44 research outputs found
A Dual Model to Predict the Peronospora sparsa Sporulation in Rose Based on the Plant Microclimate
聽Las rosas son el producto m谩s importante de exportaci贸n de la industria de flores en Colombia, y el mildeo producido por Peronospora sparsa Berkeley es la enfermedad m谩s limitante. La predicci贸n de ataque es una herramienta importante para prevenir y combatir la enfermedad, disminuyendo el costo de producci贸n de la flor. P. sparsa depende de las condiciones microclim谩ticas para su desarrollo biol贸gico. En este trabajo, se presenta un modelo dual para predecir la esporulaci贸n, basado en el conocimiento de la temperatura y la hu颅medad relativa cerca de la planta (microclima) durante la noche anterior a la predicci贸n, y permitiendo un nivel de fiabilidad por encima del 95% en la determinaci贸n de la esporulaci贸n del par谩sito y con esa informaci贸n tomar una decisi贸n sobre la aplicaci贸n de los fungicidas en el cultivo
Tn-Specific Lectins Production from Salvia Palifolia and Hyptis Mutabilis by Cellular Somaclonal Variation
Lectinas obtenidas de diferentes g茅neros de la familia Lamiaceae que reconocen el ant铆geno Tn, presente en eritrocitos enzim谩ticamente modificados y en c茅lulas cancerosas han sido de especial inter茅s. En este trabajo describimos y comparamos la extracci贸n de lectinas Tn espec铆fica de semillas y de c茅lulas cultivadas in vitro de Salvia palifolia e Hyptis mutabilis. Los somaclones que produjeron lectina fueron cultivado en medio suplementado con 2-4-D y 6-BAP, el esquema de purificaci贸n de las lectinas incluyo, extracci贸n con PBS, precipitaci贸n con etanol al 75%, intercambio i贸nico, y cromatograf铆a de afinidad. La actividad de le lectina fue monitoreada por el m茅todo de ELISA y aglutinaci贸n de eritrocitos modificados enzim谩ticamente. El ensayo de SDS-PAGE de la lectina de H. mutabilis mostro dos bandas con un Mr de 55 y 51 kDa en contraste con el peso molecular determinado por la t茅cnica de filtraci贸n en gel de 82 kDa, la prote铆na es una glicoprote铆na con 27.7% de azucares neutros. El ensayo de SDS-PAGE de la lectina de S. palifolia mostro dos bandas de 64 y 58 kDa, mientras que por la t茅cnica de filtraci贸n en gel se detect贸 una 煤nica prote铆na con 77 kDa y con un 23.8% de azucares. Caracterizamos las lectinas Tn-especificas con respecto a su pI, composici贸n de amino谩cidos, secuencia N-terminal, y actividad de carbohidratos inhibidoresLectinas obtenidas de diferentes g茅neros de la familia Lamiaceae que reconocen el ant铆geno Tn, presente en eritrocitos enzim谩ticamente modificados y en c茅lulas cancerosas han sido de especial inter茅s. En este trabajo describimos y comparamos la extracci贸n de lectinas Tn espec铆fica de semillas y de c茅lulas cultivadas in vitro de Salvia palifolia e Hyptis mutabilis. Los somaclones que produjeron lectina fueron cultivado en medio suplementado con 2-4-D y 6-BAP, el esquema de purificaci贸n de las lectinas incluyo, extracci贸n con PBS, precipitaci贸n con etanol al 75%, intercambio i贸nico, y cromatograf铆a de afinidad. La actividad de le lectina fue monitoreada por el m茅todo de ELISA y aglutinaci贸n de eritrocitos modificados enzim谩ticamente. El ensayo de SDS-PAGE de la lectina de H. mutabilis mostro dos bandas con un Mr de 55 y 51 kDa en contraste con el peso molecular determinado por la t茅cnica de filtraci贸n en gel de 82 kDa, la prote铆na es una glicoprote铆na con 27.7% de azucares neutros. El ensayo de SDS-PAGE de la lectina de S. palifolia mostro dos bandas de 64 y 58 kDa, mientras que por la t茅cnica de filtraci贸n en gel se detect贸 una 煤nica prote铆na con 77 kDa y con un 23.8% de azucares. Caracterizamos las lectinas Tn-especificas con respecto a su pI, composici贸n de amino谩cidos, secuencia N-terminal, y actividad de carbohidratos inhibidores
Temperature effect on rose downy mildew development under environmental controlled conditions
The rose downy mildew disease, caused by Peronospora sparsa Berkeley, is one of the most important that affect rose crops in Colombia. To manage this disease, flower growers must deal with high-costs due to the excessive application of fungicides, but without good results. Studies on P. sparsa behavior have shown its narrow relationship with environmental conditions. In this study, the temperature effect was evaluated during the infection and sporulation of P. sparsa in Charlotte leaflets, a susceptible commercial variety, through an environmental controlled conditions system. Infection and sporulation were observed at different temperatures in a range of from 4 to 40掳C. Infection with the absence of or very low sporulation was observed at 4掳C. The most favorable pathogen responses were between 15 and 18掳C in terms of inoculum concentration and sporulation percentage. There was no infection or leaflet change above 35掳C. According to the results, sporulation can occur from 4 to 33掳C, confirming the fact that P. sparsa is able to reproduce throughout a wide temperature range
Estudio de las caracter铆sticas reproductivas de h铆bridos de clavel (Dianthus caryophyllus)
Carnation is the most important flower in the exportation and the principal destination are United States of America and Europe and the country is the first producer of carnation in the word. The vascular diseases are the most important cause of losses in the crop and the most efficient method of control is to count to resistant varieties. The recognitions of the reproductive characteristics of the carnation hybrids, object of this work, permitted in a prudent period establish a program of varieties production in Colombia. In this work we used hybrids of three successive generations obtained by autopollination studding the reproductive characteristics. As much as pollen and ovules in the flowers, as well as in the male and female reproductive organs we find a high variability in the number of structures, were the reproductive variability is not bound to the endogamous generation. The pollen quantity is not directly bound with the number of seeds produced, as well as with the number of ovules in the gynoecium. Conversely, the seeds number is related directly with the number of viable ovules by flower. The hybrid fertility expressed in terms of number of pollen grains vs fertilized ovules and produced seeds by flower show that exist a plenty variability in the reproductive conditions in the hybrids, but enough to permit a successful production of seeds. El clavel es la principal flor de exportaci贸n de Colombia y sus principales destinos son los Estados Unidos y Europa. Colombia, es actualmente el primer productor de clavel en el mundo. Las enfermedades vasculares producidas por hongos son la causa m谩s importante de p茅rdidas en este cultivo y el m茅todo de control m谩s eficiente es contar con variedades resistentes. El reconocimiento de las caracter铆sticas reproductivas de h铆bridos de clavel es el objetivo principal de este estudio que permiti贸 en un plazo de tiempo prudente establecer un programa de producci贸n de nuevas variedades de clavel en Colombia. Para ello se utilizaron h铆bridos de tres generaciones sucesivas obtenidos por autopolinizaci贸n y se estudiaron las caracter铆sticas reproductivas tanto del polen como de los 贸vulos, as铆 como la cantidad de las diferentes estructuras de reproducci贸n. Los resultados indican que tanto para los 贸rganos de reproducci贸n masculinos como los femeninos, existe una gran variabilidad en n煤mero de estructuras, donde la viabilidad reproductiva no est谩 ligada a la generaci贸n endog谩mica. De la misma forma, la cantidad de polen no est谩 directamente vinculada con el n煤mero de semillas producidas, as铆 como tampoco con el n煤mero de 贸vulos por gineceo. Por el contrario, la cantidad de semillas si est谩 relacionada con el n煤mero de 贸vulos viables por flor. La fertilidad de los h铆bridos expresada en t茅rminos de granos de polen vs 贸vulos fecundados y semillas producidas por tallo floral muestra que existe una variabilidad muy amplia en las caracter铆sticas de los factores que determinan aspectos reproductivos de los h铆bridos. 
Producci贸n de Esferoplastos a Partir de Esporangios del Mildeo Velloso (Peronospora sparsa Berkeley) de la Rosa Comercial
Para el presente estudio, se estandariz贸 una t茅cnica para el cultivo bajo condiciones de laboratorio del parasito biotrofo (Peronospora sparsa Berkeley), en c谩mara h煤meda; tambi茅n realizo cultivo in vitro de la variedad de rosa Charlotte, con el fin de realizar los ensayos de infecci贸n sobre este material vegetal; se evaluaron mezclas enzim谩ticas y concentraciones de estas, para realizar la digesti贸n de la pared celular de los esporangios de mildeo velloso y se encontr贸 que al cabo de 5 horas se obten铆an esferoplastos con la mezcla enzim谩tica de Fluka (enzimas l铆ticas de Trichoderma harzianum), 2 mg/ml y Driselasa 3 mg/ml, tambi茅n se evaluaron diferentes buffers hasta conseguir aquel que garantizara el equilibrio osm贸tico de los esferoplastos durante su producci贸n y manipulaci贸n en los ensayos de infecci贸n. Se encontr贸 que el buffer KC (KCl 0.64M, CaCl2 0.2 M) mantuvo los esferoplastos osm贸ticamente estables durante un periodo de hasta 24 horas. Luego de 3 lavados y re-suspensi贸n en buffer MTC-10 (1M manitol, 10mM tris, pH 7.5), con los esferoplastos obtenidos se realiz贸 un seguimiento del proceso infectivo tanto en pl谩ntulas producidas in vitro, como sobre foliolos de campo de rosa variedad Charlotte, utilizando t茅cnicas de microscopia 贸ptica y se observ贸 que los esferoplastos adem谩s de conservar su capacidad infectiva, esta parec铆a ser m谩s agresiva que la observada t铆picamente en la infecci贸n con esporangios, por lo tanto, se realizaron pruebas comparativas infectando al mismo tiempo, los mismos tipos de tejidos tanto con esferoplastos como con esporangios y se pudo llegar a la conclusi贸n que el desarrollo de la enfermedad del mildeo velloso de la rosa, es m谩s r谩pido y expansivo en la infecci贸n con esferoplastos que con esporangios normales. Por 煤ltimo, se realizo un seguimiento del proceso infectivo en plantas completas de la variedad de rosa Charlotte y se observo la aparici贸n de s铆ntomas t铆picos de la enfermedad en la mitad del tiempo que normalmente se observa en plantas infectadas con mildeo velloso en camp
Evaluation of the Reproduction Proficiency of Carnation (Dianthus caryophyllus L.) Hybrids and Varieties as Search of Useful Parentals for a Breeding Program
Colombia is the world鈥檚 leading exporter of carnation (Dianthus caryophyllus聽L.) and the second of fresh cut flowers, that is why the floriculture is one of the economic sectors that generate more exchange in exports of our country. However, carnation growers must face the problem of decreasing revenues, due to the rot vascular disease produced by the pathogen聽Fusarium oxysporum聽f.sp. dianthi. Studies show that the most effective way to face the problem is to find resistant carnation varieties, obtained by breeding programs. Thus, here we present a floral evaluation of the gynoecium and androecium, possible flower defects and the reproduction capacity as well, all this useful for the breeding of four carnation commercial varieties and two hybrid lines, all of them obtained through a breeding program focus on聽Fusarium聽sp. resistance. Direct and reciprocal breeding crosses were done between all materials in order to establish in which crosses were produced viable seeds of F1 populations. As a result, the reproduction capacity of the six parental was established and a total of 809 seeds were produced from nine successful crosses. Also, it was established that floral opening stage II, is the stage in which the pollen is mature and viable. Moreover, it was established that Kaly, Candy and UM503 were the parental that have best performances as acceptor; in contrast UM226 was the best pollen donator. On the other hand, Lady Green had poor performance both as donor and acceptor
Organogenesis Directa en Medio L铆quido en Clavel en un Bioreactor de Bajo Costo.
El desarrollo de los sistemas de inmersi贸n temporal pueden proveer un medio r谩pido y eficiente para la micropropagaci贸n de plantas en condiciones in Vitro, por medio de la inducci贸n de organog茅nesis directa en medio l铆quido; sin embargo, el alto costo de los sistemas comerciales desarrollados para tal fin, como lo es caso de sistema RITA庐, ha limitado su uso. Por este motivo, se plantearon como objetivos en esta investigaci贸n; uno, desarrollar t茅cnicas de organog茅nesis directa para adaptarlas al sistema de birreactor, evaluando la variaci贸n del potencial organog茅nico de dos variedades comerciales con diferentes reguladores de crecimiento y bajo diferentes grados de gelificaci贸n del medio; y dos, dise帽ar un sistema prototipo de biorreactor de inmersi贸n temporal de bajo costo para la micropropagaci贸n de clavel (Dianthus caryophyllus). As铆, se dise帽贸 y construy贸 un sistema prototipo de inmersi贸n temporal con insumos nacionales, demostr谩ndose con esto que es posible tener un sistema de bajo costo en el cual se lograron mantener condiciones totales de asepsia, adem谩s de demostrar ser un sistema f谩cil de manipular y que puede escalarse con facilidad. En cuanto a la inducci贸n de organog茅nesis directa se quer铆a evaluar la adaptabilidad de dos variedad diferentes de clavel comercial, como ejemplo, al sistema, se encontraron diferencias en la respuesta morfog茅- nica a nivel varietal; la variedad Kaly (comercial), resulto ser m谩s eficiente bajo la influencia hormonal de tidiazuron (TDZ), a una concentraci贸n de 0.05 mg/l en medio l铆quido; factor que indica que la producci贸n de brotes organog茅nicos dentro del sistema de inmersi贸n temporal usando medio de cultivo l铆quido es altamente viable
Extracci贸n del cromosoma completo del fitoplasma presente en urapanes (Fraxinus sp.), por electroforesis de campo pulsado
Con el fin de purificar el ADN gen贸mico del fitoplasma que afecta a los Urapanes de Bogot谩, se realiz贸 introducci贸n de fitoplasmas, utilizando la ectopar谩sita C煤scuta subinclusa, a plantas j贸venes de Urap谩n, a partir de 谩rboles sintom谩ticos de fitoplasmosis presentes en la Universidad Militar. La presencia de fitoplasmas fue confirmada en 14 de los 16 Urapanes receptores por medio del test DAPI. Solamente el 12.5% de los Urapanes receptores fue positivo por reacci贸n en cadena de la polimerasa (PCR), con el par de primers universales para fitoplasmas R16F2n/R16R2. El producto de PCR obtenido a partir de amplificados de ADN de urapanes receptores con los primers R16F2n/R16R2 fue secuenciado y el an谩lisis de la secuencia mostr贸 similaridad entre el 99% y el 100% con fitoplasmas de distintos tipos. Se realizaron ensayos de Electroforesis de Campo Pulsado (ECP), con los sintom谩ticos de fitoplasmosis, pero no se obtuvieron bandas a pesar de que se utilizaron grandes cantidades de tejido. Con base en los resultados obtenidos en las pruebas moleculares, se concluy贸 que las plantas j贸venes de Urap谩n no son un buen reservorio para el aislamiento de ADN gen贸mico de fitoplasmas. Se realiz贸 introducci贸n de fitoplasmas a plantas de Apio a partir de los Urapanes sintom谩ticos de la Universidad Militar, para tratar de encontrar un nuevo reservorio para el aislamiento de ADN gen贸mico de fitoplasmas. Los Las plantas de apio infectadas resultaron positivas por PCR con el par de primers universales para fitoplasmas PhyRNAF3.3/R16R2. En los ensayos de ECP con Apio se obtuvieron bandas de aproximadamente 1125 Kb que se purificaron y se amplificaron por PCR con los primers PhyRNAF3.3/R16R2. El producto obtenido se mand贸 a secuenciar y se obtuvo similaridad del 99% con secuencias de tipo "Ash Yellows", incluidas dos secuencias reportadas en 2004 por el grupo de Biotecnolog铆a Vegetal de la Universidad Militar
Relaci贸n Entre el Color de la Flor del Clavel (Dianthus caryophyllus) y la Tolerancia a Pat贸genos del G茅nero Fusarium
Colombia es el primer exportador mundial de clavel, sin embargo su producci贸n presenta un problema de gran importancia, debido a la enfermedad de la muerte vascular producida por el par谩sito Fusarium. Estudios realizados muestran que la manera m谩s eficaz de tratar el problema, es buscar la tolerancia natural de las plantas. As铆, este trabajo busc贸 mediar la respuesta de 16 l铆neas h铆bridas y cuatro variedades comerciales de clavel frente a un aislamiento de Fusarium oxysporum y un aislamiento de Fusarium culmorum, aplicando dos metodolog铆as in vitro y una bajo invernadero. As铆 mismo busc贸, establecer una relaci贸n entre los niveles de tolerancia presentada para cada ensayo y el color de los p茅talos de la flor. La primera metodolog铆a in vitro consisti贸 en un cultivo dual, en donde callos de la l铆nea h铆brida o variedad comercial, fueron enfrentados al pat贸geno. Con este ensayo se busc贸 medir el desplazamiento del pat贸geno hacia el callo y una posible respuesta inhibidora de 茅ste hacia el crecimiento del hongo. En la segunda metodolog铆a, se infectaron micropl谩ntulas, permitiendo que el pat贸geno reconociera, infectara las ra铆ces y ascendiera por el tallo, evaluando el nivel de colonizaci贸n. Por otra parte, la medici贸n de tolerancia bajo invernadero se realiz贸 infectando plantas y evaluando la presencia o no de s铆ntomas en el tiempo. Los datos obtenidos de la tolerancia a Fusarium sp y los par谩metros de la evaluaci贸n floral, muestran una relaci贸n directa entre la distribuci贸n del color en la flor del clavel y la tolerancia a los dos aislamientos de Fusarium. Esta observaci贸n abre la puerta para iniciar estudios gen茅ticos y moleculares, que logren relacionar la tolerancia con caracter铆sticas de la flor
Inoculaci贸n Experimental de Tres Especies Hospederas de Fitoplasmas en Bogot谩, Colombia
Los Urapanes (Fraxinus sp.) en Colombia presentan problemas sanitarios como la infecci贸n con fitoplasmas del grupo 16SrRNA VII. Para tratar de superar la dificultad que significa trabajar con 谩rboles de gran tama帽o, se realizaron ensayos para buscar hu茅spedes vegetales alternativos que mejoraran la accesibilidad a estos pat贸genos. En este estudio se hicieron ensayos de inoculaci贸n de fitoplasmas de Urap谩n, permitiendo la visita libre de insectos, sobre cuatro especies vegetales de las familias Solanaceae y Apiaceae como potenciales hospederos alternativos. Una alta proporci贸n de las plantas de Apium graveolens expuestas a insectos (86%) result贸 infectada con fitoplasmas, seg煤n la sintomatolog铆a desarrollada, test DAPI y pruebas moleculares. Una proporci贸n menor de las plantas expuestas de Nicotiana tabacum (50%) y Nicotiana debneyi (10%) presentaron s铆ntomas asociados a infecci贸n por fitoplasmas y fueron positiva por test DAPI, mientras que las plantas de Lycopersicum esculentum expuestas no resultaron infectadas. Observaciones mediante el test DAPI mostraron que en las plantas infectadas, los fitoplasmas no presentaron una tendencia marcada a concentrarse en ning煤n tejido en particula