Aspectos psicológicos de los cuidados de enfermería en el paciente con dolor

El dolor crónico continúa siendo un reto para las ciencias de la salud y para la enfermería debido a la repercusión psicológica en el individuo, así como, a la elevada prevalencia y gasto en nuestra sociedad. Comprender el dolor desde una perspectiva multidisciplinar, conseguir un mejor control de este y de las variables psicológicas, insomnio y ansiedad, son los objetivos expuestos. La revisión bibliográfica en numerosos libros, revistas científicas, páginas web y la utilización de la herramienta online NNNConsult han sido imprescindibles para el desarrollo de este trabajo. La personalidad condiciona la forma de vivenciar el dolor. El afrontamiento activo, permite controlar el dolor y disminuir las consecuencias psicológicas. Por el contrario, el afrontamiento pasivo y los mecanismos de defensa se asocian a una peor adaptación. El desarrollo de actitudes como la empatía, la aceptación incondicional o la autenticidad están relacionadas con resultados positivos en los pacientes. Se debe abandonar el tratamiento farmacológico exclusivo sustituyéndolo o combinándolo con terapias cognitivo-conductuales y con métodos físicos. En el plan de cuidados, las actividades de enfermería propuestas van a estar dirigidas a un mejor manejo del dolor y de las respuestas psicológicas adversas. La implicación familiar y una correcta educación sanitaria son necesarias para la mejora en el afrontamiento de los problemas desencadenados. Las múltiples opciones terapéuticas y su accesibilidad para toda la población son algunos de los aspectos positivos que se contraponen a los problemas económicos y al uso exclusivo de tratamientos farmacológicos. Nuestra presencia y paciencia son, y serán siempre, el mejor analgésico.Grado en Enfermerí

Development of alternative strategies for preservation and generation of corneal tissues for transplantation

[Resumo] A queratoplastia ou transplante de córnea é o único tratamento dispoñible para moitas enfermidades corneais. Sen embargo, o acceso ás queratoplastias vese limitado pola dispoñibilidade das córneas doadas para transplante. Para incrementar o número de tecidos corneais, nesta tese investigáronse métodos de preservación de córneas alternativos e outras fontes de tecido corneal para queratoplastias. O primeiro obxectivo consistiu en analizar o efecto, en córneas humanas, de protocolos de criopreservación convencional con dimetil sulfóxido (DMSO) con (P1) e sen albúmina (P2), e de protocolos de vitrificación sen (P3) e con formamida (P4). O segundo obxectivo consistiu no desenvolvemento dun enxerto mediante enxeñaría de tecidos empregando membranas de Descemet como andamios e células endoteliais (CEs) para construír o endotelio. Tanto células como andamios procederon de córneas descartadas para o seu uso en clínica. Os resultados obtidos para o primeiro obxectivo mostran que só o P1 proporcionou córneas criopreservadas con CEs viables e unha estrutura xeral deformada. Sen embargo, a variabilidade dos resultados impide aplicar este protocolo na clínica. Os resultados do segundo obxectivo mostraron que é posible crear un enxerto a partir de córneas descartadas. Non obstante, a duración do estudio impediu que se crease un endotelio completamente funcional. Estas dúas prometedoras metodoloxías representan alternativas coas que, nun futuro, e tras máis estudos para a súa mellora, se podería reciclar e incrementar o número de tecidos corneais transplantables e mellorar o acceso ás queratoplastias.[Resumen] La queratoplastia o trasplante de córnea es el único tratamiento disponible para muchas enfermedades corneales. Sin embargo, el acceso a las queratoplastias se ve limitado por la disponibilidad de las córneas donadas para trasplante. Para incrementar el número de tejidos corneales, en esta tesis se investigaron métodos de preservación de córneas alternativos y otras fuentes de tejido corneal para queratoplastias. El primer objetivo consistió en analizar el efecto, en córneas humanas, de protocolos de criopreservación convencional con dimetil sulfóxido con (P1) y sin albúmina (P2), y de protocolos de vitrificación sin (P3) y con formamida (P4). El segundo objetivo consistió en el desarrollo un injerto mediante ingeniería de tejidos empleando membranas de Descemet como andamios y células endoteliales (CEs) para construir el endotelio. Tanto células como andamios procedieron de córneas descartadas para su uso en clínica. Los resultados obtenidos para el primer objetivo muestran que sólo el P1 proporcionó córneas criopreservadas con CEs viables y una estructura general deformada. Sin embargo, la variabilidad de los resultados impide aplicar dicho protocolo en la clínica. Los resultados del segundo objetivo mostraron que es posible crear un injerto a partir de córneas descartadas. No obstante, la duración del estudio impidió que se crease un endotelio completamente funcional. Estas dos prometedoras metodologías representan alternativas con las que, en un futuro, y tras más estudios para su mejora, se podría reciclar e incrementar el número de tejidos corneales trasplantables y mejorar el acceso a las queratoplastias.[Abstract] Many corneal diseases can only be treated through keratoplasty, a corneal transplantation whose access is dependent on the limited availability of transplantable donor corneas. To increase the number of corneal tissues, this thesis investigated alternative preservation methods and alternative sources of transplantable corneal tissues. The first objective was to investigate the effect, on human corneas, of cryopreservation protocols using dimethyl sulfoxide (DMSO) with (P1) and without albumin (P2), and of vitrification protocols without (P3) and with formamide (P4). The second objective was to engineer new transplantable tissues using Descemet’s membranes (DMs) and human endothelial cells (hECs) isolated from discarded corneas which were unfit for clinical use. Results showed that only P1 provided corneas with viable ECs and a slightly distorted general structure, but variability among C1-cryorpeserved corneas did not allow to use this protocol in the clinical practice. A corneal graft was successfully engineered using discarded corneas with an intact decellularized DM seeded with primary hECs. However, a fully functional endothelium was not observed within the timeframe used in this study. Consequently, additional research will be needed to improve both approaches for clinical applications. In the future and after further studies, these approaches would represent promising alternatives to improve the availability of transplantable corneal tissues and the access to keratoplasty.Xunta de Galicia; ED431B 2020/5

Application of NGS to molecular diagnosis of maturity-onset diabetes of the young (MODY)

[Resumo] A diabetes MODY é una enfermidade monoxénica pouco frecuente dentro de todos os casos de diabetes, que se caracteriza por una progresiva disfunción nas células β- pancreáticas, por ser independente de insulina e comezar a desenvolverse en idades moi tempranas. Un diagnóstico molecular pode chegar a supoñer un cambio de tratamento nun paciente, un diagnóstico precoz ou un seguimento efectivo da progresión da enfermidade. Existen unha serie de xenes implicados na diabetes MODY e diversas institucións están identificando variantes relacionadas con esta patoloxía a través da secuenciación dun panel de xenes mediante NGS (Next Generation Sequencing). A NGS está afianzándose na xenética clínica pois permite a realización de diagnóstico molecular a varios pacientes simultaneamente e en moi pouco tempo. Para este traballo foron seleccionados once pacientes baixo os criterios do Complexo Hospitalario Universitario de A Coruña para a realización dun diagnóstico molecular para diabetes MODY. Este consistiu na secuenciación dun panel de xenes relacionados coa mesma (ABCC8, GCK, HNF1A, HNF1B, HNF4A, KCJ11, INS) mediante tecnoloxía NGS. Deste xeito foi realizada unha posta a punto da técnica para a elaboración dun Protocolo Normalizado de Traballo (PNT) que se utilizará rutinariamente no laboratorio e unha análise preliminar das variantes obtidas. Atopáronse variantes de interese clínico en cinco dos once pacientes (unha patolóxica, dúas probablemente patolóxicas e catro de significado incerto), as cales serán estudadas posteriormente e confirmadas mediante secuenciación Sanger. A posterior integración desta información será clave para complementar o diagnóstico clínico de cada paciente.[Abstract] Maturity-onset diabetes of the young (MODY) is a monogenic disorder with a low frequency amongst all diabetes cases. Some of the characteristics features of MODY are the progressive pancreatic β-cell dysfunction, as well as non-insulin dependence, and early-onset diabetes. A molecular diagnosis may imply a change in the treatment, an early diagnosis or a better management of the clinical course of this disease. Several genes are associated with MODY. Some institutions are currently performing variant detection using a gene panel, one of the applications of the NGS (Next Generation Sequencing) technology. NGS technologies have enabled a dramatic transformation in clinical genetics, as they allow molecular diagnoses for many patients at once and in a short time. Following the criteria established by the Complexo Hospitalario Universitario de A Coruña, eleven patients were selected to participate in a molecular diagnosis of MODY. For this, we sequenced a gene panel (ABCC8, GCK, HNF1A, HNF1B, HNF4A, KCJ11, INS) using NGS technology. As a result of this pilot study, we set up a Standard Operating Procedure (SOP), which will be used as a routine in this laboratory. Additionally, we proceeded with a preliminary variant analysis. Clinically relevant variants were found in five out of eleven patients: one pathogenic, two likely pathogenic and four variants of uncertain significance. All of them will be studied and validated by Sanger sequencing. The subsequent integration of this information will be key to complement the clinic diagnosis of each patient.Traballo fin de grao (UDC.CIE). Bioloxía. Curso 2015/201

Criopreservación de córneas: estudio de la viabilidad celular endotelial y de la histomorfología de la córnea

[Resumen] El objetivo de este trabajo ha sido evaluar la eficacia de cuatro protocolos de criopreservación diferentes atendiendo a la viabilidad celular endotelial y a la estructura de las córneas tras su descongelación. Un total de n=3 córneas fueron criopreservadas con cada uno de los protocolos siguientes: criopreservación lenta con albúmina (Grupo 1), criopreservación lenta sin albúmina (Grupo 2), criopreservación rápida mediante vitrificación con VS55 (Grupo 3) y criopreservación rápida mediante vitrificación con DP6 (Grupo 4). Tras la descongelación, se realizó sobre dos córneas de cada grupo un ensayo de viabilidad para evaluar la celularidad y la viabilidad de las células endoteliales. Paralelamente, se realizó la tinción de tricrómico de Masson en una córnea descongelada de cada grupo para analizar la estructura histomorfológica. Las córneas del Grupo 4 mostraron, cualitativamente, más celularidad que las córneas del Grupo 3, seguidas de las córneas del Grupo 1 y Grupo 2. Respecto a la viabilidad, el Grupo 1 mostró un 66,79% de células viables, el Grupo 2 presentó muy pocas células viables, y los grupos 3 y 4, ninguna. Los daños de la criopreservación se observaron en los desprendimientos del endotelio en los Grupos 2, 3 y 4, en las oquedades amplias del estroma en los Grupos 1, 3 y 4, y en el estrechamiento y pérdida de células y de volumen celular en el epitelio de todos los grupos. La criopreservación con cualquiera de los cuatro protocolos utilizados aportan celularidades endoteliales altas tras la descongelación, mostrando la mayor celularidad la criopreservación rápida. Sin embargo, la viabilidad celular endotelial se ve más afectada en la criopreservación rápida que en la criopreservación lenta, que sí retiene cierta viabilidad celular. El endotelio, el epitelio y el estroma de la córnea son capas sensibles a los daños de la criopreservación, en especial durante la criopreservación rápida.[Resumo] O obxectivo deste traballo foi a avaliación da eficacia de catro protocolos de criopreservación diferentes, atendendo á viabilidade celular endotelial e á estrutura das córneas tras a súa desconxelación. Un total de n=3 córneas foron criopreservadas con cada un dos protocolos seguintes: criopreservación lenta con albumina (Grupo 1), criopreservación lenta sen albumina (Grupo 2), criopreservación rápida mediante vitrificación con VS55 (Grupo 3) e criopreservación rápida mediante vitrificación con DP6 (Grupo 4). Tras a desconxelación, realizouse sobre dúas córneas de cada grupo un ensaio de viabilidade para avaliar a celularidade e a viabilidade das células endoteliais. Paralelamente, realizouse a tinguidura de tricrómico de Masson nunha córnea desconxelada de cada grupo para analizar a estrutura histomorfolóxica. As córneas do Grupo 4 mostraron, cualitativamente, máis celularidade que as córneas do Grupo 3, seguidas das córneas do Grupo 1 e Grupo 2. Respecto á viabilidade, o Grupo 1 mostrou un 66,79% de células viables, o Grupo 2 presentou moi poucas células viables, e os grupos 3 e 4, ningunha. Os danos da criopreservación observáronse nos desprendementos do endotelio nos Grupos 2, 3 y 4, nos ocos amplos do estroma nos Grupos 1, 3 y 4, e no estreitamento e perda de células e de volume celular do epitelio de todos os grupos. A criopreservación con calquera dos catro protocolos utilizados aportan celularidades endoteliais altas tras a desconxelación, mostrando a maior celularidade a criopreservación rápida. Sen embargo, a viabilidade celular endotelial vese máis afectada na criopreservación rápida que na criopreservación lenta, que si retén certa viabilidade celular. O endotelio, o epitelio e o estroma da córnea son capas sensibles aos danos da criopreservación, en especial durante a criopreservación rápida.[Abstract] The aim of this study was the evaluation of four protocols of cryopreservation, attending to the cell endothelial viability and to the cornea structure after thawing. A total of n=3 corneas were cryopreserved using the following: slow cryopreservation with albumin (Group 1), slow cryopreservation without albumin (Group 2), fast cryopreservation with vitrification using VS55 solution (Group 3), fast cryopreservation with vitrification using DP6 solution media (Group 4). After thawing, a viability assay was performed over two corneas to evaluate the cellularity and viability of endothelial cells. A Masson staining was performed in one thawed cornea of each group. Corneas in Group 4 showed the huge cellularity, followed by corneas of Group 3, Group 1 and Group 2. Corneas of Group 1 showed 66,79% of viable cells, while in Group 2 there were very few viable cells, and no viable cells in Groups 3 and 4. Cryoinjuries were observed in endothelium detachment in Groups 2, 3 and 4 and in the holes among collagen fibres of strome in Groups 1, 3 and 4. Also, the thinner epithelial layer and its cell losing in all the groups are cryoinjuries. Cryopreservation with any of the four protocols allow a high endothelial cellularity after thawing. Fast cryopreservation offers the best result in cellularity. Despite of all, endothelial cell viability is affected with fast cryopreservation. Slow cryopreservation retains some cell viability. Endothelium, epithelium and strome are three sensitive layers of cornea that suffer cryoinjuries, in special, when the fast cryopreservation is carries out.Traballo fin de mestrado (UDC.FCS). Asistencia e investigación sanitaria. Especialidade en Fundamentos de investigación biomédica. Curso 2017/2018

Vascular Endothelial Growth Factor (VEGF) Prevents the Downregulation of the Cholinergic Phenotype in Axotomized Motoneurons of the Adult Rat

Vascular endothelial growth factor (VEGF) was initially characterized by its activity on the vascular system. However, there is growing evidence indicating that VEGF also acts as a neuroprotective factor, and that its administration to neurons suffering from trauma or disease is able to rescue them from cell death. We questioned whether VEGF could also maintain damaged neurons in a neurotransmissive mode by evaluating the synthesis of their neurotransmitter, and whether its action would be direct or through its well-known angiogenic activity. Adult rat extraocular motoneurons were chosen as the experimental model. Lesion was performed by monocular enucleation and immediately a gelatine sponge soaked in VEGF was implanted intraorbitally. After 7 days, abducens, trochlear, and oculomotor nuclei were examined by immunohistochemistry against choline acetyltransferase (ChAT), the biosynthetic enzyme of the motoneuronal neurotransmitter acetylcholine. Lesioned motoneurons exhibited a noticeable ChAT downregulation which was prevented by VEGF administration. To explore whether this action was mediated via an increase in blood vessels or in their permeability, we performed immunohistochemistry against laminin, glucose transporter-1 and the plasmatic protein albumin. The quantification of the immunolabeling intensity against these three proteins showed no significant differences between VEGF-treated, axotomized and control animals. Therefore, the present data indicate that VEGF is able to sustain the cholinergic phenotype in damaged motoneurons, which is a first step for adequate neuromuscular neurotransmission, and that this action seems to be mediated directly on neurons since no sign of angiogenic activity was evident. These data reinforces the therapeutical potential of VEGF in motoneuronal diseases.España, MINECO and FEDER BFU2015-64515-PJunta de Andalucía and FEDER : P10-CVI605

Continuous polyhydroxybutyrate production from biogas in an innovative two‐stage bioreactor configuration

Producción CientíficaBiogas biorefineries have opened up new horizons beyond heat and electricityproduction in the anaerobic digestion sector. Added‐value products such aspolyhydroxyalkanoates (PHAs), which are environmentally benign and potentialcandidates to replace conventional plastics, can be generated from biogas. Thiswork investigated the potential of an innovative two‐stage growth‐accumulationsystem for the continuous production of biogas‐based polyhydroxybutyrate (PHB)usingMethylocystis hirsutaCSC1 as cell factory. The system comprised twoturbulent bioreactors in series to enhance methane and oxygen mass transfer: acontinuous stirred tank reactor (CSTR) and a bubble column bioreactor (BCB) withinternal gas recirculation. The CSTR was devoted to methanotrophic growth undernitrogen balanced growth conditions and the BCB targeted PHB productionunder nitrogen limiting conditions. Two different operational approaches underdifferent nitrogen loading rates and dilution rates were investigated. A balancednitrogen loading rate along with a dilution rate (D) of 0.3 day−1resulted in the moststable operating conditions and a PHB productivity of ~53 g PHB m−3day−1.However, higher PHB productivities (~127 g PHB m−3day−1)wereachievedusingnitrogen excess at a D = 0.2 day−1. Overall, the high PHB contents (up to 48% w/w)obtained in the CSTR under theoretically nutrient balanced conditions and the poorprocess stability challenged the hypothetical advantages conferred by multistagevs single‐stage process configurations for long‐term PHB production.Ministerio de Ciencia e Innovación under (BES-2016-077160) contract and (project CTM2015-70442-R)Junta de Castilla y León and EU-FEDER program (UIC 315, CLU 2017-09

Optimization of nitrogen feeding strategies for improving polyhydroxybutyrate production from biogas by Methylocystis parvus OBBP in a stirred tank reactor

Producción CientíficaThe design of efficient cultivation strategies to produce bioplastics from biogas is crucial for the implementation of this biorefinery process. In this work, biogas-based polyhydroxybutyrate (PHB) production and CH4 biodegradation performance was investigated for the first time in a stirred tank bioreactor inoculated with Methylocystis parvus OBBP. Decreasing nitrogen loading rates in continuous mode and alternating feast:famine regimes of 24 h-cycles, and alternating feast:famine regimes of 24 h:24 h and 24 h:48 h were tested. Continuous N feeding did not support an effective PHB production despite the occurrence of nitrogen limiting conditions. Feast-famine cycles of 24 h:24 h (with 50% stoichiometric nitrogen supply) supported the maximum PHB production (20 g-PHB m−3 d−1) without compromising the CH4-elimination capacity (25 g m−3 h−1) of the system. Feast:famine ratios ≤1:2 entailed the deterioration of process performance at stoichiometric nitrogen inputs ≤60%.Ministerio de Ciencia, Innovación y Universidades (grant BES-2016-077160)Ministerio de Ciencia, Innovación y Universidades (project CTM2015-70442-R)Junta de Castilla y León (projects UIC 071 and CLU 2017–09

Análisis de la comunicación en la promoción del Camino de Santiago como producto turístico

The Way of St. James has been consolidating over the years into one of the most important tourist attractions of Galicia. Proof of this is that many of the visitors of the Autonomous Region have come directly or indirectly through this ancient pilgrimage route.Indeed, one of the key aspects when to share the road both domestically and internationally have been the various communication and promotion campaigns developed in this regard. That is why the aim of this paper is based on analyzing the promotion that took place about the Way of St. James as a tourism product, drawing particular reference the actions developed during the last Holy Year or Xacobeo 2010.  To carry out this research, the methodology used is based on the use of primary sources, which have been based on the design and conduct in-depth interviews with a group of people linked in one way or another, with the Way of St. James and its communication.El Camino de Santiago se ha ido consolidando con el paso de los años en uno de los atractivos turísticos más importantes de Galicia. Prueba de ello es que gran parte de los visitantes de la Comunidad Autónoma han llegado directa o indirectamente a través de esta ruta de peregrinación milenaria. Precisamente, uno de los aspectos clave a la hora de dar a conocer el Camino tanto a nivel nacional como internacional han sido las diversas campañas de comunicación y promoción desarrolladas al respecto. Es por ello que el objetivo central de este artículo se fundamenta en analizar la promoción llevada a cabo en torno al Camino de Santiago como producto turístico4, tomando como especial referencia las acciones desarrolladas durante el pasado Año Santo o Xacobeo 2010. Para la realización de esta investigación, la metodología utilizada se ha basado en el empleo de fuentes primarias. Las cuales se han fundamentado en la elaboración y realización de entrevistas en profundidad a un grupo de personas vinculadas, de una manera u otra, con el Camino de Santiago y su comunicació