Biópsia pulmonar com agulha cortante guilhotinada e pinça de biopsia por toracoscopia transdiafragmática em cães com alterações pulmonares

Lung diseases are common in small animal clinical routine. Diagnosis is usually affected due to nonspecific symptoms. Imaging features such as radiography and chest ultrasound are acceptable screening tests, although lung biopsy can provides a precise diagnosis. Thus thoracoscopy provides a minimally invasive diagnostic assessment for chest diseases and offers the benefits such as improved illumination and magnification of the image when compared with thoracotomy. In this study we evaluated the transdiaphragmatic thoracoscopic-assisted techniques of lung biopsy with a the guillotine cutting needle and biopsy forceps, in dogs presenting radiographic suspicion on pulmonary tumors. Fourteen dogs regardless of breed, gender, age and body weight admitted at the Hospital of Veterinary Clinics (HCV) of the Veterinary College (FAVET) of Universidade Federal do Rio Grande do Sul (UFRGS), were assessed. Inclusion criteria were presence of nodules on chest radiography and triage tests without changes that could hinder general anesthesia and surgical approach. The animals were positioned in dorsal recumbence and two thoracoscopic ports were established: the first port for working instruments; the second paraxyphoid port for the telescope. Three samples were collected using each sampling method from each lesion or from tumors macroscopically similar whenever their size was less than one centimeter. The samples were sent for histopathological examination in the Veterinary Pathology Laboratory of FAVET/UFRGS. Surgical time was recorded from first incision to wound closure and surgical complications were reported. The dogs were evaluated for the presence of subcutaneous emphysema, hematoma, seroma, local infection and dehiscence. No conversion to open surgery was necessary during the thoracoscopic procedure in any patient. Thoracoscopic assisted biopsy using guillotine needle and biopsy forceps was a safe and fast technique, without perioperative complications. Both devices provided good quality samples for histopathological analysis of lung abnormalities. However the cutting guillotine needle was more efficient especially in larger pulmonary nodules. The transdiaphragmatic access provided optimal approach for both hemithoraces.As afecções pulmonares são comuns na rotina clínica de pequenos animais, todavia, por apresentarem sintomas inespecíficos, muitas vezes o diagnóstico dessas doenças torna-se limitado. Recursos de imagem como a radiografia e a ultrassonografia torácica são válidos como exames de triagem, mas somente a biopsia pulmonar pode possibilitar um diagnóstico específico da doença. A toracoscopia fornece um meio minimamente invasivo de diagnóstico para as doenças torácicas e oferece os benefícios de melhor iluminação e ampliação da imagem, quando comparado com a toracotomia. O presente estudo teve como objetivo avaliar as técnicas de biópsia pulmonar por meio da agulha cortante guilhotinada e da pinça de biopsia, guiadas por toracoscopia, pelo acesso transdiafragmático em cães que apresentavam imagem sugestiva de nódulo pulmonar em exame radiográfico prévio. Foram utilizados 14 cães, independente de raça, sexo, idade e peso corporal. Somente caninos com nódulos visíveis na radiografia torácica e que apresentaram condições clínicas e laboratoriais de serem anestesiados foram incluídos no estudo. Os cães foram posicionados em decúbito dorsal e foram realizados dois acessos à cavidade torácica: um primeiro portal intercostal, para introdução dos dispositivos de biopsia; e outro portal paraxifoide transdiafragmático para introdução do endoscópio. Com cada instrumento de biopsia foram coletadas três amostras do mesmo nódulo ou de nódulos macroscopicamente semelhantes e próximos quando o tamanho destes era inferior a um centímetro. Posteriormente as amostras foram encaminhadas para exame histopatológico. O tempo cirúrgico foi cronometrado da incisão ao fechamento da ferida, etodas as informações foram registradas. No pós-operatório os cães foram avaliados quanto à presença de enfisema subcutâneo, hematoma, seroma, infecção local e deiscência de pontos. Não foi necessário converter os procedimentos toracoscópicos para cirurgia convencional em nenhum dos caninos. Concluiu-se tratar de uma técnica segura, rápida sem complicações trans e pós-operatórias. Ambos dispositivos permitiram aquisição de material suficiente para análise histopatológica das alterações pulmonares, no entanto a agulha cortante guilhotinada apresentou maior eficácia, principalmente, em nódulos pulmonares de maior diâmetro. O acesso transdiafragmático mostrou-se eficiente para exploração de ambos os hemitórax

Efeitos cardiorrespiratórios da associação de tiletamina/zolazepam em cães (Canis familiaris) pré-tratados ou não pela acepromazina

The aim of this work was to evaluate the use of acepromazine as pre-treatment to tiletamine/zolazepam association. Twenty male and female healthy adult mixed breed dogs were used. The dogs were allocated in two groups of 10 animals each (G1 and G2). To G1 was administered 0.1 ml/kg of saline at 0.9 % (placebo), followed by 10 mg/kg of tiletamine/zolazepam 20 minutes later, both intravenously. Immediately before the pre-anesthetic medication (M1), before the anesthetics application (M2) and at 15, 30, 45 and 60 minutes after the administration of tiletamine/zolazepam association (M3 to M6, respectively), measurements of heart rate (HR), systolic, diastolic and mean blood pressures (SBP, DBP e MBP, respectively), cardiac output (CO), cardiac index (CI), systolic volume (SV), electrocardiogram (ECG), respiratory rate (RR), end tidal CO2 (ETCO2), oxihemoglobin saturation (SpO2) and body temperature (T0) were realized. For G2 the same methodology was used, replacing the placebo by acepromazine, at 0.2 mg/kg. The numeric data were submitted to analysis of profile that demonstrated cardiovascular stability and an increase of the anesthetic period with the use of acepromazine, and it was also observed, in G2, that, in spite of the decrease of RR, the SpO2 and ETCO2 values didnt have significant alterations, allowing to conclude that the use of acepromazine presents advantages in the isolated use of the tiletamine/zolazepam association, in dogs.Avaliou-se o uso da acepromazina como pré-tratamento à associação de tiletamina/zolazepam. Para tanto, utilizaram-se 20 animais da espécie canina, machos e fêmeas, adultos, hígidos, divididos em 2 grupos de igual número. O grupo 1 (controle) foi pré-tratado com 0,1 ml/kg de solução salina a 0,9 % e o grupo 2 com 0,2 mg/kg de acepromazina, ambos por via intravenosa. Decorridos 20 minutos, todos os animais receberam, pela mesma via, 10 mg/kg da associação tiletamina/zolazepam. Imediatamente antes da medicação pré-anestésica (M1), antes da aplicação da associação (M2) e aos 15, 30, 45 e 60 minutos após a administração da tiletamina/zolazepam, realizou-se mensuração de: freqüência cardíaca (FC); pressão arterial sistólica (PAS), diastólica (PAD) e média (PAM); débito (DC) e índice cardíaco (IC); volume sistólico (VS); eletrocardiograma (ECG); freqüência respiratória (FR); CO2 ao final da expiração (ETCO2); saturação da oxiemoglobina (SpO2); e temperatura retal (T0). Observou-se estabilidade cardiovascular, miorrelaxamento e aumento do período hábil anestésico com o uso da acepromazina na medicação pré-anestésica. O tratamento estatístco dos valores numéricos pela análise de perfil mostrou que a acepromazina diminuiu a FR; entretanto, a SpO2 e ETCO2 não sofreram alterações estatisticamente significativas, permitindo concluir que o emprego da fenotiazina apresenta vantagens sobre o uso isolado da associação tiletamina/zolazepam, em cães

Clinical Implications of Immune Checkpoints and the RANK/RANK-L Signaling Pathway in High-Grade Canine Mast Cell Tumors

Mast cell tumors (MCTs) are the most common malignant cutaneous tumors in dogs, and they present extremely variable biological behavior. The interaction between RANK, RANK-L, and immune checkpoints is frequently detected in the tumor microenvironment, and, together, they participate in every stage of cancer development. Thus, the aim of this study was to characterize the molecular profiles of PD-L1, CTLA-4, RANK/RANK-L signaling pathway, and IFN-γ in primary tumors and lymph node metastases. Formalin-fixed, paraffin-embedded slides of MCTs and metastatic lymph nodes of ten dogs were submitted to immunohistochemical investigations. The results demonstrated that the tumor microenvironment of the high-grade mast cell tumors showed moderate or intense immunolabeling of all proteins, and the lymph node metastases also showed moderate or intense immunolabeling of checkpoint proteins. In addition, MCTs larger than 3 cm were associated with intensified PD-L1 (p = 0.03) in metastatic lymph nodes and RANK-L (p = 0.049) immunoreactivity in the tumor. Furthermore, dogs with a survival time of less than 6 months showed higher PD-L1 immunoreactivity (p = 0.042). In conclusion, high-grade MCT is associated with an immunosuppressive microenvironment that exhibits elevated RANK/RANK-L signaling and enhanced immune checkpoint immunoreactivity, potentially facilitating intratumorally immune escape. These biomarkers show promise as clinical indicators of disease progression and might response to immunotherapy in dogs with high-grade MCTs, thus emphasizing their importance for guiding treatment decisions and improving outcomes

Efeitos cardiorrespiratórios da associação de tiletamina/zolazepam em cães (Canis familiaris) pré-tratados ou não pela acepromazina

Avaliou-se o uso da acepromazina como pré-tratamento à associação de tiletamina/zolazepam. Para tanto, utilizaram-se 20 animais da espécie canina, machos e fêmeas, adultos, hígidos, divididos em 2 grupos de igual número. O grupo 1 (controle) foi pré-tratado com 0,1 ml/kg de solução salina a 0,9 % e o grupo 2 com 0,2 mg/kg de acepromazina, ambos por via intravenosa. Decorridos 20 minutos, todos os animais receberam, pela mesma via, 10 mg/kg da associação tiletamina/zolazepam. Imediatamente antes da medicação pré-anestésica (M1), antes da aplicação da associação (M2) e aos 15, 30, 45 e 60 minutos após a administração da tiletamina/zolazepam, realizou-se mensuração de: freqüência cardíaca (FC); pressão arterial sistólica (PAS), diastólica (PAD) e média (PAM); débito (DC) e índice cardíaco (IC); volume sistólico (VS); eletrocardiograma (ECG); freqüência respiratória (FR); CO2 ao final da expiração (ETCO2); saturação da oxiemoglobina (SpO2); e temperatura retal (T0). Observou-se estabilidade cardiovascular, miorrelaxamento e aumento do período hábil anestésico com o uso da acepromazina na medicação pré-anestésica. O tratamento estatístco dos valores numéricos pela análise de perfil mostrou que a acepromazina diminuiu a FR; entretanto, a SpO2 e ETCO2 não sofreram alterações estatisticamente significativas, permitindo concluir que o emprego da fenotiazina apresenta vantagens sobre o uso isolado da associação tiletamina/zolazepam, em cães.The aim of this work was to evaluate the use of acepromazine as pre-treatment to tiletamine/zolazepam association. Twenty male and female healthy adult mixed breed dogs were used. The dogs were allocated in two groups of 10 animals each (G1 and G2). To G1 was administered 0.1 ml/kg of saline at 0.9 % (placebo), followed by 10 mg/kg of tiletamine/zolazepam 20 minutes later, both intravenously. Immediately before the pre-anesthetic medication (M1), before the anesthetic s application (M2) and at 15, 30, 45 and 60 minutes after the administration of tiletamine/zolazepam association (M3 to M6, respectively), measurements of heart rate (HR), systolic, diastolic and mean blood pressures (SBP, DBP e MBP, respectively), cardiac output (CO), cardiac index (CI), systolic volume (SV), electrocardiogram (ECG), respiratory rate (RR), end tidal CO2 (ETCO2), oxihemoglobin saturation (SpO2) and body temperature (T0) were realized. For G2 the same methodology was used, replacing the placebo by acepromazine, at 0.2 mg/kg. The numeric data were submitted to analysis of profile that demonstrated cardiovascular stability and an increase of the anesthetic period with the use of acepromazine, and it was also observed, in G2, that, in spite of the decrease of RR, the SpO2 and ETCO2 values didn t have significant alterations, allowing to conclude that the use of acepromazine presents advantages in the isolated use of the tiletamine/zolazepam association, in dogs

Estudo da função ventricular na técnica de plicatura da parede livre do ventrículo esquerdo em cães Left ventricular function after plication of the left ventricular free wall in dogs

OBJETIVO: Avaliar os efeitos da técnica na função ventricular esquerda em cães hígidos e com cardiomiopatia dilatada induzida pela doxorrubicina. MÉTODO: De 13 cães, oito receberam doxorrubicina até que a fração de encurtamento (FE) fosse menor que 20%. Destes, quatro animais e os cinco não induzidos foram submetidos à plicatura da parede livre do ventrículo esquerdo (PPLVE). Os demais cães não foram operados. Foram avaliados débito cardíaco (DC), pressão arterial, exame físico, eletrocardiografia, sistema "Holter" e ecocardiografia, por 180 dias. RESULTADOS: Houve redução do volume ventricular esquerdo. Os cães induzidos melhoraram após a operação e a fração de ejeção (FEj) retornou aos valores normais para a espécie. O DC e a FE aumentaram após a operação. Um cão foi a óbito. Nos cães não operados, a FE diminuiu e foram a óbito em torno de 40 dias após a indução; nos cães não induzidos, esta não se alterou. Houve extra-sístoles ventriculares, que se resolveram espontaneamente. CONCLUSÕES: A PPLVE sem circulação extracorpórea reduz o volume ventricular esquerdo e melhora a função cardíaca dos cães com cardiomiopatia dilatada induzida pela doxorrubicina, demonstrando baixa morbidade e mortalidade tardia.<br>OBJECTIVE: We tested a new surgical technique, the plication of the left ventricular free wall, to reduce left ventricular area and volume and improve left ventricular systolic function, without using a cardiopulmonary bypass. METHODS: Dilated cardiomyopathy was induced in eight dogs by the injection of doxorubicin. Plication of the left ventricular free wall was performed in four dogs with induced cardiomyopathy and in five control dogs. Two dogs not submitted to surgery. The other two dogs died during the induction phase. Cardiac output, 2-dimensional and M-mode echocardiography, arterial blood pressure and electrocardiography were recorded over a 180 days period. Ambulatory electrocardiography of 24 hours was performed during the first postoperative day. RESULTS: The cardiomyopathy-induced group had significant improvements in cardiac output, ejection fraction, shortening fraction and reductions in the left ventricular end-systolic, end-diastolic area and volume after the surgery. One dog died. Electrocardiography and Holter revealed premature ventricular complexes, which improved spontaneously at the first week. The cardiomyopathy-induced dogs that did notundergo surgery deteriored and died about 40 days after the induction of cardiomyopathy. Hemodynamic values did not change in the normal dogs submitted to the surgery. CONCLUSION: The plication of the left ventricular free wall reduced the left ventricular area and volume and improved left ventricular systolic function in dogs with doxorubicin-induced cardiomyopathy giving low morbidity and mortality

Biópsia pulmonar com agulha cortante guilhotinada e pinça de biopsia por toracoscopia transdiafragmática em cães com alterações pulmonares

Lung diseases are common in small animal clinical routine. Diagnosis is usually affected due to nonspecific symptoms. Imaging features such as radiography and chest ultrasound are acceptable screening tests, although lung biopsy can provides a precise diagnosis. Thus thoracoscopy provides a minimally invasive diagnostic assessment for chest diseases and offers the benefits such as improved illumination and magnification of the image when compared with thoracotomy. In this study we evaluated the transdiaphragmatic thoracoscopic-assisted techniques of lung biopsy with a the guillotine cutting needle and biopsy forceps, in dogs presenting radiographic suspicion on pulmonary tumors. Fourteen dogs regardless of breed, gender, age and body weight admitted at the Hospital of Veterinary Clinics (HCV) of the Veterinary College (FAVET) of Universidade Federal do Rio Grande do Sul (UFRGS), were assessed. Inclusion criteria were presence of nodules on chest radiography and triage tests without changes that could hinder general anesthesia and surgical approach. The animals were positioned in dorsal recumbence and two thoracoscopic ports were established: the first port for working instruments; the second paraxyphoid port for the telescope. Three samples were collected using each sampling method from each lesion or from tumors macroscopically similar whenever their size was less than one centimeter. The samples were sent for histopathological examination in the Veterinary Pathology Laboratory of FAVET/UFRGS. Surgical time was recorded from first incision to wound closure and surgical complications were reported. The dogs were evaluated for the presence of subcutaneous emphysema, hematoma, seroma, local infection and dehiscence. No conversion to open surgery was necessary during the thoracoscopic procedure in any patient. Thoracoscopic assisted biopsy using guillotine needle and biopsy forceps was a safe and fast technique, without perioperative complications. Both devices provided good quality samples for histopathological analysis of lung abnormalities. However the cutting guillotine needle was more efficient especially in larger pulmonary nodules. The transdiaphragmatic access provided optimal approach for both hemithoraces.As afecções pulmonares são comuns na rotina clínica de pequenos animais, todavia, por apresentarem sintomas inespecíficos, muitas vezes o diagnóstico dessas doenças torna-se limitado. Recursos de imagem como a radiografia e a ultrassonografia torácica são válidos como exames de triagem, mas somente a biopsia pulmonar pode possibilitar um diagnóstico específico da doença. A toracoscopia fornece um meio minimamente invasivo de diagnóstico para as doenças torácicas e oferece os benefícios de melhor iluminação e ampliação da imagem, quando comparado com a toracotomia. O presente estudo teve como objetivo avaliar as técnicas de biópsia pulmonar por meio da agulha cortante guilhotinada e da pinça de biopsia, guiadas por toracoscopia, pelo acesso transdiafragmático em cães que apresentavam imagem sugestiva de nódulo pulmonar em exame radiográfico prévio. Foram utilizados 14 cães, independente de raça, sexo, idade e peso corporal. Somente caninos com nódulos visíveis na radiografia torácica e que apresentaram condições clínicas e laboratoriais de serem anestesiados foram incluídos no estudo. Os cães foram posicionados em decúbito dorsal e foram realizados dois acessos à cavidade torácica: um primeiro portal intercostal, para introdução dos dispositivos de biopsia; e outro portal paraxifoide transdiafragmático para introdução do endoscópio. Com cada instrumento de biopsia foram coletadas três amostras do mesmo nódulo ou de nódulos macroscopicamente semelhantes e próximos quando o tamanho destes era inferior a um centímetro. Posteriormente as amostras foram encaminhadas para exame histopatológico. O tempo cirúrgico foi cronometrado da incisão ao fechamento da ferida, etodas as informações foram registradas. No pós-operatório os cães foram avaliados quanto à presença de enfisema subcutâneo, hematoma, seroma, infecção local e deiscência de pontos. Não foi necessário converter os procedimentos toracoscópicos para cirurgia convencional em nenhum dos caninos. Concluiu-se tratar de uma técnica segura, rápida sem complicações trans e pós-operatórias. Ambos dispositivos permitiram aquisição de material suficiente para análise histopatológica das alterações pulmonares, no entanto a agulha cortante guilhotinada apresentou maior eficácia, principalmente, em nódulos pulmonares de maior diâmetro. O acesso transdiafragmático mostrou-se eficiente para exploração de ambos os hemitórax

Laparoscopy hepatic biopsy through cauterization Biópsia hepática laparoscopica por cauterização

Hepatic biopsy was realized through laparoscopy with simultaneous cauterization in the present study, whose principal aim was to evaluate the efficacy of the applied method and to study its effects in the liver of healthy dogs. Furthermore, we tried to verify the main hematological and chemistry profile alterations related to the hepatic function, and to investigate the viability of the fragments collected by histopathology. To attain this objective, 21 clinically healthy dogs, weighing between 10 and 15kg were submitted to hepatic biopsy with forceps connected to the cautery. Cautery was performed by applying radiofrequency energy at 45 watts. Forty-two hepatic biopsies through laparoscopy were conducted in the animals. At group I one hepatic fragment per animal was collected, at group II two hepatic fragments per animal were collected, and at group III three fragments were collected. Hematocrit and alanine-aminotransferase measurements were employed to evaluate the animals at the pre-operative period, at four and six hour post-operative, and at day 30 post-operative. The results revealed that the procedure was safe and effective for hepatic biopsy in dogs. There were no clinical alterations related to the technique. The fragments collected were viable for histopathology. Hepatic biopsy through laparoscopy with simultaneous cauterization is an effective and usefull method in dogs.<br>Este estudo visou avaliar a eficácia do método de biópsia hepática laparoscópica por cauterização e estudar os seus efeitos no fígado de cães sadios. Além disso, procurou-se verificar as principais alterações hematológicas e bioquímicas-séricas relacionadas às funções hepáticas e averiguar a viabilidade dos fragmentos colhidos por exame de histopatologia. Para tanto, 21 cães clinicamente sadios pesando entre 10 e 15kg, foram separados em três grupos de sete animais cada grupo. As amostras foram retiradas da borda no lobo lateral esquerdo, utilizando-se pinça de biópsia conectada a eletrocautério na freqüência de 45W. Foram realizadas 42 biópsias hepáticas por laparoscopia nos 21 animais supra- referidos. No grupo I, colheu-se um fragmento hepático por animal. No grupo II, colheram-se dois fragmentos e no grupo III, colheram-se três fragmentos por animal. Os cães foram avaliados nos períodos pré, pós-operatório (tempos 4h e 6h) e aos 30 dias de evolução. Os resutados obtidos revelaram que não houve alterações hematológicas, bioquímicas e histopatológicas relacionadas à técnica. Não foram observadas alterações significativas nos parâmetros estudados, sugerindo que não ocorreram alterações hepáticas que comprometessem a função do órgão

Utilização de implante ósseo cortical alógeno conservado em glicerina para preservação de membro torácico: estudo experimental em cães A limb sparing surgery with the use of a cortical allograft preserved in glicerin: an experimental study in dogs

A técnica de preservação de membro é uma alternativa à amputação em cães com osteossarcoma do esqueleto apendicular. OBJETIVO: O desenvolvimento da técnica preservadora aos moldes da original descrita por Straw¹. MÉTODOS: O procedimento cirúrgico foi realizado com modificações, substituindo-se o método de conservação dos implantes pela glicerina e o cimento ósseo utilizado no preenchimento do canal medular do implante pela poliuretana de mamona, e para avaliação da incorporação do implante foram feitos exames clínico, radiográfico e histopatológico em diferentes tempos pós-operatórios. RESULTADOS: Observada a boa função do membro no pós-operatório, a formação de calo ósseo e fechamento das linhas de interfaces com remodelação óssea em avaliação radiográfica e ao exame histopatológico foi notada a reabsorção do implante ósseo com sua substituição por tecido conjuntivo fibroso e tecido ósseo compacto, neovascularização e presença de infiltrado inflamatório plasmocitário. CONCLUSÕES: A poliuretana de mamona mostrou-se uma boa substituta ao cimento originalmente utilizado, aumentando a resistência do implante, sem causar reações do tipo corpo estranho e sem sua osteointegração. O implante ósseo conservado em glicerina apresentou ação osteoindutora e osteocondutora, sem sinais de rejeição; desta forma, a glicerina mostrou ser uma meio alternativo viável. Portanto, a técnica de preservação do membro, com suas modificações, caracterizou-se como alternativa à técnica original e à amputação do membro para cães com osteossarcoma de esqueleto apendicular.<br>A limb-sparing surgery can be an alternative treatment to amputation for dogs with appendicular osteosarcoma. PURPOSE: The purpose of this study was the development of this surgical technique, similar to the original, described by Straw¹, with changes in the procedure of the allografts preservation, and in the bone cement chose to be used intramedullary. METHODS: The surgery was performed in six health dogs, with the osteotomy of one-third of the radio and ulna, section of the distal margin in the radio-carpal joint and reconstruction using a cortical allograft preserved in 98% glycerin. The allograft's medullar channel was filled with a polymer extracted from castor oil (Ricinus communis) and a long dynamic compression plate were used to fix this allograft on the radio, carpal joint and 3rd metacarpal bone, with the arthrodesis of the carpal joint. A medio-lateral radiographs was performed immediately posteoperatively and with 7, 15, 30, 45, 60, 90, 120 and 150 days after surgery, to evaluate the allograft incorporation. The histopatological evaluation was done with 90, 120 and 150 days after surgery. RESULTS: Was notice a bone callus formation on the radiogrhphs exams by 60 days after surgery and bone bridges were closing the interfragmentary space, with remodeling by 90 days. We have noticed resorption of the grapht, with formation of a connective tissue and new bone around the polymer on the histophatological evaluation. A neovascularization and inflammatory cells in the connective tissue was noticed with a decreased in the inflammatory process with the time. CONCLUSIONS: The polymer extracted from castor oil showed to be a good substitute for the bone cement originally used in the limb-sparing surgery, increasing the graft resistance with no foreign body reaction or osteointegration. The allograft preserved in glycerin presented onteoinduction and osteocondution actions, with new bone formation, and no signs of rejection, then, the glycerin showed to be a good alternative preservation procedure. Therefore, the modified technique can be considered an alternative to the original limb-sparing surgery and to amputation for dogs with appendicular osteosarcoma, studies still deserve to be done with sick animals