MAJOR GOAT MILK PROTEIN: SEPARATION AND CHARACTERIZATION BY “LAB-ON-A-CHIP” MICROFLUIDIC ELECTROPHORES

This work presents the electrophoretic profile of goat and cow milk samples and their mixtures using microfluidic and conventional electrophoresis. The microfluidic method allowed the separation of the major caseins from milk, excepting the goat κ-casein.  Besides, the major whey proteins were separated with perfect distinction of A and B β-lactoglobulin variants. Comparing to SDS-PAGE, a variation in the molecular weight was observed in all milk proteins. However, A and B β-lactoglobulin variants could not be isolated using SDS-PAGE. Although urea-PAGE did not show high resolution among whey proteins, γ-, κ-, β-, and α-caseins were clearly identified. This method also showed a lower limit detection of cow milk in mixture samples than the "lab-on-a-chip" electrophoresis. In both methods, the highest linearity obtained from plotting total percentage against cow milk concentration was observed by using cow αs1-casein (R2 = 0.986 and R² = 0.973). This result indicates that microfluidic electrophoresis is an effective tool to detect the presence of some proteins in goat and cow milk, and in mixtures. Microfluidic chip technology might will complement the current methods for analyzing milk proteins, highlighting its speed amount of reagents and whey protein separation, which showed a better result than urea or SDS-PAG

Utilização de eletroforese microfluídica na detecção da adição de soro de queijo em leite cru, pasteurizado, UHT e em pó

Dairy fraud is a problem from the economic point of view, since it causes harm to the consumer and in some cases is characterized as a public health problem, since these frauds can reduce the original nutritional components of the food or even cause microbiological contamination, chemical or physical. For this reason, methodologies aimed at proving the authenticity of dairy products have been developed. Therefore, this work aimed to evaluate the lab-on-a-chip method for the detection of fraud in cow's milk by the addition of cheese whey. Therefore, samples of raw, pasteurized, UHT and powdered milk were added with cheese whey, simulating this type of fraud, at increasing levels 0; 1; 2.5; 5; 10; 20; 30; 50% (v/v). All samples were submitted to lab-on-a-chip electrophoresis and SDS-PAGE with the aim of detecting fraud. The results obtained using the two methodologies were satisfactory regarding the separation and quantification of milk proteins. It was only possible to detect fraud from 1% addition of cheese whey to the four milk types tested by the lab-on-a-chip technique. Based on these results, it was conclude that this method can be applied as a screening mechanism for the detection of milk fraud in routines in industry laboratories. However, it is emphasized that the lab-on-a-chip technique must be submitted to a methodology validation process so that it can be used routine in milk quality laboratories.Fraudes em lácteos é um problema do ponto de vista econômico, já que traz prejuízos ao consumidor, e em alguns casos, são caracterizadas como um problema de saúde pública, visto que essas podem reduzir os componentes nutritivos originais do alimento ou mesmo provocar contaminação microbiológica, química ou física. Por este motivo, metodologias que visam a comprovação da autenticidade dos produtos lácteos têm sido desenvolvidas. Desse modo, este trabalho teve como objetivo avaliar o método lab-on-a-chip para a detecção de fraude em leite de vaca pela adição de soro de queijo. Sendo assim, amostras de leite cru, pasteurizado, UHT e em pó foram adicionadas com soro de queijo, simulando este tipo de fraude, em níveis crescentes 0; 1; 2,5; 5; 10; 20; 30; 50% (v/v). Todas as amostras foram submetidas a eletroforese lab-on-a-chip e SDS-PAGE com o objetivo de detectar fraude. Os resultados obtidos utilizando as duas metodologias foram satisfatórias quanto a separação e quantificação das proteínas do leite. Somente foi possível detectar a fraude a partir de 1% de adição de soro de queijo para os quatro tipos de leite testados pela técnica lab-on-a-chip. Com base nestes resultados, conclui-se que esse método pode ser aplicado como um mecanismo de triagem para a detecção de fraude em leite nas rotinas em laboratórios da indústria. Entretanto ressalta-se que a técnica lab-on-a-chip deve ser submetida a um processo de validação de metodologia para que possa ser utilizada na rotina em laboratórios de qualidade do leite

CARACTERIZAÇÃO DOS SISTEMAS DE ABASTECIMENTO DE ÁGUA DE QUEIJARIAS DA MICRORREGIÃO CAMPO DAS VERTENTES

O presente trabalho caracterizou os sistemas de abastecimento de água em 32 queijarias artesanais da microrregião Campo das Vertentes em Minas Gerais, e avaliou a qualidade microbiológica desta água nas quatro estações do ano, de março de 2012 a abril de 2013. Inicialmente, os produtores foram entrevistados por meio da aplicação de questionários estruturados e de check list, onde foram levantados dados relativos à propriedade rural e à água destinada à higienização das queijarias. Aproximadamente 60% das queijarias apresentaram contaminação por coliformes totais nas quatro estações do ano. Mais de 70% das queijarias apresentaram, pelo menos, uma amostra de água contaminada com E. coli durante o ano. Os produtores que realizavam o tratamento da água com filtração e cloração apresentaram menor número de amostras com presença de coliformes e E. coli. Entretanto, os resultados positivos encontrados neste grupo de produtores indicam que a dosagem de cloro residual livre mínima não tem sido totalmente atingida, provavelmente devido à falha na diluição ou armazenamento inadequado do produto clorado. Conclui-se que há necessidade de conscientização dos produtores sobre a importância da qualidade da água, de adequação da legislação estadual de queijos artesanais e do devido tratamento da água (filtração, seguida de cloração) utilizada para higienização das queijarias, de modo a obter produtos seguros aos consumidores