Rol de las plaquetas en la inflamación

En condiciones fisiológicas, la activación de las plaquetas circulantes es limitada de manera constitutiva a través de la liberación, a partir del endotelio vascular, de potentes inhibidores de la función plaquetaria tales como el óxido nítrico y prostaciclina. Frente a una injuria vascular, las plaquetas se adhieren firmemente a proteínas expuestas del subendotelio permitiendo la formación del trombo y la detención de la hemorragia. Sin embargo, durante las últimas dos décadas numerosas evidencias revelaron que, además, en ausencia de un aparente daño morfológico pero en situaciones inflamatorias, las plaquetas son capaces de interactuar con el endotelio debido tanto a la disminución de los mecanismos fisiológicos inhibitorios como a un aumento en la expresión de moléculas de adhesión en la superficie de las células endoteliales activadas. Estos descubrimientos no sólo han creado un nuevo paradigma en la biología vascular sino también han abierto un novedoso y extenso campo de estudio asociado a las consecuencias fisio-patológicas de la interacción entre las plaquetas y el endotelio.Fil: Etulain, Julia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Medicina Experimental. Academia Nacional de Medicina de Buenos Aires. Instituto de Medicina Experimental; ArgentinaFil: Schattner, Mirta Ana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Medicina Experimental. Academia Nacional de Medicina de Buenos Aires. Instituto de Medicina Experimental; Argentin

Anticoagulants interfere with the angiogenic and regenerative responses mediated by platelets

Background and aims: Platelet rich plasma (PRP) obtained from blood anticoagulated with acid-citrate-dextrose (ACD) or sodium-citrate (SC) is used for regenerative medicine as source of platelet-derived growth factors. Allergic reactions against citrate were reported in patients after local injection of PRP allowing us to hypothesize that anticoagulants exert a harmful and local effect that interferes with the regenerative proprieties of platelets. Herein we test this hypothesis by analyzing the effect of ACD and SC on angiogenic and regenerative responses mediated by platelets.Methods: PRP was obtained from SC- or ACD-anticoagulated blood; platelets were lysed to release growth factors; and PRP releasates (PRPr) were used to induce in vitro endothelial proliferation and 2D-migration, and regeneration of mouse skin wounds.Results: We first compared proliferation and migration of endothelial cells mediated by anticoagulated-PRPr supplemented or not with CaCl2. Alteration of endothelial adhesion and impediment of proliferation and migration was observed without CaCl2. Although endothelial morphology was normalized in SC- and ACD-PRPr after calcium restitution, angiogenic responses were only markedly induced by SC-PRPr. In vivo studies revealed a delay in mouse skin regeneration after treatment with anticoagulated-PRPr without CaCl2. Healing was only induced after calcium restitution in SC- but ACD-PRPr. Moreover, the development of inflammatory intradermal papules was evidenced after injection of ACD-PRPr. Supplementation of SC-PRPr with the equivalent concentration of dextrose (D-Glucose, 18 mM) present in ACD-PRPr resulted in reduction of endothelial proliferation and migration, delay of mouse skin regeneration and development of intradermal papules. Finally, collecting blood with half amount of SC significantly improved all the angiogenic and regenerative responses mediated by PRPr. In contrast, the delay of skin regeneration and the development of inflammatory papules remained stable after dilution of ACD.Conclusion: Our findings indicate that (1) calcium restitution is required to impair the cellular and tissue alterations induced by citrated-anticoagulants contained in PRP; (2) ACD-derived dextrose confers anti-angiogenic, anti-regenerative and pro-inflammatory proprieties to PRP; and (3) half concentration of SC improves the angiogenesis and regeneration mediated by PRP.Fil: Oneto, Paula. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Medicina Experimental. Academia Nacional de Medicina de Buenos Aires. Instituto de Medicina Experimental; ArgentinaFil: Zubiry, Paula Romina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Medicina Experimental. Academia Nacional de Medicina de Buenos Aires. Instituto de Medicina Experimental; ArgentinaFil: Schattner, Mirta Ana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Medicina Experimental. Academia Nacional de Medicina de Buenos Aires. Instituto de Medicina Experimental; ArgentinaFil: Etulain, Julia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Medicina Experimental. Academia Nacional de Medicina de Buenos Aires. Instituto de Medicina Experimental; Argentin

Mecanismos moleculares involucrados en las respuestas inflamatorias mediadas por plaquetas en acidosis

La acidosis es una característica del microambiente inflamatorio presente en situaciones de injuria vascular, tumor, aterosclerosis y enfermedades inflamatorias pulmonares. Las plaquetas además de ser elementos claves en la hemostasia y la trombosis, también juegan un rol importante en estas patologías. En estudios previos mostramos que el descenso del pH apaga las funciones hemostáticas de las plaquetas y promueve respuestas inflamatorias mediadas por la expresión de P-selectina en la superficie plaquetaria. En este trabajo estudiamos los mecanismos moleculares involucrados en estos procesos. Mientras la fosforilación de algunas moléculas involucradas en la activación plaquetaria (Src, Akt y ERK) fue significativamente inhibida en acidosis, la activación de p38 o NFκB no fue modificada o aumentó respectivamente, con el descenso del pH. El incremento en la expresión de P-selectina observado en acidosis se mantuvo en presencia de inhibidores de Src (PP1), PI3K/Akt (Ly294002) y ERK (U0126). Este fenómeno tampoco fue modificado por la incubación individual de las plaquetas con bloqueantes de p38 (SB203580) o NFκB (Ro1069920), pero sí disminuyó significativamente ante la presencia simultánea de ambos inhibidores. En concordancia con el aumento en la expresión de P-selectin, la formación de agregados plaquetas-leucocitos, así como la migración de leucocitos en presencia de plaquetas, aumentó en acidosis y ambos fenómenos fueron revertidos por la presencia conjunta de SB203580 y Ro1069920. Estos resultados indican que las respuestas inflamatorias mediadas por plaquetas en condiciones de acidosis requieren la activación simultánea de p38 y NFκB y plantean la posibilidad de nuevos blancos terapéuticos para el tratamiento de la inflamación.Fil: Etulain, Julia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Medicina Experimental. Academia Nacional de Medicina de Buenos Aires. Instituto de Medicina Experimental; ArgentinaFil: Carestia, Agostina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Medicina Experimental. Academia Nacional de Medicina de Buenos Aires. Instituto de Medicina Experimental; ArgentinaFil: Rivadeneyra, Leonardo. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Medicina Experimental. Academia Nacional de Medicina de Buenos Aires. Instituto de Medicina Experimental; ArgentinaFil: Fondevila Sancet, Juan Carlos. Clínica Bazterrica. Servicio de Hematología; ArgentinaFil: Schattner, Mirta Ana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Medicina Experimental. Academia Nacional de Medicina de Buenos Aires. Instituto de Medicina Experimental; Argentin

Teorías y Planificación Territorial I y II : Estrategias y prácticas para su enseñanza

La publicación sintetiza ocho años de enseñanza continua de la propuesta pedagógica al Concurso de Profesores para Teorías Territoriales, Planificación Territorial I y II de la FAU-UNLP. Presenta conceptos, saberes y abordajes metodológicos para interpretar fenómenos urbanos e intervenir desde la planificación; estrategias didácticas para la enseñanza de complejidad creciente entre las tres asignaturas y trabajos de estudiantes sobre territorios del Gran La Plata y de la RMBA.Facultad de Arquitectura y Urbanism

Bovine macrophages responses to the infection with virulent and attenuated Leptospira interrogans serovar Pomona

Leptospirosis is a zoonosis, caused by pathogenic spirochetes of the genus Leptospira. Although cattle are usually the maintenance hosts of serovar Hardjo, Pomona is the most frequent serovar circulating in Argentina. The understanding of bovine innate immune response and the virulence of this serovar is important for future control measures. This work compares infection of bovine macrophages with the virulent L. interrogans sv Pomona strain AKRFB (P1) and its attenuated counterpart (P19). First, we confirmed attenuation in the hamster model. Mortality and lung hemorrhages occurred after P1 inoculation, while the survival rate was 100% in P19-infected animals. Cells infected with both strains showed statistically upregulated gene expression of pro-inflammatory cytokines, IL-1β, IL-6 and TNFα. The level of expression of anti-inflammatory cytokine IL-10 was statistically different between strains. Increased expression of IL-10 was observed only in P1-infected cells. For the first time, we describe macrophages extracellular traps induced by infection of bovine macrophages (bMETs) with both, the virulent and attenuated Leptospira interrogans Pomona strains. P1 was found higher internalized when the phagocytosis was inhibited, suggesting a cell entrance of this strain also by an independent-phagocytosis pathway. Furthermore, P1 was higher colocalized with acidic and late endosomal compartments compared with P19. This data emphasizes the importance to deepen in Leptospira bovine macrophages particular invasion mechanisms and, furthermore, underline the value of studying the main hosts.Fil: Nagel, Ariel Gastón. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Agrobiotecnología y Biología Molecular. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Agrobiotecnología y Biología Molecular; ArgentinaFil: Vázquez, Cristina Lourdes. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Agrobiotecnología y Biología Molecular. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Agrobiotecnología y Biología Molecular; ArgentinaFil: Etulain, Julia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Medicina Experimental. Academia Nacional de Medicina de Buenos Aires. Instituto de Medicina Experimental; ArgentinaFil: Blanco, Federico Carlos. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Agrobiotecnología y Biología Molecular. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Agrobiotecnología y Biología Molecular; ArgentinaFil: Gravisaco, Maria José. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Agrobiotecnología y Biología Molecular. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Agrobiotecnología y Biología Molecular; ArgentinaFil: Gómez, Ricardo Martín. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Instituto de Biotecnología y Biología Molecular. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Exactas. Instituto de Biotecnología y Biología Molecular; ArgentinaFil: Caimi, Karina Cynthia. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Agrobiotecnología y Biología Molecular. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Agrobiotecnología y Biología Molecular; Argentin

Adecuaciones normativas del uso y ocupación del suelo en el marco de las actuales transformaciones territoriales : Caso: litoral sur metropolitano

Tanto el escenario mundial como los regionales y locales incluyen imágenes comunes y diferentes: fracturas, centralización, concentración, fragmentación, etc., que describen las características que adquiere la disputa de los territorios generados desde los procesos de mundialización de las economías y la integración de las regiones. Un territorio emergente de esos procesos, que reconoce situaciones de gran criticidad, es el Área Sur Metropolitano de Buenos Aires -especialmente su Litoral, caracterizado por su gran disponibilidad de espacios abiertos en condiciones de riesgo-, y que acusa impactos muy significativos que permiten suponer la configuración territorial que presentará a futuro. En este contexto esta ponencia evalúa las adecuaciones realizadas en los marcos normativos municipales en ese ámbito, a partir de las transformaciones territoriales en curso y las tensiones que produce el mercado inmobiliario y los grandes inversores.Evento también conocido bajo el nombre de "II Jornadas Platenses de Geografía"Facultad de Humanidades y Ciencias de la Educació

Las inundaciones en La Plata, Berisso y Ensenada. Análisis de riesgos y estrategias de intervención

El trabajo presenta parte de dos proyectos de investigación en desarrollo que indagan y caracterizan los riesgos por inundación en el caso de estudio y las estrategias para su mitigación o adaptación. Se parte de entender que los conflictos hídricos en torno a las inundaciones urbanas son de naturaleza multicausal, pero preponderantemente responden a los efectos del cambio climático. Este hecho alerta sobre la necesidad de modificar la racionalidad del manejo de esta situación. En La Plata, Berisso y Ensenada (Gran La Plata, en adelante GLP-1.162 km2), han sido múltiples los eventos en los últimos cien años. Pero en la última década se han agudizado, hasta llegar a la situación del 2 y 3 de abril del 2013 con una precipitación extraordinaria de 400 milímetros, (lloviendo 313 mm en 6 horas), cuando lo ordinario para el mes de abril es 111 mm, lo que dejó un resultado catastrófico con 89 muertes.Trabajo publicado en Acta Bioquímica Clínica Latinoamericana; no. 52, supl. 2, parte II, diciembre de 2018.Universidad Nacional de La Plat

PRP en medicina regenerativa: fundamento biológico, preparación y clasificación

Si bien las plaquetas son ampliamente reconocidaspor su rol clave en la hemostasia y la trombosis, numerosasevidencias han demostrado que estas células tambiénmodulan otros procesos fisiopatológicos incluyendola inflamación y la regeneración de tejidos. Estos fenómenosestán mediados por la liberación de factoresde crecimiento, citoquinas y moduladores de la matrizextracelular que promueven secuencialmente larevascularización del tejido dañado, la restauración deltejido conectivo y la regeneración de las células específicasde cada tejido. Por este motivo, los derivados deplasma rico en plaquetas (PRP) se emplean en medicinaregenerativa para el tratamiento de diversas situacionesclínicas incluyendo úlceras, quemaduras, reparaciónmuscular, ósea y recuperación de tejido postquirúrgica.Sin embargo, a pesar de las diversas aplicaciones, laeficacia de estos tratamientos está asociada a diversascontroversias causadas por la escasez de ensayos clínicoscontrolados y aleatorizados que prueben su eficacia,la falta de regulación y control en la implementaciónde estas terapias y la ausencia de consenso en las técnicasde preparación de PRP. En esta revisión se describenlos fundamentos biológicos subyacentes al uso deestos tratamientos, los diversos métodos de preparacióny aplicación de estos hemocomponentes, como asítambién las controversias y perspectivas futuras vinculadasal empleo del PRP en medicina regenerativa.Fil: Etulain, Julia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Medicina Experimental. Academia Nacional de Medicina de Buenos Aires. Instituto de Medicina Experimental; Argentin

Platelets in wound healing and regenerative medicine

Although platelets are widely recognized as having a critical role in primary hemostasis and thrombosis, increasing experimental and clinical evidence identifies these enucleated cells as relevant modulators of other physiopathological processes including inflammation and tissue regeneration. These phenomena are mediated through the release of growth factors, cytokines, and extracellular matrix modulators that sequentially promote (i) revascularization of damaged tissue through the induction of migration, proliferation, differentiation, and stabilization of endothelial cells in new blood vessels; (ii) restoration of damaged connective tissue through migration, proliferation, and activation of fibroblasts; and (iii) proliferation and differentiation of mesenchymal stem cells into tissue-specific cell types. For these reasons, platelet-rich plasma (PRP) derivatives are used in regenerative medicine for the treatment of several clinical conditions including ulcers, burns, muscle repair, bone diseases, and tissue recovery following surgery. The benefits of PRP administration are associated with an economical advantage, taking into consideration that PRP administration does not require complex equipment or training for its execution. Moreover, due to their primary autologous origin, concerns of disease transmission or immunogenic reactions can be disregarded. Thus, platelet-enriched materials have become highly relevant in the last decade and constitute a growing focus of experimental and clinical study in the context of wound healing and tissue regeneration. However, despite the diverse applications, the efficacy of regenerative treatments using PRP is being called into question due to the lack of large controlled clinical trials and the lack of consensus regarding the PRP preparation techniques. This review describes the biological mechanisms underlying PRP’s regenerative effects, the different methods of preparation and application of these biomaterials, and the controversies and future prospects related to the use of PRP in regenerative medicine.Fil: Etulain, Julia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Medicina Experimental. Academia Nacional de Medicina de Buenos Aires. Instituto de Medicina Experimental; Argentin

PRP in wound healing applications

Platelets play a crucial role in hemostasis, tissue regeneration and host defense. Based on these settings, platelet-rich plasma (PRP) and its derivatives are therapeutically used to promote wound healing in several scenarios. This review summarizes the biological mechanisms underlying the most traditional as well as innovative applications of PRP in wound healing. These mechanisms involve the combined action of platelet-derived growth factors and cytokines, together with the role of plasma-derived fibrillar, antioxidant and homeostatic factors. In addition, regenerative treatments with PRP consist of personalized and non-standardized methods. Thus, the quality of PRP varies depending on endogenous factors (e.g., age; gender; concomitant medication; disease-associated systemic factors; nutrition) and exogenous factors (anticoagulants and cellular composition). This review also analyses whether these factors affect the biological mechanisms of PRP in wound healing applications.Fil: Oneto, Paula. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Medicina Experimental. Academia Nacional de Medicina de Buenos Aires. Instituto de Medicina Experimental; ArgentinaFil: Etulain, Julia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Medicina Experimental. Academia Nacional de Medicina de Buenos Aires. Instituto de Medicina Experimental; Argentin