In vitro activity against Leishmania and human skin permeation of miltefosine ultradeformable liposomes

Introducción: los liposomas ultradeformables de miltefosina (LUD-MIL) constituyen una opción para el tratamiento tópico en leishmaniasis cutánea penetrando los estratos de la piel hasta la dermis, sitio donde habita el parásito. Objetivo: diseñar LUD-MIL y determinar su actividad contra L. (Viannia) panamensis y L. (V.) braziliensis y la permeación en piel humana. Métodos: los LUD-MIL, liposomas convencionales de fosfatidilcolina (LConv) y LUD-MIL-fluorescente (LUD-MIL-Fluo) fueron preparados por el método de rehidratación de película lipídica. Se caracterizaron fisicoquímicamente y se determinaron: la liberación en membrana semisintéticas, la retención en las capas de la piel y la permeación en piel humana. La citotoxicidad en THP-1 fue determinada por el ensayo colorimétrico de MTT y la actividad en promastigotes y amastigotes intracelulares por recuento microscópico. Resultados: el tamaño, índice de polidispersión, potencial Z y concentración de fosfolípidos de los LUD-MIL fue de 100,7 nm, 0,147, -12,0 mV y 53,24 mM respectivamente. El flujo de MIL a través de la membrana fue mayor con LUD-MIL que con MIL-libre. El tratamiento con LUD-MIL indujo menor acumulación de la MIL en el estrato corneo y mayor permeación que el tratamiento con MIL libre. Los LUD-MIL y los LConv-MIL mantuvieron la actividad de la MIL en los parásitos y células. Los LUD-MIL fueron más tóxicos para las células que los LConv y la MIL y más activos en amastigotes intracelulares de L. (V.) braziliensis. Conclusión: los LUD-MIL preparados conservaron la actividad anti-Leishmania de la MIL y permitieron la liberación del compuesto en membranas y piel humana. Ensayos en modelos experimentales de leishmaniasis cutánea para evaluar la actividad de estas formulaciones son urgentes de realizar.Introduction: miltefosine ultradeformable liposomes (MIL-LUD) are an option for the topical treatment of cutaneous leishmaniasis penetrating the skin layers to the dermis where the parasite inhabits. Objective: to design MIL-LUD and determine their in vitro activity against L. (Viannia) panamensis and L. (V.) braziliensis and to determine human skin permeation. Methods: MIL-LUD, phosphatidylcholine liposomes (MIL-LConv) and fluorescent MIL-LUD (MIL-LUD-Fluo) were prepared by lipid film rehydration method. They were physicochemically characterized to determine drug release in semisynthetic membrane, retention in skin layers and permeation on human skin membranes. Cytotoxicity in THP-1 was determined by the MTT colorimetric test and activity in promastigotes and intracellular amastigotes by microscopic counting. Results: the size, the polydispersion index, the Zeta potential and phospholipid content were 100.7 nm, 0.147, -12.0mV and 53.24mM, respectively for MIL-LUD. MIL flow through the semisynthetic membrane was greater with MIL-LUD than MIL-free treatment. MIL-LUD treatment induced lower MIL accumulation in the stratum corneum and increased permeation than MIL free treatment. The MIL-LUD and MIL-Conv maintained MIL activity in parasites and cells. The MIL-LUD was more toxic to cells than MIL-Conv and more active against intracellular amastigotes of L. (V.) braziliensis. Conclusion: prepared LUD -MIL retained the anti-leishmanial activity of the MIL and allowed the compound release in human skin and membranes. Testing of experimental cutaneous leishmaniasis models to evaluate the activity of these formulations are urgently neededFil: Hernandez, Indiira Paola. Universidad Industrial Santander; ColombiaFil: Martinetti Montanari, Jorge Anibal. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico La Plata. Instituto Multidisciplinario de Biología Celular (i); Argentina. Universidad Nacional de Quilmes; ArgentinaFil: Escobar Rivero, Patricia. Universidad Industrial Santander; Colombi

Nanotubo de carbono-chitosan en células HOS y THP-1

RESUMENIntroducción: Los nanotubos de carbono (NTC) son estructuras nanométricas utilizadas en el tratamiento de enfermedades, principalmente en la entrega de fármacos para terapias en cáncer.Objetivo: Estudiar la internalización de NTC acoplado a quitosan (NTC-Q) en células de osteosarcoma humano (HOS) y monocitos humanos de leucemia aguda (THP-1).Materiales y métodos: Los NTC solubilizados con quitosan 30% fueron caracterizados espectroscópicamente por UV-Vis, fluorescencia y Raman. Las células HOS y THP-1 fueron tratadas con NTC-Q y se evaluó la internalización por tinción de Giemsa en microscopio de luz y la citotóxicidad utilizando la prueba fluorométrica de Azul de Alamar.Resultados: Los espectros Raman y de fluorescencia mostraron la funcionalización de los NTC con quitosan. Los NTC fueron internalizados por las líneas celulares después de 24 h mostrando una ubicación citoplasmática sin presentar citotóxicidad en ninguna de las células evaluadas.Discusión: Las características presentadas por los NTC-Q les brinda la posibilidad de ser utilizados como transportadores de fármacos.Salud UIS 2011; 43(1): 21-26Palabras clave: Nanotubos de carbono, quitosan, internalización celularABSTRACTIntroduction: Carbon nanotubes (CNT) are nanometer-sized structures used in medicine in the treatment of diseases, mainly in drug delivery in therapies against cancer.Objective: To Study the internalization of carbon nanotubes modified with chitosan (CNT-CH) in human osteosarcom cells (HOS) and human monocytes of acute leukemia (THP1).Materials and methods: The CNTs solubilized in chitosan 30% were characterized spectroscopically by UV-Vis, fluorescence and Raman. HOS cells and THP-1 were treated with CNT-CH, the internalization was evaluated by Giemsa staining with light microscopy, and cytotoxicity was determined using Alamar Blue assay.Results: Raman and fluorescence spectra showed the functionalization of the CNT with chitosan. After 24 h the NTC were internalized in the cell lines showing a cytoplasmic location and were not cytotoxic in any of both cell lines types.Discussion: The properties of CNT-CH on cells allowing it to be potentially used as drug carrier. Salud UIS 2011; 43(1): 21-26Keywords: Carbon nanotubes, chitosan, cell internalization cells, macrophage

Nanotubo de carbono-chitosan en células HOS y THP-1

RESUMENIntroducción: Los nanotubos de carbono (NTC) son estructuras nanométricas utilizadas en el tratamiento de enfermedades, principalmente en la entrega de fármacos para terapias en cáncer.Objetivo: Estudiar la internalización de NTC acoplado a quitosan (NTC-Q) en células de osteosarcoma humano (HOS) y monocitos humanos de leucemia aguda (THP-1).Materiales y métodos: Los NTC solubilizados con quitosan 30% fueron caracterizados espectroscópicamente por UV-Vis, fluorescencia y Raman. Las células HOS y THP-1 fueron tratadas con NTC-Q y se evaluó la internalización por tinción de Giemsa en microscopio de luz y la citotóxicidad utilizando la prueba fluorométrica de Azul de Alamar.Resultados: Los espectros Raman y de fluorescencia mostraron la funcionalización de los NTC con quitosan. Los NTC fueron internalizados por las líneas celulares después de 24 h mostrando una ubicación citoplasmática sin presentar citotóxicidad en ninguna de las células evaluadas.Discusión: Las características presentadas por los NTC-Q les brinda la posibilidad de ser utilizados como transportadores de fármacos.Salud UIS 2011; 43(1): 21-26Palabras clave: Nanotubos de carbono, quitosan, internalización celularABSTRACTIntroduction: Carbon nanotubes (CNT) are nanometer-sized structures used in medicine in the treatment of diseases, mainly in drug delivery in therapies against cancer.Objective: To Study the internalization of carbon nanotubes modified with chitosan (CNT-CH) in human osteosarcom cells (HOS) and human monocytes of acute leukemia (THP1).Materials and methods: The CNTs solubilized in chitosan 30% were characterized spectroscopically by UV-Vis, fluorescence and Raman. HOS cells and THP-1 were treated with CNT-CH, the internalization was evaluated by Giemsa staining with light microscopy, and cytotoxicity was determined using Alamar Blue assay.Results: Raman and fluorescence spectra showed the functionalization of the CNT with chitosan. After 24 h the NTC were internalized in the cell lines showing a cytoplasmic location and were not cytotoxic in any of both cell lines types.Discussion: The properties of CNT-CH on cells allowing it to be potentially used as drug carrier. Salud UIS 2011; 43(1): 21-26Keywords: Carbon nanotubes, chitosan, cell internalization cells, macrophage

Estudio de citotoxicidad y adhesión de células humanas de osteosarcoma en ti6al4v superficialmente modificado

El crecimiento y adhesión celular sobre biomateriales depende de las características superficiales de los materiales empleados, recubrimientos realizados sobre ellos y su grado de citotoxicidad. En este trabajo se evaluó la biocompatibilidad y adhesión de células de osteosarcoma humano (HOS) sobre Ti6Al4V pulido mecánicamente y anodizado; con rugosidades en un rango de 2 – 10 μm. Las células fueron cultivadas en un medio RPMI-1640, suero bovino 10%, en un período de 9 a 72 horas. Ninguno de los sobrenadantes fue toxico para las células y no se observaron diferencias en la adhesión celular entre los diferentes tipos de discos

Estudio comparativo de la composición y actividad biológica de los aceites esenciales extraídos de lippia alba, lippia origanoides y phyla dulcis, especies de la familia verbenaceae

Se determinó por GC -MS la composición química de los aceites esenciales de dos quimiotipos de Lippia alba, citral y carvona; Lippia origanoides y Phyla dulcis. Se evaluó la actividad antioxidante de cada uno de los aceites, como una medida de la capacidad antirradicalaria. Adicionalmente, se evaluaron la citotoxicidad en células Vero y las actividades antifúngica, antiparasitaria y antibacterial. Los resultados obtenidos permitieron establecer que el aceite de L. origanoides, fue la mezcla más promisoria , debido a su alta actividad en los diferentes ensayos biológicos, y su capacidad antirradicalaria, y a ser un aceite esencial no tóxico

Actividad antiparasitaria de nuevas dihidrodibenzo[c,f]tiazolo[3,2-a] azepin-3(2H)-onas contra Leishmania chagasi y Trypanosoma cruzi

RESUMEN INTRODUCCIÓN: La leishmaniasis y la enfermedad de Chagas son consideradas como problemas de salud pública en varios países, y nuevas estrategias quimioterapéuticas son necesarias para el control de estas enfermedades. OBJETIVO: El objetivo de este trabajo fue evaluar in vitro la actividad antiparasitaria de 7 nuevas dihidrodibenzo[c,f]tiazolo[3,2-a]azepin-3(2H)-onas contra Leishmania chagasi, Trypanosoma cruzi, y la citotoxicidad sobre las células de mamìfero Vero y THP-1. MATERIALES Y MÉTODOS: La actividad antiparasitaria se determinó microscópicamente por conteo directo de parásitos vivos en comparación con el control no tratado, y la citotoxicidad en células de mamífero por el método colorimétrico de MTT. Las formas extracelulares e intracelulares de los parásitos utilizados así como las células de mamífero, fueron tratadas con diferentes concentraciones de los compuestos (0,3-600 µM) por 3-5 días. Los resultados de actividad de los compuestos fueron expresados en concentración inhibitoria (CI50) y concentración citotóxica (CC50). RESULTADOS: En T. cruzi, 4 compuestos (4a, 4b, 4d, 4g) fueron activos contra epimastigotes con rangos de actividad de CI50 entre 11,28-32,66 µM, y tres (4a, 4c, 4g) contra la forma intracelular (CI50= 18,42-23,62 µM), sin presentar toxicidad en células de mamífero. En L. chagasi, seis compuestos (4a-d, 4g) fueron activos contra promastigotes con CI50 entre 8,27-28,59 µM. El compuesto 4d fue parcialmente activo contra amastigotes intracelulares de L. chagasi (CI50= 59,36 µM). CONCLUSIONES: Los compuestos 4a y 4g presentaron actividad in vitro contra L. chagasi y T. cruzi y baja toxicidad en células de mamífero. Estudios posteriores con los compuestos activos encontrados, de genotoxicidad, mecanismos de acción y de evaluación de su actividad en modelos experimentales, son necesarios para establecer su posible uso como antiparasitarios. Palabras clave: Leishmania chagasi, Trypanosoma cruzi, toxicidad, dihidrodibenzo[c,f]tiazolo[3,2-a] azepin-3(2H)-onas, células Vero y células THP-1 ABSTRACT INTRODUCTION: Leishmaniasis and Chagas disease are considered public health problems in several countries and new chemotherapeutic approaches are needed to control these diseases. OBJETIVE: The aim of this study was to evaluate the antiparasitic activity of 7 new dihydrodibenzo[c,f]thiazolo[3.2-a]azepin-3(2H)-ones on Leishmania chagasi, Trypanosoma cruzi, and the cytotoxicity on Vero and THP-1 cells.  MATERIALS AND METHODS: The antiparasitic activities were determined microscopically counting living parasites compared with untreated control, and the mammalian cell toxicities using the MTT colorimetric test. (Extracellular and intracellular forms of the parasites used and mammalian cells were treated with different concentrations (0.3-600 µM) of compounds for 3-5 days). The activities of the compounds were expressed as the concentration to inhibit 50% percent of parasites (IC50) and the concentration to kill 50% of the mammalian cells (CC50). RESULTS: 4 compounds (4a, 4b, 4d, 4g) were active against T. cruzi epimastigotes with ranges of IC50 from 11.28 to 32.66 μM, and three (4a, 4c, 4g) inhibited the intracellular form (IC50 = 18.42-23.62 μM), with low toxicity on mammalian cells. In L. chagasi, 6 compounds (4a-d, 4g) were active against promastigote forms (IC50= 8.27-28.59 μM). Compound 4d was partially active against intracellular amastigotes of L. chagasi (IC50= 59.36 μM). CONCLUSIONS: The compounds 4a and 4g were actives on both T. cruzi and L. chagasi parasites with low toxicity on mammalian cells. Further studies of genotoxicity, mechanisms of action and evaluation of its activity in experimental models are necessaries.  Keywords: Leishmania chagasi, Trypanosoma cruzi, toxicity, dihydrodibenzo[c,f]-thiazolo[3,2-a]azepin-3(2H)-ones, Vero and THP-1 cell

Actividad antiparasitaria de nuevas dihidrodibenzo[c,f]tiazolo[3,2-a] azepin-3(2H)-onas contra Leishmania chagasi y Trypanosoma cruzi

RESUMEN INTRODUCCIÓN: La leishmaniasis y la enfermedad de Chagas son consideradas como problemas de salud pública en varios países, y nuevas estrategias quimioterapéuticas son necesarias para el control de estas enfermedades. OBJETIVO: El objetivo de este trabajo fue evaluar in vitro la actividad antiparasitaria de 7 nuevas dihidrodibenzo[c,f]tiazolo[3,2-a]azepin-3(2H)-onas contra Leishmania chagasi, Trypanosoma cruzi, y la citotoxicidad sobre las células de mamìfero Vero y THP-1. MATERIALES Y MÉTODOS: La actividad antiparasitaria se determinó microscópicamente por conteo directo de parásitos vivos en comparación con el control no tratado, y la citotoxicidad en células de mamífero por el método colorimétrico de MTT. Las formas extracelulares e intracelulares de los parásitos utilizados así como las células de mamífero, fueron tratadas con diferentes concentraciones de los compuestos (0,3-600 µM) por 3-5 días. Los resultados de actividad de los compuestos fueron expresados en concentración inhibitoria (CI50) y concentración citotóxica (CC50). RESULTADOS: En T. cruzi, 4 compuestos (4a, 4b, 4d, 4g) fueron activos contra epimastigotes con rangos de actividad de CI50 entre 11,28-32,66 µM, y tres (4a, 4c, 4g) contra la forma intracelular (CI50= 18,42-23,62 µM), sin presentar toxicidad en células de mamífero. En L. chagasi, seis compuestos (4a-d, 4g) fueron activos contra promastigotes con CI50 entre 8,27-28,59 µM. El compuesto 4d fue parcialmente activo contra amastigotes intracelulares de L. chagasi (CI50= 59,36 µM). CONCLUSIONES: Los compuestos 4a y 4g presentaron actividad in vitro contra L. chagasi y T. cruzi y baja toxicidad en células de mamífero. Estudios posteriores con los compuestos activos encontrados, de genotoxicidad, mecanismos de acción y de evaluación de su actividad en modelos experimentales, son necesarios para establecer su posible uso como antiparasitarios. Palabras clave: Leishmania chagasi, Trypanosoma cruzi, toxicidad, dihidrodibenzo[c,f]tiazolo[3,2-a] azepin-3(2H)-onas, células Vero y células THP-1 ABSTRACT INTRODUCTION: Leishmaniasis and Chagas disease are considered public health problems in several countries and new chemotherapeutic approaches are needed to control these diseases. OBJETIVE: The aim of this study was to evaluate the antiparasitic activity of 7 new dihydrodibenzo[c,f]thiazolo[3.2-a]azepin-3(2H)-ones on Leishmania chagasi, Trypanosoma cruzi, and the cytotoxicity on Vero and THP-1 cells.  MATERIALS AND METHODS: The antiparasitic activities were determined microscopically counting living parasites compared with untreated control, and the mammalian cell toxicities using the MTT colorimetric test. (Extracellular and intracellular forms of the parasites used and mammalian cells were treated with different concentrations (0.3-600 µM) of compounds for 3-5 days). The activities of the compounds were expressed as the concentration to inhibit 50% percent of parasites (IC50) and the concentration to kill 50% of the mammalian cells (CC50). RESULTS: 4 compounds (4a, 4b, 4d, 4g) were active against T. cruzi epimastigotes with ranges of IC50 from 11.28 to 32.66 μM, and three (4a, 4c, 4g) inhibited the intracellular form (IC50 = 18.42-23.62 μM), with low toxicity on mammalian cells. In L. chagasi, 6 compounds (4a-d, 4g) were active against promastigote forms (IC50= 8.27-28.59 μM). Compound 4d was partially active against intracellular amastigotes of L. chagasi (IC50= 59.36 μM). CONCLUSIONS: The compounds 4a and 4g were actives on both T. cruzi and L. chagasi parasites with low toxicity on mammalian cells. Further studies of genotoxicity, mechanisms of action and evaluation of its activity in experimental models are necessaries.  Keywords: Leishmania chagasi, Trypanosoma cruzi, toxicity, dihydrodibenzo[c,f]-thiazolo[3,2-a]azepin-3(2H)-ones, Vero and THP-1 cell

Estudio comparativo de la composición y actividad biológica de los aceites esenciales extraídos de lippia alba, lippia origanoides y phyla dulcis, especies de la familia verbenaceae

Se determinó por GC -MS la composición química de los aceites esenciales de dos quimiotipos de Lippia alba, citral y carvona; Lippia origanoides y Phyla dulcis. Se evaluó la actividad antioxidante de cada uno de los aceites, como una medida de la capacidad antirradicalaria. Adicionalmente, se evaluaron la citotoxicidad en células Vero y las actividades antifúngica, antiparasitaria y antibacterial. Los resultados obtenidos permitieron establecer que el aceite de L. origanoides, fue la mezcla más promisoria , debido a su alta actividad en los diferentes ensayos biológicos, y su capacidad antirradicalaria, y a ser un aceite esencial no tóxico

Estudio comparativo de la composición y actividad biológica de los aceites esenciales extraídos de lippia alba, lippia origanoides y phyla dulcis, especies de la familia verbenaceae

Se determinó por GC -MS la composición química de los aceites esenciales de dos quimiotipos de Lippia alba, citral y carvona; Lippia origanoides y Phyla dulcis. Se evaluó la actividad antioxidante de cada uno de los aceites, como una medida de la capacidad antirradicalaria. Adicionalmente, se evaluaron la citotoxicidad en células Vero y las actividades antifúngica, antiparasitaria y antibacterial. Los resultados obtenidos permitieron establecer que el aceite de L. origanoides, fue la mezcla más promisoria , debido a su alta actividad en los diferentes ensayos biológicos, y su capacidad antirradicalaria, y a ser un aceite esencial no tóxico