Avaliação da atividade antifúngica do extrato etanólico de própolis G12 sobre Cryptococcus neoformans

Criptococose, doença cosmopolita, causada pelo agente etiológico Cryptococcus neoformans, está associada, principalmente, a indivíduos imunocomprometidos. O acometimento de animais é relativamente raro, exceto, nos casos associados à prolongada antibioticoterapia. A própolis é uma resina que pode apresentar diversas propriedades biológicas, incluindo atividades antibacterianas, antifúngicas e antivirais. Amostra padrão de C. neoformans foi utilizada no teste de atividade antifúngica do extrato etanólico de própolis (EEP) G12 nas concentrações de 0,1 a 1,6 mg.mL-1. As avaliações da Concentração Inibitória Mínima (CIM) e Concentração Fungicida Mínima (CFM) foram realizadas conforme DUARTE5. O efeito inibitório do EEP G12 sobre o crescimento fúngico foi observado na concentração de 0,2 mg.mL-1. A concentração de 1,6 mg.mL-1 foi considerada fungicida.Cryptococcosis is a worldwide disease caused by the etiological agent Cryptococcus neoformans. It affects mainly immunocompromised humans. It is relatively rare in animals only affecting those that have received prolonged antibiotic therapy. The propolis is a resin that can present several biological properties, including antibacterial, antifungal and antiviral activities. The standard strain C. neoformans ATTC 90112 was used to the antifungal evaluation. The tests were realized with propolis ethanol extract (PEE) G12 in concentrations from 0.1 to 1.6 mg mL-1. The evaluation of MIC and MFC were done according to DUARTE (2002)5. The inhibitory effect of PEE G12 on the fungal growing was seen at the concentration of 0.2 mg mL-1 and 1.6 mg mL-1 was considered a fungicidal one

Caracterização da diversidade genética em feijão por meio de marcadores RAPD

RAPD (Random Amplified Polymorphic DNA) markers were used to evaluate the genetic diversity among 19 common bean (Phaseolus vulgaris L.) cultivars. Amplifications using 15 decamers primers revealed 108 RAPD loci, 70 of which were polymorphic. The relative genetic distance was estimated using the complement of Jaccard’s coefficient and grouping analyses were derived from UPGMA and Tocher. These two grouping analyses confirmed the broad genetic diversity among the common bean tropical germplasm, which was divided into two main groups. These groups correspond to the Andean (genotypes with medium and large size seeds) and Mesoamerican (genotypes with small seeds) domestication centers. The relative genetic diversity was greater among the Andean cultivars than that of the Mesoamerican cultivars.Marcadores RAPD (Random Amplified Polymorphic DNA) foram usados para avaliar a diversidade genética entre 19 cultivares de feijão (Phaseolus vulgaris L.). Dos cento e oito locos de RAPD obtidos de 15 primers decâmeros, 70 foram polimórficos. Para estimar a distância genética foi usado o coeficiente de similaridade de Jaccard e as análises de agrupamento foram feitas pelos métodos UPGMA e Tocher. As análises de agrupamento confirmaram a ampla diversidade genética existente entre germoplasmas tropicais de feijão, separando as cultivares em dois grupos principais, correspondendo aos centros de domesticação Andino (genótipos de sementes médias e grandes) e Mesoamericano (genótipos de sementes pequenas). No grupo Andino, a diversidade genética relativa foi maior do que no Mesoamericano

Molecular identification of Candida dubliniensis isolated from oral lesions of HIV-positive and HIV-negative patients in São Paulo, Brazil

Candida dubliniensis é uma nova espécie recentemente descrita. Este patógeno oral emergente compartilha muitas características fenotípicas e bioquímicas com C. albicans dificultando assim a diferenciação entre elas. As mesmas, porém, mostram-se genotipicamente distintas. Este trabalho tem como objetivo identificar, pela técnica de PCR (Polymerase Chain Reaction), a possível presença de C. dubliniensis dentre amostras isoladas de candidose oral eritematosa, provenientes de pacientes HIV positivos e HIV negativos. Em um total de 37 amostras identificadas anteriormente, por método clássico, como C. albicans encontramos duas amostras de C. dubliniensis (5,4%) utilizando a técnica do PCR. Esta técnica mostrou-se útil, prática e com identificação taxonômica mais acurada.Candida dubliniensis is a new, recently described species of yeast. This emerging oral pathogen shares many phenotypic and biochemical characteristics with C. albicans, making it hard to differentiate between them, although they are genotypically distinct. In this study, PCR (Polymerase Chain Reaction) was used to investigate the presence of C. dubliniensis in samples in a culture collection, which had been isolated from HIV-positive and HIV-negative patients with oral erythematous candidiasis. From a total of 37 samples previously identified as C. albicans by the classical method, two samples of C. dubliniensis (5.4%) were found through the use of PCR. This study underscores the presence of C. dubliniensis, whose geographical and epidemiological distribution should be more fully investigated

Caracterização da diversidade genética em feijão por meio de marcadores RAPD

Marcadores RAPD (Random Amplified Polymorphic DNA) foram usados para avaliar a diversidade genética entre 19 cultivares de feijão (Phaseolus vulgaris L.). Dos cento e oito locos de RAPD obtidos de 15 primers decâmeros, 70 foram polimórficos. Para estimar a distância genética foi usado o coeficiente de similaridade de Jaccard e as análises de agrupamento foram feitas pelos métodos UPGMA e Tocher. As análises de agrupamento confirmaram a ampla diversidade genética existente entre germoplasmas tropicais de feijão, separando as cultivares em dois grupos principais, correspondendo aos centros de domesticação Andino (genótipos de sementes médias e grandes) e Mesoamericano (genótipos de sementes pequenas). No grupo Andino, a diversidade genética relativa foi maior do que no Mesoamericano

Nodulação em cultivares de feijão dos conjuntos gênicos andino e meso-americano

O objetivo deste trabalho foi determinar a capacidade de nodulação e a especificidade de feijão (Phaseolus vulgaris L.) dos conjuntos gênicos andino e meso-americano submetidos a inóculo de Rhizobium. O experimento foi estabelecido em parcelas subdivididas em blocos ao acaso, com quatorze cultivares de feijão e três estirpes de Rhizobium (R. etli KIM 5, R. etli CIAT 632 e R. tropici CIAT 899). Somente as cultivares andinas WAF 15, WAF 7, Mineiro Precoce, WAF 6 e Antioquia 8 apresentaram especificidade na nodulação. Em relação à massa seca dos nódulos, houve diferenças significativas dos tratamentos de inoculação nas cultivares andinas WAF 15, WAF 7, WAF 6 e Diacol Andino, e na cultivar meso-americana Ouro Negro. Nenhuma das cultivares restringiu a nodulação, embora tenham sido verificadas diferenças de até 53 e 103 vezes no número e massa de nódulos por planta, respectivamente. Considerando todas as cultivares e estirpes de rizóbio, WAF 15 foi a cultivar com melhor desempenho em número e massa nodular. WAF 6 foi a cultivar de pior desempenho, chegando quase ao nível de restrição da nodulação com a estirpe R. etli CIAT 632

Nodulação em cultivares de feijão dos conjuntos gênicos andino e meso-americano

The objective of this work was to determine the capacity and specificity for nodulation in dry bean (Phaseolus vulgaris L.) cultivars, arising from Andean or Mesoamerican germplasm, inoculated with Rhizobium. The experiment was a factorial 14x3 in a randomized block design with fourteen dry bean cultivars and three strains of Rhizobium (R. etli KIM 5, R. etli CIAT 632 and R. tropici CIAT 899). Only five cultivars (WAF 15, WAF 7, Mineiro Precoce, WAF 6 and Antioquia 8), all from the Andean germplasm, demonstrated nodulation specificity. In relation to the nodules' dry weight, the values revealed significative difference when comparing the inoculation treatments of the Andean cultivars WAF 15, WAF 7, WAF 6 and Diacol Andino as well as the Mesoamerican cultivar Ouro Negro. None of the cultivars completely eliminated nodulation by the less compatible Rhizobium strains, but the differences in number of nodules per plant and the nodule dry weight among inoculation with the highly specific strains and the non-specific strains was 53 and 103 times greater, respectively. Considering all of the combinations of bean cultivars and Rhizobium strains, cultivar WAF 15 was the most responsive to nodulation and demonstrated superior growth and nodule number, while cultivar WAF 6 inoculated with CIAT 632 grew very little with practically no nodulation.O objetivo deste trabalho foi determinar a capacidade de nodulação e a especificidade de feijão (Phaseolus vulgaris L.) dos conjuntos gênicos andino e meso-americano submetidos a inóculo de Rhizobium. O experimento foi estabelecido em parcelas subdivididas em blocos ao acaso, com quatorze cultivares de feijão e três estirpes de Rhizobium (R. etli KIM 5, R. etli CIAT 632 e R. tropici CIAT 899). Somente as cultivares andinas WAF 15, WAF 7, Mineiro Precoce, WAF 6 e Antioquia 8 apresentaram especificidade na nodulação. Em relação à massa seca dos nódulos, houve diferenças significativas dos tratamentos de inoculação nas cultivares andinas WAF 15, WAF 7, WAF 6 e Diacol Andino, e na cultivar meso-americana Ouro Negro. Nenhuma das cultivares restringiu a nodulação, embora tenham sido verificadas diferenças de até 53 e 103 vezes no número e massa de nódulos por planta, respectivamente. Considerando todas as cultivares e estirpes de rizóbio, WAF 15 foi a cultivar com melhor desempenho em número e massa nodular. WAF 6 foi a cultivar de pior desempenho, chegando quase ao nível de restrição da nodulação com a estirpe R. etli CIAT 632

Caracterização de sorotipo e "mating type" de Cryptococcus neoformans por PCR Multiplex

Cryptococcus neoformans is an encapsulated yeast, etiological agent of cryptococcosis. The species is commonly associated with pigeon droppings and plant materials. The aim of the present work was to verify the presence of the yeast in pigeon droppings, and to identify the isolates obtained in serotypes and mating types (MAT). Ten samples of pigeon droppings were collected in the rural area of the city of Alfenas, Brazil. Samples were inoculated in agar Niger medium for fungal isolation and 22 isolates with characteristics of C. neoformans were obtained. The serotypes and MAT were determined by multiplex PCR using specific primers. Serotypes were also determined by using the Kit Crypto Check. Among the 22 samples evaluated, eight were identified as C. neoformans by classic identification tests. These samples were characterized as serotype A by the Kit Crypto check and as serotype A MAT alpha by the multiplex PCR. The present study reinforces the evidence that pigeon droppings are a reservoir for C. neoformans and confirms the prevalence of C. neoformans var. grubii (Aalpha) among environmental isolates. It also demonstrates that multiplex PCR is an acceptable alternative for serotype analysis because it reduces the costs for each reaction and analyses serotype and MAT simultaneously.Cryptococcus neoformans é levedura encapsulada, agente etiológico da criptococose. As espécies são comumente associadas com fezes de pombos e material vegetal. O objetivo do presente trabalho foi verificar a presença de leveduras em fezes de pombos e identificar os isolados em relação aos sorotipos e "mating types". Dez amostras de fezes de pombos foram coletadas na zona rural da cidade de Alfenas, Brasil. As amostras foram inoculadas em agar Niger e 22 isolados com características de C. neoformans foram obtidos. Os sorotipos e "mating types" foram determinados pela PCR multiplex e os sorotipos foram identificados também pelo Kit Crypto Check. Dentre as 22 amostras avaliadas, oito foram identificadas como C. neoformans através dos testes clássicos. Estas amostras foram caracterizadas como sorotipo A pelo Kit Crypto check e como sorotipo A MATalfa pela PCR multiplex. O presente estudo reforça a evidência de que as fezes de pombos constituem reservatório para C. neoformans e confirma a prevalência de C. neoformans var. grubii (Aalfa) nos isolados ambientais. PCR multiplex é uma alternativa aceitável para análise do sorotipo porque reduz os custos de cada reação e analisa simultaneamente os sorotipos e "mating type"

The "in vitro" antifungal activity evaluation of propolis G12 ethanol extract on Cryptococcus neoformans

Cryptococcosis is a worldwide disease caused by the etiological agent Cryptococcus neoformans. It affects mainly immunocompromised humans. It is relatively rare in animals only affecting those that have received prolonged antibiotic therapy. The propolis is a resin that can present several biological properties, including antibacterial, antifungal and antiviral activities. The standard strain C. neoformans ATTC 90112 was used to the antifungal evaluation. The tests were realized with propolis ethanol extract (PEE) G12 in concentrations from 0.1 to 1.6 mg mL-1. The evaluation of MIC and MFC were done according to DUARTE (2002)5. The inhibitory effect of PEE G12 on the fungal growing was seen at the concentration of 0.2 mg mL-1 and 1.6 mg mL-1 was considered a fungicidal one