Shiga toxin-producing Escherichia coli: Factors involved in virulence and cattle colonization

Shiga toxin-producing Escherichia coli (STEC) cause hemorrhagic colitis (HC) and hemolytic uremic syndrome (HUS) in humans. Outbreaks are linked to bovine food sources. STEC O157:H7 has been responsible for the most severe outbreaks worldwide. However, non-O157 serotypes have emerged as important enteric pathogens in several countries. The main virulence factor of STEC is the production of Shiga toxins 1 and 2. Additional virulence markers are a plasmid-encoded enterohemolysin (ehxA), an autoagglutinating adhesin (Saa), a catalase-peroxidase (katP), an extracellular serine protease (espP), a zinc metalloprotease (stcE), a subtilase cytotoxin (subAB), among others. Other virulence factors are intimin and adhesins that had a roll in the adherence of STEC to bovine colon. This review focuses on the virulence traits of STEC and especially on those related to the adhesion to bovine colon. The known of the interaction between STEC and the bovine host is crucial to develop strategies to control cattle colonization.Fil: Etcheverría, Analía Inés. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Tandil. Centro de Investigacion Veterinaria de Tandil; ArgentinaFil: Padola, Nora Lía. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Tandil. Centro de Investigacion Veterinaria de Tandil; Argentin

Understanding the Detection of Shiga Toxin Producing Escherichia Coli: Virulence Factors, Pathogenicity Islands or Serotypes?

Shiga toxin-producing Escherichia coli (STEC) are important food borne pathogens that can cause severe disease in children by producingtwo toxins (Stx1 and Stx2). This bacteria harbor several additional virulence factorsand have been classified in different serotypes that havebeen used as screening for detection of STEC. Aa is not possible to define when a STEC strain is pathogenic, it is important incorporate the riskassessment.Fil: Colello, Rocío. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tandil. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comision de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil; ArgentinaFil: Etcheverría, Analía Inés. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tandil. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comision de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil; ArgentinaFil: Padola, Nora Lía. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tandil. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comision de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil; Argentin

Fermentation by Lactobacillus paracasei of galactooligosaccharides and low-molecular weight carbohydrates extracted from squash (curcubita maxima) and lupin (lupinus albus) seeds

The in vitro prebiotic activity of galactooligosaccharides (GOS) and low-molecular-weight carbohydrates (LMWC) extracted from lupin and squash seeds on the growth of Lactobacillus paracasei BGP1 was studied. To this end, the change in cell density after 24 h of L. paracasei growth on 1% (w/v) glucose, 1% (w/v) raffinose, 1% (w/v) commercial inulin GR, 1% (w/v) lupin extract, and 1% (w/v) squash extract relative to the change in cell density of a mixture of enteric strains under the same culture conditions were evaluated. Additionally, the principal components of GOS and LMWC in the extracts were identified using Thin Layer Chromatography. The highest prebiotic activity score was for L. paracasei grown on squash extract (0.55±0.03), followed by lupin extract (0.49±0.02), inulin (0.38±0.05) and raffinose (0.37±0.05). These results will contribute to selecting plant species as potential sources of prebiotic ingredients for the development of functional foods.Fil: Palacio, Maria Ines. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Facultad de Ingenieria de Olavarria; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Etcheverría, Analía Inés. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tandil. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comision de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil; Argentina. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias. Departamento de Sanidad Animal y Medicina Preventiva. Laboratorio de Inmunoquímica y Biotecnología; ArgentinaFil: Manrique, Guillermo Daniel. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Facultad de Ingenieria de Olavarria; Argentin

Shigatoxigenic and Enteropathogenic Escherichia coli Biofilm Formation: Effects of Different Stress Conditions on Polystyrene and Stainless Steel Surfaces

Biofilms constitutes one of the main problems for food industry and publichealth due to the survival and the ability of pathogenic microorganisms to formthese communities on different surfaces and culture composition. Shigatoxigenic(STEC) and Enteropathogenic (EPEC) Escherichia coli are some of themicroorganisms that could form biofilms and cause serious diseases in humans.The aim of this study was to determine the capability to form biofilms of nativeSTEC and atypical EPEC (aEPEC) strains on polystyrene and stainless steel andto evaluate the effects produced by different stress conditions. The expressionof the fimbria curli was also studied. All strains were strong biofilm formers at37°C on polystyrene, except STEC O145:NM and aEPEC O130:H11 which weremoderated biofilm formers. No one strain formed biofilm at heat stress (54°C)or refrigeration (5°C) temperatures. Stainless steel surface reduced significantlythe capability to form biofilms regardless the culture composition. Most of theSTEC and aEPEC strains were curli-negative at 37°C while they showed curlipositivephenotypes at 20°C. Both curli expression and biofilm formation weresignificantly influenced by temperature and incubation time. STEC and aEPECstrains demonstrated to be able to form biofilm and produce fimbria curli underdifferent conditions of medium and temperature, which is important due the riskof survival and transmission of these pathogens from reservoirs and food tohumans.Fil: Cáceres, María Emilia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones en Microbiología y Parasitología Médica. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones en Microbiología y Parasitología Médica; Argentina. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires; ArgentinaFil: Etcheverría, Analía Inés. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Padola, Nora Lía. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentin

Escherichia coli verocitotoxigénico (VTEC)

Argentina es el país con mayor número de casos de SUH a nivel mundial. Los bovinos son el principal reservorio de Escherichia coli verocitotoxigénico (VTEC) y los rodeos argentinos presentan una alta prevalencia de este patógeno. En la región pampeana se ha comprobado que el ganado de pastoreo y los animales de engorde a corral son portadores de serotipos VTEC muy virulentos. Sin embargo, estos patógenos son aislados del medio ambiente con baja frecuencia. Una posible explicación estaría basada en la capacidad de VTEC de formar biofilms y/o entrar en un estado fisiológico de no culturabilidad. Esta característica haría que escapen a la detección por medios tradicionales de microbiología, siendo imprescindible el uso de técnicas moleculares.Argentina has the highest recorded frequency of HUS in the world. Cattle are the main reservoir of verocytotoxigenic Escherichia coli (VTEC) and Argentine herds have a high prevalence of these pathogens. In the Pampeana region, grazing and feedlot cattle are carriers of highly virulent serotypes. Despite this, VTEC is isolated with low frequency from the environment. An explanation could be the ability of VTEC to form biofilm or to enter in a nonculturable state. These characteristics would make these clusters of cells undetectable by traditional microbiology methods, justifying the use of molecular techniques

Sequencing and evaluation of the antimicrobial effect of lactic acid bacteria against strains of Salmonella Tiphymurium isolated from intensive and extensive pig production

La producción intensiva y extensiva de cerdo en Argentina y España respectivamente presenta factores productivos diferentes. Sin embargo, cuando se trata de amenazas ante patógenos, específicamente Salmonella, ambos se ven afectados. Salmonella es un patógeno común en los alimentos relacionado con las toxiinfecciones alimentarias que provoca graves problemas en la salud pública. Las bacterias acidolácticas, específicamente los géneros Lactobacillus y Pediococcus se han caracterizado en los últimos años por tener gran importancia como antagonistas de diferentes bacterias patógenas. Una alternativa de control es la aplicación de Lactobacillus a lo largo de la cadena productiva de cerdo, evitando así la llegada de este patógeno a los consumidores. Se realizó una evaluación preliminar de la capacidad antagónica de bacterias acidolácticas identificadas tras secuenciación como Lactobacillus plantarum y Pediococcus acidilactici ante Salmonella Tiphymurium aislada de producción intensiva de cerdo de Argentina y Salmonella Tiphymurium aislada de producción extensiva de cerdo en España. Los resultados obtenidos reflejaron una alta capacidad antimicrobiana de las BAL seleccionadas ante ambas cepas patógenas (93.75%). De esta manera, se proponen como potenciales bacterias biopreservadoras en la producción de carne de cerdo y subproductos.The intensive and extensive production of pigs in Argentina and Spain, respectively, present different production factors. However, when dealing with pathogen threats, specifically Salmonella, both are affected by them. Salmonella is a common pathogen in food related to food outbreaks that cause serious problems in public health. Lactic acid bacteria, specifically the genera Lactobacillus and Pediococcus, have been characterized in the past few years for being of great importance as antagonists of different pathogenic bacteria. One control alternative is the application of Lactobacillus throughout the pig production chain, thus preventing the arrival of this pathogen to consumers. A preliminary assessment was made of the antagonistic capacity of lactic acid bacteria identified after sequencing as Lactobacillus plantarum and Pediococcus acidilactici against Salmonella Tiphymurium isolated from intensive pig production in Argentina, and Salmonella Tiphymurium isolated from extensive pig production in Spain. The results obtained showed the high antimicrobial capacity of the LAB selected against both pathogenic strains (93.75%). Thus, they can be proposed as potential biopreservative bacteria in the production of pig meat and its subproducts.Fil: Ruiz, María Julia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tandil. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comision de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil; Argentina. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias. Departamento de Sanidad Animal y Medicina Preventiva. Laboratorio de Inmunoquímica y Biotecnología; ArgentinaFil: Colello, Rocío. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tandil. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comision de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil; Argentina. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias. Departamento de Sanidad Animal y Medicina Preventiva. Laboratorio de Inmunoquímica y Biotecnología; ArgentinaFil: Etcheverría, Analía Inés. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tandil. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comision de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil; Argentina. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias. Departamento de Sanidad Animal y Medicina Preventiva. Laboratorio de Inmunoquímica y Biotecnología; ArgentinaFil: Medina, Luis Manuel. Universidad de Córdoba. Departamento de Bromatología y Tecnología de los Alimentos; Españ

Supervivencia de VTEC O157 y no-O157 en agua de bebederos y materia fecal de bovinos

Verotoxin-producing E. coli (VTEC) are the etiologic agent of hemolytic-uremic syndrome (HUS), that affect children typically ranged in age from six months old to five years old. The transmission is produced by consumption of contaminated foods, by direct contact with animals or the environment and person to person. In previous studies we determined that the environment of a dairy farm is a non animal reservoir, for that we proposed to study the survival of 4 VTEC isolates (O20:H19; O91:H21; O157:H7 and O178:H19) in sterile water troughs and bovine feces by viable bacteria count and detection of virulence genes by PCR. It was demonstrated that the survival of different VTEC isolates (O157 and non-O157) varied in function of their own characteristics as well as the environmental conditions where they were. The main differences between isolates were the survival time and maximal counts reached. The competitive and adaptive characteristic of some isolates increase the infection risk for people that are working or visiting a farm, as well as increase the reinfection risk for the animals and the contamination of foods.Escherichia coli productor de verotoxina [verotoxin-producing E. coli (VTEC)] es el agen- te causal del síndrome urémico hemolítico (SUH), enfermedad que afecta principalmente a niños de edades comprendidas entre 6 meses y 5 años. La transmisión se produce por el consumo de alimentos contaminados, por el contacto directo con animales o con el medio ambiente y de persona a persona. En trabajos anteriores hemos determinado que el medio ambiente del tambo es un reservorio no animal de VTEC, por lo cual nos pro- pusimos estudiar la supervivencia de 4 aislamientos VTEC (O20:H19; O91:H21; O157:H7 y O178:H19) en agua estéril de bebederos y en materia fecal de bovinos mediante el recuento de bacterias viables y la detección de genes de virulencia por PCR. Se demos- tró que la supervivencia de los distintos aislamientos VTEC (O157 y no-O157) varía en función de sus características intrínsecas y de las condiciones del medio ambiente en el que se encuentran. Las principales diferencias entre los aislamientos fueron el tiempo de supervivencia en los microcosmos y los recuentos máximos alcanzados. La capacidad para adaptarse y sobrevivir de estos microorganismos aumenta el riesgo de transmisión a las personas que trabajan en los establecimientos ganaderos o que se encuentran de visita en ellos, así como el riesgo de reinfección de los animales y de contaminación de los alimentos.Fil: Polifroni, Rosana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Tandil. Centro de Investigacion Veterinaria de Tandil; ArgentinaFil: Etcheverría, Analía Inés. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Tandil. Centro de Investigacion Veterinaria de Tandil; ArgentinaFil: Arroyo, Guillermo Horacio. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Tandil. Centro de Investigacion Veterinaria de Tandil; ArgentinaFil: Padola, Nora L.. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Tandil. Centro de Investigacion Veterinaria de Tandil; Argentin

Identification and detection of iha subtypes in LEE-negative Shiga toxin-producing Escherichia coli (STEC) strains isolated from humans, cattle and food

LEE-negative Shiga toxin-producing Escherichia coli (STEC) strains are important cause of infection in humans and they should be included in the public health surveillance systems. Some isolates have been associated with haemolytic uremic syndrome (HUS) but the mechanisms of pathogenicity are is a field continuos broadening of knowledge. The IrgA homologue adhesin (Iha), encoded by iha, is an adherence-conferring protein and also a siderophore receptor distributed among LEE-negative STEC strains. This study reports the presence of different subtypes of iha in LEE-negative STEC strains. We used genomic analyses to design PCR assays for detecting each of the different iha subtypes and also, all the subtypes simultaneously. LEE-negative STEC strains were designed and different localizations of this gene in STEC subgroups were examinated.Genomic analysis detected iha in a high percentage of LEE-negative STEC strains. These strains generally carried iha sequences similar to those harbored by the Locus of Adhesion and Autoaggregation (LAA) or by the plasmid pO113. Besides, almost half of the strains carried both subtypes. Similar results were observed by PCR, detecting iha LAA in 87% of the strains (117/135) and iha pO113 in 32% of strains (43/135). Thus, we designed PCR assays that allow rapid detection of iha subtypes harbored by LEE-negative strains. These results highlight the need to investigate the individual and orchestrated role of virulence genes that determine the STEC capacity of causing serious disease, which would allow for identification of target candidates to develop therapies against HUS.Fil: Colello, Rocío. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tandil. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comision de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil; ArgentinaFil: Krüger, Alejandra. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tandil. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comision de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil; ArgentinaFil: Velez, María Victoria. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comisión de Investigaciones Científicas; ArgentinaFil: Del Canto, Felipe. Universidad de Chile. Facultad de Medicina. Instituto de Ciencias Biomédicas; ChileFil: Etcheverría, Analía Inés. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tandil. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comision de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil; ArgentinaFil: Vidal, Roberto. Universidad de Chile. Facultad de Medicina. Instituto de Ciencias Biomédicas; Chile. Universidad de Chile. Facultad de Medicina. Instituto Milenio de Inmunología e Inmunoterapia; ChileFil: Padola, Nora Lía. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tandil. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comision de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil; Argentin

Síndrome Urémico Hemolítico: El rol del bovino como reservorio de Escherichia coli productores de verocitotoxinas (VTEC)

El síndrome urémico hemolítico (SUH) es un desorden multisistémico caracterizado por trombocitopenia, anemia hemolítica e insuficiencia renal aguda. La forma típica del SUH es causada por serotipos particulares de Escherichia coli productores de verocitotoxinas (VTEC)1. El SUH fue descripto por primera vez en Suiza por Gasser y cols.2 y a partir de 1964, los primeros casos en Argentina fueron estudiados por el Dr. Carlos Giannantonio.3 Un hito en el conocimiento de la enfermedad fue la publicación de Karmali demostrando categóricamente el papel protagonico de la relación entre la E. coli productoras de verotoxina y el SUH.4 Rivas y cols. analizaron 87 cepas de VTEC provenientes de pacientes con SUH, de las cuales 66 (75,8%) fueron serotipificadas como O157:H7 y 21 (24,1%) como VTEC no-O157.5 En Argentina, el SUH es una enfermedad endémica, con el registro más alto del mundo, con aproximadamente 420 casos declarados anualmente y una incidencia de 17/100 000 en niños menores de 5 años de edad.6 Posee un aumento estacional de casos en primavera y verano y afecta principalmente a niños entre los 6 meses y los 5 años de edad, siendo los pacientes generalmente niños eutróficos, de clase media, con buenas condiciones sanitarias y ambientales.7 Es la causa principal de insuficiencia renal aguda y la segunda causa de insuficiencia renal crónica y transplante renal en niños en Argentina.8-10 La familia de bacterias conocidas como VTEC se caracterizan por producir toxinas denominadas verocitotoxinas (VTs) que son las responsables de las lesiones trombóticas en la microvasculatura que forman la base histopatológica del SUH y del daño en las células endoteliales que es el evento clave en que subyace su patogénesis.11,12 Luego de ser ingerida y resistir las condiciones acídicas del estómago, VTEC se une a las células del epitelio intestinal y libera las VTs que serán absorbidas hacia la circulación.13 Las células endoteliales son un blanco importante para las toxinas, pero otros tipos celulares como células tubulares renales, células mesangiales, monocitos y plaquetas también pueden ser afectadas por las VTs.14Fil: Etcheverría, Analía Inés. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Tandil. Centro de Investigacion Veterinaria de Tandil; ArgentinaFil: Arroyo, Guillermo Horacio. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Tandil. Centro de Investigacion Veterinaria de Tandil; ArgentinaFil: Parma, Alberto Ernesto. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Tandil. Centro de Investigacion Veterinaria de Tandil; ArgentinaFil: Padola, Nora Lía. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Tandil. Centro de Investigacion Veterinaria de Tandil; Argentin

Massive sequencing of artisan cheeses from raw sheep's milk

Lactic acid bacteria (LAB) are used in the food industry to confer aromatic characteristicsand their antibacterial capacity. In this study the native flora of LAB that participates in thetraditional fermentation of semi-hard cheeses made with raw sheep?s milk from the regionof Andalusia, Spain was analyzed. Three samples of four different commercial cheeses weretaken. Massive sequencing was carried out to identify the lactic and accompanying flora.Predominant lactic flora was Lactococcus lactis, Streptococcus thermophilus, Lactobacillusparacasei and Lactococcus raffinolactis, and to a lesser extent other species of the generaLactobacillus, Streptococcus, Pediococcus and Leuconestoc. The accompanying florawas composed of species of the genera Mycoplasma, Pseudomonas, Acinetobacter,Chryseobacterium, Mannheimia, Trueperella, Enterococcus, Vibrio, Serratia, Macrococcus,Staphylococcus, Massilia, Flavobacterium, Yersinia, Gallaecimonas, Hafnia, Leclercia,Obesumbacterium, Morganella and Kluyvera. These results show that modern moleculartechniques are very good tools to identify natural LABs of artisanal dairy products.The characterization of the native flora of the artisanal cheese allows us to evaluate themicrobiological diversity of the natural population of LAB and the symbiosis with anothertype of flora.Fil: Ruiz, María Julia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tandil. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comision de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil; ArgentinaFil: Etcheverría, Analía Inés. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tandil. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comision de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil; ArgentinaFil: Padola, Nora Lía. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tandil. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comision de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil; ArgentinaFil: Krüger, Alejandra. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tandil. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comision de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil; ArgentinaFil: Medina, Luis. Universidad Nacional de Córdoba; Argentin