Resposta osteomielogênica ectópica ao implante de matriz óssea desmineralizada em camundongos tratados com bussulfano

Camundongos Swiss, fêmeas, (25-30 g; n = 100) receberam 4 injeções de bussulfano (20 mg/kg, ip) a intervalos de 15 dias (n = 100). Antes do tratamento e após 30, 60 e 90 dias, os animais deste e de um grupo controle (n = 15) foram avaliados quanto ao leucograma, taxa de hemoglobina e hematrócito por meio do sangue colhido por punção retroorbital. Sessenta dias após o início do tratamento, 60 animais sobreviventes do grupo tratado e 15 animais do grupo controle receberam implantes intermuseulares de matriz óssea desmineralizada (MOD-10 mg). No 90s dia (30 dias após o implante) foram sacrificados para exame histológico da medula óssea esternal (MOE) e da resposta osteomielogênica ao implante de MOD. Trinta dias após o início do tratamento observou-se leucopenia, com diminuição do número de granulócitos, linfócitos e monócitos nos animais que receberam bussulfano. O hematócrito e a taxa de hemoglobina apresentaram-se diminuídos no 609 dia. O exame histológico da MOE do grupo tratado revelou hipocelularidade, dilatação dos capilares sinusóides e redução do número de megacariócitos (50%). Os animais controle apresentaram 100% de resposta positiva ao implante de MOD, havendo formação de placas metaplásicas compostas por trabéculas ósseas contendo cavitações preenchidas por células hematopoiéticas. Em 46,7% dos animais tratados observou-se resposta osteomielogênica semelhante à do grupo controle, mas com hipocelularidade e maior componente de adipócitos; 25% apresentaram resposta osteomielogênica tardia e incompleta com menor componente ósseo, maior componente cartilaginoso e ausência de células hematopoiéticas; nos 28,3% restantes a resposta foi negativa.Swiss female mice (25-30 g; n = 100) were four times treated i.p. with busulphan (20 mg/kg), with 15 day interval between doses. Blood was collected by retroorbital puncture from treated and non treated control animals (n = 15) for white blood cell count, hematocrit and hemoglobin evaluation, before treatment and on 30th, 60th, 90th days followingthe first dose of the drug. On day 60 both treated (60 survived animals) and non treated (n = 15) animals received intermuscular implant of demineralized bone matrix (DBM-10 mg). All of them were killed 30 days after implant (90th day post busulphan initial dose) for histological analysis of esternal bone marrow (EBM) and ectopic osteomyelogenousresponse to the DBM implant. Thirty days after the first dose of busulphan, leukopenia and drop in the granulocyte, lymphocyte and monocyte numbers were observed. The hematocrit and hemoglobin rate decreased on 60th day. Histologycal analysis of the EBM of the test group showed hypocellularity, sinusoid capilar distention and reduction inmegakaryocyte numbers. Control animals showed 100% positive response to DBM implant with the formation of metaplastic plaques made of bone trabeculae forming cavities filled with haematopoietic cells. 46.7% of the test animals had positive osteomyelogenous response, similar to that of the control groups, except for hypocellularity and more adipocytes; 25% displayed late and incomplete response with predominance of cartilaginous component, less neoformed bone tissue and absence of haematopoietic cells; the remaining 28.3% did not respond at all

0 efeito potenciador do succinato de cloranfenicol sobre a pleurisia aguda induzida pela carragenina. Inibição por indometacina e dexametasona

The effect of indomethacin and dexamethasone on PMN cell migration was studied in relation to chloramphenicol in the pleural cavity of rats, 4 hours after local injection of carrageenin or dextran. Pre-treatment of rats with chloramphenicol succinate (30mg/kg), ip, every 12h, during 4 days, potentiated the migration of PMN leucocytes to the inflamed cavity, when carrageenin (150mcg) was used as an irritant. However, responses to dextran (100mcg) remained the same. Chloramphenicol pre-treated rats that received indomethacin (2mg/kg, per os, 30min before carrageenin) or dexamethasone (0.25mg/kg, ip, 30min before carrageenin) showed inhibition of potentiated cellular responses. Mechanisms of the potentiating effect of chloramphenicol on the acute carrageenin-induced inflammation remains unclear.Neste trabalho estudaram-se os efeitos da indometacina e dexametasona sobre a migração das células polimorfonucleares (PMN), produzida pelo cloranfenicol 4h após a aplicação intrapleural de carragenina ou dextrano. Demonstrou-se que o pré-tratamento de ratos com cloranfenicol (30mg/kg, ip, a cada 12h, por 4 dias) potenciou a migração de PMN para a cavidade inflamada, quando a carragenina (150mg) foi utilizada como estímulo inflamatório, enquanto a resposta ao dextrano (100mcg) não se alterou, em comparação com animais não tratados com o antibiótico. Ratos que receberam cloranfenicol e foram tratados com indometacina (2,0mg/kg, per os, 30 min antes da aplicação de carragenina) ou dexametasona (0,25mg/kg, ip, 30 min antes da aplicação de carragenina) apresentaram inibição das respostas celulares potenciadas. O mecanismo pelo qual o cloranfenicol produz aumento da resposta inflamatória permanece obscuro

Ratos diabéticos são hiporeativos a drogas antiinflamatórias esteroidais e não esteroidais: efeito sobre a migração celular

The effect of steroidal antiinflammatory drugs (SAID) and non-steroidal antiinflammatory drugs (NSAID) on carrageenan-induced (300 mcg) pleurisy was studied in diabetic rats (40 mg/kg alloxan, iv). Indomethacin (2.0 mg/kg, po), pyroxicam (10 mg/kg, po) and dexamethasone (0.25 mg/kg, ip) significantly inhibited (P < 0.01) the accumulation of total leukocytes by 49,57 and 66%, respectively, and of polymorphonuclear cells by 50,60 and 66%, respectively, in normal rats. Diabetes significantly reduced total leukocytes (52%) and polymorphonuclear (58%). Pretreatment of diabetic animals with pyroxicam or indomethacin did not significantly inhibit total leukocyte or polymorphonuclear accumulation, indicating that the drugs were ineffective in the presence of diabetes. Dexamethasone, on the other hand, was as effective in diabetic animals as in the controls. All three drugs were significantly effective in inhibiting increased vascular permeability to carrageenin both in control and in diabetic animals. Untreated diabetic rats displayed a 24% weaker increase in vascular permeability than in controls. At the doses used, NSAID, but not SAID, are ineffective against carrageenan-induced cell migration in diabetic rats. Vascular permeability increase and cellular migration are independent phenomena as far as the effect of antiinflammatory drugs are concerned. Diabetes mellitus can affect NSAID action when cell migration is involved but not when plasma extravasation evoked by inflammatory stimuli is under consideration.Estudou-se o efeito de drogas antiinflamatórias esteroidais (DAIE) e não-esteroidais (DAINE) sobre a pleurisia induzida pela carragenina (300 mcg) em ratos diabéticos (aloxana, 40 mg/kg, iv). Em ratos normais, indometacina (2.0 mg/kg, vo), piroxicam (10 mg/kg, vo) e dexametasona (0.25 mg/kg, ip) inibiram significativamente (P<0.01) o acúmulo de leucócitos totais (49%, 57% e 66%, respectivamente) e polimorfonucleares (50%, 60% e 66%,  respectivamente). Ratos diabéticos sofreram redução no acúmulo de leucócitos totais (52%) e polimorfonucleares (58%). O tratamento de animais diabéticos com indometacina ou piroxicam não interferiu significativamente com o acúmulo de leucócitos totais ou polimorfonucleares, indicando que as drogas foram inefetivas em presença de diabetes. Por outro lado, a dexametasona foi efetiva tanto em animais normais quanto em diabéticos. Estes sofreram inibição significativa do aumento de permeabilidade vascular (24%) em comparação com animais normais. As três drogas inibiram o aumento de permeabilidade vascular à carragenina em ratos diabéticos e controles. Nas doses utilizadas DAINE mas não DAIE foram inefetivas em bloquear o acúmulo de leucócitos em ratos diabéticos. Considerando-se o efeito de drogas antiinflamatórias os resultados sugerem que o aumento de permeabilidade vascular e a migração celular sejam fenômenos independentes. O diabetes mellitus parece interferir na ação das DAINE quanto à migração celular mas não quando se considera o extravasamento plasmático induzido pelo estímulo inflamatório

PARÂMETROS BIOQUÍMICOS DE Piaractus mesopotamicus E Colossoma macropomum (CHARACIDAE) E HÍBRIDO TAMBACU (P. mesopotamicus x C. macropomum)

Estudaram-se os valores de glicose plasmática, proteína total sérica e íons séricos (cálcio, potássio, magnésio, sódio e cloreto) em jovens de Colossomoma macropomum Cuvier 1818, Piaractus mesopotamicus Holmberg 1887 e híbrido tambacu (P. mesopotamicus x C. macropomum), mantidos em cultivo intensivo. As concentrações plasmáticas de glicose no híbrido tambacu foram maiores que em P. mesopotamicus e C. macropomum. Os níveis de proteínas totais em P. mesopotamicus foram maiores em C. macropomum e híbrido tambacu. O C. macropomum apresentou maior concentração de sódio e cloreto, ao passo que o P. mesopotamicus mostrou maior concentração de potássio e magnésio. Porém, os níveis de cálcio mostraram-se similares nas três espécies estudadas. O híbrido tambacu apresentou os menores níveis de proteínas totais e níveis intermediários de potássio, sódio, magnésio e cloreto quando comparado ao P. mesopotamicus e C. macropomum. Foram estabelecidos valores basais para peixes sadios criados em cativeiro, os quais poderão ser usados em estudos de comparação futura em populações selvagens de P. mesopotamicus e C. macropomum. PALAVRAS-CHAVES: Bioquímica, Colossoma macropomum, peixes de água doce, Piaractus mesopotamicus, sangue

Chloramphenicol restores the polymorphonuclear accumulation in carrageenin-induced pleurisy in diabetic rats

We investigated the effect of chloramphenicol succinate (30 mg/kg, every 12 h for 4 days, ip) on the reduced polymorphonuclear leukocytes (PMN) accumulation in carrageenin-induced pleurisy (150 mug) in diabetic (alloxan, 40 mg/kg, IV) rats (Wistar, males, 180-320 g, n = 12). Chloramphenicol produced an increase (p<0.05) on PMN count in pleural exudate of 36% in normal animals. In the animals non-treated with chloramphenicol the diabetes state reduced (p<0.05) the accumulation of PMN cells by 45%. In diabetic animals treated with chloramphenicol the number of PMN in pleural exudate was similar to the one observed in the control group. Total and differential counts of leukocytes in the peripheral blood were similar between groups before and 4 h after the carrageenin-injection.Investigou-se o efeito do succinato de cloranfenicol (30 mg/kg, a cada 12 h, durante 4 dias, IP) sobre o acúmulo de leucócitos polimorfonucleares (PMN) na pleurisia induzida pela carragenina (150 mig) em ratos (Wistar, machos, 180-230 g, n = 12) diabéticos (40 mg/kg de aloxana, IV). O antibiótico produziu aumento de 36% no número de PMN (p<0,05) migrados para a cavidade pleural de animais normais. O estado diabético provocou redução de 45% dos PMN (p<0,05) acumulados no exsudato pleural de animais não tratados com o antibiótico. Por outro lado, animais diabéticos tratados com succinato de cloranfenicol apresentaram resposta de PMN que não diferiu estatisticamente do observado em animais controle, não tratados. A contagem total e diferencial dos leucócitos circulantes realizada antes e 4 h depois da aplicação da carragenina não diferiu estatisticamente entre os grupos

Efeito da estimulação prévia sobre a migração de neutrófilos protege contra os efeitos letais da Salmonella typhimurium

A inoculação intraperitoneal de 3,8 x 10(9) CFU de Salmonella typhimurium viva causou 100% de mortalidade em ratos. Nesses animais, pequeno número de neutrófilos migraram para a cavidade peritoneal. A injeção intraperitoneal de tioglicolato (TG, 90 mg), carragenina (Cg, 500 mi g) ou salmonella morta pelo calor (KS, 1,9 x10(9) CFU) 24 horas antes do desafio com S. typhimurium viva causou maior (p < 0,01) migração de neutrófilos para a cavidade peritoneal após 6 horas e conferiu proteção aos animais contra os efeitos letais da bactéria que foram da ordem de 50%, 83% e 80%, respectivamente. Todavia, o tratamento semelhante dos animais com o meio de cultivo "infusão de cérebro e coração" (brain heart infusion-BHI) estéril exerceu proteção de apenas 23%. O número de neutrófilos que migraram para a cavidade peritoneal representou apenas 10% do verificado nos outros tratamentos. A atividade fagocitária não estava relacionada ao índice de sobrevivência dos animais, uma vez que tal atividade foi duas vezes maior no grupo KS do que nos grupos Tg e Cg, e a taxa de sobrevivência nesse grupo foi semelhante à observada no grupo Cg. Esses resultados sugerem que o aumento da migração de neutrófilos para o sítio infeccioso induzida pelas administrações prévias das diferentes substâncias é um importante fator associado com a proteção dos animais contra os efeitos letais da infecção bacteriana.The intraperitoneal inoculation of 3.8 x 10(9) CFU of alive Salmonella typhimurium caused 100% mortality in rats. In these animals a small number of neutrophils migrated to the peritoneal cavity. The intraperitoneal inoculation of the animals with thioglycollate (Tg, 90 mg), carrageenin (Cg, 500 mu g), or killed S. typhimurium (KS, 1.9 x 10(9) CFU) 24 hours before challenge with alive S. typhimurium caused a significant neutrophil migration to the peritoneal cavity (determined 6 hours after challenge) and protected the animals against the lethal effect of the bacteria at a rate of 50%, 83% and 80%, respectively. However, similar treatment of the animals with brain heart infusion broth (BHI, S. typhimurium grout medium) protected the animals by only 23%. The migrating neutrophils in these animals represented less than 10% of those observed with other treatments. The phagocytosis activity was not associated with the survival rate as this activity was 2 times higher in the KS group than in the Tg and Cg groups, and the survival rate in this group was similar to that observed in Cg. These results suggest that the increase of neutrophil migration to the infectious site is an important factor associated with protection of the animals against the lethal effect of the bacterial infection

Performance and hematology of pacu fed diets supplemented with vitamins C and/or E

O pacu (Piaractus mesomotamicus Holmberg 1887) é uma espécie altamente valiosa para a aqüicultura brasileira. Entretanto, trata-se de uma das espécies mais susceptíveis a doenças. Por isso, a suplementação alimentar para o pacu pode representar importante estratégia de prevenção da incidência das enfermidades em pisciculturas. Pacus (10,5 ± 1,2 g) foram alimentados com dietas contendo três níveis de vitamina C e/ou E (0, 250 e 500 mg vitamina kg-1 de dieta). Os peixes foram alimentados com dieta não purificada sem suplementação durante os primeiros 60 dias para reduzir as reservas teciduais das vitaminas. Após este período, os peixes foram alimentados com as dietas testadas durante 60 dias. As avaliações de crescimento e hematologia foram realizadas no 30º e 60º dias. Pacus alimentados com dieta sem suplementação com as vitaminas C e E durante 120 dias não apresentaram sinais claros típicos de deficiência. Os peixes que receberam a dieta deficiente em vitamina C e E apresentaram maior consumo de ração, porém sem melhora no desempenho produtivo. A vitamina E mostrou-se essencial para a proteção dos eritrócitos, sendo que quanto maior o nível desta vitamina na dieta, menor o número de eritroblastos. A suplementação com 500 mg de vitamina C e 250 mg de vitamina E durante 60 dias aumentou a produção de monócitos, trombócitos e células granulocíticas especiais em pacu.Pacu (Piaractus mesopotamicus Holmberg, 1887) is a valued Brazilian fish species for aquaculture. This is highly susceptible to disease, and feed supplementations for pacu can be a very important strategy to prevent disease incidence in fish farms. The aim of this study was to evaluate a strategic supplementation for pacu. Juvenile pacu (10.5 ± 1.2 g) were fed diets containing three levels of vitamins C and/or E (0, 250, and 500 mg vitamin kg-1 diet). Fish were fed diets without supplementation for two months prior to the experiment. After that period, experimental feeding was initiated for two months. Growth and hematological evaluations were made on the thirtieth and sixtieth days of feeding. Pacu fed diet without supplementation of vitamins C and E during 120 days did not show clear typical signs of deficiency. Fish fed diet vitamins C and E free increased feed intake, but no improvement on growth performance was detected. Vitamin E proved essential for erythrocyte protection, so that the higher the level of this vitamin in diet, the smaller the number of erythroblasts. Supplementation with 500 mg of vitamin C and 250 mg of vitamin E for 60 days increased the production of monocytes, thrombocytes and special granulocytic cells in pacu

Hematological parameters for the Brycon orbignyanus Valenciennes, 1850 (Osteichthyes: Characidae) intensively bred

This paper determined red blood cell number, total thrombocyte count, and total leukocyte, and differential counts for young Brycon orbignyanus Valenciennes 1849 (Characidae) maintained in fish farming ponds. Mean values and range obtained were as follows: red blood cell count 3.283 (2.110-4.235) x 106 /µl, hemoglobin 10.7 (8.4- 13.1) g/dl, hematocrit 40.2 (35.0-47.0) %, mean corpuscular volume 125.0 (91.5-199.1) fl, mean corpuscular hemoglobin concentration 26.9 (19.5-35.6) g/dl, total thrombocyte count 25,743.0 (11,228.0-54,152.0) µl, total leukocyte count 23,290.0 (9,601.0-37,520.0) µl, lymphocytes 3,642.0 (709.0-9,005.0) µl, neutrophils and heterophils 18,178.0 (7,488.0-29,783.0) µl and monocytes 1,471.0 (147.0-4,976.0) µl. These results found should be useful for evaluation of health status of this fish, when in intensive breeding or other cultivation forms, in addition to serving for comparison of this species in a natural environment

Respostas hematológica e branquial de tilápia parasitada do vale do Rio Tijucas, SC, Brasil

In the State of Santa Catarina there is no information about haematological and parasitological characteristics of fish maintained in feefishing operations and manured ponds. This work compared the haematological characteristics of Nile tilapia parasitized or not, captured in a property situated in Nova Trento, SC, Brazil, between August 2003 and July 2004. During the studied period, the water temperature, pH, dissolved oxygen, alkalinity, ammonia and transparency were measured. Ten fish were collected monthly either in a feefishing or in a pond receiving pig manure, and anesthetized with benzocaine solution for haematological, parasitological and histopathological exams. From a total of 360 analyzed fish, 64 (17.8%) were parasitized with Cichlidogyrus sclerosus and Cichlidogyrus sp. (Monogenoidea: Ancyrocephalidae), 20 (5.5%) with Trichodina sp. (Protozoa: Ciliophora), and four (1.1%) with Lamproglena sp. (Crustacea: Lernaeidae). The total number of erythrocytes, thrombocytes and leucocytes, glucose rate and the percentages of hematocrit, lymphocytes, monocytes and neutrophils did not show relation with parasitism. Histopathological analysis showed moderate hyperplasia and absence of congestion. The low level of parasitism found in the animals was not responsible for haematological alterations.No Estado de Santa Catarina não existe informação sobre características hematológicas e parasitológicas que compare peixes mantidos em pesque-pague e com dejetos de suínos. Este trabalho estudou as características hematológicas da tilápia do Nilo parasitada ou não, capturada numa propriedade em Nova Trento, SC, Brasil, entre agosto de 2003 e julho de 2004. Durante o período a temperatura da água, pH, oxigênio, alcalinidade e transparência foram medidos. Dez peixes foram mensalmente coletados no pesque-pague e num viveiro que recebia dejetos de suínos, anestesiados com benzocaína para análise hematológica, parasitológica e histopatológica. De 360 animais analisados, 64 (17,8%) estavam parasitados com Cichlidogyrus sclerosus e Cichlidogyrus sp. (Monogenoidea: Ancyrocephalidae), 20 (5,5%) com Trichodina sp. (Protozoa: Ciliophora) e quatro (1,1%) com Lamproglena sp. (Crustacea: Lernaeidae). O número total de eritrócitos, , trombócitos e leucócitos, a taxa de glicose, os percentuais do hematócrito, linfócitos, monócitos e neutrófilos não alteraram com o parasitismo. A análise histopatológica mostrou moderada hiperplasia e ausência de congestão. O baixo nível de parasitismo não foi responsável por alterações hematológicas

Aerocistite aguda induzida por tioglicolato, lipolisacarídeo e Aeromona hydrophila inativada em Piaractus mesopotamicus: efeitos hematológicos

The effects of swim bladder injection with thioglycolate, Escherichia coli lipopolysaccharide (LPS) and heat-inactivated Aeromonas hydrophila were assessed on hematological responses in pacu, Piaractus mesopotamicus (Characidae). A quantitative assessment was done on erythrocytes, thrombocytes e leucocytes at 6, 24, and 48 h pos-injection of the inflammatory agents and compared with fish injected with saline solution (control). Fish injected with inactivated A.hydrophila showed a reduction of erythrocytes and hemoglobin, whereas the hematocrit increased 6 h pos-injection.The results show that thioglycolate and LPS also induced a reduction on hemoglobin and an increase on the hematocrit. The thrombocytes count decreased 6 h post A. hydrophila injection, whereas increased 48 hours post LPS injection. The leukocytes count increased after 6 h post A. hydrophila injection, while the lymphocytes and PAS-positive granularleukocytes (PAS-LG) count decreased after 24 h post injection. In fish injected with thioglycolate or with LPS showed an increase in the LG-PAS counts when compared to A. hydrophila or control groups. The monocytes count was not affected by the different inflammatory agents.Os efeitos da injeção de tioglicolato, lipolissacarídio de Escherichia coli e Aeromonas hydrophila inativada na bexiganatatória de pacus, Piaractus mesopotamicus (Characidae) foram avaliados quanto às respostas de células vermelhas,leucócitos e trombócitos do sangue. Ensaios quantitativos de eritrócitos, leucócitos e trombócitos foram realizados6, 24 e 48 h após os estímulos e comparados com peixes que receberam solução salina 0,65% pela mesma via. Peixes inoculados com A. hydrophila apresentaram redução do número de eritrócitos e da taxa de hemoglobina enquanto ohematócrito aumentou 6 h após o estímulo. Os resultados mostraram que o tioglicolato e o LPS também induziram redução da hemoglobina e aumento do hematócrito. A contagem de trombócitos diminuiu 6 h após a inoculação deA. hydrophila inativada e aumentou 48 horas após a injeção de LPS. A contagem de leucócitos aumentou 6 h após ainoculação de A. hydrophila enquanto a de linfócitos a leucócitos granulares PAS positivos (PAS_LG) diminuiu 24 hdepois. Peixes injetados com tioglicolato o LPS apresentaram aumento do número de LG_PAS em relação aos inoculadoscom A. hydrophila inativada ou grupo controle. A contagem de monócitos não foi afetada pelos diferentes agentes