In vitro grafting in the propagation of Eucalyptus urophylla and E. grandis clones

O objetivo deste trabalho foi avaliar a eficiência da enxertia in vitro na propagação de dois clones híbridos de Eucalyptus urophylla e E. grandis. Foram utilizados porta-enxertos juvenis obtidos de sementes de E. grandis e E. urophylla germinadas in vitro. As plantas enxertadas apresentaram pegamento de até 93% aos 50 dias de idade para as combinações de enxerto e porta-enxerto. Quanto ao crescimento em altura, verificaram-se melhores resultados em relação ao porta-enxerto E. urophylla. A análise histológica das plantas enxertadas comprovou a eficiência do processo de cicatrização do calo formado na região de conexão, seguida da reconstituição vascular.The objective of this work was to evaluate the efficiency of the in vitro grafting in the propagation of two Eucalyptus urophylla and E. grandis hybrid clones. Juvenile stocks obtained from seeds of E. grandis and E. urophylla germinated in vitro were used. The grafted plants showed success up to 93% at 50 days for the scion and stock combinations. The highest final plant height values were observed when the stock was E. urophylla. Histologic analysis showed that cicatrized callus in the connection region was successfully followed by vascular recomposition in different combinations among scion with rootstocks

Rooting of apical, intermediate and basal minicuttings in clones of Eucalyptus benthamii

Este trabalho teve como objetivo avaliar o enraizamento de miniestacas apicais, intermediárias e basais de Eucalyptus benthamii Maiden et Cambage. As miniestacas utilizadas foram coletadas de minicepas estabelecidas a partir de mudas de origem seminal. O experimento foi conduzido no delineamento inteiramente casualizado, em arranjo fatorial 4x3, sendo os fatores constituídos por quatro clones de E. benthamii (C50, C51, C52 e C53) e três tipos de miniestacas, confeccionadas das porções apical, intermediária e basal das brotações. Avaliou-se a sobrevivência e o enraizamento das mudas aos 45 dias de idade, em casa de sombra, e aos 90 dias em fase de pleno sol. Avaliou-se ainda a altura das mudas aos 90 dias de idade. Ao final das avaliações, o clone C52 se destacou dos demais em termos de sobrevivência, enraizamento e crescimento em altura. Na fase de pleno sol, quando as mudas já haviam completado o ciclo de desenvolvimento, a miniestaca apical comprovou ser o tipo de propágulo com maior aptidão ao enraizamento entre todos os clones avaliados.AbstractRooting of apical, intermediate and basal minicuttings in clones of Eucalyptus benthamii. This study aimed to evaluate the rooting of apical, intermediate and basal ministumps of Eucalyptus benthamii Maiden et Cambage. The minicuttings were collected from ministumps originated from seedlings. The experiment was conducted in a completely randomized design, in a 4x3 factorial arrangement with factors consisting of four clones of E. benthamii (C50, C51, C52 e C53) and three types of cuttings (apical, intermediate and basal). The survival and rooting were evaluated with 45 days  in shadow house, and 90 days in the full sun stage. In the end of the evaluations, the clone C52 proved to be better in survival, rooting and height growth. In full sun stage, when the seedlings completed the development cycle, the apical minicutting proved to be the kind of propagules with grater aptitude on rooting when compared with the others clones.Keywords: Minicutting; types of cuttings; clonal propagation.This study aimed to evaluate the rooting of apical, intermediate and basal ministumps of Eucalyptus benthamii Maiden et Cambage. The minicuttings were collected from ministumps originated from seedlings. The experiment was conducted in a completely randomized design, in a 4x3 factorial arrangement with factors consisting of four clones of E. benthamii (C50, C51, C52 e C53) and three types of cuttings (apical, intermediate and basal). The survival and rooting were evaluated with 45 days  in shadow house, and 90 days in the full sun stage. In the end of the evaluations, the clone C52 proved to be better in survival, rooting and height growth. In full sun stage, when the seedlings completed the development cycle, the apical minicutting proved to be the kind of propagules with grater aptitude on rooting when compared with the others clones

Dormancy break induced by gibberellic acid and in vitro germination of seeds and zygotic embryos of Prunus campanulata Maxim

Prunus campanulata is a species largely adopted for landscape composition in Brazil with limited seedling production by seed dormancy, lacking studies about in vitro propagation. This study aims to evaluate different P. campanulata seed pretreatments on germination, and the effect of GA3 on dormancy break and seedlings biometry. Seeds were processed in three treatments: complete seeds, seeds without endocarp, and isolated zygotic embryos incubated in a WPM medium containing different GA3 concentrations (0.0, 2.0, and 4.0 mg L-1). After 30 days of in vitro incubation were evaluated the germination percentage, mean germination time, percentage of normal seedlings, percentage of seedlings with leaves, and survival percentage were. Seedlings greater than 3.0 cm were selected for ex vitro adaptation, evaluating after 32 days the biometric variables: total length, aerial part length, root length, and the number of leaves. Complete seeds do not germinate, suggesting dormancy associated with the endocarp, whereas seeds without endocarp and isolated zygotic embryos showed the same germination rate, with no effect on GA3. The GA3 promoted greater seedling growth at concentrations between 1.89 mg L-1 for the total length of the isolated zygotic embryo and 2.24 mg L-1 for the length of the aerial part of seeds without endocarp. In conclusion, seed processing, i.e., removing the endocarp or isolating the zygotic embryo can overcome dormancy, improving germination and seedling production of P. campanulata in vitro

Growth promoting and rooting of Eucalyptus dunnii for rhizobacteria and epiphytic bacteria.

The use of microorganisms with plant growth promoting and rooting effect they have results promising for production of clonal seedlings of eucalyptus. Thus, the aim of this study was evaluate rhizobacteria and epiphytic bacterial potential in the growth promoting and rooting of minicutting of Eucalyptus dunnii. The assay were conducted in randomized block design in a factorial 4 x 3x 3, being factors period to harvesting of shoots, four bacterial isolates and three methods of bacterial application. Percent survival of minicuttings was assessed in the end of greenhouse phase, in the end of shadow house phase and in the end of acclimation sun area phase, the minicutting rooting was evaluate after 90 days of staking of minicuttings. Thereply in the survival in the green house, shadow house and the acclimation sun area has varied according withbacterial isolates, method of appliedandperiod assay realized. Do not observed significant effect of the isolates under rooting of the minicuttings. Based on the results concluded that bacterial isolates sometimes has beneficial effect, sometimes has nothing effect under survival and rooting of minicutting of E. dunnii. How is the first relate of the use to rhizobacteria and epiphytic bacterias as E. dunnii growth promoter and rooting, more studies are needed for confirmation of effective these microorganisms.O uso de microrganismos com efeito de promotores de crescimento e enraizamento de plantas tem apresentando resultados promissores no desenvolvimento de mudas clonais. Assim, o objetivo do estudo foi avaliar o potencial de isolados de rizobactérias e residentes do filoplano na promoção de crescimento e enraizamento de miniestacas de Eucalyptus dunnii. O experimento foi conduzido no delineamento de blocos casualizados, em arranjo fatorial 4 x 4 x 3, sendo os fatores constituídos por quatro coletas, quatro isolados bacterianos e três métodos de aplicação. Foram avaliados o percentual de sobrevivência das miniestacas na saída da casa de vegetação, casa de sombra e área de pleno sol e, o enraizamento das miniestacas aos 90 dias de idade. A resposta na sobrevivência de mudas na casa de vegetação, sombra e área de pleno sol variaram de acordo com o isolado, forma de aplicação e período de realização da coleta. Não foi observado efeito significativo dos isolados bacterianos sobre o enraizamento das miniestacas. Os isolados bacterianos apresentaram ora efeito benéfico, ora ausência de efeito para a sobrevivência e enraizamento das miniestacas. Por ser o primeiro relato do uso de rizobactérias e residentes de filoplano na promoção de crescimento de E. dunnii há demanda de novos estudos para a confirmação da efetividade destes microrganismos

Eucalyptus urophylla x E. grandis clones in vitro graftings

O presente trabalho teve como objetivo avaliar a eficiência da enxertia in vitro na propagação de dois clones de Eucalyptus urophylla x E. grandis. Foram utilizados porta-enxertos juvenis obtidos de sementes de Eucalyptus urophylla e E. grandis, germinadas em condições assépticas. As avaliações foram realizadas quanto ao percentual de pegamento e crescimento em altura dos enxertos durante a etapa in vitro (aos 35 e 50 dias) e quanto à sobrevivência e crescimento em altura das plantas enxertadas in vitro, após a etapa de aclimatização nas condições ex vitro (aos 25, 32, 50 e 70 dias), em relação a diferentes tempos de permanência das plantas no escuro após a enxertia (0, 7, 14 e 21 dias). Foi realizada a análise histológica da região de união dos enxertos aos 7, 14, 21, 28 e 50 dias após a enxertia in vitro. Verificou-se que os processos de cicatrização do calo formado na região de injúria e reconexão vascular das plantas enxertadas ocorreram aos 14 dias após a enxertia. Com relação ao crescimento em altura, observou-se durante a etapa in vitro, comportamento semelhante entre os clones e os porta-enxertos utilizados. Quanto ao percentual de pegamento dos enxertos in vitro, para o clone 1, os melhores resultados (87%) foram obtidos quando as plantas permaneceram por até 14 dias no escuro após a enxertia, enquanto que para o clone 2, melhores respostas (93%) foram observadas no tempo de 7 dias no escuro. Quanto ao maior tempo no escuro (21 dias), o clone 2, enxertado em plântulas de Eucalyptus urophylla mostrou maior sensibilidade, com perda de vigor das plantas e grande parte dos enxertos oxidados, resultando em número reduzido de plantas sobreviventes à fase de transferência para as condições ex vitro. No que se refere à etapa de aclimatização e rustificação ex vitro, não houve diferença significativa entre os clones e entre os tratamentos de escuro na condição inicial in vitro. Os resultados obtidos permitiram concluir que a metodologia de enxertia in vitro adotada se mostrou eficiente e com potencial de aplicação na propagação clonal e em estudos relacionados ao rejuvenescimento de clones de Eucalyptus, representados pela elevada taxa de sobrevivência das plantas enxertadas, atingindo até 87% ao final da etapa de aclimatização ex vitro.The objective of this work was to evaluate the in vitro grafting efficiency on the propagation of two Eucalyptus urophylla X E. grandis clones. Juvenile stocks obtained from Eucalyptus grandis and Eucalyptus urophylla germinated in aseptic conditions were used. The evaluations to verify the success percentage and graftings height growth during the in vitro stage (at 35 and 50 days), and survival and height growth of the grafted plants in vitro after the acclimation stage in the ex vitro conditions (at 25, 32, 50 and 70 days) in relation to various periods of permanence of the plants in the dark after grafting (0, 7, 14 and 21 days) were done. The histologic analysis made on the union region of the graftings was made at 7, 14, 21, 28 and 50 days after the in vitro grafting. It was observed that the cicatrization processes of the callus formed on the damaged region and the vascular reconnection on the grafted plants occurred at 14 days after grafting. In relation to height growth during the in vitro stage it was observed a similar behavior between the clones and the stock used. As to the success percentage of the in vitro graftings, for the clone 1, the best results (87%) were obtained when the plants were maintained in the dark for until 14 days after grafting, and for clone 2, the best response (93%) was observed for the dark permanence time of 7 days. In the greatest period of darkness (21 days), the clone 2 grafted on Eucalyptus urophylla saplings showed a greater susceptibility, with vigor loss of the plants and most of the graftings oxidized wich resulted in a reduced number of plants surviving the stage of transference to ex vitro conditions. In the stage of ex vitro acclimation and hardening, there was no significant difference between the clones and dark treatments in relation to the initied in vitro condition. The results obtained allow to conclude that the in vitro grafting methodology adopted showed to be efficient and has potential of use in the clonal propagation and in studies related to clonal rejuvenation of Eucalyptus spp., which are represented by the high survival rate of the grafted plants, which was up to 87% at the end of the ex vitro acclimation stage.Fundação de Amparo a Pesquisa do Estado de Minas Gerai

In vitro culture and somatic embryogenesis of zygotic embryos of macaúba (Acrocomia aculeata (Jacq). Loddiges)

O presente trabalho teve por objetivos a proposição de protocolos para a cultura de embriões e indução de embriogênese somática da macaúba, utilizando-se como fonte de explantes embriões zigóticos maduros e imaturos. Na cultura de embriões in vitro estudou-se: a) o efeito do regime de incubação e carvão ativado na germinação de embriões maduros; b) o efeito da composição do meio, concentração de sais, e do carvão ativado na germinação de embriões zigóticos maduros e imaturos; c) o efeito de temperaturas de armazenamento dos frutos e da sacarose na germinação in vitro de embriões zigóticos maduros e imaturos. Quanto à indução de embriogênese somática, avaliou-se o efeito da auxina picloram na indução de calos embriogênicos, a partir de embriões zigóticos maduros. Nos experimentos de germinação in vitro de embriões zigóticos, avaliaram-se os percentuais de intumescimento, oxidação, germinação, explantes sem reação, conversão de plântulas viáveis, plantas com raízes secundárias, comprimento da parte aérea e da raiz primária e o número médio de folhas por plântula. Na indução de embriogênese somática, foram avaliados os percentuais de calejamento dos explantes, o tipo de calo formado (primário ou embriogênico), o percentual de calos nodulares e a oxidação. O cultivo dos embriões sob fotoperíodo resultou em elevado índice de oxidação dos explantes, no entanto foi favorável ao crescimento e desenvolvimento das plântulas se comparados ao regime de escuro inicial. A suplementação do meio com carvão ativado mostrou-se imprescindível ao pleno desenvolvimento das plântulas, principalmente por estimular o desenvolvimento de um sistema radicular eficiente, visto que na ausência deste componente no meio, não foi observada a conversão de plântulas viáveis, que por sua vez apresentaram crescimento lento e desbalanceado. Em relação à composição do meio, em geral o meio de MS promoveu resultados ligeiramente superiores ao meio Y3, em termos de desenvolvimento das plântulas, na ausência de carvão ativado. Contudo, independente da composição salina utilizada, a ausência de carvão no meio resultou no crescimento desbalanceado das plântulas, que nessa condição, não apresentaram formação de raízes primárias e secundárias. Por outro lado, a incorporação de carvão ativado aos meios, promoveu a conversão de plântulas viáveis, com raízes bem formadas, e em condições de serem aclimatizadas. Plântulas oriundas da cultura de embriões imaturos tenderam a se desenvolver melhor em meio contendo maiores concentrações de sais (75 e 100 % da força total) do meio Y3. Além disso, notou-se que as raízes primárias tiveram maior alongamento e desenvolvimento de raízes secundárias, à medida que a concentração de carvão ativado no meio foi aumentada. Quanto ao armazenamento dos frutos, a temperatura ambiente incorreu em maior percentual de germinação dos embriões. A menor concentração de sacarose foi o pior tratamento, pois além de influenciar negativamente a germinação dos embriões, especialmente para os frutos mantidos em baixa temperatura, resultou na formação de plântulas anormais, com sintomas de hiperidricidade. Nas concentrações mais elevadas de sacarose, não foi observada diferença no aspecto das plântulas, que mostraram-se muito vigorosas, independente da temperatura em que os frutos foram estocados. A temperatura de 35 ºC estimulou a germinação dos embriões imaturos e a conversão de plântulas viáveis, e, independente do tempo em que os frutos permaneceram nessa condição a qualidade fisiológica e viabilidade dos explantes foi mantida. Além disso, proporcionou maior eficiência durante o processamento dos frutos e extração dos embriões. A freqüência de calos embriogênicos foi maior em meio contendo 2,4 mg L-1 de picloram, que também mostrou-se mais efetiva na formação de estruturas nodulares. Seções histológicas de calos nodulares revelaram a formação de pró-embriões e embriões somáticos na fase globular, contudo essas estruturas não progrediram para fases mais avançadas quando transferidas para meio de maturação, e os calos tenderam a escurecer por completo após 30 dias nessa condição. Os resultados obtidos nesse trabalho permitiram concluir que é possível obter plântulas de macaúba a partir da cultura de embriões in vitro de forma relativamente rápida (12 semanas). No entanto, estudos complementares visando, principalmente, aprimorar a fase de aclimatização devem ser conduzidos, considerando o crescimento lento apresentado, o que demonstra a dificuldade de enraizamento in vitro da espécie. Pesquisas mais aprofundadas nesse sentido contribuirão para aumentar a sobrevivência das plântulas nessa fase e com isso viabilizar a aplicação desta técnica na propagação da macaúba. Metodologias que visem a melhoria da fase de maturação e regeneração de embriões somáticos necessitam ser ajustadas, permitindo a clonagem em larga escala desta palmeira, via embriogênese somática, pelo seu potencial como oleaginosa na produção de biocombustíveis.The objectives of this work were to propose the proceeds regarding the culture of embryos and induction of somatic embryogenesis of the Acrocomia aculeata palm tree using as explants source the mature and immature zygotic embryos. In the in vitro embryo culture the following were studied: a) the effect of the incubation conditions and of the activated charcoal on the germination of the mature embryos; b) the effect of the medium composition, salt composition and of the activated charcoal on the germination of mature and immature zygotic embryos; and c) the effect of the storage temperature of the fruits and of the sucrose on the in vitro germination of mature and immature zygotic embryos. In relation to the induction of somatic embryogenesis, the effect of the auxin picloram in the induction of embryogenic calluses was evaluated on mature zygotic embryos. In the experiments on in vitro germination of zygotic embryos, the percentage of swelling, oxidation, germination, non reative explants, conversion to viable seedlings, plants with secondary roots, length of the aerial part and of the primary root and the average number of leaves per seedlings were evaluated. In the induction of somatic embryogenesis, the percentages of callus formation on the explants, the type of callus formed (primary or embryogenic), the percentage of nodular callus and the oxidation were evaluated. The culture of embryos under photoperiodic conditions resulted in a high index of oxidation of the explants, but this was favorable to the growth and development of the seedlings if compared to the starting darkness condition. The addition of activated charcoal to the medium showed to be essential to the complete development of the seedlings, mainly because it stimulates the development of an efficient root system, because in the absence of this component in the medium the conversion to the viable seedling was not observed, instead, the seedlings had a slow and unbalanced growth. In relation to the medium composition, in general, the MS medium promoted slightly better results than the Y3 medium, considering the seedling development in the absence of the activated charcoal. However, independent of the saline composition used, the absence of activated charcoal in the medium resulted in the unbalanced growth of the seedlings, which, in this condition, did not show the formation of primary or secondary roots. On the other hand, the addition of activated charcoal to the media promoted the conversion to viable seedlings, with well formed roots and in conditions to grow normally. The seedlings produced from immature embryos had the tendency to develop better in a medium with higher salt concentrations (75 to 100 % of the total power) of the Y3 medium. Moreover, it was observed that the primary roots had a greater length and developed more secondary roots as the concentration of activated charcoal was increased in the medium. In relation to the storage of the fruits, the environmental temperature caused the greatest percentage of germination of the embryos. The lower concentration of sucrose was the worst treatment, because, besides influencing negatively the germination of the embryos, specially those from fruits kept in low temperature, it resulted in the formation of abnormal seedlings, with symptoms of hyperhydricity. In the higher sucrose concentrations no difference was observed in the aspects of the seedlings, that showed great vigour, independently of the storage temperature of the fruits. The temperature of 35 oC stimulated the germination of immature embryos and the formation of viable seedlings, and, independent of the period of time that the fruits were kept in this condition, the physiologic quality and the viability of the explants were maintained. In addition, it rendered greater efficiency during the processing of the fruits and the extraction of the embryos. The frequency of the embryogenic calluses was greater in the medium containing 2,4 mg L-1 of picloram that also showed to be more effective in the formation of nodular structures. Hystologic sections of the nodular calluses showed the formation of pro-embryos and of somatic embryos in the globular phase, but the formation of these structures did not progress to more advanced phases when they were transferred to a maturation medium, and the calluses tended to darken completely after 30 days in this condition. The results obtained in this work allowed to conclude that it is possible to obtain seedlings of Acrocomia aculeata from the in vitro embryo culture in a relatively fast way (12 weeks). Nevertheless, complementary studies directed mainly to the curing of the seedlings should be done, because of the slow growth rate shown, which demonstrates the in vitro rooting difficulty of the species. More specific research in this direction will contribute to increase the survival rate of the seedlings in this phase and thus viabilize the application of this propagation technique to this palm species. The methodologies to improve the maturation phase and the regeneration of somatic embryos need to be adjusted, to allow the cloning in great numbers via somatic embryogenesis, because of the potential as oleaginous plant to produce biofuels.Fundação de Amparo a Pesquisa do Estado de Minas Gerai

Nutrição e enraizamento adventício de plantas lenhosas

Vegetative propagation success of commercial genotypes via cutting techniques is related to several factors, including nutritional status of mother trees and of propagation material. The nutritional status determines the carbohydrate quantities, auxins and other compounds of plant essential metabolism for root initiation and development. Each nutrient has specific functions in plant, acting on plant structure or on plant physiology. Although the importance of mineral nutrition for success of woody plants vegetative propagation and its relation with adventitious rooting is recognized, the role of some mineral nutrients is still unknown. Due to biochemical and physiological complexity of adventitious rooting process, there are few researches to determine de role of nutrients on development of adventitious roots. This review intends to explore de state of the art about the effect of mineral nutrition on adventitious rooting of woody plants.O sucesso da propagação vegetativa de genótipos comerciais via técnicas de estaquia está relacionado a diversos fatores, dentre os quais o estado nutricional das plantas matrizes doadoras de propágulos e dos propágulos. O status nutricional determina a quantidade de carboidratos, auxinas e outros compostos do metabolismo essencial da planta para a iniciação e desenvolvimento da rizogênese. Cada nutriente possui na planta funções específicas essenciais, podendo atuar estruturalmente ou fisiologicamente. Contudo, apesar de se reconhecer a importância da nutrição mineral para o sucesso da propagação vegetativa de espécies lenhosas e sua relação com o enraizamento adventício, o papel de alguns elementos são ainda desconhecidos. Pela complexidade bioquímica e fisiológica do processo de enraizamento adventício, há escassez de trabalhos buscando determinar o papel nos nutrientes no desenvolvimento adventício de raízes. A presente revisão bibliográfica pretende explorar o estado da arte no que se refere aos conhecimentos sobre o efeito da nutrição mineral no enraizamento adventício de espécies lenhosas, bem como apresentar ao final uma breve revisão sobre outros compostos de origem orgânica que podem ser empregados com o intuito de melhorar o processo rizogênico

Use of bio-fertilezers based on amino acids to grow Eucalyptus dunnii seedlings

A produção de mudas florestais em quantidade e qualidade é uma das fases mais importantes para o estabelecimento de povoamentos florestais mais uniformes e produtivos. A maior sobrevivência e desenvolvimento das plantas após o plantio é dependente, dentre outros fatores, de um bom estado nutricional das mudas. Este trabalho objetivou avaliar o potencial de utilização de dois biofertilizantes à base de aminoácidos como agentes promotores de crescimento inicial de mudas de Eucalyptus dunnii Maiden, denominados respectivamente como “BIO 1” e “BIO 2”. O experimento foi conduzido em viveiro comercial no município de Imbituva, PR. Foi utilizado delineamento inteiramente casualizado, com três tratamentos e 4 repetições, contendo 50 mudas por repetição. As variáveis avaliadas foram: altura da planta, diâmetro do coleto, peso de matéria fresca e seca da parte aérea e raízes, comprimento de raízes e índice de qualidade de Dickson. Houve respostas positivas pela aplicação dos biofertilizantes para todas as variáveis estudadas, destacando-se a aplicação do BIO 2.The production of forest seedlings in quantity and quality is one of the most important stages for more uniform and productive forest stands establishment. A higher survival and development of seedlings after planting are dependent, among other factors, of their good nutritional status. This study aimed to evaluate the potential use of two bio-fertilizers based on amino acids as initial growth promoters of Eucalyptus dunnii Maiden seedlings, known respectively as “BIO 1” and “BIO 2” .The experiment was conducted in a commercial nursery in Imbituva, Parana State, Brazil. It was used a completely randomized design, with three treatments and four replications, with 50 seedlings per replication. The variables evaluated were: plant height, stem diameter, fresh matter weight of shoot and of roots, dry matter weight of shoot and roots, roots length and Dickson quality index (DQI). There were positive responses to bio-fertilizers application for all studied variables, especially when applied BIO 2