pomada comercial (CP), sin tratamiento (CN) A los dos, cinco, ocho, 14 y 25 días, se evaluó clínicamente la presencia de exudado, edema, necrosis, corteza, granulación y epitelización. Además, se determinó el área de la lesión y se recogieron muestras de piel para evaluación histológica y tensiométrica. Clínicamente, a los ocho días, las fórmulas presentaron un menor porcentaje de corteza que los grupos de control y LCFT 2001 mostró un mayor porcentaje de granulación. Histológicamente, a los cinco días, LCFT 2002 presentó una angiogénesis similar a la CP, pero menos inflamación. A los ocho días, las fórmulas contenían angiogénesis en arcos, mientras que los grupos de control de angiogénesis fina y el LCFT 2001 mostraron inflamación exuberante, mientras que la CP con inflamación moderada. Se concluye que las formulaciones que contienen extractos de trigo y anato estimulan la curación de las lesiones térmicas

In vitro activity of essential oil of Origanum vulgare L. in clinical isolates from Aspergillus spp

Aspergillus fumigatus, A. flavus e A. niger são os mais importantes agentes etiológicos da aspergilose, relevante micose aviária, com tratamento ineficaz e altas taxas de mortalidade. Em vista da importância da aspergilose, da necessidade de prospectar novos fármacos e do potencial terapêutico do óleo essencial de Origanum vulgare L. (OEO), o orégano, objetivou-se avaliar a sensibilidade in vitro de isolados clínicos de Aspergillus spp. em relação ao OEO. O óleo foi obtido por hidrodestilação em Clevenger, e a análise química realizada por cromatografia de massa (GC/MS). Observaram-se 15 diferentes compostos ativos, sendo 4-terpineol, hidrato de sabinene e timol os majoritários. Nos testes de microdiluição em caldo (Reference..., 2008), todos os isolados (n= 23) foram sensíveis ao OEO: A. fumigatus teve CIM entre 28,125mg/mL (0,1875%) e 450mg/mL (3,0%), A. flavus entre 112,5mg/mL (0,75%) e 450mg/mL, e A. niger 112,5mg/mL. CFM variou de 112,5mg/mL a 450mg/mL nos isolados de A. fumigatus, de 225mg/mL (1,5%) a 450mg/mL em A. flavus, e foi de 450mg/mL em A. niger. CIM e CFM foram idênticos em 6/14 isolados, o que demonstra que o óleo com a mesma concentração pode ter capacidade fungistática e fungicida. CIM 90 correspondeu à CIM máxima. Os resultados demonstram a atividade anti-Aspergillus do OEO, com CIM 90 de 450mg/mL (3%).Aspergillus fumigatus, A. flavus and A. niger are the most important etiological agents of aspergillosis, a relevant avian mycosis, with innefective treatment and high mortality rates. Due the importance of aspergillosis, the necessity of prospection of new drugs and the therapeutic potential of the essential oil of Origanum vulgare L. (OEO), popularly known as oregano, aims to evaluate the in vitro sensitivity of Aspergillus spp. opposing to OEO. The oil was obtained by hydrodistillation in Clevenger, and the chemical analysis performed by mass chromatography (GC/MS). 15 different active compounds were observed, being 4-terpineol (18.4%), sabinene hydrate (15.6%) and thymol (13.6%), the majority components. In the in vitro susceptibility test, all strains showed sensitivity to OEO, MIC of Aspergillus fumigatus ranged from 28,125mg/mL (0,1875%) to 450mg/mL (3,0%), A. flavus 112,5mg/mL (0,75%) to 450mg/mL, and A. niger 112,5mg/mL. MFC ranged from 112,5mg/mL to 450mg/mL in the A. fumigatus isolates, 225mg/mL (1,5%) to 450mg/mL in A. flavus, and 450mg/mL for A. niger. The MIC and FMC values were identical in 6/14 of the isolated subjects, demonstrating that the oil with the same concentration can have fungistatic and fungicidal capacity. The results demonstrates anti-Aspergillus activities of OEO with CIM90 de 450mg/mL (3%)

<b><i>In vitro</i> study on the antimicrobial effect of hydroalcoholic extracts from <i>Mentha arvensis</i> L. (Lamiaceae) against oral pathogens</b> - doi: 10.4025/actascibiolsci.v34i4.8959

<p class="aTitulodoArtigo"><em>In vitro</em> tests could be a valuable tool for the evaluation of medicinal plants’ antimicrobial activity. <em>Mentha arvensis</em> of the Lamiaceae family is one of the most frequently traditional plants used in Brazil. Hydroalcoholic extracts of<em> M. arvensis</em> were analyzed for antimicrobial activity on <em>Streptococcus</em> <em>mutans</em>,<em> Streptococcus sobrinus </em>and <em>Candida albicans</em>. Three different assays (agar diffusion, broth macro- and micro-dilution methods) were used to evaluate antimicrobial activity. Although hydroalcoholic extracts of <em>M. arvensis</em> did not show any antibacterial effect, its antifungal activity against<em> C. albicans</em> was revealed. According to the micro-dilution broth assay, MIC of the hydroalcoholic extract from leaves of <em>M. arvensis</em> on <em>Candida albicans</em> strains ranged between 625 and 2500 mg mL^-1. Results suggest that <em>M. arvensis</em> hydroalcoholic extract may be considered a potentially antifungal agent against <em>C. albicans</em>, and a possible item for human antibiotic therapy.  However, further biological tests on the plant’s efficacy and side-effects are necessary before its use on humans.</p><p class="aresumo"><strong> </strong></p> <p class="apalavrachave"> </p><br /

In vitro study on the antimicrobial effect of hydroalcoholic extracts from Mentha arvensis L. (Lamiaceae) against oral pathogens=Estudo in vitro do efeito antimicrobiano dos extratos hidroalcólicos de Mentha arvensis L. (Lamiaceae) contra patógenos orais

In vitro tests could be a valuable tool for the evaluation of medicinal plants’ antimicrobial activity. Mentha arvensis of the Lamiaceae family is one of the most frequently traditional plants used in Brazil. Hydroalcoholic extracts of M. arvensis were analyzed for antimicrobial activity on Streptococcus mutans, Streptococcus sobrinus and Candida albicans. Three different assays (agar diffusion, broth macro- and micro-dilution methods) were used to evaluate antimicrobial activity. Although hydroalcoholic extracts of M. arvensis did not show any antibacterial effect, its antifungal activity against C. albicans was revealed. According to the micro-dilution broth assay, MIC of the hydroalcoholic extract from leaves of M. arvensis on Candida albicans strains ranged between 625 and 2500 g mL-1. Results suggest that M. arvensis hydroalcoholic extract may be considered a potentially antifungal agent against C. albicans, and a possible item for human antibiotic therapy. However, further biological tests on the plant’s efficacy and side-effects are necessary before its use on humans. <br><br>Testes in vitro podem ser uma ferramenta valiosa para a avaliação da atividade antimicrobiana de plantas medicinais. Mentha arvensis é uma das plantas medicinais brasileiras mais frequentemente utilizadas e pertence à família Lamiaceae. No presente estudo, extratos hidroalcólicos de M. arvensis foram analisados quanto à sua atividade antimicrobiana sobre Streptococcus mutans, Streptococcus sobrinus e Candida albicans. Três diferentes ensaios (métodos de difusão em ágar, macro e microdiluição em caldo) foram utilizados para avaliação da atividade antimicrobiana. Embora os extratos hidroalcólicos de M. arvensis não demonstraram qualquer efeito antibacteriano, eles apresentaram atividade antifúngica contra C. albicans. Baseado no ensaio de microdiluição em caldo, a CIM do extrato hidroalcólico das folhas de M. arvensis sobre cepas de C. albicans variaram de 625 a 2500 g mL-1. Estes achados sugerem que o extrato hidroalcólico de M. arvensis pode ser considerado um agente antifúngico em potencial contra C. albicans, e um possível candidato para antibioticoterapia humana. Contudo, mais testes biológicos sobre a eficácia e efeitos adversos desta planta são necessários antes do seu uso em humanos

In Vitro Activity of the Lamiaceae Family Species on Ancylostoma spp. Eggs

Abstract The in vitro anthelmintic activity of essential oils from the Lamiaceae family species against Ancylostoma spp. eggs was evaluated, as well as the chemical composition by GC/MS of these essential oils. The major chemical compounds for O. vulgare were 4-terpineol, while for the essential oil of O. majorana, o 4-terpineol, and for the oil of R. officinalis it was observed cineole as major components. For this, hatchability tests were performed, where the parasite eggs were exposed to concentrations of 0.07% to 2.5% of the essential oils of Origanum vulgare, Origanum majorana and Rosmarinus officinalis. The assay was accompanied by a control with thiabendazole hydrochloride, a control with distilled water and a control with tween 80. The chemical composition of each essential oil sample was determined by gas chromatography. It was observed that all oils showed ovicidal action, and the percentage of inhibition of hatchability of R. officinalis oil was greater than 90% at concentrations from 0.62% to 2.5%. As for the essential oils of O. vulgare and O. majorana, the concentrations of 0.31% to 2.5% were those that presented an inhibitory percentage greater than 90%. Thus, this study showed that the essential oils of R. officinalis, O. vulgare and O. majorana inhibit the hatchability of Ancylostoma spp., being promising for the control of this helminth

Antifungal activity of Origanum vulgare essential oil against Malassezia pachydermatis

Objetivou-se com este estudo avaliar a atividade antifúngica in vitro do óleo essencial de Origanum vulgare frente a isolados clínicos de Malassezia pachydermatis. As folhas secas de O. vulgare foram adquiridas de distribuidor comercial com certificado de qualidade e origem e encaminhadas para extração do óleo essencial e cromatografia. Para realização do teste in vitro, foi utilizada a técnica de microdiluição em caldo (CLSI M27A3) com modificações para fitofármacos e M. pachydermatis. O óleo essencial de orégano foi testado nas concentrações de 28 a 0,87mg/mL diluído em caldo Sabouraud com 1% de tween 80. Todos os isolados foram testados em duplicata. Na análise cromatográfica do óleo essencial, foram identificados 12 compostos, sendo timol, -terpineno e 4-terpineol os compostos majoritários. A CIM e a CFM dos 42 isolados de M. pachydermatis variaram de ≤0,87 a 7mg/mL, com valores de CIM50 e CIM90 de 1,18 e 3,28mg/mL, respectivamente. Com este estudo foi possível concluir que M. pachydermatis é sensível ao óleo essencial de orégano mesmo em concentrações baixas. Dessa maneira, o óleo essencial de orégano apresenta-se como promissor na bioprospecção de novos fármacos para o tratamento das otites e dermatites na clínica de pequenos animais.The aim of this study was to evaluate the in vitro antifungal activity of essential oil of Origanum vulgare against clinical isolates of Malassezia pachydermatis. The dried leaves of O. vulgare were purchased from a commercial distributor with certified quality and origin and referred for essential oil extraction and chromatography. The technique for in vitro testing was microdilution (CLSI M27A3) with modifications to phytochemicals and M. pachydermatis. The essential oil of O. vulgare was tested at concentrations from 28 to 0.87mg/mL in Sabouraud broth diluted with 1% of tween 80. All isolates were tested in duplicate. In the chromatographic analysis of the essential oil 12 compounds were identified, and thymol, α-terpinene, 4-terpineol were the major compounds. The MIC and the MFC of the 42 isolates of M. pachydermatis ranged from ≤0.87 to 7mg/mL with MIC50 and MIC90 values of 1.18 and 3.28 mg/mL, respectively. With this study it was concluded that M. pachydermatis is sensible to O. vulgare essential oil even at low concentrations. Thus, the essential oil of O. vulgare is presented as bioprospecting in the promising new drugs for the treatment of otitis and dermatitis in small animal clinic