Chromosome stability in cryopreserved germplasm of Cyrtopodium hatschbachii (Orchidaceae)

Cyrtopodium hatschbachii is a recently-described orchid species distributed in norteastern Argentina. Natural populations of this species require conservation because they have a very restricted size and distribution and are in danger of destruction. Cryopreservation in liquid nitrogen is the most commonly-applied technique for ex situ conservation of plant genetic resources, but genetic stability after cryopreservation is an important consideration. Chromosome number and morphology are primary cytogenetic parameters that must remain stable after cold storage. We analyzed plants of C. hatschbachii cytogenetically in order to determinate their stability level. The plants from cryopreserved encapsulated seeds were stable at chromosome and phenotypic level, but showed more limited condensation of the chromatin during the first stages of their development. The chromosome number and karyotype analysis of C. hatschbachii is presented for the first time.Fil: Surenciski, Mauro Rodrigo. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Nordeste. Instituto de Botánica del Nordeste. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Agrarias. Instituto de Botánica del Nordeste; ArgentinaFil: Dematteis, Massimiliano. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Nordeste. Instituto de Botánica del Nordeste. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Agrarias. Instituto de Botánica del Nordeste; ArgentinaFil: Flachsland, Eduardo Alberto. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Nordeste. Instituto de Botánica del Nordeste. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Agrarias. Instituto de Botánica del Nordeste; Argentin

Plant regeneration of Rhabdadenia Ragonesei (Apocynaceae) by in vitro culturing of leaf explants

Se regeneraron plantas de Rhabdadenia Ragonesei Woodson (Apocynaceae) mediante el cultivo in vitro de explantes foliares en condiciones ambientales controladas. El procedimiento consistió en: 1) Desinfección de las hojas por inmersión en etanol al 70% (10 s) seguida de inmersión en NaOCl al 1,1% (15 min) y lavado tres veces con agua destilada estéril. 2) Inducción de callos y yemas mediante el cultivo de explantes foliares en el medio de Murashige y Skoog (MS) + 3 mg/L de benciladenina (BAP). 3) Subcultivo de callos y yemas en MS + 1 mg/L de BAP y 4) Enraizamiento de los vástagos obtenidos en MS + 0,5 mg/L de ácido naftalenacético.Plants of Rhabdadenia Ragonesei Woodson (Apocynaceae) were regenerated in vitro from leaves explants. The procedure employed includes: 1) Surface sterilization of leaves by immersion in 70% ethanol (10 s) followed by 1,1%NaOCl (15 min) and three wash with sterile distilled water. 2) Callus and buds induction by culture on Murashige and Skoog medium (MS) + 3 mg/L benzyladenine (BAP). 3) Subculture of callus and buds on MS + 1 mg/L BAP, and 4) Rooting on MS + 0.5 mg/L naftalenacetic acid.Fil: Flachsland, Eduardo Alberto. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Nordeste. Instituto de Botánica del Nordeste. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Agrarias. Instituto de Botánica del Nordeste; ArgentinaFil: Schinini Cacace, Aurelio. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Nordeste. Instituto de Botánica del Nordeste. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Agrarias. Instituto de Botánica del Nordeste; ArgentinaFil: Terada, Graciela. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Nordeste. Instituto de Botánica del Nordeste. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Agrarias. Instituto de Botánica del Nordeste; ArgentinaFil: Furst, Graciela. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Agrarias; ArgentinaFil: Mroginski, Luis Amado. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Nordeste. Instituto de Botánica del Nordeste. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Agrarias. Instituto de Botánica del Nordeste; Argentin

Sphenospora kevorkianii on the orchids Epidendrum paniculatum and Stanhopea graveolens newly reported in Argentina

Plants of Epidendrum paniculatum and Stanhopea graveolens were collected in May 2007 as part of a native orchids preservation project in Baritú National Park, a protected area of the Yungas subtropical forest located in the province of Salta (Northwestern Argentina). The causal agent of the rust diseases was identified as Sphenospora kevorkianii. Urediniospores were ovoid yellowish and echinulate. The telia observed on E. paniculatum were subepidermal and erumpent, in which numerous clavate paraphyses were found besides the pedicelated teliospores, longitudinally one-septate, hyaline and thin walled. This is the first report of Sphenospora kevorkianii infecting E. paniculatum and S. graveolens in Argentina.Fil: Cúndom, M. A.. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Nordeste. Instituto de Botánica del Nordeste. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Agrarias. Instituto de Botánica del Nordeste; ArgentinaFil: Galdeano, Ernestina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Nordeste. Instituto de Botánica del Nordeste. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Agrarias. Instituto de Botánica del Nordeste; ArgentinaFil: Tarrago, Jose Ramon. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Nordeste. Instituto de Botánica del Nordeste. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Agrarias. Instituto de Botánica del Nordeste; ArgentinaFil: Flachsland, Eduardo Alberto. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Nordeste. Instituto de Botánica del Nordeste. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Agrarias. Instituto de Botánica del Nordeste; Argentin

In vitro culture of embryos isolated from seeds of immature fruits of irupé (Victoria cruziana, Nymphaeaceae)

El irupé o maíz de agua (Victoria cruziana A. D. Orb.) pertenece a la familiaNymphaeaceae y despierta interés, principalmente, por la belleza de sus hojas y flores. Laobtención de semillas de esta especie acuática es dificultosa en su ambiente natural y ademáses considerada recalcitrante para el cultivo in vitro. Por este motivo, el objetivo de este trabajofue el establecimiento de una metodología para la conversión a plantas de embriones de irupéextraídos de semillas de frutos inmaduros y la obtención de material para ser empleado en lamicropropagación o en programas de restauración ambiental. Se realizó el cultivo de embrionesde frutos con seis estadios de crecimiento, hasta un máximo de cuatro semanas. Empleando elmedio basal de Murashige & Skoog, se probaron doce medios de cultivo con y sin el agregadode reguladores de crecimiento (ácido giberélico, AG3 y thidiazuron, TDZ). Los embriones seconvirtieron en plantas en todos los medios diluidos al 50% (½ MS), manteniendo el 3% desacarosa, mientras que en el medio adicionado con 10 mg/L de AG3 se obtuvieron plantascon raíces desarrolladas. Si bien el cultivo de embriones derivados de las semillas en losestadios tempranos del fruto no permitió la regeneración de plantas, esta fue posible cuando losexplantes derivaron de frutos en estadios tardíos.The irupé or water corn (Victoria cruziana A. D. Orb.) belongs to the Nymphaeaceae family and arouses interest mainly due to the beauty of its leaves and flowers. Obtaining seeds of this aquatic species in its natural environment is challenging, and it is also considered a recalcitrant species for in vitro culture. For this reason, the aim of this work was to establish a methodology for the conversion into plants of irupé embryos extracted from seeds of immature fruits and to obtain material to be used in micropropagation or in environmental restoration programs. Embryo culture of fruits in six growth stages was carried out up to a maximum of four weeks. Using Murashige & Skoog’s basal medium, twelve culture media with and without the addition of growth regulators (gibberellic acid, AG3 and thidiazuron, TDZ) were tested. Embryos converted into plants in all media diluted to 50% (½ MS) with 3% sucrose, while plants with developed roots were obtained in the medium with the addition of 10 mg/L of GA3 . Although the culture of embryos derived from seeds in early fruit stages did not allow plant regeneration, this was possible when explants derived from fruits in late developmental stages.Fil: Terada, Graciela. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Agrarias; ArgentinaFil: Flachsland, Eduardo Alberto. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Agrarias; ArgentinaFil: Medina, Ricardo Daniel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Nordeste. Instituto de Botánica del Nordeste. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Agrarias. Instituto de Botánica del Nordeste; Argentina. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Agrarias; ArgentinaFil: Mignolli, Francesco. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Nordeste. Instituto de Botánica del Nordeste. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Agrarias. Instituto de Botánica del Nordeste; Argentina. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Agrarias; ArgentinaFil: Vidoz, María Laura. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Agrarias; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Nordeste. Instituto de Botánica del Nordeste. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Agrarias. Instituto de Botánica del Nordeste; Argentin

Cryopreservation of Cyrtopodium hatschbachii Pabst (Orchidaceae) immature seeds by encapsulation-dehydration

ABSTRACT: The aim of the present study was to investigate the efficiency of the encapsulation-dehydration technique for cryopreservation of Cyrtopodium hastchbachii Pabst seeds. Immature seeds of this species were cryopreserved by an encapsulation-dehydration technique. Seeds of five immature pods, 120 days after pollination, were encapsulated in 3% calcium alginate matrix and pretreated in liquid medium supplemented with 0.08 M sucros

Cryopreservation of Cyrtopodium hatschbachii Pabst (Orchidaceae) immature seeds by encapsulation-dehydration

The aim of the present study was to investigate the efficiency of the encapsulation-dehydration technique for cryopreservation of Cyrtopodium hastchbachii Pabst seeds. Immature seeds of this species were cryopreserved by an encapsulation-dehydration technique. Seeds of five immature pods, 120 days after pollination, were encapsulated in 3% calcium alginate matrix and pretreated in liquid medium supplemented with 0.08 M sucrose (24 h), 0.15 M sucrose (24 h), 0.25 M sucrose (48 h), 0.5 M sucrose (24 h) and 0.75 M sucrose (24 h) in shaker at 60 rpm. Alginate beads were dehydrated 5 h in silicagel and immersed in liquid nitrogen for 12 h. Cryopreserved beads were thawed at 30°C for 1 min, rehydrated using the same liquid mediums [0.75 M sucrose (24 h), 0.5 M sucrose (24 h), 0.25 M sucrose (48 h) and 0.15 M sucrose (24 h)] and cultivated in half strength Murashige & Skoog medium (1962) with the addition of 2 g/L activated charcoal. Sixty four percent of seeds survived and developed into acclimatized plants after being cryopreserved. In this work, the encapsulation-dehydration technique was employed for first time in Cyrtopodium hatschbachii.Fil: Surenciski, Mauro Rodrigo. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Nordeste. Instituto de Botánica del Nordeste. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Agrarias. Instituto de Botánica del Nordeste; ArgentinaFil: Flachsland, Eduardo Alberto. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Nordeste. Instituto de Botánica del Nordeste. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Agrarias. Instituto de Botánica del Nordeste; ArgentinaFil: Terada, Graciela. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Nordeste. Instituto de Botánica del Nordeste. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Agrarias. Instituto de Botánica del Nordeste; ArgentinaFil: Mroginski, Luis Amado. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Nordeste. Instituto de Botánica del Nordeste. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Agrarias. Instituto de Botánica del Nordeste; ArgentinaFil: Rey de Badaró, Hebe Yolanda. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Nordeste. Instituto de Botánica del Nordeste. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Agrarias. Instituto de Botánica del Nordeste; Argentin

In vitro tuberization and plant regeneration from multinodal segment culture of Habenaria bractescens Lindl., an Argentinean wetland orchid

Tuberization in many terrestrial orchids represents the most important physiological process for reproduction and survival. An in vitro controlled and reproducible tuberization and plant regeneration system was designed for Habenaria bractescens. Multinodal segments were incubated on Murashige and Skoog (MS) medium supplemented with different concentrations of N6-benzylaminopurine (BAP) and sucrose. After 45 days, the explants developed root tubers in vitro in 8 of the 12 media assayed. MS medium with 87.6 mM sucrose plus 4.4 μM BAP was one of the most effective for stimulating root tubers. Plants derived from in vitro root tubers were successfully transferred to the greenhouse without any acclimatization. The morphology and anatomy of the regenerated underground organs were examined to find identifying and distinguishing features. The protocol to regenerate root tubers of H. bractescens will be useful to study the basic aspects and control of tuberization and to carry out restoration programs.Fil: Medina, Ricardo Daniel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Nordeste. Instituto de Botánica del Nordeste. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Agrarias. Instituto de Botánica del Nordeste; ArgentinaFil: Flachsland, Eduardo Alberto. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Nordeste. Instituto de Botánica del Nordeste. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Agrarias. Instituto de Botánica del Nordeste; ArgentinaFil: González, Ana María. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Nordeste. Instituto de Botánica del Nordeste. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Agrarias. Instituto de Botánica del Nordeste; ArgentinaFil: Terada, Graciela. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Nordeste. Instituto de Botánica del Nordeste. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Agrarias. Instituto de Botánica del Nordeste; ArgentinaFil: Faloci, Mirta Mabel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Nordeste. Instituto de Botánica del Nordeste. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Agrarias. Instituto de Botánica del Nordeste; ArgentinaFil: Mroginski, Luis Amado. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Nordeste. Instituto de Botánica del Nordeste. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Agrarias. Instituto de Botánica del Nordeste; Argentin

Plant regeneration from root-tip culture of Cyrtopodium brandonianum Barb. Rodr. (Orchidaceae).

A protocol for in vitro plant multiplication of Cyrtopodium brandonianum from root-tip culture was developed. Root tips were dissected from 150 day-old plants, obtained in vitro and were cultured on half-strength MS medium, supplemented with different concentrations of BAP, kinetin, zeatin, tidiazuron, and 2iP for induction of adventitious shoots. After 60-70 days of incubation, shoot differentiation could be distinguished. The halfstrength MS medium supplemented with 0.5 mg l-1 TDZ showed the best response on shoot production, with, in average, 43% of the explants with shoots. Optimal rooting (20% of shoots with an average of 4.3 roots per explants), with no intervening callus was observed in medium containing half-strength MS medium, with 6% sucrose and 1 mg l-1 NAA.Fil: Flachsland, Eduardo Alberto. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Nordeste. Instituto de Botánica del Nordeste (i); ArgentinaFil: Terada, Graciela. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Nordeste. Instituto de Botánica del Nordeste (i); ArgentinaFil: Mourazos Fernández, José. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Nordeste. Instituto de Botánica del Nordeste (i); ArgentinaFil: Medina, Ricardo Daniel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Nordeste. Instituto de Botánica del Nordeste (i); ArgentinaFil: Schinini Cacace, Aurelio. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Nordeste. Instituto de Botánica del Nordeste (i); ArgentinaFil: Rey, Hebe. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Nordeste. Instituto de Botánica del Nordeste (i); ArgentinaFil: Mroginski, Luis Amado. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Nordeste. Instituto de Botánica del Nordeste (i); Argentin