Importancia de la detección del protozoario zoonótico Cryptosporidium parvum en muestras de agua en Chile

Cryptosporidiosis is a parasitic disease of the digestive tract caused by protozoa of the genus Cryptosporidium. Species of this agent have been reported since the beginning of the twentieth century. Just at the end of it, it has been recognized as a pathogen widely distributed as a threat to public health. In human beings and other animal species, is considered an emerging or re emerging infectious agent. In 1984, the first outbreak of cryptosporidiosis transmitted through water, was described. Since then, many authors have shown the presence of this endoparasite in surface water, pool water, untreated wastewater and even drinking water, suggesting its role as a causative agent of diarrhea. Also there is evidence that water purification methods would not be completely efficient to remove or inactivate this endoparasite. The persistence and spread of this protozoan in the environment and drinking water are based on three biological conditions: 1) Its oocysts are immediately infectious, 2) it have a small size and 3) it have resistance to the environmental conditions, as well as the action of disinfectants and physical processes of water purification treatment. The laboratory diagnostic methods are diverse and can vary according to the origin of the samples. Microscopic, immunological and molecular protocols can be used in either patients or environmental samples. The development of molecular diagnostic technique has allowed the identification of Cryptosporidium hominis and C. parvum witch infections have the highest prevalence in human beings. In Chile, this parasitic disease is endemic infecting human domestic and wildlife animals. Studies of cryptosporidiosis in humans and livestock animals banegda dne itnec tth teh ims zido-o8n0o'sti',c baugte notn ilny trheicse mntalytr isxo.    La criptosporidiosis es una enfermedad parasitaria del tracto digestivo producida por protozoos del género Cryptosporidium. Aunque las especies de este agente se han descrito desde comienzos del siglo veinte, solo a fines de éste, se ha reconocido como un patógeno ampliamente distribuido y como una amenaza para la salud pública. En los seres humanos y algunas especies animales, es considerado un agente emergente dado su reciente hallazgo en nuevas áreas geográficas del mundo o por su descripción en nuevas especies animales. En tanto que también se ha reportado su re emergencia por el aumento de la prevalencia de este patógeno en poblaciones humanas o animales. El primer brote de criptosporidiosis transmitido a través del agua, fue descrito en 1984, y desde ese año numerosos autores han evidenciado la presencia de este endoparásito en aguas de superficie, aguas de piscina, aguas residuales no tratadas e incluso en redes de agua potable, sugiriendo su rol como agente etiológico de diarrea. Su hallazgo frecuente en el agua potable, evidencia que los métodos de potabilización del agua no serían completamente eficientes en la separación o inactivación de este endoparásito. La persistencia y diseminación de éste protozoo en el ambiente y el agua potable se sustenta en tres hechos biológicos: (1) Sus ooquistes son inmediatamente infectantes, (2) tienen un tamaño pequeño y (3) resisten las condiciones medio ambientales, tanto como la acción de desinfectantes convencionales, así como los procesos físicos de tratamientos de aguas. Los métodos de diagnóstico de laboratorio son diversos y pueden variar según el origen de la muestra. Así por ejemplo existen protocolos y estudios tanto de técnicas microscópicas, como inmuocromatográficas y moleculares como PCR, para ser utilizados tanto en muestras del medio ambiente como en aquellas provenientes de pacientes. El desarrollo de estas últimas técnicas para el diagnóstico, ha permitido identificar a Cryptosporidium hominis y C. parvum como aquellos que con mayor prevalencia infectan al hombre. En Chile, es un agente endémico y está descrito en una serie de animales domésticos, así como también en los seres humanos. Si bien, los estudios de esta parasitosis se iniciaron en humanos y animales a mediados de la década de los 80', solo recientemente existen antecedentes bibliográficos de laboratorios que han realizado protocolos de detección de este agente zoonótico en esta matriz.  

Factores asociados a reacciones adversas a fármacos antituberculosos en pacientes con tuberculosis pulmonar en el centro de salud cooperativa universal Santa Anita, Lima 2015 - 2022

Objetivo: Determinar los factores asociados a reacciones adversas a fármacos antituberculosos en pacientes con tuberculosis pulmonar en el Centro de Salud Cooperativa Universal Santa Anita, Lima 2015-2022. Metodología: observacional, analítica, retrospectiva y transversal, cuya muestra estuvo conformada por 120 pacientes con diagnóstico de tuberculosis pulmonar, además para la recolección de la información se usó la técnica documental y el instrumento fue la ficha de recolección, mientras que para responder a los objetivos se aplicó la prueba Chi cuadrado y la Razón de prevalencia (RP). Resultados: Se muestra que al menos el 50% de pacientes con tuberculosis tenía hasta 34 años, el 69.2% fueron varones, el 60% tenían IMC normal y el 65% tenía hábitos nocivos, además el 65.8% de pacientes presentó alguna comorbilidad, el 90% no recibió tratamiento previo para TBC, el 53.3% tuvo antecedente de retraso diagnóstico mayor a 30 días y el 55% presentó resultado frotis BK ≥++. Respecto al análisis multivariado, se evidenció que existe mayor riesgo de presentar reacciones adversas en pacientes con edad entre 20 y 39 años (p=0.025, RP=1.153) y antecedente de retraso diagnóstico mayor a 30 días (p=0.021, RP=1.146). Conclusión: Los factores asociados a reacciones adversos a fármacos antituberculosos fueron la edad entre 20 y 39 y el antecedente de retraso diagnóstico mayor a 30 días

Detección y caracterización de Crytosporidium spp. mediante métodos tradicionales y PCR en diferentes matrices (heces y aguas)

Cryptosporidium spp. es un importante parásito protozoario, mundialmente distribuido, que causa enfermedad digestiva en diferentes especies animales, especialmente a terneros menores de 30 días de edad, incluido el humano. Los ooquistes excretados por las heces, que son inmediatamente infectantes y resistentes, contaminan aguas y suelos, constituyendo una amenaza para la salud pública. Debido al escaso número de ooquistes presentes en el ambiente y su reducida dosis infectante se hacen necesarios métodos rápidos y sensibles para su detección en muestras animales y ambientales. Por lo anterior el objetivo de este estudio fue contribuir al conocimiento del diagnóstico de laboratorio tanto microscópico como molecular de Cryptosporidium spp. en muestras de heces diarreicas de terneros y de agua inoculada con el agente, mediante la implementación y estandarización de protocolos microscópicos tradicionales y un ensayo de Reacción en Cadena de la Polimerasa (PCR) género-específico. Para lo anterior, se utilizaron y analizaron 205 muestras fecales diarreicas de terneros, comparando la eficiencia de dos métodos de tinción microscópicas para el diagnóstico del parásito, el de Auremina (AU) y el de Ziehl-Neelsen modificado (ZN). Por primera vez en Chile se usó una prueba inmunocromatografica (CR) y una molecular (PCR) para confirmar la observación microscópica de los ooquistes de Cryptosporidium spp. en la muestras fecales de bovinos estudiadas. De las 205 muestras fecales, se detectaron 115 muestras positivas con AU (56,1%) y 102 con ZN (49,8%), resultado que mostró diferencias significativas (p ≤0,05), al ser AU más sensible. Por otro lado, la concordancia entre los ambos métodos fue casi perfecta (valor kappa de 0,83). El método CR y la realización de una PCR especie específica, también permitieron determinar la identidad de la especie del parásito detectado, como Cryptosporidium parvum. Esta última prueba, realizado en unas pocas muestras tomadas al azar. Así también, de las 102/205 muestras positivas a ZN, se seleccionaron al azar 58 para confirmar los diagnósticos mediante CR y todas resultaron también positivas. Diez muestras fecales ZN negativas, también fueron confirmadas como negativas mediante CR. La PCR género específica desarrollada, confirmó 37 de la 58 ZN positivas (64%) y dio negativa al 100% de las diez muestras CR negativas. La técnica molecular desarrollada fue capaz de...Cryptosporidium is an important protozoan parasite, globally distributed, that causes digestive disease in different animals, especially in neonates and young bovines, including humans. Excreted oocysts are immediately infective, resistant and contaminate water and soil, constituting a public health threat. Sensitive and fast methods to detect oocysts in water samples are necessary due to the small number of oocysts present in the environment and their low infectious dose. Therefore, the aim of this study was to contribute to the knowledge of the laboratory diagnosis of Cryptosporidium spp., both microscopic and molecular, in diarrheal stool samples from calves and water samples inoculated with the agent, through the implementation and standardization microscopic traditional protocols and gender-specific PCR. Fecal samples of 205 newborn calves with diarrhea were studied and used for comparing the efficiency of two microscopic staining methods for diagnosis of the parasite, the auramine (AU) and a modified Ziehl-Neelsen (ZN) procedure. For the first time in the country, an immunochromatographic and a molecular assay were used to confirm the microscopical observation of Cryptosporidium spp. oocysts in the bovine samples studied. Out of the 205 fecal samples, we detected oocysts in 115 (56.1%) with AU and 102 (49.8%) with ZN. Comparison of results obtained with the two microscopic techniques showed significant difference (p ≤ 0.05), AU being more sensitive. On the other hand, concordance between the two methods was almost perfect (kappa value of 0.83). The results with these two operator dependent methods were confirmed using an operator independent immunochromatographic (IC) method. The IC method also enabled us to determine the identity of the parasite species as that of Cryptosporidium parvum. Identification of the parasite species was further corroborated by performing a Cryptosporidium species-specific polymerase chain reaction (PCR) test on few samples taken at random. A total of 205 fecal samples were stained with acid-fast method (Ziehl Neelsen, ZN) and 102 (49.8%) were found to have parasite oocysts. From these ZN positive samples, 58 were randomly selected and were all confirmed positive by the immunochromatographic test (IC). Conversely, 10 ZN negative samples were all negative by using IC test. A genus-specific molecular assay (18S ribosomal RNA PCR) was designed and..